PD1 及PDL1 在乳腺癌中的表達(dá)變化及其與患者臨床病理參數(shù)和預(yù)后的關(guān)系

成蘭云， 嚴(yán)曉苓， 邢晨陽(yáng)， 冀 楠， 郭高敏， 陳文換

（涿州市醫(yī)院，河北 涿州 072750）

程序性死亡受體（programmed death-1，PD1）和細(xì)胞程序性死亡配體（programmed cell death 1 ligand 1，PDL1）在T 淋巴細(xì)胞壓迫和免疫反應(yīng)的觸發(fā)上具有決定性作用。PD1 屬于CD28 類別的一部分，這種跨膜蛋白的構(gòu)造主要包含288 個(gè)氨基酸殘基，且其分子質(zhì)量介于50～55 kD。PD1 的表現(xiàn)在參與抗原識(shí)別的免疫系統(tǒng)里顯著增強(qiáng)，其被認(rèn)定為衡量免疫系統(tǒng)活性的重要參數(shù)。PD1 由2 個(gè)配位元素構(gòu)成，分別為PDL1 和PDL2，兩者均屬于B7 家族的跨膜元素。干擾素γ（interferon gamma，IFN-γ）主導(dǎo)PDL1 的表達(dá)，這種表達(dá)在造血細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等的表面分布十分廣泛。PDL2 對(duì)IL-4 的反應(yīng)比其他細(xì)胞更為敏感，在抗原傳遞細(xì)胞和Th2 型細(xì)胞中有所體現(xiàn)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2012 年1 月—2021 年10 月涿州市醫(yī)院外科手術(shù)的患者信息，病理科保存的100 例確診的浸潤(rùn)性乳腺癌的女性患者。100 例患者的年齡為25～78 歲，平均年齡（55.29±17.16）。其中＜45 歲的患者有46 例，≥45 歲54 例；絕經(jīng)者45 例，未絕經(jīng)者55 例；臨床分期：Ⅰ和Ⅱ期65 例，Ⅲ和Ⅴ期35 例；組織學(xué)分級(jí)：Ⅰ級(jí)26 例、Ⅱ級(jí)33 例、Ⅲ級(jí)41 例；腫瘤部位：外上象限74 例，其他部位26 例（外下象限13 例、內(nèi)下象限4例、內(nèi)上象限5例、中央部4例）；腫瘤直徑：＜2 cm 47 例，≥2 cm 53 例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移54 例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移46 例。所有的乳腺組織樣本均為離體標(biāo)本。患者手術(shù)前均未接受任何與乳腺癌相關(guān)的治療，包括新輔助化療、內(nèi)分泌治療、靶向治療、放療等。本研究經(jīng)涿州市醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者或其家屬知情同意。

1.2 PD1及PDL1的檢測(cè)方法

采用免疫組織化學(xué)技術(shù)，對(duì)手術(shù)切除的乳腺癌組織和與其相鄰5 cm 或更遠(yuǎn)的正常乳腺組織中PD1 及PDL1 的表達(dá)進(jìn)行評(píng)估。2 位資深病理醫(yī)師采用雙盲法對(duì)染色結(jié)果評(píng)分。PD1/PDL1 以細(xì)胞質(zhì)和/或細(xì)胞膜出現(xiàn)棕黃至棕褐色為陽(yáng)性。PDL1以陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≥1%判為陽(yáng)性，＜1%判為陰性。PD1 表達(dá)于間質(zhì)淋巴細(xì)胞，以陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≥5%判為陽(yáng)性，＜5%判為陰性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用SPSS 26.0 軟件分析檢測(cè)數(shù)據(jù)，分別對(duì)2 個(gè)獨(dú)立樣本行t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)，對(duì)比分析乳腺癌部位及其周圍正常組織內(nèi)PD1 和PDL1 的表達(dá)情況；分析PD1 和PDL1 與各項(xiàng)臨床病理指標(biāo)之間的相關(guān)性，分析PD1 和PDL1 對(duì)預(yù)后的影響，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 具體表達(dá)情況

