云南省2015—2020年艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室血清學(xué)檢測考核結(jié)果分析

楊 敏，孫鵬艷，金曉媚，陳會超，戴 潔，董莉娟，曾志君，楊朝軍，楊 莉，陳 敏

（云南省疾病預(yù)防控制中心性病艾滋病防制所，云南 昆明 650022）

HIV抗體檢測是艾滋病實(shí)驗(yàn)室的核心檢測技術(shù)，在艾滋病的篩查和確證中起著關(guān)鍵的作用。為加強(qiáng)云南省艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理，確保檢測質(zhì)量，根據(jù)《全國艾滋病檢測工作管理辦法》[1]，云南省疾控中心艾滋病確證中心實(shí)驗(yàn)室每年組織全省艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行艾滋病血清學(xué)檢測質(zhì)量考核，分析查找云南省艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室在血清學(xué)檢測方面存在的問題。筆者對云南省艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室（2015—2020）年血清學(xué)檢測考核成績進(jìn)行分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 對象和方法

1.1 組織實(shí)施 云南省疾病預(yù)防控制中心艾滋病確證中心實(shí)驗(yàn)室組織全省除出入境檢驗(yàn)檢疫系統(tǒng)以外的所有艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行HIV血清學(xué)檢測考核。使用商品化的考核盲樣，每套考核盲樣包含5份樣品，考核項(xiàng)目包括HIV抗體快速試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫/化學(xué)發(fā)光試驗(yàn)、免疫印跡試驗(yàn)（WB試驗(yàn)）以及條帶判讀。根據(jù)考核通知，要求在指定時(shí)間內(nèi)完成檢測并回報(bào)結(jié)果。

1.2 結(jié)果分析 艾滋病確證中心實(shí)驗(yàn)室匯總各實(shí)驗(yàn)室反饋的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。根據(jù)所有參加考核的實(shí)驗(yàn)室的檢測結(jié)果確定預(yù)期值（采取所有實(shí)驗(yàn)室80%的一致性）[2]，每個(gè)考核項(xiàng)目滿分100分，每個(gè)樣品20分。WB試驗(yàn)及條帶判讀結(jié)論錯(cuò)誤扣20分，結(jié)論正確，條帶判讀錯(cuò)誤一個(gè)（p17，p24，p31，gp41，p51，p55，p66，gp120，gp160，HIV2/gp36）扣2分。以應(yīng)參加考核實(shí)驗(yàn)室數(shù)、實(shí)際參加實(shí)驗(yàn)室數(shù)、滿分實(shí)驗(yàn)室數(shù)、參加率、最低分、平均分和滿分實(shí)驗(yàn)室比例以及條帶判讀符合率對（2015—2020）年云南省艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室所參加的6次考核成績進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)室分布 （2015—2020）年，云南省分別有41家、64家、72家、96家、114家 和118家 艾 滋病確證實(shí)驗(yàn)室參加考核。包括省級、州（市）級和縣（區(qū)）級實(shí)驗(yàn)室，覆蓋疾控中心、醫(yī)療機(jī)構(gòu)、婦幼計(jì)生、監(jiān)管場所和采供血機(jī)構(gòu)。詳見表1。

表1 2015—2020年云南省艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室分布情況

2.2 實(shí)驗(yàn)室考核結(jié)果

2.2.1 HIV抗體快速試驗(yàn) 各實(shí)驗(yàn)室均參加HIV抗體快速試驗(yàn)考核，6次考核參加率均為100%，滿分率均為100%。

2.2.2 HIV抗體酶聯(lián)免疫/化學(xué)發(fā)光試驗(yàn) 各實(shí)驗(yàn)室均參加HIV抗體酶聯(lián)免疫/化學(xué)發(fā)光試驗(yàn)考核，6次考核參加率均為100%，滿分率均為100%。

2.2.3 免疫印跡試驗(yàn)和條帶判讀 免疫印跡試驗(yàn)和條帶判讀的參加率為100%。全省確證實(shí)驗(yàn)室6次WB試驗(yàn)和條帶判讀考核的平均分在（98.9～99.6）分，分別為99.6分、99.6分、99.3分、99.5分、99.0分、98.9分。2016年1家實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)1個(gè)樣品結(jié)論錯(cuò)誤，2019年1家實(shí)驗(yàn)室有2個(gè)樣品結(jié)果填報(bào)錯(cuò)誤，其余扣分均是因?yàn)椴糠痔禺愋詶l帶判讀錯(cuò)誤，未出現(xiàn)結(jié)論性差錯(cuò)。2016年考核中滿分實(shí)驗(yàn)室比例最高，達(dá)96.9%，2020年滿分實(shí)驗(yàn)室比例最低，為71.2%。（2015—2020）年云南省艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室WB試驗(yàn)及條帶判讀考核成績詳見表2。

表2 2015—2020年云南省艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室HIV確證試驗(yàn)及條帶判讀考核情況

對條帶判讀結(jié)果的分析發(fā)現(xiàn)，p17、p51、p55條帶判讀的符合率低于98.0%，（2015—2020）年云南省艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室條帶判讀符合率詳見表3。

