鹿茸多肽通過(guò)SDF-1α/CXCR4軸調(diào)控PI3K/AKT信號(hào)通路促進(jìn)下肢動(dòng)脈硬化性閉塞癥大鼠血管新生的作用機(jī)制

丁愛(ài)國(guó)，王雁彬，李廷荃，李子娟，王繼堯，曹佳穎

摘要目的：探索鹿茸多肽通過(guò)基質(zhì)細(xì)胞衍生因子（SDF-1α）/趨化因子受體（CXCR4）軸對(duì)磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）通路促進(jìn)下肢動(dòng)脈硬化性閉塞癥（PAD）大鼠血管新生的作用機(jī)制。方法：采用結(jié)扎并離斷大鼠股動(dòng)脈及分支造成肢體缺血、給予高脂飼料喂養(yǎng)制作大鼠下肢動(dòng)脈硬化閉塞癥模型。將100只雄性Sprague Dawley（SD）大鼠隨機(jī)分為10組，分別為空白組、模型組、假手術(shù)組，鹿茸多肽低劑量組、鹿茸多中劑量肽組、鹿茸多肽高劑量組、抑制劑LY294002組、鹿茸多肽低劑量＋抑制劑LY294002組、鹿茸多肽中劑量＋抑制劑LY294002組、鹿茸多肽高劑量＋抑制劑LY294002組。將空白組、模型組及假手術(shù)組灌胃等容量蒸餾水。鹿茸多肽低、中、高劑量組＋抑制劑LY294002組先行腹腔注射再灌胃，于造模完第1天開(kāi)始給藥，每日1次，28 d后處死。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)給藥后外周血、骨髓中造血干細(xì)胞（CD34＋細(xì)胞）比例；免疫熒光法檢測(cè)給藥后患側(cè)腓腸肌SDF-1α、PI3K的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)比例。結(jié)果：造血干細(xì)胞（CD34＋細(xì)胞）比例模型組均顯著高于空白組（P＜0.05）；其中鹿茸多肽低劑量組較鹿茸多肽低劑量＋抑制劑LY294002組陽(yáng)性細(xì)胞比例升高，鹿茸多肽中劑量組較鹿茸多肽中劑量＋抑制劑LY294002組陽(yáng)性細(xì)胞比例升高，鹿茸多肽高劑量組較鹿茸多肽高劑量＋抑制劑LY294002組陽(yáng)性細(xì)胞比例升高（P＜0.05）；給藥組SDF-1α、PI3K的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)高于模型組及抑制組（P＜0.05），鹿茸多肽中劑量組高于鹿茸多肽低劑量組（P＜0.05），鹿茸多肽高劑量組高于鹿茸多肽高劑量組＋LY294002組（P＜0.05）。結(jié)論：鹿茸多肽通過(guò)SDF-1α/CXCR4軸影響PI3K/AKT信號(hào)通路促進(jìn)了內(nèi)皮祖細(xì)胞的增殖及分化、PAD血管新生。

關(guān)鍵詞下肢動(dòng)脈硬化性閉塞癥；鹿茸多肽；內(nèi)皮祖細(xì)胞；血管新生；實(shí)驗(yàn)研究

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.08.012

The? Mechanism of Antler Polypeptide? Regulating PI3K/AKT Signaling Pathway through SDF-1α/CXCR4 Axis Promotes Angiogenesis on Rats with Lower Extremity Arteriosclerotic Obliterans

