T淋巴細胞亞群在抗結(jié)核藥物所致肝損傷中的作用

黃潔，王暉，周蜜

(江西省九江市第三人民醫(yī)院檢驗科，九江 332000)

結(jié)核病患者在抗結(jié)核化療過程中，一般以藥物性肝損傷引起的不良反應(yīng)最多見，由于肝損傷的患者降低了抗結(jié)核藥物的有效性，常被迫調(diào)整抗結(jié)核的治療方案，導(dǎo)致病情失敗、復(fù)發(fā)，嚴重者因結(jié)核病病情惡化而死亡[1]?？菇Y(jié)核藥物引起的肝損傷發(fā)生機制十分復(fù)雜，大多數(shù)學(xué)者認為，細胞免疫、體液免疫參與了結(jié)核藥物所致肝損傷得過程[1，2]?？菇Y(jié)核藥物所致肝損傷成為影響結(jié)核治療效果的關(guān)鍵因素，水飛薊賓是公認的保肝作用藥物，對肝細胞膜具有保護作用，促進肝細胞的修復(fù)與再生[3，4]。外周血CD4+CD8+T細胞是參與機體免疫反應(yīng)并起主導(dǎo)調(diào)節(jié)作用的免疫細胞，本實驗主要是采用流式細胞儀檢測抗結(jié)核藥物引起的肝損傷患者和抗結(jié)核藥物未引起肝損傷的外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+及CD8+百分比進行對比，以及藥物性肝損傷的患者在用水飛薊賓治療前后的外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+及CD8+表達水平之間的變化，進一步研究外周血T淋巴細胞亞群在藥物性肝損傷中的發(fā)病機制。

1 材料和方法

1.1 病例選擇 選取九江市第三人民醫(yī)院2016年1月至2017年11月診斷為抗結(jié)核性藥物肝損傷的住院及門診患者作為實驗組，共55例，其中男39例，女26例。選擇同期于本院抗結(jié)核治療未產(chǎn)生肝功能損傷的門診或者住院患者30例作為對照組，其中男12例，女18例。入選病例發(fā)病前均無其他的肝病史。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) ⑴肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)2013年中華醫(yī)學(xué)會結(jié)核病學(xué)分會 《肺結(jié)核診斷和治療指南》的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。⑵急性藥物性肝損傷診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)2013年中華醫(yī)學(xué)會結(jié)核病學(xué)分會 《抗結(jié)核藥所致的藥物性肝損傷診斷與處理專家建議》[6]。

1.3 治療方法 實驗組患者抗結(jié)核藥導(dǎo)致肝損傷后，ALT＞2倍正常值上限（ULN），并且實驗組患者無病毒性肝炎、自身免疫性肝炎和其他原因引起的肝炎病史[5]。給予患者服用水飛薊賓膠囊（天士力制藥集團股份有限公司，國藥準(zhǔn)字：H20040299）每天三次，2-4 粒/次[8]，210mg/d。 待轉(zhuǎn)氨酶降到正常后繼續(xù)服用一個月后停藥。

1.4 檢測方法 實驗組和對照組測定外周血T淋巴細胞亞群均使用EDTA-Na抗凝管清晨空腹抽取外周血4ml送檢（2h進行檢測），使用儀器為美國貝克曼公司生產(chǎn)的FC500流式細胞儀，ALT檢測使用帶分離膠的真空采血管抽取空腹靜脈血3ml，ALT檢測使用美國貝克曼生產(chǎn)的AU5800生化分析儀，檢測試劑均為原裝配套試劑，嚴格按照儀器標(biāo)準(zhǔn)操作流程進行操作。

1.5 統(tǒng)計方法 采用SPSS 12.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，T淋巴細胞亞群的百分率用，組間均數(shù)比較用t檢驗。

2 結(jié)果

2.1 實驗與對照組的ALT指標(biāo) 實驗組ALT值為：114.0±32.0IU/L， 對照組 ALT 值為 26.0±5.0IU/L，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（t值=0.422，P＜0.01）。

2.2實驗組與對照組人外周血T淋巴細胞亞群比較 實驗組中的外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+及CD4+/CD8+的百分率明顯低于對照組，實驗組CD8+的百分率明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01），見表 1。

