不同烤煙品種間碳氮代謝關(guān)鍵酶及其產(chǎn)物的差異

黃人杰 王嬌 龍尚沅 熊晶 郜軍藝 高煥曄

摘要：為探究不同品種間碳、氮代謝關(guān)鍵酶及其主要產(chǎn)物間的差異和內(nèi)在聯(lián)系，尋找碳氮代謝適宜的后備烤煙品種，進(jìn)行4個(gè)品種（云煙87、云煙105、云煙116、云煙121）的田間試驗(yàn)，觀測其團(tuán)棵期、旺長期、現(xiàn)蕾期總糖、還原糖、總氮、煙堿含量及代謝關(guān)鍵酶［蔗糖合成酶（SS）、蔗糖磷酸合成酶（SPS）、硝酸還原酶（NR）、亞硝酸還原酶（NiR）、谷氨酰胺合成酶（GS）］活性。結(jié)果表明，碳代謝方面，云煙87總糖含量在旺長期達(dá)到最高；云煙105團(tuán)棵期還原糖含量最高，旺長期SPS活性最高，云煙116現(xiàn)蕾期總糖含量最高，SS活性最高；云煙121現(xiàn)蕾期還原糖含量最高，團(tuán)棵期和旺長期SS活性最高，現(xiàn)蕾期SPS活性最高。氮代謝方面，云煙87旺長期和現(xiàn)蕾期總氮含量最高，云煙105團(tuán)棵期總氮含量最高，現(xiàn)蕾期煙堿含量最高，云煙116現(xiàn)蕾期總氮含量最高，團(tuán)棵期NR和NiR活性最高，NiR活性旺長期最高，云煙121整個(gè)生長期GS活性均處較高水平。相關(guān)性分析結(jié)果表明，碳代謝方面，云煙105和云煙116的SS活性與總糖含量呈極顯著相關(guān)，云煙87則是SPS活性與總糖含量呈極顯著相關(guān)。氮代謝方面，除云煙87和云煙121外，其他品種NR和GS活性與煙堿含量均存在顯著相關(guān)性，云煙121 NiR活性與總氮和煙堿含量存在顯著或極顯著相關(guān)性。綜合以上因素，云煙116生長前期氮代謝旺盛，生長后期碳代謝旺盛，相比起云煙87有更優(yōu)質(zhì)的碳氮代謝機(jī)制，可作為威寧烤煙栽培的后備品種。

關(guān)鍵詞：烤煙；碳氮代謝；酶活性；煙葉品質(zhì)；相關(guān)性分析

中圖分類號：S572.04；S572.01? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號：1002-1302（2024）05-0102-06

碳氮代謝是煙株生長過程中的基礎(chǔ)代謝，其代謝強(qiáng)度影響著烤煙大田生育期的物質(zhì)合成、轉(zhuǎn)化和分解［1-2］。碳代謝為氮代謝提供能量和支架，氮代謝為碳代謝提供關(guān)鍵的酶和蛋白質(zhì)［3］?？緹熖即x過程中，蔗糖合成酶（SS）和蔗糖磷酸合成酶（SPS）直接影響蔗糖的生物合成。SS催化尿苷二磷酸葡萄糖（UDPG）與果糖合成蔗糖，屬于可逆反應(yīng)，SS通過這種可逆反應(yīng)維持植物體內(nèi)蔗糖含量的平衡。SS和SPS可以調(diào)控植株體內(nèi)碳同化物的分配及流向［4-5］。在氮代謝過程中，硝酸還原酶（NR）起著決定性的作用，是植物氮代謝的限速酶［6］。亞硝酸還原酶能將亞硝酸鹽降解為銨，使氮素能夠以銨的形式參與蛋白質(zhì)的合成［7］。谷氨酰胺合成酶（GS）及其同工酶活性在植物氮素轉(zhuǎn)運(yùn)、分配中均有重要作用［8］。環(huán)境中的NO-3分別在硝酸還原酶和亞硝酸還原酶的作用下轉(zhuǎn)化為NH+4，再經(jīng)過谷氨酰胺合成酶的作用，合成L-谷氨酰胺后，進(jìn)一步合成氨基酸和蛋白質(zhì)等［9］。

