壯藥廣西鵝掌柴質(zhì)量標準建立

溫海成 蘇永精 謝澳 李燦 韋威

摘要：采用顯微鑒別和薄層色譜鑒別方法對不同產(chǎn)地壯藥廣西鵝掌柴進行鑒定研究，按照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則中規(guī)定的方法對不同產(chǎn)地藥材進行水分含量、灰分含量和浸出物含量的測定。結(jié)果表明，壯藥廣西鵝掌柴顯微鑒別特征性強；薄層色譜鑒別方法以環(huán)己烷∶丙酮∶甲酸（8.5∶1.5∶0.4）為展開系統(tǒng)，此展開系統(tǒng)分離度較好，斑點清晰，以15 cm為展距，斑點分離度最佳；以10%硫酸乙醇溶液作為顯色劑，紫外燈（365 nm）下檢視；擬定壯藥廣西鵝掌柴水分含量不超過12.00%，總灰分含量不超過6.00%，酸不溶性灰分含量不超過0.50%，水溶性浸出物含量不低于9.50%。其方法操作簡單易行、穩(wěn)定可靠、重復(fù)性較好、擬定范圍合理，可為壯藥廣西鵝掌柴質(zhì)量控制提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：壯藥；廣西鵝掌柴；質(zhì)量標準；薄層色譜

中圖分類號：R29? ? ? ? ?文獻標識碼：A

文章編號：0439-8114（2024）04-0154-04

Establishment of quality standards for Zhuang medicine Schefflera kwangsiensis

Abstract： Microscopic identification and thin-layer chromatography identification methods were used to identify and study the Zhuang medicine Schefflera kwangsiensis from different regions. The moisture content， ash content， and extract content of the medicinal materials from different regions were determined according to the methods specified in the 2020 edition of the "Pharmacopoeia of the Peoples Republic of China". The results showed that the microscopic identification characteristics of the Zhuang medicine Schefflera kwangsiensis were strong； the thin-layer chromatography identification method used cyclohexane∶acetone∶formic acid of 8.5∶1.5∶0.4 as the unfolding system， which had good separation and clear spots. The best spot separation was achieved with a spreading distance of 15 cm；using a 10% sulfuric acid ethanol solution as the chromogenic agent， the examination was conducted under a UV lamp （365 nm）； the moisture content of Zhuang medicine Schefflera kwangsiensis shall not exceed 12.00%， the total ash content should not exceed 6.00%， the acid insoluble ash content should not exceed 0.50%， and the water-soluble extract content should not be less than 9.50%. The method was easy to operate， stable and reliable， with good reproducibility and reasonable scope， which could provide a theoretical basis for the quality control of Zhuang medicine Schefflera kwangsiensis.

Key words： Zhuang medicine； Schefflera kwangsiensis； quality standards； thin-layer chromatography

壯藥廣西鵝掌柴為五加科植物廣西鵝掌柴（Schefflera kwangsiensis Merr. ex Li.）的莖枝或帶葉莖枝［1］，別名白花鵝掌柴［2］、廣西鴨腳木、漢桃葉、七葉蓮、七多（廣西壯語）［3，4］等。廣西鵝掌柴主要分布于廣西壯族自治區(qū)、廣東省、臺灣省等地［5］。壯醫(yī)將其歸為通龍路、火路藥，具有祛風(fēng)毒、除濕毒、通龍路、活血止痛的功效，常用于治療風(fēng)濕骨痛、跌打腫痛、外傷出血、骨折等疾病［2］。經(jīng)現(xiàn)代藥理［6，7］和化學(xué)成分［8-10］研究，廣西鵝掌柴莖枝中主要含有氧倍半萜烯、β-石竹烯等揮發(fā)油成分，具有抗菌、抗炎和鎮(zhèn)痛的作用［11，12］。

現(xiàn)行的廣西壯族自治區(qū)壯藥質(zhì)量標準中只有廣西鵝掌柴莖枝的性狀鑒別和橫切面顯微鑒別［1］，為完善壯藥廣西鵝掌柴的質(zhì)量標準，本試驗參考《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則中的方法，對壯藥廣西鵝掌柴進行顯微鑒別和薄層色譜鑒別，并對不同產(chǎn)地的廣西鵝掌柴進行水分測定、總灰分與酸不溶性灰分測定、浸出物含量測定等。

1 材料與儀器

1.1 試藥與試劑

廣西鵝掌柴藥材于2020年采自廣西壯族自治區(qū)，采集信息如表1所示。經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)韋松基教授鑒定為五加科植物廣西鵝掌柴的莖，選定EZC-11為對照藥材。石油醚、乙酸乙酯、丙酮等試劑購買于成都市科隆化學(xué)品有限公司，均為分析純。

