不同貯藏時間對紫花苜蓿干草營養(yǎng)品質(zhì)和氨基酸的影響

珠 娜，王志軍，郝百賀，趙牧其爾，包 健，意如樂，格根圖

（內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)草原與資源環(huán)境學(xué)院 / 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部飼草栽培、加工與高效利用重點實驗室, 內(nèi)蒙古 呼和浩特 010019）

紫花苜蓿(Medicago sativa)是一種豆科植物，在世界范圍內(nèi)被廣泛使用，具有很高的營養(yǎng)價值、易于消化?；谶@些特性，被稱為“牧草之王”[1]。與其他豆科植物相比，紫花苜蓿具有鮮明的優(yōu)勢，含有豐富的大量和微量營養(yǎng)物質(zhì)以及維生素和氨基酸。隨著畜牧業(yè)的發(fā)展和農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)的重組，紫花苜蓿在全國耕種的土地面積逐年增加，在飼料產(chǎn)業(yè)的發(fā)展道路上發(fā)揮著非常重要的作用[2]。紫花苜蓿主要利用方式為初花期收獲調(diào)制干草[3]。由于含水量低，苜蓿干草捆可以長期貯藏，為牲畜提供高質(zhì)量飼料[4]。大量優(yōu)質(zhì)干草的準(zhǔn)備和貯存是草食動物順利度過冬春兩季枯萎期及其健康生長發(fā)育的重要保證[5]。張培青[6]研究發(fā)現(xiàn)，隨著貯藏時間的延長，干草捆的粗蛋白(crude protein，CP)、粗脂肪(ether extract，EE)、胡蘿卜素、總可消化營養(yǎng)物質(zhì)及相對飼喂價值(relative feeding value，RFV)降低，粗纖維(crude fiber，CF)含量升高。氨基酸參與調(diào)節(jié)物質(zhì)的代謝和體內(nèi)的信息傳遞，在生物體的生命活動中起著重要的作用。經(jīng)過前人的大量研究和應(yīng)用，氨基酸已被廣泛應(yīng)用于食品工業(yè)、農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)及人體健康、保健等方面[7]。郝百賀等[8]研究發(fā)現(xiàn)，氨基酸作為評價苜蓿干草品質(zhì)的指標(biāo)具有顯著作用。目前有關(guān)苜蓿干草的貯藏時間對營養(yǎng)品質(zhì)影響的研究較多，但是結(jié)合氨基酸對苜蓿干草品質(zhì)綜合分析的研究較少。為此，研究不同貯藏期苜蓿干草營養(yǎng)物質(zhì)含量的變化和氨基酸的動態(tài)變化特征，通過隸屬函數(shù)分析方法對苜蓿干草營養(yǎng)品質(zhì)及氨基酸進(jìn)行綜合評價，探討苜蓿干草的最佳貯藏時間，以期為貯藏優(yōu)質(zhì)苜蓿干草提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗地概況

試驗于呼和浩特市賽罕區(qū)內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗地進(jìn)行，試驗地位于內(nèi)蒙古自治區(qū)中部大青山南側(cè)，地處40°36′～40°57′ N、110°40′～112°10′ E。該地屬大陸性氣候，屬典型的溫帶氣候。年均降水量335.2～534.6 mm，年均氣溫 6.7 ℃，無霜期 113～134 d。

1.2 試驗設(shè)計

試驗材料為紫花苜?！瓸ara310SC’，于2020 年6 月1 日種植。試驗材料生長第2 年進(jìn)入初花期(2021 年6 月8 日)時收獲，自然干燥至15%的水分含量后進(jìn)行打捆。分別在貯藏30、60、90 和120 d時，用取樣器從草捆中取500 g 樣，3 個重復(fù)。

1.3 測定項目

采用全自動杜馬斯定氮儀測定粗蛋白質(zhì)含量[9]，采用 ANKOM2000I 型纖維分析儀測定中性洗滌纖維(neutral detergent fiber，NDF)和 酸 性 洗 滌 纖 維(acid detergent fiber，ADF)含量[10]，采用馬弗爐550 ℃灰化法測定粗灰分(crude ash，Ash)含量[11]。