不同烤煙品種間碳氮代謝存在一定差異［10-11］。張小全等研究發(fā)現(xiàn)，烤煙品種的衰老特性與碳氮代謝有關(guān)，中部葉衰老快的煙株其淀粉含量下降快，氮素轉(zhuǎn)移量大，含氮化合物快速降解［12］。楊志曉等研究發(fā)現(xiàn)，品種間致香物質(zhì)總量的差異，與烤煙移栽后的硝酸還原酶與蔗糖轉(zhuǎn)化酶比例（NR/INV）相關(guān)［13］。陳波等研究發(fā)現(xiàn)，由于不同品種間次生代謝能力不同，碳氮代謝的強(qiáng)弱會存在差異［14］。徐志強(qiáng)等研究表明，改變烤煙碳氮代謝關(guān)鍵酶的活性會影響烤煙碳氮代謝次生代謝產(chǎn)物的含量，有利于煙葉品質(zhì)的改善［15-17］。因此，研究烤煙碳氮代謝差異，有助于調(diào)控烤后煙葉化學(xué)平衡，對提升煙葉品質(zhì)有重要意義。本研究對比4個(gè)烤煙品種間碳氮代謝關(guān)鍵酶的活性及代謝產(chǎn)物的差異，以期尋找不同烤煙品種間碳氮代謝與產(chǎn)物之間的內(nèi)在聯(lián)系，同時(shí)為改進(jìn)幾個(gè)品種的田間管理措施提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)

試驗(yàn)于2022年在貴州省威寧縣黑石頭鎮(zhèn)煙草科技園（26.754 725°N，103.995 142°E）進(jìn)行，試驗(yàn)煙田地勢平坦，排灌狀況良好，上一季無病蟲害發(fā)生。土壤類型為黃壤，pH值為5.88，耕層有機(jī)質(zhì)含量為11.32 g/kg，堿解氮含量為89.43 mg/kg，速效磷含量為11.08 mg/kg，速效鉀含量為241.37 mg/kg。試驗(yàn)地塊遠(yuǎn)離公路。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

設(shè)置4個(gè)品種的對比試驗(yàn)，品種分別為云煙87、云煙105、云煙116、云煙121，詳情見表1。田間試驗(yàn)采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，每個(gè)品種重復(fù)3次，每個(gè)小區(qū)種植4行，行距1.1 m，每行20株，株距60 cm，小區(qū)四周設(shè)置保護(hù)行?；?∶追肥=7 ∶3，施純氮7 kg/667 m2，其余栽培管理技術(shù)及調(diào)制工藝均按當(dāng)?shù)厣a(chǎn)技術(shù)方案執(zhí)行。

1.3 測定項(xiàng)目及方法

1.3.1 烤煙碳氮代謝主要產(chǎn)物含量測定

烤煙長至團(tuán)棵期、旺長期、現(xiàn)蕾期時(shí)，各處理取長勢均勻一致有代表性的煙株3株，每株取同一葉位葉片共3張，用烘箱105? ℃殺青30 min， 溫度調(diào)整為65 ℃烘至恒重，去除煙葉主脈充分研磨。用于測量烤煙碳代謝主要產(chǎn)物（總糖、還原糖）和氮代謝主要產(chǎn)物（總氮、煙堿）的含量。測定方法參照王瑞新的《煙草化學(xué)》［18］。

