補(bǔ)腎化瘀方對PCOS 患者血清半乳糖凝集素-3、IL-6及CRP 水平的影響

汪 钘 梅青青 潘敏丹 孫 忻

多囊卵巢綜合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）是育齡期女性常見多發(fā)疾病，患病率約15%[1]，是造成育齡期女性月經(jīng)紊亂和無排卵性不孕的主要原因之一。慢性炎癥被認(rèn)為是PCOS 的重要致病因素，與高血糖、高雄激素血癥、胰島素抵抗和排卵障礙有關(guān)[2]。最近的研究發(fā)現(xiàn)，PCOS 患者體內(nèi)腫瘤壞死因子α、白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）和白介素-18（IL-18）等炎癥因子水平升高[2]。半乳糖凝集素-3（Galectin-3）與慢性炎癥、胰島素抵抗及肥胖密切相關(guān)，是許多疾病的研究熱點(diǎn)[3]。研究發(fā)現(xiàn)，Galectin-3 在PCOS 患者體內(nèi)表達(dá)升高，且與IL-6 呈正相關(guān)，推測Galectin-3 作為促炎因子在PCOS 發(fā)生發(fā)展中起到重要作用[4-5]。本研究旨在探討補(bǔ)腎化瘀方對腎虛血瘀型PCOS 患者體內(nèi)Galectin-3、IL-6、C反應(yīng)蛋白（CRP）等炎癥因子的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取浙江省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院2020年9 月至2021 年9 月收治的腎虛血瘀型PCOS 患者60 例，根據(jù)前瞻性臨床對照研究方法，進(jìn)行隨機(jī)、單盲、對照試驗(yàn)，采用隨機(jī)數(shù)字表將患者隨機(jī)分為治療組和對照組，各30 例。本研究已通過醫(yī)院倫理委員會審核，審批號：【2021】快審（76）號。

1.2 納入、排除及剔除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合2003 年鹿特丹PCOS 診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；（2）符合《24 個(gè)專業(yè)105 個(gè)病種中醫(yī)臨床路徑（試行）》[7]中腎虛血瘀證的辨證標(biāo)準(zhǔn)；（3）年齡18～35 歲；（4）自愿加入本研究，簽署知情同意書；（5）近3 個(gè)月內(nèi)未服用激素類、二甲雙胍等影響內(nèi)分泌代謝的藥物。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）妊娠期或哺乳期婦女；（2）合并有其他內(nèi)分泌疾患如甲狀腺、垂體及腎上腺疾患等；（3）合并心腦腎肝等臟器功能嚴(yán)重受損者；（4）患有嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)疾病及精神病、惡性腫瘤者；（5）存在藥物禁忌或有嚴(yán)重藥物過敏史者。剔除標(biāo)準(zhǔn)：（1）治療過程中出現(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)、影響觀察的其他系統(tǒng)疾?。唬?）治療依從性差，未能完成治療療程者。

1.3 治療方法 對照組給予鹽酸二甲雙胍片（批號67210104，規(guī)格：0.25 g×60 片，上海信誼天平藥業(yè)有限公司）1.0 g，1 天2 次，如無妊娠，治療3 個(gè)月經(jīng)周期，如妊娠則停藥。治療組給予補(bǔ)腎化瘀方（毓麟珠合芎歸二陳湯加減）治療，組方：菟絲子15 g，杜仲10 g，枸杞子、炒當(dāng)歸各12 g，丹參15 g，川芎10 g，生地黃、炒黨參各15 g，炒蒼術(shù)9 g，茯苓15 g，陳皮、浙貝母、夏枯草、香附各10 g，甘草3 g。中藥材由浙江省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院中藥房提供。每日1 劑，水煎取400 mL，200 mL/次，1 天2 次，經(jīng)期不停藥，治療3 個(gè)月經(jīng)周期，如妊娠則停藥。

1.4 觀察指標(biāo)