1.3.1氨基酸樣品制備及計算

試驗方法參考GB/T18246-2019[12]采用S-433D全自動氨基酸分析儀進(jìn)行鹽酸水解法；將45～50 mg苜蓿樣品準(zhǔn)確稱量，置于安培管內(nèi)，加入6 mol·L-1鹽酸10 mL ，充入氮氣30 s，密封后在110 ℃恒溫干燥箱內(nèi)水解24 h，冷卻，過濾，定容至25 mL。取1 mL 在試管中，使用平行蒸發(fā)儀蒸干后加入5 mL檸檬酸鈉緩沖溶液復(fù)溶，使氨基酸濃度適宜，振蕩，混勻，0.22 μm 濾膜過濾裝入1.5 mL 進(jìn)樣瓶中[13]。

根據(jù)聯(lián)合國糧食與農(nóng)業(yè)組織和世界衛(wèi)生組織提出的氨基酸平衡理論，F(xiàn)AO/WHO 氨基酸模式進(jìn)行蛋白質(zhì)營養(yǎng)評價。通過先計算氨基酸比值(ratio amino acid, RAA)，再計算各氨基酸比值系數(shù)(ratio coefficient, RC)。以此為基礎(chǔ)計算出氨基酸比值系數(shù)及 氨 基 酸 比 值 系 數(shù) 分(score ratio coefficient Amino acid, SRCAA)，SRCAA 表示待測蛋白質(zhì)中必需氨基酸與參考蛋白模式中相應(yīng)必需氨基酸的接近程度及在氨基酸平衡上所作的貢獻(xiàn)。

氨基酸比值(RAA) = 待測蛋白質(zhì)中氨基酸含量/模式氨基酸含量；

氨基酸比值系數(shù)(RC) = 氨基酸比值/氨基酸比值之均數(shù)；

氨基酸比值系數(shù)分(SRCAA) = 100 -CV× 100。式中：CV為RC的變異系數(shù)。CV= 標(biāo)準(zhǔn)差/均數(shù)，如果待測蛋白質(zhì)的氨基酸組成與模式氨基酸一致，則CV= 0，SRCAA= 100。而當(dāng)待測蛋白質(zhì)的RC越分散，CV相應(yīng)的變大，SRCAA變小，表示該蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價值越差[14-15]。

1.3.2 粗飼料相對飼喂價值(RFV)計算

利用干物質(zhì)采食量(dry matter intake，DMI)和可消化干物質(zhì)(digestible dry matter，DDM)對各處理的相對飼用價值進(jìn)行評定并計算：

式中：DMI為飼料干物質(zhì)采食量，單位為占體重的百分比(%)，BW(body weight)為可消化的干物質(zhì)，單位為占干物質(zhì)的百分比(%)[16]。

1.4 數(shù)據(jù)分析

利用Excel 2016 進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計；利用SPSS 22對數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差及相關(guān)性分析。結(jié)果以平均值 ± 標(biāo) 準(zhǔn) 誤 表 示，P＜ 0.05 表 示 差 異 顯 著、P＜0.01 表示差異極顯著。對不同貯藏期苜蓿干草的營養(yǎng)品質(zhì)采用模糊數(shù)學(xué)中的隸屬函數(shù)分析方法進(jìn)行綜合評價。

隸屬函數(shù)計算公式：

反隸屬函數(shù)計算公式：

式中：Xi為第i個指標(biāo)測定值，Xmax和Xmin表示第i個指標(biāo)的最大值和最小值，粗蛋白質(zhì)、相對飼喂價值、總氨基酸、必需氨基酸、非必需氨基酸和苜蓿干草營養(yǎng)品質(zhì)正相關(guān)時，使用式(1)，酸性洗滌纖維、中性洗滌纖維、粗灰分與苜蓿干草營養(yǎng)品質(zhì)負(fù)相關(guān)時，使用公式(2)[17]。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同貯藏時間對苜蓿干草營養(yǎng)品質(zhì)的影響