1.3.2 烤煙碳氮代謝酶活性

烤煙長至團(tuán)棵期、旺長期、現(xiàn)蕾期時(shí)，取代表性煙株同一葉位葉片，相同葉位每株僅取樣1次，用于煙葉碳代謝關(guān)鍵酶（蔗糖合成酶、蔗糖磷酸合成酶）和氮代謝關(guān)鍵酶［硝酸還原酶、亞硝酸還原酶（NiR）、谷氨酰胺合成酶］活性的測定。測定方法：采用深圳子科生物科技有限公司提供的試劑盒，顯色后用酶標(biāo)儀測定吸光度，計(jì)算樣品的酶活性。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用Microsoft Excel 2010對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，采用SPSS 23數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析，采用Duncans新復(fù)極差法進(jìn)行處理間的差異顯著性比較，采用Pearson法對數(shù)據(jù)進(jìn)行簡單相關(guān)分析。使用Origin 2021軟件繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同品種間烤煙碳氮代謝主要產(chǎn)物差異

碳氮代謝是貫穿烤煙整個(gè)生育時(shí)期的重要代謝，烤煙碳氮代謝的過程包括含碳化合物、含氮化合物的吸收和轉(zhuǎn)化。一般認(rèn)為，在打頂前烤煙以氮的吸收轉(zhuǎn)化為主，打頂后烤煙以碳的吸收轉(zhuǎn)化為主。由圖1可見，云煙87總糖和總氮含量在旺長期達(dá)到最大，之后又有所降低；還原糖和煙堿含量隨生育進(jìn)程整體逐漸增加。說明云煙87在烤煙生長過程中，前期以物質(zhì)積累為主，后期則以物質(zhì)代謝合成為主。云煙105在現(xiàn)蕾期總糖和煙堿含量有較大的增長，還原糖和總氮含量反而隨生育進(jìn)程推進(jìn)逐漸降低，說明云煙105在烤煙生長前期含氮化合物合成旺盛，但轉(zhuǎn)化能力略有不足，含碳化合物在生長后期合成旺盛，同樣轉(zhuǎn)化能力略有不足。云煙116的總糖和還原糖含量均隨生育進(jìn)程增加，總氮含量隨烤煙生育進(jìn)程整體逐漸降低，煙堿含量逐漸增加，說明云煙116在生長前期含氮化合物合成旺盛，但轉(zhuǎn)化能力稍弱，在生長后期，碳代謝的物質(zhì)合成和轉(zhuǎn)化都十分旺盛。云煙121總糖、還原糖和煙堿含量整體隨生育進(jìn)程逐漸增加，總氮含量隨生育進(jìn)程逐漸降低，煙堿含量在團(tuán)棵期和旺長期均與表現(xiàn)最優(yōu)的處理呈顯著差異，含量最低，說明云煙121在生長前期氮素轉(zhuǎn)化較少，這可能會影響云煙121的香吃味。

2.2 不同品種間烤煙碳氮代謝關(guān)鍵酶活性差異

碳氮代謝關(guān)鍵酶活性是評價(jià)烤煙田間碳氮代謝程度的重要指標(biāo)［19-21］。張玲等比較了不同品種間碳氮代謝關(guān)鍵酶的活性和品質(zhì)指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)烤煙前期以氮代謝為主，之后逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)橐蕴即x為主，是生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)煙葉的重要基礎(chǔ)［22］。

由圖2可見，4個(gè)品種中云煙87在團(tuán)棵期NiR活性最低，旺長期和現(xiàn)蕾期同樣處于較低水平，說明云煙87在烤煙生長前期氮代謝物質(zhì)轉(zhuǎn)化能力較弱，后期有所加強(qiáng)，整體氮素轉(zhuǎn)化在所有品種中較弱；現(xiàn)蕾期SPS活性最低，說明在生長后期碳代謝物質(zhì)轉(zhuǎn)化能力較弱。云煙105在團(tuán)棵期SS活性最低，說明云煙105在生長前期蔗糖合成較少，碳代謝物質(zhì)積累少。云煙105在現(xiàn)蕾期NR、NiR、SS活性最低，說明在生長后期云煙105碳氮代謝水平均較低。云煙116在團(tuán)棵期NR、NiR活性最高，GS活性最低，SS活性較高，SPS活性最低，說明云煙116在生長前期氮素積累快，轉(zhuǎn)化能力一般，蔗糖合成較多而蔗糖磷酸化程度較低，碳氮代謝物質(zhì)積累較多而轉(zhuǎn)化稍有不足；在現(xiàn)蕾期，GS活性最低，SS活性最高，說明云煙116在生長后期氮代謝較低，而蔗糖合成較多，這更符合烤煙生長前期以氮代謝為主，生長后期以碳代謝為主的生長規(guī)律。相較于其他品種，云煙121團(tuán)棵期NR活性最低，GS活性最高，SS和SPS活性同樣最高，說明在生長前期，云煙121碳氮代謝十分旺盛，但氮素轉(zhuǎn)化不足。在現(xiàn)蕾期，云煙121的GS活性最高，SS活性較低，SPS活性最高，相較于其他品種，云煙121在現(xiàn)蕾期氮代謝仍十分旺盛，蔗糖合成不足，蔗糖磷酸化較多。這可能是云煙121葉片糖含量低于其他品種的主要原因。

