實時熒光人乳頭瘤病毒檢測和液基薄層細胞學(xué)檢查對宮頸病變的預(yù)測價值

張立娥 杜翠霞

【摘要】目的：探討實時熒光人乳頭瘤病毒（HPV）檢測和液基薄層細胞學(xué)檢查（TCT）對宮頸病變的預(yù)測價值。方法：以我院接診的行宮頸篩查的1786例女性為研究對象，對其進行實時熒光HPV檢測、TCT和陰道鏡病理檢測，以病理檢測結(jié)果為金標準，評價實時熒光HPV檢測和TCT的預(yù)測價值。結(jié)果：本研究1786例受檢女性，病理篩查確診131例，發(fā)病率為7.33%，TCT、實時熒光HPV檢測和TCT聯(lián)合實時熒光HPV檢測篩出陽性率分別為2.97%、5.60%和6.83%。TCT聯(lián)合實時熒光HPV檢測靈敏度為91.60%、特異度為99.88%、陽性預(yù)測值為98.36%、陰性預(yù)測值為99.34%，TCT聯(lián)合實時熒光HPV檢測靈敏度與陽性預(yù)測值高于TCT與實時熒光HPV檢測，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：在宮頸病變診斷中，實時熒光HPV檢測與TCT聯(lián)合篩查具有較高的預(yù)測價值，值得推廣。

【關(guān)鍵詞】實時熒光HPV檢測；TCT；宮頸病變；預(yù)測價值

Predictive value of real-time fluorescent human papillomavirus detection and thinprep cytology test in cervical lesions

ZHANG Lie， DU Cuixia

Department of Clinical Laboratory， Ningjin Peoples Hospital， Dezhou City， Shandong， Dezhou， Shandong 253400， China

【Abstract】Objective：To investigate the predictive value of real-time fluorescent human papillomavirus （HPV） detection and thinprep cytology test （TCT） in cervical lesions.Methods：A total of 1786 women who underwent cervical screening in our hospital were selected as the research objects，and real-time fluorescent HPV detection，TCT and colposcopy pathological test were performed on them.The pathological test results were used as the gold standard to evaluate the predictive value of real-time fluorescence HPV detection and TCT.Results：Among the 1786 women tested in this study，131 cases were confirmed by pathological screening，with the incidence rate of 7.33%.The positive rates of TCT，real-time fluorescent HPV detection and TCT combined with real-time fluorescent HPV detection were 2.97%，5.60% and 6.83%，respectively.The sensitivity，specificity，positive predictive value and negative predictive value of TCT combined with real-time fluorescent HPV detection were 91.60%，99.88%，98.36% and 99.34%，the sensitivity and positive predictive value of TCT combined with real-time fluorescence HPV detection were higher than those of TCT and real-time fluorescent HPV detection，the difference was statistically significant （P<0.05）.Conclusion：In the diagnosis of cervical lesions，the combined screening of real-time fluorescent HPV detection and TCT has high predictive value and is worth popularizing.

【Key Words】Real-time fluorescent HPV detection； TCT； Cervical lesions； Predictive value

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤。研究報道表示[1]，99.7%的宮頸癌與高危型人乳頭瘤病毒（HPV）感染密切相關(guān)[2]，但該方法單獨篩查其特異性非常低，需要聯(lián)合液基薄層細胞學(xué)檢查（TCT）、陰道鏡復(fù)查。現(xiàn)以我院開展宮頸篩查工作接收的1786例女性的相關(guān)情況做如下總結(jié)。

1 資料與方法

1.1臨床資料

本研究采取回顧性分析，以2021年1月—2023年3月在我院接受宮頸篩查的1786例女性作為研究對象。（1）納入標準：年齡20歲及以上；有正常性生活史；無子宮切除術(shù)病史；非經(jīng)期；非妊娠階段；無宮頸治療病史和盆腔照射史；同時接受實時熒光HPV檢測與TCT，呈現(xiàn)為陽性的患者；受檢3d時間內(nèi)無陰道用藥史、性交史；有明確的病理組織檢查結(jié)果；有完整的臨床資料信息。（2）排除標準：合并有全身腫瘤或者盆腹腔包塊；急性生殖系統(tǒng)感染性疾?。慌R床資料不全；妊娠期女性。本研究1786例女性，年齡18～65歲，平均年齡（39.8±3.32）歲；孕次0～4次，平均孕次（2.2±1.0）次；產(chǎn)次0～3次，平均產(chǎn)次（1.8±0.7）次。