2.1.1 不同貯藏時間對苜蓿干草CP 的影響

苜蓿干草在不同貯藏時間下CP 含量的變化(圖1)表明，0～120 d 貯藏期間，苜蓿干草CP 含量隨貯藏期延長而不斷下降。貯藏0 d 時CP 含量為15.13%，貯藏30 d 后下降0.26%，貯藏120 d 后，CP 含量最低，為13.54%，較0 d 顯著下降1.59% (P＜ 0.05)。貯藏30、60、90 d 的CP 含量無顯著差異(P ＞0.05)。

圖1 不同貯藏時間粗蛋白含量Figure 1 The crude protein (CP) content of alfalfa hay at different storage times

2.1.2 不同貯藏時間對苜蓿干草ADF 含量的影響

苜蓿干草ADF 含量在不同貯藏時間下的變化(圖2)表明，在貯藏0～120 d 期間，苜蓿干草ADF含量無異常值，ADF 含量持續(xù)顯著增加(P＜ 0.05)。

圖2 不同貯藏時間ADF 含量Figure 2 The acid detergent fiber (ADF) content of alfalfa hay at different storage times

貯藏0 d 的ADF 含量為35.05%，貯藏30、60、90 d后 分 別增加1.42%、3.65%、7.03%，貯藏120 d 時ADF 含量上升趨勢明顯，含量為43.56%，較0 d 上升8.51%。

2.1.3 不同貯藏時間對苜蓿干草NDF 含量的影響

苜蓿干草NDF 含量在不同貯藏時間下的變化(圖3)顯示，在貯藏0～120 d，苜蓿干草NDF 含量無異常值。貯藏過程中NDF 含量持續(xù)升高。貯藏60 與90 d 含量差異不顯著(P＞ 0.05)。

圖3 不同貯藏時間NDF 含量Figure 3 The neutral detergent fiber (NDF) content of alfalfa hay at different storage times

貯藏0 d 的 NDF 含量為42.33%，經(jīng)30 d 貯藏，NDF含 量 為47.92%，比0 d 增 加5.59%。貯 藏120 d 時NDF 含量增加趨勢明顯，與0 d 相比增加了10.98%。

2.1.4 不同貯藏時間對苜蓿干草Ash 含量的影響

如圖4 所示，在貯藏0～120 d，苜蓿干草Ash 含量無異常值。貯藏過程中Ash 含量逐漸增加，貯藏120 d 時Ash 含 量 顯 著 高 于0 和30 d 時(P＜ 0.05)。

圖4 不同貯藏時間Ash 含量Figure 4 The crude ash (Ash ) content of alfalfa hay at different storage times

貯藏0 d 的Ash 含量為8.54%。貯藏30 d 后，Ash 含量為8.71%，比貯藏0 d 時增加0.17%。貯藏120 d，Ash 含量有明顯增加趨勢，比0 d 增加0.82%。

2.1.5 不同貯藏時間對苜蓿干草RFV 的影響

貯藏0～120 d，苜蓿干草RFV 含量無異常值。RFV含量在隨貯藏時間增加不斷顯著下降(圖5)(P＜ 0.05)。

圖5 不同貯藏時間RFV 含量Figure 5 The relative feeding value (RFV) of alfalfa hay at different storage times

貯藏0 d 的RFV 值為135.39，30 d 時為117.43，較0 d 下降了17.96。貯藏60、90 d 分別比0 d 下降了27.54、34.32。RFV 值在貯藏120 d 時最低，有明顯的下降趨勢，與0 d 相比降低了39.48。

2.2 不同貯藏時間對苜蓿干草氨基酸的影響

2.2.1 不同貯藏時間對苜蓿干草氨基酸含量的影響

總氨基酸含量隨苜蓿貯藏期的延長，呈逐漸下降趨勢(表1)。不同貯藏時間的總氨基酸含量介于9.499%～12.600%。

表1 不同貯藏時間苜蓿干草氨基酸含量Table 1 The amino acid contents of alfalfa hay at different storage times%

