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    三華李-木瓜復(fù)合果醋的發(fā)酵工藝研究

    2024-05-26 09:30:24蘇彩榮余森艷黎蘭明李秀秀覃瑤雙農(nóng)天霸
    農(nóng)產(chǎn)品加工 2024年7期
    關(guān)鍵詞:三華果醋總酸

    蘇彩榮,余森艷,黎蘭明,李秀秀,覃瑤雙,農(nóng)天霸

    (廣西民族師范學(xué)院化學(xué)與生物工程學(xué)院,廣西 崇左 532200)

    0 引言

    三華李屬薔薇科李屬,主要在廣東、廣西等地區(qū)種植,廣西最大的三華李生產(chǎn)基地是賀州市八步區(qū)[1]。成熟的三華李外觀(guān)呈圓形,果肉呈紫紅色,肉厚核小、脆甜可口、風(fēng)味獨(dú)特。三華李富含礦物質(zhì)、維生素、有機(jī)酸等多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),此外還含有鈣、鐵、磷、核黃素、維C、多酚類(lèi)物質(zhì)和類(lèi)胡蘿卜素[2]。三華李主要用于鮮食,在華南地區(qū)盛行將三華李做成酸嘢,部分加工成果脯[3]、果汁飲料[4]等產(chǎn)品,但將其用于果醋釀造還鮮有報(bào)道。木瓜屬番木瓜科番木瓜屬,廣西是我國(guó)木瓜的主要產(chǎn)區(qū),果實(shí)為橙色或橙紅色,果肉多汁味甜,含有豐富的蛋白質(zhì)、維生素、有機(jī)酸等多種成分,也含有豐富的超氧化物歧化酶,具有抗衰老、抗癌、防輻射等作用,是兼具營(yíng)養(yǎng)價(jià)值與藥用價(jià)值的水果之一[5]。

    果醋是一種以水果或者多種水果加工下腳料為主要原料,經(jīng)過(guò)酒精發(fā)酵和醋酸發(fā)酵2 段發(fā)酵工藝釀造而成的酸性飲品[6-7]。果醋營(yíng)養(yǎng)豐富、風(fēng)味優(yōu)良,具有促消化、抗氧化、促進(jìn)新陳代謝、調(diào)節(jié)酸堿平衡和降血脂等功效[8-10],是集營(yíng)養(yǎng)、保健、食療等功能為一體的新型飲品[11]。三華李與木瓜均不耐貯藏,鮮銷(xiāo)有限,將2 種原料結(jié)合制成三華李-木瓜復(fù)合果醋,既能滿(mǎn)足消費(fèi)者對(duì)健康果醋飲品的追求,增加復(fù)合果醋的花色品種,又可突破水果盛產(chǎn)帶來(lái)的“鮮銷(xiāo)瓶頸”,提升三華李和木瓜的經(jīng)濟(jì)附加值,培育和拉動(dòng)三華李與木瓜產(chǎn)業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    三華李、木瓜,購(gòu)自崇左農(nóng)貿(mào)市場(chǎng);果酒酵母、綿白糖,安琪酵母(崇左) 有限公司提供;果醋菌,煙臺(tái)帝伯士自釀?dòng)邢薰咎峁?5%食用酒精,河南漢永酒精有限公司提供;0.05 mol/L 氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液,飛凈生物科技有限公司提供。

    1.2 儀器與設(shè)備

    JYZ-E3C 型榨汁機(jī),九陽(yáng)股份有限公司產(chǎn)品;LRH-400A 型生化培養(yǎng)箱,廣東泰宏君科學(xué)儀器股份有限公司產(chǎn)品;YP5002 型電子天平,上海佑科儀器儀表有限公司產(chǎn)品;PAL-1 型手持糖度計(jì),深圳市卓越儀器儀表有限公司產(chǎn)品;酒精計(jì),浙江力辰儀器科技有限公司產(chǎn)品;HWS-26 型電熱恒溫水浴鍋,上海齊欣科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品;BD-320HEM型冰箱,青島海爾特種電冰柜有限公司產(chǎn)品。

    1.3 試驗(yàn)方法

    1.3.1 工藝流程

    ①三華李→清洗→去核→切塊→熱燙→三華李果漿;

    ②木瓜→清洗→去籽→切塊→熱燙→打漿→木瓜漿;

    ①+②→調(diào)配→調(diào)糖→殺菌、冷卻→酒精發(fā)酵→過(guò)濾→調(diào)整酒精度→過(guò)濾→殺菌→成品。

    1.3.2 操作要點(diǎn)

    (1) 三華李果漿的制備。挑選成熟適度、無(wú)霉變腐爛的新鮮市售三華李,經(jīng)清洗、去核、切塊后熱燙90 s,再按三華李與水質(zhì)量比1∶1 打漿,獲得三華李果漿備用。