綜上，云煙116不同時(shí)期酶活性最符合烤煙生長規(guī)律，其次是云煙87，各種酶活性均處于居中水平。云煙105碳代謝水平在4個(gè)品種間最低，云煙121碳氮代謝旺盛，但不符合優(yōu)質(zhì)烤煙物質(zhì)積累規(guī)律。

2.3 不同品種間烤煙碳氮代謝產(chǎn)物與碳氮代謝關(guān)鍵酶活性相關(guān)性分析

由表2可見，不同品種烤煙間酶活性與田間碳氮代謝主要產(chǎn)物含量存在一定的相關(guān)性。云煙87的總糖含量與SS活性呈負(fù)相關(guān)，與SPS活性呈極顯著正相關(guān)；還原糖含量與SS、SPS活性均呈負(fù)相關(guān)。含氮化合物中，總氮含量與NR、NiR活性呈負(fù)相關(guān)，與GS活性呈正相關(guān)；煙堿含量與NR、NiR、GS活性均呈負(fù)相關(guān)，其中與GS活性呈顯著負(fù)相關(guān)。

云煙105的總糖含量與SS、SPS活性均呈負(fù)相關(guān)，其中與SS活性呈極顯著負(fù)相關(guān)；還原糖含量與SS活性呈正相關(guān)，與SPS活性呈負(fù)相關(guān)。含氮化合物中，總氮含量與NR、NiR、GS活性均呈正相關(guān)；煙堿含量與NR、NiR、GS活性均呈負(fù)相關(guān)，其中與NR、GS活性呈極顯著負(fù)相關(guān)。

云煙116的總糖含量與SS活性呈極顯著負(fù)相關(guān)，與SPS活性呈正相關(guān)；還原糖含量與SS活性呈負(fù)相關(guān)，與SPS活性呈正相關(guān)。含氮化合物中，總氮含量與NR、NiR、GS活性均呈正相關(guān)；煙堿含量與NR、GS活性呈顯著負(fù)相關(guān)，與NiR活性呈正相關(guān)。

云煙121的總糖含量與SS活性呈負(fù)相關(guān)，與SPS活性呈正相關(guān)；還原糖含量與SS活性呈負(fù)相關(guān)，與SPS活性呈正相關(guān)。含氮化合物中，總氮含量與NR、NiR、GS活性均呈負(fù)相關(guān)，其中與NiR活性呈極顯著負(fù)相關(guān)；煙堿含量與NR、NiR、GS活性均呈負(fù)相關(guān)，其中與NiR活性呈顯著負(fù)相關(guān)。

3 討論與結(jié)論

3.1 不同品種間烤煙碳氮代謝主要產(chǎn)物

烤煙的生長發(fā)育離不開含碳化合物的積累和代謝?？緹熃?jīng)過光合作用，將無機(jī)碳同化為有機(jī)碳的同時(shí)放出氧氣，又對光合產(chǎn)物進(jìn)行了再分配［23］。潘冬等研究發(fā)現(xiàn)，糖是烤煙碳代謝的重要紐帶，田間煙葉糖含量的多少可以直接表征烤煙碳代謝的程度［24］。在本研究中，云煙87的碳代謝高峰期較早，旺長期開始碳代謝即處于較高水平，這導(dǎo)致現(xiàn)蕾期云煙87碳代謝水平在4個(gè)品種中最低。其余品種則在現(xiàn)蕾后達(dá)到碳代謝高峰。其中，云煙105和云煙116在旺長期和現(xiàn)蕾期總糖含量變化顯著，說明其碳代謝的轉(zhuǎn)變較迅速。