本研究檢測出7 種必需氨基酸。不同貯藏時間的必需氨基酸含量介于3.316%～5.031%。蘇氨酸含量在0 d 與其他時間段差異顯著(P＜ 0.05)，蘇氨酸含量介于0.477%～0.579%。不同貯藏時間蛋氨酸含量無顯著差異(P＞ 0.05)，介于0.137%～0.249%。賴氨酸含量介于0.516%～0.787%。纈氨酸含量在貯藏120 d 時顯著低于貯藏0 d (P＜ 0.05)，介于0.516%～1.038%。異亮氨酸含量介于0.360%～0.682%，0、30 d與其他時間段差異顯著(P＜ 0.05)。亮氨酸含量介于0.719%～1.015%，0、30 d 與其他時間段差異顯著(P＜ 0.05)。苯丙氨酸含量介于0.590%～0.681%。不同貯藏時間對苯丙氨酸的含量無顯著影響(P＞0.05)。

本研究中共檢測出10 種非必需氨基酸，不同貯藏時間的非必需氨基酸含量介于6.184%～7.576%。在10 種非必需氨基酸中，有4 種氨基酸含量在不同貯藏期間無顯著差異(P＞ 0.05)，分別為天冬氨酸、甘氨酸、組氨酸和脯氨酸。天冬氨酸含量介于1.494%～1.680%，隨貯藏時間的延長逐漸減少。甘氨酸含量介于0.478%～0.542%。脯氨酸含量介于0.934%～1.073%。組氨酸含量介于0.248%～0.280%。絲氨酸含量介于0.548%～0.628%，0 d 與其他時間段的含量差異顯著(P＜ 0.05)。谷氨酸含量介于0.992%～1.187%，0 d 與60、90、120 d 差異顯著(P＜0.05)。丙氨酸含量介于0.535%～0.635%，0 d 與其他時間段的含量差異顯著(P＜ 0.05)。胱氨酸含量介于0.248%～0.511%，90 與120 d 無 顯 著 差 異(P＞0.05)。酪氨酸含量介于0.365%～0.502%，0 d 與60、90、120 d 差 異 顯 著(P＜ 0.05)。精 氨 酸 含 量 介 于0.342%～0.536%，0 與30 d 無 顯 著 差 異(P＞ 0.05)，90 與120 d 無顯著差異(P＞ 0.05)。

苜蓿干草的氨基酸含量在不同貯藏期有一定的規(guī)律，含量最高的是天冬氨酸，含量最低的是蛋氨酸。苜蓿干草總氨基酸、必需氨基酸和非必需氨基酸含量隨貯藏期的延長逐漸減少。貯藏0 和30 d的總氨基酸含量及必需氨基酸含量差異顯著(P＜0.05)。貯藏0 和120 d 的非必需氨基酸含量差異顯著(P＜ 0.05)。

隨著貯藏時間的延長，呈味氨基酸、藥用氨基酸、支鏈氨基酸、芳香族氨基酸，含量呈遞減趨勢(表2)。藥用氨基酸每個貯藏期內(nèi)占總氨基酸比均最高。

表2 不同貯藏時間苜蓿干草各組成氨基酸比較Table 2 Comparison of the amino acids in alfalfa hay at different storage times

2.2.2 不同貯藏時間苜蓿干草的氨基酸營養(yǎng)價值評價

不同貯藏期的亮氨酸、賴氨酸、蘇氨酸均低于FAO/WHO 模式譜標(biāo)準(zhǔn)(以下簡稱標(biāo)準(zhǔn))。異亮氨酸貯藏60 d 后低于標(biāo)準(zhǔn)。蛋氨酸 + 半胱氨酸貯藏90 d后低于標(biāo)準(zhǔn)。纈氨酸貯藏期間均低于標(biāo)準(zhǔn)。苯丙氨酸 + 酪氨酸貯藏期間均高于標(biāo)準(zhǔn)(表3)。苜蓿干草貯藏期間，所含的必需氨基酸含量越接近模式氨基酸的組成，其蛋白質(zhì)的價值就越高。可以看出，根據(jù)計算差值的大小，不同貯藏時間苜蓿干草的第一限制性氨基酸為賴氨酸和亮氨酸。貯藏0 d 時苜蓿干草第二限制性氨基酸為亮氨酸，30 d 時為蘇氨酸，60、90 和120 d 時是賴氨酸。其余幾種氨基酸含量非常豐富，可以作為優(yōu)質(zhì)蛋白飼料進(jìn)行飼喂。