1.4.1 中醫(yī)證候積分、排卵及妊娠情況 觀察兩組患者治療前及治療3 個(gè)周期后中醫(yī)證候積分的變化情況。于研究開始時(shí)向每位受試者發(fā)放中醫(yī)證候積分表（參照《24 個(gè)專業(yè)105 個(gè)病種中醫(yī)臨床路徑（試行）》[7]制定），包括月經(jīng)情況、毛發(fā)情況、痤瘡情況、皮膚溢脂情況、舌象、脈象等，依據(jù)患者自身感受填寫。各項(xiàng)證候根據(jù)嚴(yán)重程度分為無、輕度、中度、重度，分別計(jì)0、1、2、3 分。治療前后分別填寫1 次，整個(gè)過程均由專業(yè)醫(yī)務(wù)人員判斷舌脈并指導(dǎo)完成。治療期間記錄患者排卵及妊娠情況。

1.4.2 血清學(xué)指標(biāo) 治療前后采集患者月經(jīng)周期第3～5 天空腹靜脈血樣，閉經(jīng)患者B 超檢查無優(yōu)勢卵泡時(shí)（最大卵泡直徑＜10 mm）采集血樣。當(dāng)天即檢測空腹血糖（fasting plasma glucose，F(xiàn)PG）、空腹胰島素（fasting insulin，F(xiàn)INS）、三酰甘油（triglyceride，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、低密度脂蛋白（lowdensity lipoprotein，LDL）、高密度脂蛋白（high-density lipoprotein，HDL）、CRP、促卵泡激素（follicle stimulating hormone，F(xiàn)SH）、促黃體生成素（luteinizing hormone，LH）、雌二醇（estradiol，E2）、睪酮（testosterone，T）水平，部分血清分裝保存至-80 ℃以備檢測Galectin-3、IL-6 水平。采用放射免疫法檢測FPG、FINS、TG、TC、HDL、LDL、CRP、FSH、LH、E2、T 水平（由浙江省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院檢驗(yàn)科完成）；采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清Galectin-3 和IL-6 水平。采用穩(wěn)態(tài)模型評估法，根據(jù)血糖、胰島素水平計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)（homeostasis model assessment for insulin resistance，HOMA-IR），HOMA-IR=FINS（mU/L）×FPG（mmol/L）/22.5。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 25.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料符合正態(tài)分布且方差齊，采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，組內(nèi)比較采用配對樣本t 檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料采用百分率（%）表示，采用非參數(shù)檢驗(yàn)。血清Galectin-3、IL-6、CRP 水平與其他指標(biāo)相關(guān)關(guān)系則采用Spearman 相關(guān)性分析。以P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組PCOS 患者一般資料比較 對照組1 例患者因嚴(yán)重腹瀉退出本研究，治療組2 例患者因個(gè)人原因主動退出本研究。兩組患者基線資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性，見表1。

表1 兩組PCOS 患者一般資料比較（±s）

表1 兩組PCOS 患者一般資料比較（±s）

注：對照組予鹽酸二甲雙胍治療；治療組予補(bǔ)腎化瘀方治療；PCOS 為多囊卵巢綜合征；BMI 為體質(zhì)指數(shù)；WHR 為腰臀比

組別治療組對照組t 值P 值例數(shù)28 29年齡（歲）27.11±3.74 27.31±4.96-0.174 0.862病程（年）2.98±1.16 2.60±1.11 1.259 0.213 BMI（kg/m2）24.30±4.59 24.37±3.47 0.065 0.948 WHR 0.87±0.05 0.87±0.05＜0.001＞0.999

2.2 兩組PCOS 患者中醫(yī)證候積分比較 治療前，兩組患者中醫(yī)證候積分比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。治療后兩組中醫(yī)證候積分均有一定程度降低（P＜0.01），且治療組中醫(yī)證候積分降低較對照組顯著，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組PCOS 患者治療前后中醫(yī)證候積分比較（分，±s）

表2 兩組PCOS 患者治療前后中醫(yī)證候積分比較（分，±s）

注：對照組予鹽酸二甲雙胍治療；治療組予補(bǔ)腎化瘀方治療；PCOS 為多囊卵巢綜合征

組別治療組對照組t 值P 值例數(shù)28 29治療前12.50±2.17 11.97±2.44 0.873 0.387治療后4.18±2.58 6.07±2.94-2.576 0.013 t 值16.015 19.442 P 值＜0.001＜0.001