氮的含量和種類對烤煙生理生化十分重要。硝態(tài)氮和銨態(tài)氮均可以被烤煙吸收利用，相比起銨態(tài)氮，硝態(tài)氮在代謝過程中因其所含的氮呈高度氧化狀態(tài)，還需經(jīng)過代謝性還原才能被煙株利用［25-26］。梁喜歡的研究表明，低氮脅迫下，烤煙凈光合速率、氣孔導(dǎo)度、胞間CO2濃度以及蒸騰速率均有一定的下降，根系中NR、NiR活性也相應(yīng)降低［27］。而李朝陽則發(fā)現(xiàn)，烤煙在打頂后，煙堿含量迅速增加，說明在打頂前，烤煙的氮代謝以氮的積累為主，且氮的積累量對烤煙光合作用有一定影響，而打頂后則以煙堿的轉(zhuǎn)化為主［28］。在本研究中，各品種在現(xiàn)蕾期均發(fā)生了煙堿的快速積累，其中云煙87煙堿轉(zhuǎn)化量最低，而云煙105轉(zhuǎn)化率最高，這可能是在現(xiàn)蕾時(shí)云煙87還未達(dá)到氮代謝轉(zhuǎn)化的高峰期。

3.2 不同品種間烤煙碳氮代謝關(guān)鍵酶活性差異

碳氮代謝的過程離不開各種酶的參與。在碳代謝過程中，SS和SPS活性直接影響烤煙碳代謝的水平，其中SPS是調(diào)控烤煙蔗糖合成的關(guān)鍵酶，其活性直接影響光合產(chǎn)物的分配。SS是一種可逆酶，不僅可以作用于蔗糖合成，還可以催化蔗糖分解，普遍認(rèn)為它主要影響蔗糖的分解，且能為細(xì)胞壁提供合成底物并合成淀粉［29］。白應(yīng)香的研究表明，云煙87的SS活性在移栽后40 d達(dá)到最高，而后呈下降趨勢［30］。在本試驗(yàn)中，各品種SS活性均在團(tuán)棵期達(dá)到最大值，而后呈下降趨勢，SPS活性則在旺長期達(dá)到最大，這與白應(yīng)香的研究結(jié)果［30］相似。

而在氮代謝過程中，NR和NiR可以通過參與硝酸鹽和亞硝酸鹽還原，實(shí)現(xiàn)對氮代謝的調(diào)節(jié)，其活性高低可以直接反映出土壤中氮素的利用情況，進(jìn)而影響植物的產(chǎn)量和品質(zhì)。GS則在植物的氮素轉(zhuǎn)運(yùn)和分配中發(fā)揮著重要作用，GS1的功能是在葉片衰老過程中轉(zhuǎn)移和再利用氮源，而GS2主要是同化光呼吸和硝酸還原產(chǎn)生的氨［31］。徐志強(qiáng)等研究表明，在打頂110 d后，不同烤煙品種的NR活性存在顯著差異，這可能是不同烤煙品種煙堿積累有所差異的原因之一［15］。本研究中，在氮代謝旺盛的團(tuán)棵期，各品種NR和NiR活性已產(chǎn)生差異，其中云煙116在團(tuán)棵期和現(xiàn)蕾期的NR和NiR活性均處于較高水平，而云煙87在團(tuán)棵期和旺長期的NR活性同樣較高，云煙121在所有時(shí)期均有最高的GS活性，相較于其他品種，云煙116和云煙87表現(xiàn)更加優(yōu)秀。