表3 不同貯藏時間苜蓿干草氨基酸與FAO/WHO 推薦氨基酸模式比較Table 3 Comparison of amino acid patterns in alfalfa hay at different storage times with those recommended by FAO/WHO

如果苜蓿干草在貯藏期間的氨基酸含量與FAO/WHO 模式氨基酸含量相同，則RC 值為1；RC ＞1 表明相對過剩，RC ＜ 1 則表示相對不足。賴氨酸和亮氨酸在貯藏期間RC 均在1 以下(表4)。蛋氨酸 +半胱氨酸在貯藏90 d 后RC 在1 以下。苯丙氨酸 +酪氨酸在貯藏期間RC 均在1 以上。纈氨酸在貯藏60 d 后RC 在1 以下。SRCAA 值則 越接近100，就表明苜蓿干草的氨基酸組成越平衡。本試驗中苜蓿干草的SRCAA 值介于73.82～82.08?？梢钥闯?，不同貯藏時間苜蓿干草的SRCAA值最高的是30 d。

表4 不同貯藏時間苜蓿干草氨基酸比值系數(shù)分Table 4 Ratio coefficients of amino acids in alfalfa hay at different storage times

2.2.3 不同貯藏時間苜蓿干草粗蛋白含量及氨基酸組分含量的相關(guān)性分析

對不同貯藏時間苜蓿干草粗蛋白含量及氨基酸組分含量的相關(guān)分析(表5)表明，粗蛋白含量與脯氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、組氨酸和精氨酸等顯著正相關(guān)(P＜ 0.05)，而與丙氨酸、胱氨酸、苯丙氨酸和賴氨酸等極顯著正相關(guān)(P＜ 0.01)。且各氨基酸的組成之間具有更加復(fù)雜的相關(guān)性。天冬氨酸與谷氨酸、蛋氨酸、絲氨酸、脯氨酸等極顯著正相關(guān)(P＜ 0.01)，與蘇氨酸、賴氨酸、甘氨酸、精氨酸顯著正相關(guān)(P＜ 0.05)。蘇氨酸與纈氨酸、精氨酸等顯著正相關(guān)(P＜ 0.05)，與絲氨酸、谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、胱氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、組氨酸、賴氨酸極顯著正相關(guān)(P＜ 0.01)。絲氨酸與酪氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸相關(guān)性不顯著，與纈氨酸、精氨酸顯著正相關(guān)(P＜ 0.05)，與其他氨基酸極顯著正相關(guān)(P＜0.01)。谷氨酸與纈氨酸、酪氨酸、脯氨酸等顯著正相關(guān)(P＜ 0.05)，與蛋氨酸、苯丙氨酸相關(guān)性不顯著，與其他氨基酸極顯著正相關(guān)(P＜ 0.01)。脯氨酸與丙氨酸、亮氨酸、精氨酸極顯著正相關(guān)(P＜ 0.01)，與胱氨酸、異亮氨酸、賴氨酸顯著正相關(guān)(P＜ 0.05)。甘氨酸與組氨酸、賴氨酸極顯著正相關(guān)(P＜ 0.01)，與丙氨酸、胱氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、精氨酸顯著正相關(guān)(P＜ 0.05)。丙氨酸與胱氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、賴氨酸極顯著正相關(guān)(P＜ 0.01)，與纈氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、組氨酸顯著正相關(guān)(P＜0.05)。胱氨酸與異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、賴氨酸、精氨酸極顯著正相關(guān)(P＜ 0.01)。纈氨酸與異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、賴氨酸顯著正相關(guān)(P＜0.05)。蛋氨酸與精氨酸極顯著正相關(guān)(P＜ 0.01)，與其他氨基酸相關(guān)性不顯著。異亮氨酸與亮氨酸、酪氨酸、賴氨酸、精氨酸極顯著正相關(guān)(P＜ 0.01)。亮氨酸與酪氨酸、賴氨酸、精氨酸極顯著正相關(guān)(P＜0.01)。酪氨酸與賴氨酸極顯著正相關(guān)(P＜ 0.01)。組氨酸與賴氨酸極顯著正相關(guān)(P＜ 0.01)。賴氨酸與精氨酸極顯著正相關(guān)(P＜ 0.01)。