PD1 和PDL1 在乳腺癌組織中的表達(dá)陽(yáng)性率分別為79.57%、79.57%，這2 個(gè)數(shù)值均超過(guò)PD1 表達(dá)于間質(zhì)淋巴細(xì)胞的48.39%和22.58%；PD1的表達(dá)陰性率則是20.43%、20.43%，均不如PD1 表達(dá)于間質(zhì)淋巴細(xì)胞的51.61%和77.42%。上述數(shù)據(jù)的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。乳腺癌組織PDL1 和間質(zhì)淋巴細(xì)胞PD1的表達(dá)情況見(jiàn)表1。

表1 乳腺癌組織和PD1表達(dá)于間質(zhì)淋巴細(xì)胞PD1及PDL1表達(dá)情況

2.2 臨床病理參數(shù)的相關(guān)性研究

Ⅱ級(jí)和Ⅲ級(jí)乳腺癌組織PD1陽(yáng)性率超過(guò)Ⅰ級(jí)，同時(shí)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的PD1陽(yáng)性率也超過(guò)未有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。由于受性別、絕經(jīng)程度、腫瘤尺寸、腫瘤位置、病程長(zhǎng)短等因素影響，乳腺癌的PD1陽(yáng)性率在數(shù)據(jù)分析中未獲得明確的結(jié)果（P＞0.05）。PD1在乳腺癌組織中的表達(dá)及其與臨床病理參數(shù)的相關(guān)性研究見(jiàn)表2。

表2 乳腺癌組織PD1表達(dá)情況及其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系分析

PDL1 的陽(yáng)性表達(dá)在乳腺癌的Ⅲ～Ⅴ階段的病人中明顯增加，而在組織學(xué)的Ⅱ級(jí)和Ⅲ級(jí)病人中，PDL1 的陽(yáng)性表達(dá)比Ⅰ級(jí)病人更為顯著，在統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有顯著差異（P＜0.05）。由于性別、絕經(jīng)狀態(tài)、腫瘤大小、病灶位置及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的不同，對(duì)乳腺癌PDL1 陽(yáng)性反應(yīng)率的差異在數(shù)據(jù)分析中并無(wú)明顯差異（P＞0.05）。見(jiàn)表3。

表3 乳腺癌組織PDLI表達(dá)情況及其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系分析

2.3 預(yù)后關(guān)系分析

PD1 和PDL1 在乳腺癌組織中表達(dá)陽(yáng)性的病人，其生存期均短于陰性病人，在統(tǒng)計(jì)上具有顯著差異（P＜0.05）。過(guò)去3 年中，陽(yáng)性患者的存活率普遍低于陰性患者，在統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有重要意義（P＜0.05）。乳腺癌組織PD1及PDL1表達(dá)情況及其與預(yù)后的關(guān)系分析見(jiàn)表4。

表4 乳腺癌組織PD1及PDL1表達(dá)情況及其與預(yù)后的關(guān)系分析

3 討論

有研究表明，PDL2 的相互作用力量遠(yuǎn)勝PDL1，但PDL1 的調(diào)控作用則更為突出［1］。PD1 在正常狀態(tài)下，一旦與配體結(jié)合，就有可能阻止自身的免疫反應(yīng)，進(jìn)而避免自身免疫性疾病的產(chǎn)生。盡管如此，PDL1 的表達(dá)量在許多癌癥細(xì)胞內(nèi)有所增加，這可能是由于其與淋巴細(xì)胞表面的PD1 產(chǎn)生交互，降低人體對(duì)癌癥細(xì)胞的免疫響應(yīng)，促使癌癥細(xì)胞的免疫逃脫，最終導(dǎo)致癌癥的形成和擴(kuò)散。邱志敏等［2］調(diào)查結(jié)果顯示，在乳腺癌組織里，PD1 和PDL1 的陽(yáng)性表現(xiàn)程度均超過(guò)其周圍的健康組織。深入分析可知，PD1 和PDL1 的正常表達(dá)水平與乳腺癌的腫瘤分期、組織分級(jí)、淋巴結(jié)的擴(kuò)散情況等有密切聯(lián)系。PD1/PDL1 是一種有效的浸潤(rùn)性乳腺癌治療手段，采用該方法進(jìn)行特定的治療，能夠避免腫瘤的再次發(fā)生，提升病人的生活品質(zhì)。