3.3 不同品種間烤煙碳氮代謝產(chǎn)物與酶活性的相關(guān)性分析

在烤煙的生理生化過程中，酶與底物結(jié)合，從而生成對應(yīng)的產(chǎn)物［32］。酶的活性越高，則生成對應(yīng)產(chǎn)物的速度越快，產(chǎn)物合成量越多。相關(guān)性分析結(jié)果表明，不同品種間碳氮代謝關(guān)鍵酶活性和產(chǎn)物之間的相關(guān)性有所不同，碳代謝方面，云煙105和云煙116的SS活性與總糖含量呈極顯著相關(guān)，云煙87則是SPS活性與總糖含量呈極顯著相關(guān)。氮代謝方面，云煙121的NiR活性與總氮和煙堿含量存在顯著或極顯著相關(guān)性，除云煙87和云煙121外，其他品種NR和GS活性與煙堿含量均存在顯著相關(guān)性。說明在不同品種之間，不同酶對烤煙碳氮代謝的影響有所差異，這可能是烤煙品種間碳氮代謝關(guān)鍵酶的基因表達(dá)量不同，導(dǎo)致碳氮代謝酶活性產(chǎn)生差異。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，烤煙品種不同，其代謝強(qiáng)度、代謝高峰期、代謝產(chǎn)物比例和酶對代謝產(chǎn)物的影響程度均會有所差異。在本試驗(yàn)中，相較于對照品種云煙87，云煙116生長前期氮代謝旺盛，生長后期碳代謝旺盛；云煙105碳代謝水平低，各時(shí)期含碳化合物積累不足；云煙121碳、氮代謝旺盛，但代謝高峰期與烤煙物質(zhì)積累時(shí)期相悖。綜上，云煙116可作為威寧煙區(qū)的后備品種，其他品種則有待繼續(xù)研究。

參考文獻(xiàn)：

［1］黃 佳，李 信，王子一，等. 種植密度和施氮量對烤煙碳氮代謝關(guān)鍵酶及品質(zhì)的影響［J］. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2023，51（9）：82-88.

［2］管慶林，樸晟源，張思唯，等. 中微量元素配施對雪茄煙葉光合特性、碳氮代謝及產(chǎn)量和質(zhì)量的影響［J］. 作物雜志，2023（5）：187-196.

［3］李國明. 上部煙葉光合及碳氮代謝機(jī)理與調(diào)控措施研究［D］. 貴陽：貴州大學(xué)，2022：3-5.

［4］潘飛龍. 烤煙成熟期和調(diào)制過程中碳代謝酶活性及基因表達(dá)的研究［D］. 鄭州：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2020：3-4.

［5］張曉遠(yuǎn)，劉國順，畢慶文，等. 烤煙成熟過程中部分酶活性及碳水化合物變化規(guī)律研究［J］. 中國煙草學(xué)報(bào)，2010，16（1）：45-48.

［6］曾孝敏. 施氮量對烤煙碳氮代謝過程中關(guān)鍵酶及代謝產(chǎn)物的影響［D］. 雅安：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2017：5-10.

［7］Kyaing S M，顧立江，程紅梅. 植物中硝酸還原酶和亞硝酸還原酶的作用［J］. 生物技術(shù)進(jìn)展，2011，1（3）：159-164.

［8］周健飛，武云杰，薛 剛，等. 烤煙成熟期煙葉GS同工酶活性與氮素運(yùn)轉(zhuǎn)的關(guān)系［J］. 作物學(xué)報(bào)，2019，45（1）：111-117.

［9］馮新維，黃 鶯，陳 東，等. 烤煙氮代謝研究進(jìn)展［J/OL］. 分子植物育種：1-26［2023-01-19］. http：//kns.cnki.net/kcms/detail/46.1068.S.20210723.1202.002.html.

［10］陳永明，王 行，趙偉才，等. 不同烤煙品種成熟期碳氮代謝關(guān)鍵酶活性的變化［J］. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2014，26（8）：43-45.

［11］拓陽陽，趙銘欽，張廣富，等. 不同烤煙品種葉片碳氮代謝及相關(guān)產(chǎn)物差異性［J］. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2011，20（4）：82-86.