1.2 試驗儀器

DMB-1223型Motic生物顯微鏡（麥克奧迪實業(yè)集團有限公司）；EL204型電子天平［梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司］；HWS-24型電熱恒溫水浴鍋（上海齊欣科學(xué)儀器有限公司）；DHG-9203A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（泰州市蘇京實驗儀器科技有限公司）；UPK-Ⅱ型優(yōu)普系列超純水機（成都超純科技有限公司）；12-10A型SX2系列箱式電阻爐（上海齊欣科學(xué)儀器有限公司）；KQ5200DE型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；一聯(lián)型電子萬用爐（上海科恒實業(yè)發(fā)展有限公司）；DFY-500型搖擺式粉碎機（溫嶺市林大機械有限公司）；ZF-7型暗箱式三用紫外分析儀（上海嘉鵬科技有限公司）。

2 試驗方法與結(jié)果

2.1 廣西鵝掌柴的性狀鑒別

廣西鵝掌柴為長圓柱形，挺直或稍彎曲，長9～18 cm，直徑0.4～3.0 cm，表面灰白色至淡黃褐色，有縱皺紋和點狀皮孔，有時可見新月狀葉痕（圖1）。體輕、質(zhì)較硬，斷面黃白色，較平坦，木部略顯放射狀紋理，中心有髓白色或中空。氣微、味甘、微苦。

2.2 廣西鵝掌柴莖橫切面的顯微鑒別

取壯藥廣西鵝掌柴的莖制成永久石蠟切片，置于顯微鏡下觀察，拍照，并描述其顯微構(gòu)造特征。①莖橫切面類圓形，木栓層為多列細胞構(gòu)成，外部多破裂，并與韌皮部有石細胞環(huán)帶間隔。②韌皮部外部有裂隙，與皮層界限不明顯，裂隙中常有石細胞散在，內(nèi)側(cè)薄壁細胞排列較緊密，可見樹脂道分布。③維管束外韌型，木部中有一裂隙將其分成不對稱的兩部分，射線寬廣，導(dǎo)管單個散在或數(shù)個相聚，徑向稀疏排列成放射狀。④髓部較小，偏向一側(cè)，如圖2所示。

2.3 廣西鵝掌柴莖粉末顯微鑒別

廣西鵝掌柴莖切段干燥后，打粉機粉碎，取足夠顯微鑒別用量過五號篩（80目）。用稀甘油制片和水合氯醛液制片，置于顯微鏡下觀察拍照并記錄數(shù)據(jù)。本品莖粉末黃灰色或淺灰色。①薄壁細胞多邊形，單個或多個存在，偶爾含有淀粉粒。②木栓細胞多角形或長方形，紅棕色或無色。③草酸鈣簇晶直徑15～50 μm，草酸鈣方晶長17～35 μm、寬12～33 μm，晶體數(shù)量眾多，四處散落或包于細胞中。④石細胞多，呈類方形或不規(guī)則形，四面增厚。⑤淀粉粒少，單粒，偶見復(fù)粒，橢圓形或類圓形。⑥纖維常成束存在，單纖維少見，多破裂，長12～26 μm。⑦導(dǎo)管以網(wǎng)紋導(dǎo)管、具緣紋孔導(dǎo)管為主，偶見環(huán)紋導(dǎo)管和梯紋導(dǎo)管。⑧薄壁細胞含草酸鈣方晶、草酸鈣簇晶，如圖3所示。

2.4 廣西鵝掌柴的薄層色譜鑒別

按照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則中規(guī)定的薄層鑒別方法，以EZC-11為對照藥材，分別稱取EZC-1～EZC-10藥材粉末1 g放入50 mL磨口錐形瓶中，加入95%乙醇10 mL，超聲波滲透處理45 min，過濾，濾液水浴蒸干，加入甲醇1 mL溶解，制備供試品藥材溶液。另取對照藥材（EZC-11）1 g，按上述方法制備對照藥材溶液。依據(jù)《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則中規(guī)定的薄層色譜法，吸取供試品藥材溶液、對照藥材溶液各10 μL，分別在同一薄層硅膠G板點樣，以環(huán)己烷∶丙酮∶甲酸=8.5∶1.5∶0.4（體積比）為展開劑，展開，展至15 cm處取出，晾干，噴10%硫酸乙醇溶液，在100～105 ℃下加熱至顯色，紫外燈（365 nm）下檢視［13］。