DING Aiguo， WANG Yanbin， LI Tingquan， LI Zijuan， WANG Jiyao， CAO Jiaying

Shuozhou People′s Hospital， Shuozhou 036000， Shanxi，China

Corresponding AuthorWANG Yanbin， E-mail： 416210959@qq.com

AbstractObjective：To explore the effect of antler polypeptides on phosphatidylinoinosidine-3-kinase（PI3K）/protein kinase B（AKT） pathway through stromal cell derived factor（SDF-1α）/receptor（CXCR4） axis，and to promote angiogenesis on rats with lower limb arteriosclerotic obliterans（PAD）.Methods：The rats model with lower extremity arteriosclerosis obliterans were established by ligation and severing of femoral artery and branches to construct limb ischemia and feeding with high fat diet.One hundred male SD rats were randomly divided into blank group，model group and sham operation group; antler polypeptide low dose group，medium dose antler polypeptide medium dose group，antler polypeptide high dose group，inhibitor LY294002 group，LY294002＋antler polypeptide low dose group，LY294002＋antler polypeptide medium dose group，LY294002＋antler polypeptide high dose group.The blank group，model group and sham group were gavaged equal volume of distilled water.LY294002＋antler polypeptide low dose group，LY294002＋antler polypeptide medium dose group，LY294002＋antler polypeptide high dose group were first injected intraperitoneally and then gavaged with intragastric administration，once a day? after modeling，and rats，were executed after 28 days.Flow cytometry was used to detect the proportion of hematopoietic stem cells（CD34＋cells） in peripheral blood and bone marrow after administration.The proportion of SDF-1α and PI3K positive cells in gastrocnemius muscle was detected by immunofluorescence assay.Results：The proportion of hematopoietic stem cells（CD34＋cells） in model group was higher than that in blank group（P＜0.05）.The proportion of positive cells in antler polypeptide low dose group was higher than that in LY294002＋antler polypeptide low dose group，the proportion of positive cells in antler polypeptide medium dose group was higher than that in LY294002＋antler polypeptide medium dose group，and the proportion of positive cells in antler polypeptide high dose group was higher than that in LY294002＋antler polypeptide high dose group（P＜0.05）.The proportion of positive cell number of SDF-1α and PI3K in administration group was significantly higher than that in model group and inhibition group（P＜0.05），the antler polypeptide medium dose group was higher than that in LY294002＋antler polypeptide medium dose group group，and the antler polypeptide medium dose group was higher than that in antler polypeptide low dose group group（P＜0.05），antler polypeptide high dose group was higher than LY294002＋antler polypeptide high dose group（P＜0.05）.Conclusion：Antler polypeptide affected the PI3K/AKT signaling pathway through SDF-1α/receptor（CXCR4） axis thereby promoting the proliferation and differentiation of endothelial progenitor cells，and facilitating the angiogenesis of PAD.

Keywordsarteriosclerotic obliterans of lower extremity; antler polypeptide; endothelial progenitor cells; angiogenesis; experimental study

下肢動(dòng)脈硬化性閉塞癥（peripheral artery disease in the lower extremity，PAD）是我國(guó)老年人的常見(jiàn)病、多發(fā)?。?］。研究表明，有癥狀的PAD是全身血管系統(tǒng)硬化的重要標(biāo)志，在早期以肢體發(fā)涼、怕冷及間歇性跛行為主［2-3］，發(fā)展到后期常出現(xiàn)肢體末端壞疽而面臨截肢，其病理特點(diǎn)往往表現(xiàn)為動(dòng)脈粥樣硬化導(dǎo)致的動(dòng)脈狹窄、閉塞、局部缺血，所以該病治療集中在缺血部位的血管再通和血管新生方面［4］。

鹿茸能夠補(bǔ)腎、填精、益髓，其核心成分是鹿茸多肽，探究鹿茸多肽調(diào)控內(nèi)皮祖細(xì)胞（EPCs）動(dòng)員、歸巢及促進(jìn)PAD缺血區(qū)血管新生的機(jī)制意義重大。本課題組前期動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)，鹿茸能夠改善內(nèi)皮細(xì)胞，通過(guò)磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）信號(hào)通路調(diào)控EPCs的動(dòng)員及歸巢，促進(jìn)PAD大鼠的血管新生［5-7］。鹿茸主要成分是鹿茸多肽，鹿茸多肽對(duì)成纖維細(xì)胞及表皮細(xì)胞有顯著促進(jìn)增殖作用，可以加速瘡面的愈合，促進(jìn)其血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖分化及遷移［8］，對(duì)EPCs的特征和鹿茸多肽信號(hào)傳導(dǎo)途徑的充分理解更有利于研究PAD的分子生物學(xué)機(jī)制。本研究旨在分析鹿茸多肽通過(guò)基質(zhì)細(xì)胞衍生因子（SDF-1α）/趨化因子受體4（CXCR4）軸對(duì)PI3K/AKT通路的影響，探討促進(jìn)PAD大鼠血管新生的作用機(jī)制。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