    (2) 木瓜漿的制備。選擇八、九成熟的新鮮木瓜,清洗、去籽、切塊后熱燙90 s,以鈍化木瓜蛋白酶活性,再按木瓜與水質(zhì)量比1∶1 打漿,獲得木瓜漿備用。

    (3) 調(diào)配、調(diào)糖。將制備好的三華李果漿、木瓜漿按照一定的質(zhì)量比例混合,再用綿白糖調(diào)整初始糖度至適宜范圍。

    (4) 殺菌、冷卻。將調(diào)糖后的三華李-木瓜復(fù)合果漿于100 ℃條件下滅菌5 min,冷卻備用。

    (5) 酒精發(fā)酵。通過(guò)前期試驗(yàn)確定三華李-木瓜復(fù)合果酒發(fā)酵的條件為三華李果漿與木瓜漿的質(zhì)量比例1∶1,酵母添加量0.3%,發(fā)酵溫度27 ℃,初始糖度22%,發(fā)酵時(shí)間5 d,在此條件下發(fā)酵所得的三華李-木瓜復(fù)合果酒具有較好的風(fēng)味,酒體呈橙色,酒香濃郁、醇厚爽口。

    (6) 調(diào)整酒精度。利用酒精計(jì)測(cè)定酒精度,將復(fù)合果酒用無(wú)菌水及食用酒精調(diào)整到醋酸發(fā)酵所需要的酒精度。

    (7) 醋酸發(fā)酵。在調(diào)整酒精度的三華李-木瓜復(fù)合果酒中加入果醋菌,敞口靜置進(jìn)行醋酸發(fā)酵,每天攪拌2~3 次,以提高溶氧量。

    (8) 殺菌。將發(fā)酵結(jié)束的三華李-木瓜復(fù)合果醋過(guò)濾后于95~100 ℃條件下殺菌約10 min,然后迅速冷卻至常溫。

    1.4 醋酸發(fā)酵單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    以初始酒精度、果醋菌添加量、發(fā)酵溫度及發(fā)酵時(shí)間4 個(gè)因素進(jìn)行醋酸發(fā)酵階段的單因素試驗(yàn),設(shè)計(jì)各因素水平為初始酒精度6%,7%,8%,9%,10% (V/V);果醋菌添加量1%,2%,3%,4%,5%;發(fā)酵溫度30,32,34,36,38 ℃;發(fā)酵時(shí)間5,7,9,11,13 d。當(dāng)研究其中1 個(gè)因素時(shí),其余的3 個(gè)因素取各水平的中間值,以總酸為指標(biāo),研究這4 個(gè)因素對(duì)醋酸發(fā)酵的影響。

    1.5 醋酸發(fā)酵工藝優(yōu)化響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)

    在醋酸發(fā)酵單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,以Y 總酸(以乙酸計(jì),質(zhì)量濃度g/100 mL) 為響應(yīng)值,根據(jù)Box-benhnken 設(shè)計(jì)原理,以初始酒精度(A)、果醋菌添加量(B)、發(fā)酵溫度(C)、發(fā)酵時(shí)間(D) 為因素設(shè)計(jì)四因素三水平的響應(yīng)面試驗(yàn),確定復(fù)合果醋的最佳發(fā)酵工藝條件。

    1.6 數(shù)據(jù)處理與分析

    利用Origin2021 軟件完成單因素試驗(yàn)作圖,運(yùn)用Design Expert 8.0.6 軟件完成響應(yīng)面試驗(yàn)作圖及數(shù)據(jù)處理與分析。

    1.7 理化成分測(cè)定

    酒精度的測(cè)定:使用酒精計(jì)測(cè)定。

    糖度的測(cè)定:使用手持糖度計(jì)測(cè)定。

    總酸測(cè)定:采用酸堿滴定法(以乙酸計(jì),參照GB 12456—2021 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中總酸的測(cè)定)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 醋酸發(fā)酵最佳工藝條件的確定

    2.1.1 初始酒精度的確定

    初始酒精度對(duì)醋酸發(fā)酵的影響見(jiàn)圖1。

    圖1 初始酒精度對(duì)醋酸發(fā)酵的影響

    由圖1 可知,三華李-木瓜復(fù)合果醋產(chǎn)品的總酸含量在初始酒精度為6%~9%(V/V) 范圍內(nèi)呈升高的趨勢(shì);當(dāng)初始酒精度超過(guò)9%(V/V) 時(shí),總酸含量開(kāi)始下降。這可能是因?yàn)榫凭冗^(guò)高會(huì)抑制果醋菌的生長(zhǎng)代謝,降低其活力,導(dǎo)致發(fā)酵結(jié)束時(shí)總酸的含量偏低[12]??梢?jiàn),酒精度的高低會(huì)影響總酸產(chǎn)量。因此,選擇該因素進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn)的3 個(gè)水平為8%,9%,10%(V/V)。