1.2方法

1.2.1婦科檢查與標本收集

接受檢查的婦女均要求在經(jīng)期干凈之后3～7d進行，由婦科醫(yī)生對婦女實施常規(guī)婦科檢查，并運用兩支干燥的無菌棉拭子在陰道壁中上1/3或者陰道穹隆部位刮取適量的陰道分泌物，將兩支棉簽分別放置于液基細胞保存液中保存?zhèn)溆?；另采用人乳頭瘤病毒專用刷，在宮頸口部位順時針旋轉(zhuǎn)3～5圈，將其置于HPV樣本保存液中保存?zhèn)溆?，以便后續(xù)進行實時熒光HPV檢測與TCT。由有著豐富實踐經(jīng)驗的陰道鏡醫(yī)生對細胞學(xué)檢查結(jié)果進行分析，針對細胞學(xué)檢查結(jié)果顯示為陰性但HPV16/18顯示為陽性、不典型的鱗狀細胞（ASCUS）受試者實施陰道鏡檢查，若陰道鏡暴露充分且表現(xiàn)出病變情況則在異常部位截取活檢，若陰道鏡暴露不充分則通過陰道搔刮術(shù)（ECC）檢查。

1.2.2檢測方法

（1）TCT：由婦科醫(yī)生拭去宮頸表面黏液及分泌物，使用活細胞取樣刷對患者病灶部位進行采樣，再對樣本進行細菌分解，進行制片、凝固和巴氏染色等檢查。（2）實時熒光HPV檢測：采用實時熒光PCR法。采集患者分泌物或?qū)m頸脫落細胞，使用多重核酸的擴增與熒光檢查方法檢查HPV。（3）陰道鏡下組織病理學(xué)檢查：宮頸消毒后在陰道鏡下取可疑病變部位宮頸組織，行石蠟切片檢查。

1.3觀察指標及診斷標準

比較TCT、實時熒光HPV檢測及TCT聯(lián)合實時熒光HPV檢測的診斷結(jié)果。①TCT診斷標準：國際癌癥協(xié)會Bethesda報告系統(tǒng)（TBS）診斷系統(tǒng)：正常范圍；非典型的鱗狀細胞（ASC-US）；非典型鱗狀細胞傾向上皮內(nèi)高度病變（ASC-H）；低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）；高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）；不典型腺細胞、宮頸管原位癌（AIS）；鱗狀細胞癌（SCC）或腺癌（CA）。②TCT陽性診斷指ASC-US及以上的病變。實時熒光HPV檢測診斷標準：檢查結(jié)果為<1 pg/mL為HPV陰性；>1 pg/mL為HPV陽性。HPV陽性根據(jù)致癌性分為高危型、低危型。高危型HPV主要有16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、82型；低危型HPV有6、11、40、42、43、44、55、61、81、83型等。③陰道鏡下病理組織學(xué)結(jié)果判斷標準：正常；宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變（CIN）Ⅰ級；CINⅡ級；CINⅢ級；SCC。陰道鏡下病理組織學(xué)檢查結(jié)果為判定宮頸癌的金標準。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 25.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析。計數(shù)資料采用（%）表示，進行x2檢驗，計量資料采用（x±s）表示，進行t檢驗，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同方法的篩查結(jié)果

本研究1786例受檢女性，經(jīng)病理篩查，最終確診131例，發(fā)病率為7.33%，其中CIN I級84例，占64.12%；CIN II級19例，占14.50%；CIN Ⅲ級9例，占6.87%；宮頸癌19例，占14.50%。TCT、實時熒光HPV檢測與TCT聯(lián)合實時熒光HPV檢測篩出陽性率分別為2.97%、5.60%、6.83%，其中TCT陽性率低于病理檢測結(jié)果，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2不同篩查方法的診斷效能

以病理檢測結(jié)果為金標準，對TCT、實時熒光HPV檢測與TCT聯(lián)合實時熒光HPV檢測診斷效能進行計算，TCT聯(lián)合實時熒光HPV檢測靈敏度為91.60%、特異度為99.88%、陽性預(yù)測值為98.36%、陰性預(yù)測值為99.34%，其中靈敏度與陽性預(yù)測值均高于TCT與實時熒光HPV檢測，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