100只2月齡雄性Sprague Dawley（SD）大鼠，清潔級(jí)，體質(zhì)量250～300 g，由山西省中醫(yī)藥研究院提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào)：1103221911003889［9］。

1.1.2飼料制備

高脂飼料：80.3%基礎(chǔ)飼料＋15%豬油＋0.5%淡黃色膽酸鈉＋0.2%丙硫氧嘧啶＋4%膽固醇。

1.1.3藥物與試劑

鹿茸多肽采用馬鹿茸多肽，鹿茸多肽凍干粉購(gòu)于陜西斯諾特生物科技技術(shù)有限公司，儲(chǔ)存于室溫，鹿茸多肽凍干粉溶于去離子水，配置為濃度 4.5 mg/mL的溶液，置于 EP 管中，儲(chǔ)存在 2～6 ℃冰箱中［9］；PI3K抑制劑LY294002采購(gòu)于美國(guó)輝瑞公司，用非質(zhì)子溶劑二甲基亞砜（DMSO）配置母液（10 mg PI3K抑制劑溶于6.507 5 mL二甲基亞砜中）在－20 ℃冰箱保存，每日所配置的當(dāng)日所需工作液由10%母液＋40%PEG300＋5%Tween-80＋45%生理鹽水組成，即用即配［9］；維生素針劑D3購(gòu)于哈爾濱摩天農(nóng)科獸藥有限公司；造血干細(xì)胞CD34抗體及同型對(duì)照抗體購(gòu)于BD公司；SDF-1α、PI3K購(gòu)于英國(guó) Abcam 公司。

1.1.4儀器

德國(guó)EPPENDORF移液器；電子天平購(gòu)于瑞士METTER公司；中國(guó)中衫金橋有限公司微量加樣吸頭；法國(guó)Froilabo烘箱；日本OLYMPUS顯微鏡；脫水機(jī)、包埋機(jī)及凍臺(tái)購(gòu)于武漢俊杰電子公司；病理切片機(jī)購(gòu)于上海徠卡科技公司；烤箱、微波爐及冰箱購(gòu)于美的電器制造有限責(zé)任公司；流式細(xì)胞儀購(gòu)于美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特公司；恒溫水浴箱購(gòu)于江蘇太倉(cāng)醫(yī)用儀器廠；高速攪拌器為德國(guó)Fluko公司。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1分組

按隨機(jī)數(shù)字表法將100只大鼠分為10組：空白組、模型組、假手術(shù)組、給藥組（包括鹿茸多肽低劑量組、鹿茸多肽中劑量組、鹿茸多肽高劑量組、鹿茸多肽低劑量＋抑制劑LY294002組、鹿茸多肽中劑量＋抑制劑LY294002組、鹿茸多肽高劑量＋抑制劑LY294002組）、抑制劑LY294002組，每組10只。

1.2.2PAD模型制作

將SD雄性大鼠，腹腔麻醉（5%水合氯醛溶液7 mL/kg），取平臥位，固定于手術(shù)臺(tái)中央，左腹股溝區(qū)域碘消毒，縱向切口約1.5 cm，暴露血管鞘，分離其股動(dòng)脈及其分支，齒鑷鉗夾約30 s，結(jié)扎并離斷左側(cè)股動(dòng)脈的分支；用0號(hào)線縫合皮膚及皮下組織，在SD大鼠背部皮下注射生理鹽水10 mL補(bǔ)液抗休克治療，觀察大鼠各項(xiàng)生命體征，平穩(wěn)后放回鼠籠；肌肉注射30×104 U青霉素3 d，預(yù)防感染；飼料為高脂飼料并且喂養(yǎng)12周［8-9］；給予維生素D3（30×104 U/kg），右下肢肌肉注射，每月1次［10］。

1.2.3給藥方法

鹿茸多肽低、中、高劑量組分別灌胃給藥0.143 g/（kg·d）、0.286 g/（kg·d）、0.572 g/（kg·d）。抑制劑LY294002組腹腔注射LY294002 1 mg/（kg·d）；空白組、模型組和假手術(shù)組灌胃等容量蒸餾水；鹿茸多肽低中、高劑量＋抑制劑LY294002組先進(jìn)行腹腔注射然后再灌胃；在造模后的第1天給藥，連續(xù)28 d，每日1次，28 d后處死大鼠［9］。