表5 不同貯藏時間苜蓿干草粗蛋白質(zhì)蛋白及氨基酸含量的相關(guān)性Table 5 Correlation of crude protein and amino acid contents of alfalfa hay at different storage time

2.3 不同貯藏時間對苜蓿干草營養(yǎng)品質(zhì)的隸屬函數(shù)綜合評價

苜蓿干草的營養(yǎng)品質(zhì)評價結(jié)果(表6)表明，貯藏30 d 的苜蓿干草品質(zhì)最好，得分為0.69。貯藏時間越長，品質(zhì)越差，貯藏120 d 的干草品質(zhì)最差。

表6 不同貯藏時間苜蓿干草營養(yǎng)品質(zhì)綜合評價Table 6 Comprehensive evaluation of alfalfa hay nutritional quality at different storage times

3 討論

3.1 不同貯藏時間對苜蓿干草常規(guī)營養(yǎng)品質(zhì)變化的影響

營養(yǎng)品質(zhì)是一個關(guān)鍵的評價指標(biāo)來衡量飼草品質(zhì)，直接影響家畜采食的適口性和消化率[18]。CP 含量決定了牧草的營養(yǎng)價值的高或低[19]。Goto 等[20]研究發(fā)現(xiàn)苜蓿草捆內(nèi)粗蛋白含量會隨著貯藏期的延長而降低。本研究表明，隨著貯藏時間的延長CP 的含量逐漸下降。這一結(jié)果與范美超等[21]的研究結(jié)果相似。

NDF 作為植物中主要的纖維類物質(zhì)，通常由半纖維素、纖維素和木質(zhì)素組成[22]。NDF 有較低和較慢的降解率。過高的NDF 含量可能會使反芻動物在粗飼料中的進(jìn)食量和利用率受到限制。ADF 含量直接影響牧草消化率，ADF 含量越高消化率越低[22]。王根旺[23]研究表明，適合家畜采食的優(yōu)質(zhì)牧草中，ADF 的含量一般占干物質(zhì)含量40%以下，NDF的含量占干物質(zhì)的百分含量在50%以下。本研究中隨貯藏時間的延長，NDF、ADF 的含量都增加。ADF 含量由最初的35.05%提高到43.56%。NDF含量從最初42.33%提高到53.31%。那亞[24]發(fā)現(xiàn)，苜蓿干草NDF 和ADF 含量隨貯藏時間的延長逐漸增加，與本研究結(jié)果一致。

Ash 是樣品燃燒后殘留的殘渣，可用作衡量牧草中無機(jī)礦物質(zhì)含量的指標(biāo)[25]。牧草Ash 含量越高品質(zhì)越差，根據(jù)我國豆科牧草干草質(zhì)量等級標(biāo)準(zhǔn)，干草Ash 含量超過12.0%的為不合格產(chǎn)品[26]。本研究結(jié)果顯示，隨貯藏時間的延長，Ash 含量有所增加，但不到12.0%。

RFV 指反芻動物對飼料的可消化干物質(zhì)的隨意采食量[27]，用來衡量苜蓿干草品質(zhì)[28]。RFV 值越高，干草品質(zhì)越好。本研究中，ADF、NDF由于貯藏時間的影響而發(fā)生了變化，進(jìn)而改變了RFV 值。隨著貯藏時間的延長，RFV 呈下降趨勢。劉鷹昊[29]也發(fā)現(xiàn)，干草捆的RFV 含量隨著貯藏時間的延長而降低，這與本研究結(jié)果一致。