宮頸癌是目前影響全球女性身心健康的第四大惡性腫瘤疾病，我國作為宮頸癌高發(fā)國家，其發(fā)病率與死亡率均居于世界首位[3]。宮頸癌從癌前病變逐漸演變?yōu)榻櫺詫m頸癌需要經(jīng)歷一個較為漫長的過程，并且在這個過程中，宮頸內(nèi)瘤變是可實現(xiàn)逆轉(zhuǎn)的，為此，宮頸癌是一種能夠進行早期預(yù)防的臨床疾病，早期的干預(yù)不僅能夠促使發(fā)病率得到降低，同時還能夠達到100%的早期治愈率?，F(xiàn)階段，陰道鏡活檢組織病理學(xué)診斷是宮頸癌診斷的“金標準”，但該方法本身是一種有創(chuàng)手段，且不能夠適用于農(nóng)村地區(qū)的普及篩查，為此，被作為初篩陽性病例的復(fù)查手段，能夠為臨床提供更為充分的診斷指導(dǎo)。

在有正常性生活的女性群體中，80%以上的女性在其一生中至少感染一種型別的HPV，但絕大部分均屬于一過性感染，因HPV-DNA檢查很難識別這種一過性感染，導(dǎo)致HPV患者出現(xiàn)了不必要的復(fù)查隨訪，甚至是過度診療的情況，不僅使得患者承擔(dān)不必要的經(jīng)濟損失，還會造成極大的心理負擔(dān)[4]。有研究報道表明，HPV早期編碼區(qū)域中E6/E7基因均屬于致癌性基因，其呈現(xiàn)出的陽性表達也是宮頸癌發(fā)生發(fā)展中的必然過程，簡單來說，就是在沒有E6/E7基因表達的情況下，那么細胞通常不會出現(xiàn)癌變[5]。同時還有研究者認為，E6/E7 mR-NA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物能夠客觀體現(xiàn)出癌基因的活性程度，當其表達出現(xiàn)增加時，就會導(dǎo)致宮頸癌和高度鱗狀上皮內(nèi)病變風(fēng)險升高。為此，相較于HPV與TCT檢查手段，TCT聯(lián)合實時熒光HPV檢測能夠掌握HPV E6/E7mRNA檢測，更為準確地判斷持續(xù)感染情況，而避免過度診療情況出現(xiàn)[6]。根據(jù)本次結(jié)果來看，通過陰道鏡為患者復(fù)查，確診患者131例，發(fā)病率為7.33%，而通過TCT檢查僅發(fā)現(xiàn)53例，實時熒光HPV檢測僅發(fā)現(xiàn)100例，兩者聯(lián)合發(fā)現(xiàn)122例，均稍低于病理檢查結(jié)果，盡管實時熒光HPV單獨檢測與實時熒光HPV檢測聯(lián)合TCT與病理結(jié)果無差異（P>0.05）。但根據(jù)診斷效能來看，實時熒光HPV單獨檢測、實時熒光HPV檢測聯(lián)合TCT檢查均存在假陽性情況，其中TCT聯(lián)合實時熒光HPV檢測的假陽性率相對較低，具有較高診斷靈敏度。即表明通過陰道鏡來實施進一步檢查，能夠準確對患者進行判定，而通過TCT聯(lián)合實時熒光HPV檢測可提高初篩的準確性，盡量減少漏診、誤診情況。

綜上所述，在宮頸病變篩查中，采取TCT聯(lián)合實時熒光HPV檢測進行初篩具有較高的應(yīng)用價值，但仍然需要安排患者做進一步的陰道鏡檢查，以便更好、更為客觀地評價病變情況，為臨床診療方案的制定提供依據(jù)。

參考文獻

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[2] 麥艷媚.實時熒光PCR與基因芯片法檢測人乳頭瘤病毒的方法學(xué)比較[J].吉林醫(yī)學(xué)，2021，42（12）：2882-2884.

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[5] 嚴良烽，謝超，方景文.基于分子生物學(xué)水平的核酸實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)人乳頭瘤病毒基因分型檢測技術(shù)的臨床應(yīng)用[J].實用醫(yī)技雜志，2020，27（9）：1170-1171.

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