    2.1.2 果醋菌添加量的確定

    果醋菌添加量對(duì)醋酸發(fā)酵的影響見(jiàn)圖2。

    圖2 果醋菌添加量對(duì)醋酸發(fā)酵的影響

    由圖2 可知,當(dāng)果醋菌添加量為3%時(shí),總酸含量達(dá)到最大;果醋菌添加量為1%~3%時(shí),總酸含量逐漸升高,超過(guò)3%時(shí),總酸含量開(kāi)始降低。原因可能是果醋菌添加量較低時(shí),菌體生長(zhǎng)速度慢,發(fā)酵液中的酒精不能在短時(shí)間內(nèi)盡快轉(zhuǎn)化為醋酸[13]。當(dāng)果醋菌添加量在適當(dāng)?shù)姆秶鷥?nèi)及溶氧量大時(shí),有利于醋酸的產(chǎn)生,而果醋菌添加量過(guò)多時(shí),一方面果醋菌的生長(zhǎng)繁殖會(huì)消耗過(guò)多的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì);另一方面會(huì)導(dǎo)致溶氧量降低使醋酸生成量下降[14]。因此,選擇該因素進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn)的3 個(gè)水平為2%,3%,4%。

    2.1.3 發(fā)酵溫度的確定

    發(fā)酵溫度對(duì)醋酸發(fā)酵的影響見(jiàn)圖3。

    圖3 發(fā)酵溫度對(duì)醋酸發(fā)酵的影響

    由圖3 可知,發(fā)酵溫度低于34 ℃時(shí),總酸含量隨發(fā)酵溫度增加而升高;當(dāng)發(fā)酵溫度超過(guò)34 ℃時(shí),總酸含量呈下降趨勢(shì)。這可能是因?yàn)檫m宜的溫度有利于果醋菌生長(zhǎng)繁殖和產(chǎn)酸;當(dāng)發(fā)酵溫度偏低或偏高時(shí),果醋菌的酶活性被抑制,酒精轉(zhuǎn)化為醋酸的能力下降[15]。因此,選擇該因素進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn)的3個(gè)水平為32,34,36 ℃。

    2.1.4 發(fā)酵時(shí)間的確定

    發(fā)酵時(shí)間對(duì)醋酸發(fā)酵的影響見(jiàn)圖4。

    圖4 發(fā)酵時(shí)間對(duì)醋酸發(fā)酵的影響

    由圖4 可知,三華李-木瓜復(fù)合果醋在發(fā)酵過(guò)程中,總酸含量隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)呈先升高后緩慢降低的趨勢(shì),當(dāng)發(fā)酵時(shí)間為9 d 時(shí)總酸含量達(dá)到最高。發(fā)酵初期總酸含量低,這可能是因?yàn)榘l(fā)酵時(shí)間太短,發(fā)酵不充分,隨著時(shí)間的推移,發(fā)酵液的總酸含量趨于平緩,表明醋酸發(fā)酵基本結(jié)束[16]。因此,選擇該因素進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn)的3 個(gè)水平為9,11,13 d。

    2.2 醋酸發(fā)酵工藝響應(yīng)面法優(yōu)化試驗(yàn)結(jié)果與分析

    根據(jù)Box-behnken 中心組合試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理[17],在醋酸發(fā)酵單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,設(shè)計(jì)醋酸發(fā)酵響應(yīng)面試驗(yàn)因素水平(見(jiàn)表1),并以Y總酸為響應(yīng)值,進(jìn)行四因素三水平的響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)(見(jiàn)表2) 和回歸分析與結(jié)果(見(jiàn)表3)。

    表1 醋酸發(fā)酵響應(yīng)面試驗(yàn)因素與水平設(shè)計(jì)

    表2 醋酸發(fā)酵響應(yīng)面試驗(yàn)方案及結(jié)果

    表3 回歸分析與結(jié)果

    醋酸發(fā)酵響應(yīng)面試驗(yàn)因素與水平設(shè)計(jì)見(jiàn)表1,醋酸發(fā)酵響應(yīng)面試驗(yàn)方案及結(jié)果見(jiàn)表2,回歸分析與結(jié)果見(jiàn)表3。

    利用Design Expert 8.0.6 軟件進(jìn)行回歸分析,得到的回歸方程式為:

    由表3 可知,模型的p<0.000 1<0.01,表明模型方程極顯著,說(shuō)明試驗(yàn)方法可行可靠;失擬項(xiàng)p=0.312 5>0.05,失擬項(xiàng)不顯著,說(shuō)明該模型的擬合度較好,該方程能夠很好地反映初始酒精度、果醋菌添加量、發(fā)酵溫度、發(fā)酵時(shí)間和總酸之間的準(zhǔn)確關(guān)系,可以利用回歸方程式得出三華李-木瓜復(fù)合果醋的最佳工藝條件,回歸分析結(jié)果顯示R2=0.956 9,R2Adj=0.913 8,兩者相差<0.2,說(shuō)明預(yù)測(cè)值與真實(shí)值有很好的相關(guān)性。一次項(xiàng)A對(duì)總酸有極顯著影響,C對(duì)總酸有顯著影響;交互項(xiàng)BD對(duì)總酸有極顯著影響,AC、BC對(duì)總酸有顯著影響;二次項(xiàng)A2,B2,C2,D2對(duì)總酸有極顯著影響,其他各因素對(duì)總酸影響不顯著(p>0.05)。

    2.3 三華李-木瓜復(fù)合果醋工藝優(yōu)化響應(yīng)面圖

    從Design Expert 8.0.6.1 響應(yīng)面分析軟件中得到兩兩因素間的三維響應(yīng)曲面圖。曲面圖可直接反映各因素交互作用對(duì)果醋總酸的影響,曲面的坡度越陡,說(shuō)明該因素對(duì)果醋發(fā)酵過(guò)程的影響越大[18-19]。

    各因素交互作用對(duì)總酸影響的曲面圖見(jiàn)圖5。

    圖5 各因素交互作用對(duì)總酸影響的曲面圖

    由圖5 可知,總體上,總酸含量隨著4 個(gè)因素的增加先上升后下降,初始酒精度、果醋菌添加量、發(fā)酵溫度和發(fā)酵時(shí)間4 個(gè)因素之間存在交互作用。其中,總酸含量受果醋菌添加量和發(fā)酵時(shí)間交互作用強(qiáng),對(duì)總酸的影響極顯著;初始酒精度和發(fā)酵溫度、果醋菌添加量和發(fā)酵溫度的交互作用較強(qiáng),對(duì)總酸的影響顯著。

    2.4 驗(yàn)證試驗(yàn)

    根據(jù)響應(yīng)面分析試驗(yàn),結(jié)合回歸方程分析得出優(yōu)化的三華李-木瓜復(fù)合果醋最佳發(fā)酵工藝條件為初始酒精度9.26%(V/V),果醋菌添加量2.98%,發(fā)酵溫度33.62 ℃,發(fā)酵時(shí)間11.12 d,在該預(yù)測(cè)條件下,果醋的總酸為5.07 g/100 mL。為了驗(yàn)證試驗(yàn),使結(jié)果更準(zhǔn)確,根據(jù)實(shí)際情況,對(duì)響應(yīng)面試驗(yàn)得出的最佳工藝條件進(jìn)行如下調(diào)整:初始酒精度9%(V/V),果醋菌添加量3%,發(fā)酵溫度34 ℃,發(fā)酵時(shí)間11 d,在此發(fā)酵工藝條件下重復(fù)三華李-木瓜復(fù)合果醋發(fā)酵3 次,得出三華李-木瓜復(fù)合果醋的平均總酸為5.17 g/100 mL,該值與預(yù)測(cè)值接近,兩者之間的相對(duì)誤差只有0.2%,說(shuō)明該模型能夠很好地反映三華李-木瓜復(fù)合果醋發(fā)酵的實(shí)際情況,因此使用該方法分析三華李-木瓜復(fù)合果醋得到的數(shù)據(jù)是可靠的。

    3 結(jié)論

    以三華李和木瓜為原料,依次進(jìn)行酒精發(fā)酵與醋酸發(fā)酵,通過(guò)單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面分析試驗(yàn),對(duì)三華李-木瓜復(fù)合果醋在醋酸發(fā)酵過(guò)程中的主要工藝參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化,得出復(fù)合果醋的最佳發(fā)酵工藝條件為初始酒精度9%(V/V),果醋菌添加量3%,發(fā)酵溫度34 ℃,發(fā)酵時(shí)間11 d,在該條件下,果醋的總酸含量達(dá)到5.17 g/100 mL,產(chǎn)品的色澤呈棕紅色,透明澄清、酸味柔和、果香協(xié)調(diào)。三華李-木瓜復(fù)合果醋的研發(fā)既可延伸三華李與木瓜的加工產(chǎn)業(yè)鏈,提升三華李和木瓜的經(jīng)濟(jì)附加值,又可增加果醋花色品種,為果醋產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展提供一定的理論參考。

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