1.2.4采集標(biāo)本及處理方法

將大鼠麻醉，用小鑷子摘去其中一只眼球，收集外周血到微量離心管（EP）管中；取大鼠結(jié)扎及分離后術(shù)側(cè)的下肢股骨，用注射器抽吸磷酸緩沖鹽溶液（PBS）反復(fù)沖洗下肢股骨骨髓腔，過(guò)濾、離心及吹打后制成密度均勻的骨髓懸液，收集到EP管中，溫度調(diào)至－70 ℃凍存［9］。

1.2.5檢測(cè)指標(biāo)

1.2.5.1一般狀態(tài)

觀察SD大鼠的一般狀態(tài)，包括大鼠的精神狀態(tài)和毛色，大鼠的皮溫和活動(dòng)靈敏度等。

1.2.5.2大鼠血脂水平

分別于手術(shù)后第6周、12周時(shí)測(cè)量與記錄空白組和給藥組大鼠體質(zhì)量，用乙醇棉球擦拭固定好的大鼠尾部，將尾靜脈血抽取作為標(biāo)本，用生化分析儀檢測(cè)空白組和給藥組低密度脂蛋白（LDL）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）水平［9］。

1.2.5.3采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血、骨髓中CD34＋細(xì)胞比例

將每只大鼠各設(shè)置5個(gè)測(cè)定管，2個(gè)單染管及同型對(duì)照管，另加1個(gè)三染測(cè)定管，在抗凝管中加入紅細(xì)胞裂解液5 mL，放入37 ℃恒溫水溫箱中，避光孵育10 min，1 500 r/min離心5 min，棄上清，在抗凝管中加紅細(xì)胞裂解液5 mL，再次放入37 ℃恒溫水溫箱中避光孵育10 min，1 500 r/min離心5 min，棄上清后加PBS 350 μL，將每個(gè)樣品分裝到5個(gè)1.5 mL的離心管中，每管給予50 μL，按CD34檢測(cè)、 CD34對(duì)照及三色檢測(cè)順序標(biāo)明各管，將各管中加入所對(duì)應(yīng)的抗體，放入4 ℃恒溫水溫避光孵育20～25 min，各管加1 mL PBS緩沖液洗滌1次，再以1 500 r/min離心5 min，棄上清液，加入PBS緩沖液定容至500 μL，樣本按CD34檢測(cè)、CD34對(duì)照、三色檢測(cè)移至流式管中備用，最后將樣品重懸，按CD34檢測(cè)、CD34對(duì)照、三色檢測(cè)順序上機(jī)檢測(cè)，軟件分析各管雙陽(yáng)性細(xì)胞所占比例［12］。

1.2.5.4免疫熒光技術(shù)檢測(cè)下肢腓腸肌中SDF-1α、PI3K的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)

將樣本涂片后用多聚甲醛固定10 min；PBS溶液微振蕩洗滌5 min×2次，加0.4%裂解緩解液Triton-X100破膜5～10 min，然后用PBS微振蕩洗滌3 min×3次；再用1% PBS溶液封閉30 min至1 h；給予0.5% PBS溶液稀釋一抗，比例為1∶100；4 ℃過(guò)夜；冰箱取出后需37 ℃ 復(fù)溫45 min；或在室溫下2～3 h；或37 ℃ 1 h，用0.5% PBS溶液稀釋二抗，比例為1∶400；室溫30 min至1 h；孵育后洗滌5 min×3次；熒光染料DAPI原液為1 g/mL，將其稀釋為1∶1 000濃度，快速染色10 s，再用蒸餾水沖洗和用防淬滅的封片劑封片，在熒光顯微鏡高倍視野下觀察［9］。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 25.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，定量資料符合正態(tài)分布且方差齊時(shí)用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示；不符合正態(tài)分布時(shí)用秩和檢驗(yàn)，方差不齊時(shí)用校正t檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1大鼠一般狀態(tài)

空白組和假手術(shù)組大鼠毛色光澤，活動(dòng)靈敏，下肢溫度正常；模型組和給藥組大鼠毛色暗淡，活動(dòng)欠靈敏，下肢溫度降低。

2.2空白組與給藥組大鼠血脂水平變化

空白組的LDL、TC、TG在實(shí)驗(yàn)第6周與第12周比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。給藥組各時(shí)期TC及LDL與空白組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，LDL第12周較第6周上升（P＜0.05）。詳見(jiàn)表1。