從廣西鵝掌柴的薄層鑒別圖譜（圖4）可以看出，各批次廣西鵝掌柴與EZC-11對照藥材在相同的位置顯示相同顏色斑點。

2.5 檢查項測定

考慮到壯藥材不同采收期、不同產(chǎn)地、不同生長環(huán)境差異性較大，以及生長在潮濕多雨的南方，因此，將本品水分含量、灰分含量檢查值適當提高。

2.5.1 水分測定 按《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則0832項中第二法進行測定，結(jié)果見表2。11批廣西鵝掌柴藥材水分含量為8.29%～8.58%，各批次水分含量平均值差異較小，但考慮到廣西鵝掌柴為南方植物，生長環(huán)境濕度較大，因此，將本品水分含量適當提高，初步擬定廣西鵝掌柴藥材水分含量不超過12.00%。

2.5.2 灰分測定 按《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則2302項灰分測定法進行測定，結(jié)果見表3。11批廣西鵝掌柴總灰分含量為3.33%～4.59%，酸不溶性灰分含量為0.07%～0.34%，考慮實際應(yīng)用，初步擬定總灰分含量不超過6.00%，酸不溶性灰分含量不超過0.50%。

2.5.3 浸出物測定 按《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則2201項浸出物測定法進行測定。以EZC-4為考察樣品，分別采用冷浸法和熱浸法，篩選水和不同濃度乙醇溶液（30%、50%、70%、95%）作為提取或浸出溶劑的最優(yōu)提取方法，測定本品浸出物含量。對每種提取方法的結(jié)果進行對比分析，發(fā)現(xiàn)廣西鵝掌柴熱浸出物含量較冷浸出物的含量高，水浸出物含量較醇浸出物含量高，故本試驗選擇水為溶劑，按照水溶性浸出物測定方法中的熱浸法依次測定本品11批藥材的浸出物，結(jié)果如表4所示。11批廣西鵝掌柴水溶性浸出物含量為9.79%～11.34%，均超過9.50%。從實際應(yīng)用角度出發(fā)，擬定本品水溶性浸出物含量不低于9.50%。

3 小結(jié)與討論

3.1 顯微鑒別特征

廣西鵝掌柴莖橫切面類圓形，木栓層為多列細胞構(gòu)成，外部多破裂，韌皮部外部有裂隙，與皮層界限不明顯，裂隙中常有石細胞散在，維管束外韌型，有樹脂道分布，髓小并偏向一側(cè)，薄壁細胞含草酸鈣方晶、草酸鈣簇晶。以上顯微鑒別特征可作為壯藥廣西鵝掌柴藥材顯微鑒別依據(jù)。

3.2 限量檢查

依據(jù)《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則中藥材水分測定方法、灰分測定方法及浸出物測定法中的相關(guān)規(guī)定要求，測定不同產(chǎn)地壯藥廣西鵝掌柴的水分含量、總灰分含量、酸不溶性灰分含量、浸出物含量，廣西鵝掌柴水分含量為8.29%～8.58%，總灰分含量為3.33%～4.59%，酸不溶性灰分含量為0.07%～0.34%，水溶性浸出物含量為9.79%～11.34%。本品11批廣西鵝掌柴均采自廣西，雖然采集時間不同，但生長環(huán)境相似，因此11批廣西鵝掌柴藥材含水量差異較小。試驗藥材的前處理較好，未混入泥沙等雜質(zhì)。依據(jù)試驗結(jié)果最終擬定廣西鵝掌柴藥材水分含量不超過12.00%，總灰分含量不超過6.00%，酸不溶性灰分含量不超過0.50%，熱浸法測定水溶性浸出物含量不低于9.50%。

3.3 薄層鑒別

通過比較11批壯藥廣西鵝掌柴薄層色譜不同極性展開系統(tǒng)，如石油醚∶乙酸乙酯∶丙酮（8.0∶1.0∶1.0）、石油醚∶乙酸乙酯∶丙酮（8.5∶3.0∶1.5）、環(huán)己烷∶丙酮∶甲醇（8.5∶1.5∶0.4）等，最終確定以環(huán)己烷∶丙酮∶甲酸（8.5∶1.5∶0.4）為展開系統(tǒng)，此展開系統(tǒng)分離度較好，斑點清晰。以15 cm為展距，斑點分離度最佳，以10%硫酸乙醇溶液作為顯色劑，紫外燈（365 nm）下檢視。本試驗建立的薄層色譜方法具有操作簡單、可行性高、重復(fù)性好、斑點清晰等特點，因而可作為壯藥廣西鵝掌柴薄層鑒別的方法。

綜上所述，本研究建立的性狀鑒別、顯微鑒別、薄層鑒別及檢查項測定方法操作簡單易行、穩(wěn)定可靠、重現(xiàn)性好、專屬性強、擬定范圍合理，可為提升壯藥廣西鵝掌柴藥材質(zhì)量標準提供試驗依據(jù)。

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