［12］張小全，蔡文龍，闞洪贏，等. 不同品種烤煙衰老期碳氮代謝及相關(guān)基因表達(dá)的差異分析［J］. 中國煙草學(xué)報(bào)，2020，26（6）：66-73.

［13］楊志曉，王 軼，王志紅，等. 不同生態(tài)環(huán)境烤煙品種碳氮代謝關(guān)鍵酶活性及其與致香物質(zhì)的關(guān)系［J］. 三峽生態(tài)環(huán)境監(jiān)測，2016，1（3）：32-39.

［14］陳 波，潘文杰，陳 偉，等. 不同烤煙品種碳氮及其次生代謝相關(guān)酶的動(dòng)態(tài)變化研究［J］. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2013，29（34）：66-70.

［15］徐志強(qiáng)，劉化冰，張曉兵，等. 不同烤煙品種成熟期氮代謝及次生代謝差異研究［J］. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2022，38（36）：42-47.

［16］闞洪贏. 不同烤煙品種中部葉成熟衰老過程中生理代謝差異研究［D］. 鄭州：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2019：18-30.

［17］胡 錦，朱 迪，張 恒，等. 打頂調(diào)控對煙葉碳氮代謝主要產(chǎn)物的影響［J］. 特產(chǎn)研究，2021，43（2）：63-68.

［18］王瑞新. 煙草化學(xué)［M］. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2003：58-120.

［19］吳貴麗. 鎂對烤煙碳氮代謝及其關(guān)鍵酶活性的影響［D］. 貴陽：貴州大學(xué)，2019：4-8.

［20］王 冠，周清明，楊宇虹，等. 烤煙碳氮代謝及其關(guān)鍵酶研究進(jìn)展［J］. 作物研究，2012，26（2）：189-192.

［21］劉衛(wèi)群，韓錦峰，史宏志，等. 數(shù)種烤煙品種中碳氮代謝與酶活性的研究［J］. 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1998，3（1）：22-26.

［22］張 玲，翟 欣，許自成，等. 不同烤煙品種碳氮代謝關(guān)鍵酶和品質(zhì)指標(biāo)比較［J］. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42（2）：52-55.

［23］張 森，許自成，李京京，等. 煙草碳氮代謝及其調(diào)控技術(shù)研究進(jìn)展［J］. 生物技術(shù)進(jìn)展，2016，6（5）：312-318.

［24］潘 冬，張玉磊，同拉嘎，等. “庫” 對可溶性糖及碳氮代謝相關(guān)酶基因表達(dá)影響［J］. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2018，31（1）：51-56.

［25］劉國順. 煙草栽培學(xué)［M］. 2版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2017：146-147.

［26］張 涵，祖慶學(xué)，聶忠揚(yáng)，等. 銨態(tài)氮/硝態(tài)氮配比對烤煙生長以及碳氮代謝和水溶性氮含量的影響［J］. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2022，50（7）：73-77.

［27］梁喜歡. 煙草低氮脅迫下與氮相關(guān)的生理機(jī)制及基因表達(dá)量研究［D］. 南昌：江西農(nóng)業(yè)大學(xué)，2020：39-41.

［28］李朝陽. 頂端調(diào)控對烤煙上部葉品質(zhì)和中部化煙葉比例的影響［D］. 合肥：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)，2018：16-22.

［29］馬俊紅，李軍營，馬二登，等. 烤煙不同生育期蔗糖代謝關(guān)鍵酶基因的表達(dá)［J］. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，43（5）：32-34.

［30］白應(yīng)香. 移栽期對煙株生長發(fā)育及碳氮代謝的影響［D］. 貴陽：貴州大學(xué)，2021：18-21.

［31］周健飛. 煙葉成熟期GS同工酶表達(dá)特性與氮素運(yùn)轉(zhuǎn)的關(guān)系［D］. 鄭州：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)：5-10.

［32］王小菁. 植物生理學(xué)［M］. 8版.北京：高等教育出版社，2019：87-97.