2.3流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)給藥后外周血和骨髓中CD34＋細(xì)胞比例

與空白組比較，模型組外周血和骨髓中CD34＋陽(yáng)性細(xì)胞比例升高；與鹿茸多肽低劑量＋抑制劑LY294002組比較，鹿茸多肽低劑量組、鹿茸多肽中劑量組、鹿茸多肽中劑量＋抑制劑LY294002組、鹿茸多肽高劑量組、鹿茸多肽高劑量＋LY294002組外周血和骨髓中CD34＋陽(yáng)性細(xì)胞比例升高；鹿茸多肽中劑量組較鹿茸多肽中劑量＋抑制劑LY294002組外周血和骨髓中CD34＋陽(yáng)性細(xì)胞比例升高；鹿茸多肽高劑量組、鹿茸多肽高劑量＋抑制劑LY294002組較鹿茸多肽中劑量＋LY294002組外周血和骨髓中CD34＋陽(yáng)性細(xì)胞比例升高；鹿茸多肽高劑量組較鹿茸多肽高劑量＋抑制劑LY294002組外周血和骨髓中CD34＋陽(yáng)性細(xì)胞比例升高；與模型組比較，假手術(shù)組、給藥組外周血和骨髓中CD34＋陽(yáng)性細(xì)胞比例升高。詳見(jiàn)表2。

2.4免疫熒光法檢測(cè)給藥后腓腸肌中SDF-1α、PI3K陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)

與抑制劑LY294002組比較，模型組及給藥組抑制劑LY294002組SDF-1α、PI3K陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)增加（P＜0.05）；與模型組比較，給藥組、模型組SDF-1α、PI3K陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)增加（P＜0.05）；與鹿茸多肽低劑量組比較，鹿茸多肽中劑量組、鹿茸多肽中劑量＋抑制劑LY294002組、鹿茸多肽高劑量組、鹿茸多肽高劑量＋抑制劑LY294002組較鹿茸多肽低劑量組陽(yáng)SDF-1α、PI3K陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)增加（P＜0.05）。詳見(jiàn)表3及圖1、圖2。

3討論

PAD的病理特點(diǎn)往往表現(xiàn)為動(dòng)脈狹窄、閉塞、局部缺血，所以該病治療集中在缺血部位的血管再通和血管新生方面［9］。外科手術(shù)和介入難以從根本上解決術(shù)后再狹窄和術(shù)后血管遠(yuǎn)期通暢率。有文獻(xiàn)報(bào)道，在膝上股-腘動(dòng)脈人工血管移植后3年的通暢率為60%～80%，膝下3年通暢率僅20%～30%，并且外科治療在基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)推廣應(yīng)用困難［10］。血管新生的研究為臨床治療PAD提供了新的思路，是指通過(guò)藥物促進(jìn)缺血組織在原有微血管基礎(chǔ)上形成新毛細(xì)血管與原有血管網(wǎng)相交匯，通過(guò)加速和增加側(cè)支動(dòng)脈發(fā)育來(lái)治療血管狹窄、阻塞引起的缺血［11］。EPCs源于骨髓，具有調(diào)控缺血區(qū)定向歸巢的作用，成熟的內(nèi)皮細(xì)胞與血管新生有密切關(guān)系，直接參與血管新生。中藥干預(yù)在治療PAD方面有極大潛力。鹿茸能夠補(bǔ)腎、填精、益髓，其核心成分是鹿茸多肽，探究鹿茸多肽調(diào)控EPCs動(dòng)員、歸巢及促進(jìn)PAD缺血區(qū)血管新生的機(jī)制意義重大。