表3 2015—2020年云南省艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室條帶判讀符合率

3 討論

到2016年底，云南省已成為艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室最多的省份。近5年來，艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)建設(shè)進(jìn)展較快[3]，到2020年底，云南省已建成各類艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室共6 781個(gè)，其中艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室123個(gè)，并且覆蓋了各級疾控中心、醫(yī)療機(jī)構(gòu)、婦幼計(jì)生、采供血、監(jiān)管場所、出入境檢驗(yàn)檢疫等系統(tǒng)，形成了一個(gè)較為完善的艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)。如此龐大的實(shí)驗(yàn)室規(guī)模在適應(yīng)云南省日益增長的艾滋病防制任務(wù)的同時(shí)，也給艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理帶來了嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。檢測工作質(zhì)量直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，每年的室間質(zhì)評作為評價(jià)檢測結(jié)果質(zhì)量的重要手段之一[4]，可以及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題，及時(shí)改進(jìn)，保證各實(shí)驗(yàn)室間的結(jié)果具有可比性。通過室間質(zhì)評，將考評結(jié)果及時(shí)反饋給各參評實(shí)驗(yàn)室，各參評實(shí)驗(yàn)室通過結(jié)果對比可以衡量自身的水平，以達(dá)到不斷完善、共同進(jìn)步的目的[5]。因此，為加強(qiáng)云南省艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室的管理，根據(jù)《全國艾滋病檢測工作管理辦法》[1]和《云南省艾滋病檢測工作規(guī)范（試行）》[6]的要求，云南省艾滋病確證中心實(shí)驗(yàn)室每年對轄區(qū)內(nèi)的所有艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行質(zhì)量考核，發(fā)現(xiàn)并及時(shí)反饋實(shí)驗(yàn)室檢測工作過程中存在的問題，加強(qiáng)云南省艾滋病檢測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室的管理。

（2015—2020）年，云南省參加血清學(xué)考評的艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室從41家增長到118家，包括了疾控、醫(yī)療機(jī)構(gòu)、監(jiān)管場所、婦幼計(jì)生、采供血機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)室?？h（市、區(qū)）級艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室所占比例由2015年的51.22%（21/41）增長到2020年的73.73%（87/118）。艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室主要設(shè)立在各級疾控中心，到2020年抗病毒治療定點(diǎn)醫(yī)療機(jī)構(gòu)的確證實(shí)驗(yàn)室增長的17家。目前大部分的感染者是在醫(yī)療機(jī)構(gòu)發(fā)現(xiàn)的，為實(shí)現(xiàn)從發(fā)現(xiàn)到治療的“一站式”服務(wù)，對醫(yī)療機(jī)構(gòu)的確證檢測能力也提出了新的要求。（2015—2020）年組織的6次考核中，云南省艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室的HIV抗體快速試驗(yàn)、HIV抗體、確證試驗(yàn)和條帶判讀的參加率均為100%，HIV抗體快速試驗(yàn)、HIV酶聯(lián)免疫/化學(xué)發(fā)光的滿分率為100%，WB試驗(yàn)和條帶判讀的滿分率在71.2%～96.9%，反映了各確證檢測實(shí)驗(yàn)室較好地保持了檢測能力。

從表2和表3可以看出，云南省部分艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室的條帶判讀能力還有待提高，從2015年到2020年，WB試驗(yàn)和條帶判讀的平均分在98.9～99.6，波動不大，但是從滿分率來看，2017年、2019年、2020年滿分率低于80%。對條帶判讀的考核結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)，p17、p51、p55條帶的錯(cuò)判率較高，符合率低于98%，可能原因是p17條帶前后非特異性條帶較多，且條帶的分子量小，電泳的位置不固定，而p55條帶與p51條帶距離較近，條帶顏色較淺，肉眼判讀不易區(qū)分，這與陳會超[2]、郭志宏等[7]的分析結(jié)果一致。除了對特異性條帶的特征和位置掌握不全面之外，結(jié)果填報(bào)時(shí)不認(rèn)真也是造成結(jié)果錯(cuò)判的原因，例如2019年有的實(shí)驗(yàn)室WB試驗(yàn)考核僅得60分，2019年、2020年還出現(xiàn)了HIV-2條帶的錯(cuò)判，相關(guān)實(shí)驗(yàn)室自查之后發(fā)現(xiàn)，這些差錯(cuò)均是由于填報(bào)結(jié)果時(shí)粗心大意導(dǎo)致的。

從（2015—2020）年云南省艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室確證試驗(yàn)及條帶判讀考核情況還可以看出，與前幾年相比，2019年和2020年的考評結(jié)果滿分率和平均分都有一定程度的降低，原因可能是自2018年云南省開展HIV快速檢測替代策略以來，隨著替代策略在云南省的推廣應(yīng)用，WB檢測的頻率減少，因此檢測人員對WB試驗(yàn)和條帶判讀的熟練程度降低。而且云南省確證實(shí)驗(yàn)室建設(shè)速度快，（2015—2020）年，確證實(shí)驗(yàn)室的數(shù)量大約翻了3倍，且縣級占比較大，現(xiàn)場指導(dǎo)的覆蓋面下降。因此，在今后的工作中，一方面要定期組織人員進(jìn)行條帶判讀的復(fù)訓(xùn)，提高判讀水平，另一方面要加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室人員的管理，充分發(fā)揮州（市）艾滋病中心實(shí)驗(yàn)室的作用，加強(qiáng)對縣級確證實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)指導(dǎo)。