一項(xiàng)關(guān)于PD1/PDL1 在乳腺癌中的分布及其臨床價(jià)值的調(diào)查采用免疫組化法，分析39名乳腺癌病人及39 名非乳腺癌病人的乳腺癌組織樣本［3］。研究結(jié)果顯示，乳腺癌組織樣本中PD1 蛋白的陽(yáng)性分布占比較高，達(dá)到28.21%（11/39），這一數(shù)值超過(guò)非三陰性乳腺癌組織的10.26%（4/39），在統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有顯著差異（P=0.044）。在乳腺癌組織中，PD1蛋白的陽(yáng)性表現(xiàn)占比高達(dá)41.03%（16/39），這個(gè)數(shù)值超過(guò)非三陰性乳腺癌組織的15.38%（6/39），在統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有明顯差異（P=0.025）。對(duì)比乳腺癌病人的年紀(jì)、更替情況、組織劃分、腫瘤大小、淋巴結(jié)擴(kuò)散情形、腫瘤侵犯神經(jīng)情形及血管內(nèi)的癌癥栓塞情形，可知在乳腺癌患者的組織中，PD1 與PDL1 蛋白的陽(yáng)性表達(dá)水平無(wú)明顯差異（P＞0.05）。依據(jù)前述研究結(jié)果，可以斷定PD1 和PDL1 的表達(dá)水平對(duì)乳腺癌患者的病程發(fā)展沒(méi)有影響。但乳腺癌組織中PD1和PDL1 的陽(yáng)性表達(dá)比例明顯高于非乳腺癌，提示PD1 和PDL1 可能是乳腺癌的一部分。因此，檢測(cè)PD1 和PDL1 的表達(dá)，對(duì)乳腺癌的早期診斷具有重要作用。另外，切斷PD1 和PDL1 的信號(hào)傳導(dǎo)途徑，也可能是乳腺癌的潛在治療目標(biāo)［4］。

這項(xiàng)研究的發(fā)現(xiàn)揭示了PD1 和PDL1 在乳腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)比在PD1 表達(dá)于間質(zhì)淋巴細(xì)胞中更為顯著，陰性表達(dá)則相對(duì)較少。PD1 表達(dá)陽(yáng)性率在組織學(xué)分期Ⅰ的患者中，相較于分期Ⅱ和Ⅲ的患者，其有顯著降低。但對(duì)于存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者，其PD1 表達(dá)陽(yáng)性率大大高于未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者。在臨床分期Ⅰ～Ⅱ期的病人中，其乳腺癌組織PDL1 表達(dá)陽(yáng)性率相對(duì)較低。同樣，對(duì)于組織學(xué)分期為Ⅰ的病人，其PDL1 表達(dá)陽(yáng)性率較分期Ⅱ和Ⅲ的病人要少，這表明PD1 和PDL1 可能是乳腺癌的一部分。這項(xiàng)研究的結(jié)果還揭示了，乳腺癌組織PD1 和PDL1 表達(dá)陽(yáng)性的患者的生存期均短于陰性患者，3 年的生存率也低于陰性的患者，這表明PD1 和PDL1 表達(dá)陽(yáng)性的乳腺癌患者的預(yù)后情況更為糟糕。PD1 和PDL1 在侵襲性乳腺癌的治療中具有重要作用，通過(guò)這一特定的治療靶點(diǎn)，可以有效地減緩或防止腫瘤的復(fù)發(fā)，進(jìn)而提升患者的生活質(zhì)量［5］。

綜上所述，PD1 和PDL1 的陽(yáng)性表現(xiàn)在乳腺癌中較為顯著，且其與患者的臨床病理指標(biāo)和預(yù)后具有緊密聯(lián)系，因此PD1 和PDL1 適合被應(yīng)用于乳腺癌的實(shí)際治療。