PAD病本在腎，病位在脈，補(bǔ)腎是關(guān)鍵。中醫(yī)學(xué)將PAD歸為“脈痹”“陰疽”“脫疽”范疇，其病本在腎，病位在脈。本病的發(fā)生多與腎虛血瘀有關(guān)。人到老年，隨著年齡的增長(zhǎng)，腎精漸虧，腎陽(yáng)漸衰，導(dǎo)致氣血虧虛，運(yùn)行無(wú)力，脈絡(luò)不通，筋脈痹阻，肢體缺乏血液的濡養(yǎng)，故出現(xiàn)發(fā)涼、麻木、間歇性跛行等。《景岳全書(shū)》：“血即精之屬也”，精髓是化生血液的基本物質(zhì)。清代王士雄《溫?zé)峤?jīng)緯》曰：“人體血生于脾，藏于肝，脈源于腎而主于心”，也就是說(shuō)其資始于腎，即脈形成的物質(zhì)基礎(chǔ)是腎精，所以脈絡(luò)生成受到“腎”的調(diào)控。鹿茸補(bǔ)腎生髓，鹿茸中含有大量的氨基酸、蛋白質(zhì)、糖類化合物、多肽，其中鹿茸多肽為其主要成分［12］。鹿茸多肽含有許多細(xì)胞生長(zhǎng)因子和內(nèi)生的抗氧化酶，如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GPX）和過(guò)氧化氫酶（CAT）等多種在疾病治療中起主要作用的生物活性成分［13-15］。

SDF-1α/CXCR4軸在EPCs 歸巢到缺血組織過(guò)程中起著重要作用?；|(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α（stromal cell derived factor-1，SDF-1α），屬于CXC型趨化因子，參與缺血誘導(dǎo)的EPCs動(dòng)員及介導(dǎo)EPCs在缺血組織中趨化和歸巢［16］。CXCR4作為SDF-1α的唯一受體，是一種具有7個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域的G蛋白偶聯(lián)受體［17］，研究證明，缺血組織SDF-1α表達(dá)增強(qiáng)，進(jìn)而導(dǎo)致外周血SDF-1α水平升高，組織缺血同時(shí)誘導(dǎo)骨髓SDF-1α表達(dá)下調(diào)，骨髓對(duì)EPCs的滯留作用減弱，外周血對(duì)EPCs的趨化作用增強(qiáng)，從而導(dǎo)致骨髓源性EPCs動(dòng)員到外周血，參與缺血組織新生血管的形成［18］。PI3K/AKT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路處于SDF-1α/CXCR4軸的下游，調(diào)控EPCs的遷移及歸巢，抑制受體CXCR4可顯著降低SDF-1α誘導(dǎo)的骨髓EPCs歸巢到下肢缺血區(qū)域的數(shù)量［19-20］。鹿茸多肽促進(jìn)外周血及骨髓EPCs缺血區(qū)血管新生。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)SDF-1α/CXCR4軸調(diào)控PI3K/AKT信號(hào)通路促進(jìn)EPCs的動(dòng)員及歸巢，促進(jìn)血管新生。因此，本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CD34＋陽(yáng)性細(xì)胞比例、SDF-1α、PI3K的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，結(jié)果顯示CD34＋細(xì)胞比例模型組高于空白組（P＜0.05）；其中鹿茸多肽低劑量組較鹿茸多肽低劑量＋抑制劑LY294002組陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)升高，鹿茸多肽中劑量組較鹿茸多肽中劑量＋抑制劑LY294002組陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)升高，鹿茸多肽高劑量組較鹿茸多肽高劑量＋抑制劑LY294002組陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)升高（P＜0.05）；給藥組SDF-1α、PI3K的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)數(shù)高于模型組及抑制劑組（P＜0.05），鹿茸多肽中劑量組高于鹿茸多肽低劑量組（P＜0.05），表明大鼠下肢動(dòng)脈硬化閉塞缺血激活了SDF-1α/CXCR4軸從而調(diào)控PI3K/AKT信號(hào)通路，在鹿茸多肽干預(yù)下促進(jìn)了EPCs的增殖及分化，影響下肢動(dòng)脈硬化閉塞癥大鼠，促進(jìn)PAD大鼠血管新生［9］。

綜上所述，鹿茸多肽可以促進(jìn)PAD大鼠血管新生，通過(guò)SDF-1α/CXCR4軸調(diào)控PI3K/AKT信號(hào)通路促進(jìn)了EPCs的增殖及分化，鹿茸多肽提高外周血及骨髓CD34＋細(xì)胞比例，給藥后提高腓腸肌中SDF-1α、PI3K陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)比例。

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（收稿日期：2023-11-27）

（本文編輯王雅潔）