表1 實驗組與對照組人外周血T淋巴細胞亞群（%s）比較

表1 實驗組與對照組人外周血T淋巴細胞亞群（%s）比較

注：與對照組比較*P<0.01。

1.41±0.5 0.57±0.3*9.9組別對照組實驗組t值例數(shù)30 55 CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+71.76±7.74 64.51±7.81*4.12 36.99±5.64 20.83±8.32*9.72 28.24±6.64 38.36±8.03*6.03

2.3 實驗組治療前后人外周血T淋巴細胞亞群比較 實驗組藥物性肝損傷時的外周血T淋巴細胞亞群CD4+及CD4+/CD8+的百分率，明顯低于用水飛薊賓治療后肝功能恢復(fù)正常的CD4+及CD4+/CD8+的百分率，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，CD3+百分率在治療前后差異無統(tǒng)計學(xué)意義，治療前的CD8+百分比明顯高于治療后，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。見表2。

表2 實驗組治療前后人外周血T淋巴細胞亞群（%±s）比較

表2 實驗組治療前后人外周血T淋巴細胞亞群（%±s）比較

注：與治療前比較#P<0.01。

0.57±0.3 1.17±0.24#8.25組別治療前治療后t值例數(shù)55 55 CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+64.51±7.81 67.77±6.92 1.82 20.83±8.32 34.20±5.35#7.21 38.36±8.03 30.12±3.85#5.39

3 討論

一般情況下，結(jié)核藥所致的藥物性肝損傷發(fā)生機制分為免疫機制和非免疫機制，目前大部分研究集中在抗結(jié)核藥物性肝損害的非免疫性機制，免疫因素參與的各類藥物性肝損傷研究甚少[2]。有研究提出藥物是小分子物質(zhì)只有作為半抗原誘導(dǎo)線粒體氧化應(yīng)激反應(yīng)，促進炎癥釋放并激活免疫系統(tǒng)，而外周血T淋巴細胞亞群是機體抗炎癥、排異物免疫反應(yīng)中起主導(dǎo)作用的免疫性細胞[8]，黃承樂等人認為，在急性肝炎的患者體內(nèi)CD4+、CD4+/CD8+水平也有不同程度的下降，提示急性病毒性肝炎的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸除了與病毒增殖、擴散有關(guān)，還與機體免疫應(yīng)答強弱及免疫調(diào)節(jié)紊亂有關(guān)[9]。人成熟T細胞按表型不同分為CD4+T細胞和CD8+T細胞，CD4+為輔助性的T細胞，CD4+T細胞的減少將會直接影響機體的免疫功能。CD4+還可以分泌細胞因子，抗結(jié)核藥物在這些細胞因子的作用下，并且作為半抗原形成免疫復(fù)合物引發(fā)變態(tài)反應(yīng)導(dǎo)致肝損害，CD8+T細胞為細胞毒性T細胞，對清除損傷的肝細胞有重要的作用，并且依賴于CD4+T細胞發(fā)揮生理功能，所以CD4+T細胞減少和功能下降使損傷的肝細胞不能有效清除。CD4+/CD8+比值是監(jiān)測免疫狀態(tài)的重要指標(biāo)，該比值的下降可以導(dǎo)致免疫功能紊亂和一系列的機體免疫損傷[10]。

本研究結(jié)果表明，抗結(jié)核藥物所致藥物性肝損傷患者的外周血CD3+T細胞、CD4+T細胞、CD8+T細胞及CD4+/CD8+比值密切相關(guān)，特別是實驗組在治療之后肝功能恢復(fù)正常時，外周血CD3+T細胞、CD4+T細胞及CD4+/CD8+比值明顯上升，證實了損傷肝細胞清除之后，機體免疫系統(tǒng)的恢復(fù)。本研究的例數(shù)不多，仍然需要擴大樣本進一步研究T細胞亞群在抗結(jié)核藥物所致肝損傷的免疫作用機理，為肝細胞在抗炎癥過程中產(chǎn)生的氧化應(yīng)激產(chǎn)物殺傷或TNF-Fas的作用下凋亡等一系列信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑提供一些參考與啟示。

參考文獻

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