3.2 不同貯藏時間苜蓿干草氨基酸含量及相關(guān)性分析

氨基酸是構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單位，氨基酸含量、種類和比例等直接影響蛋白質(zhì)的組成，進(jìn)而影響牲畜對粗飼料蛋白的吸收和利用，因此氨基酸評價粗飼料飼用價值的重要指標(biāo)[30]。必需氨基酸指畜禽不能合成或合成速度不能滿足自身需求的氨基酸，并且必需從食物中攝取，必須外源獲取[31]。非必需氨基酸為畜禽自身可合成的氨基酸。呈味氨基酸的比例和含量會影響牲畜的機(jī)體健康[32]。限制性氨基酸是動物體內(nèi)無法自己合成的氨基酸，并且別的氨基酸無可替代的、動物必不可少的一種氨基酸。因此，這種氨基酸是高品質(zhì)的飼料所不可缺少的氨基酸，但是不宜過多。 因為限制氨基酸本身不會被動物的生長所吸收，一旦過多對臟器的負(fù)擔(dān)就會加重[33]。除合成蛋白質(zhì)外，具有其他特殊作用的氨基酸叫做功能性氨基酸[34]。本研究發(fā)現(xiàn)，隨著貯藏時間的延長，總氨基酸、必需氨基酸和非必需氨基酸的含量逐漸減少。含量最高的是天冬氨酸，含量最低的是蛋氨酸。必需氨基酸的含量與氨基酸的總量成正比。呈味氨基酸的含量是決定飼料適口性的主要因素之一，紫花苜蓿中呈味氨基酸占總氨基酸的36% 以上，提高了牲畜肉類的品質(zhì)和肉制品的營養(yǎng)價值[35]。本研究發(fā)現(xiàn)，苜蓿干草不同貯藏期的第一限制性氨基酸為賴氨酸和亮氨酸。這與Sitompul[36]指出的，賴氨酸和蛋氨酸是飼料中的限制性氨基酸的結(jié)果有所不同。本研究發(fā)現(xiàn)，氨基酸比值系數(shù)分(SRCAA)在貯藏時間為30 d 最高，表明氨基酸營養(yǎng)價值最高，氨基酸組成平衡較好。

粗蛋白含量與脯氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、組氨酸和精氨酸等顯著正相關(guān)(P＜ 0.05)，而與丙氨酸、胱氨酸、苯丙氨酸和賴氨酸等極顯著正相關(guān)(P＜ 0.01)，且各氨基酸的組成之間具有更加復(fù)雜的相關(guān)性。這說明不同貯藏期內(nèi)的粗蛋白含量與每個必需氨基酸組成存在較為密切的相關(guān)性。各必需氨基酸成分之間具有復(fù)雜的相關(guān)性，基本正相關(guān)，這說明各成分之間相互促進(jìn)的關(guān)系較好。

3.3 不同貯藏時間對苜蓿干草營養(yǎng)品質(zhì)的隸屬函數(shù)綜合評價

紫花苜蓿作為經(jīng)濟(jì)性粗飼料，如果僅用一種指標(biāo)或幾種指標(biāo)來評價紫花苜蓿的營養(yǎng)品質(zhì)或飼用價值，過于片面[37]。隸屬函數(shù)分析能夠綜合考慮諸多因素，對營養(yǎng)品質(zhì)或飼用價值的評價更加客觀、全面、合理，結(jié)果更加客觀、準(zhǔn)確[38]。本研究利用隸屬函數(shù)分析方法綜合評價常規(guī)營養(yǎng)和氨基酸得出了最佳貯藏時間。

4 結(jié)論

苜蓿干草的營養(yǎng)品質(zhì)隨貯藏時間的延長而逐漸下降。本研究共檢測出17 種氨基酸，隨貯藏時間延長苜蓿干草氨基酸成分的含量逐漸下降。貯藏30 d的氨基酸比值系數(shù)分為最高。隸屬函數(shù)分析法進(jìn)行綜合評價得出貯藏30 d 的苜蓿干草品質(zhì)最好。綜上所述，苜蓿干草隨著貯藏時間的延長，其品質(zhì)呈降低趨勢。因此，為保證苜蓿干草品質(zhì)，減少營養(yǎng)物質(zhì)損失，貯藏時間應(yīng)控制在30 d 以內(nèi)，盡量在30 d之內(nèi)飼喂家畜，從而取得良好的飼喂效果。