2.3 兩組PCOS 患者排卵及妊娠情況比較 因部分患者存在確認(rèn)妊娠情況，治療組共82 個(gè)觀察周期，其中已排卵周期63 個(gè)，排卵率為76.83%；對照組共87 個(gè)觀察周期，其中已排卵周期43 個(gè)，排卵率為49.43%；治療組排卵率高于對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

治療組28 例患者中，第2 個(gè)月經(jīng)周期妊娠2例，第3 個(gè)月經(jīng)周期妊娠2 例，妊娠率為14.29%；對照組29 例患者中，第3 個(gè)月經(jīng)周期妊娠1 例，妊娠率為3.45%；治療組妊娠率略高于對照組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.4 兩組PCOS 患者性激素水平比較 因部分患者存在確認(rèn)妊娠情況，實(shí)際治療前后檢測生殖激素患者治療組共24 例，對照組共28 例。治療前，兩組患者性激素比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療后，兩組患者的LH、T 及LH/FSH 水平均顯著降低（P＜0.05），且治療組患者的LH、T 及LH/FSH 水平顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。治療后兩組患者FSH、E2 水平與治療前相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表3。

表3 兩組PCOS 患者性激素水平比較（±s）

表3 兩組PCOS 患者性激素水平比較（±s）

注：對照組予鹽酸二甲雙胍治療；治療組予補(bǔ)腎化瘀方治療；PCOS 為多囊卵巢綜合征；FSH 為卵泡刺激素；LH 為黃體生成素；E2 為雌二醇；T為睪酮；LH/FSH 為黃體生成素與卵泡刺激素比值；與同組治療前比較，aP＜0.05

組別治療組對照組t 值P 值例數(shù)24 28 FSH（mIU/mL） LH（mIU/mL） E2（pg/mL） T（ng/mL） LH/FSH治療前6.49±1.27 6.68±1.28 0.251 0.803治療后6.25±0.99 6.14±1.10 0.461 0.647治療前15.09±2.15 15.12±2.75 0.148 0.883治療后10.12±1.72a 12.54±2.56a-3.856＜0.001治療前31.58±7.29 33.19±10.40-0.742 0.461治療后32.93±10.72 33.52±10.27-0.124 0.902治療前0.65±0.12 0.64±0.17 0.269 0.789治療后0.47±0.12a 0.57±0.16a-2.072 0.043治療前2.39±0.50 2.29±0.36 0.145 0.885治療后1.65±0.32a 1.95±0.40a-4.561＜0.001

2.5 兩組PCOS 患者糖脂代謝指標(biāo)比較 治療前，兩組患者糖脂代謝指標(biāo)水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療后，兩組患者的FPG、FINS 和HOMAIR 水平顯著降低（P＜0.05），治療組與對照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。治療后，兩組患者的TG、TC、LDL 水平顯著降低（P＜0.05），HDL 水平顯著升高（P＜0.05），且治療組患者的TG、TC、LDL 水平顯著低于對照組（P＜0.05），HDL 水平顯著高于對照組（P＜0.05）。見表4～5。

表4 兩組PCOS 患者糖代謝指標(biāo)比較（±s）

表4 兩組PCOS 患者糖代謝指標(biāo)比較（±s）

注：對照組予鹽酸二甲雙胍治療；治療組予補(bǔ)腎化瘀方治療；PCOS 為多囊卵巢綜合征；FPG 為空腹血糖；FINS 為空腹胰島素；HOMA-IR 為胰島素抵抗指數(shù)；與同組治療前比較，aP＜0.05

組別治療組對照組t 值P 值例數(shù)28 29 FPG（mmol/L） FINS（mU/L） HOMA-IR治療前5.27±0.70 5.44±0.37-1.130 0.265治療后5.05±0.45a 4.92±0.56a 0.970 0.336治療前13.48±4.73 12.20±5.19 0.974 0.334治療后9.66±4.54a 8.44±2.81a 1.215 0.231治療前3.17±1.24 2.99±1.42 0.530 0.598治療后2.18±1.05a 1.89±0.76a 1.198 0.236

表5 兩組PCOS 患者脂代謝指標(biāo)比較（mmol/L，±s）

表5 兩組PCOS 患者脂代謝指標(biāo)比較（mmol/L，±s）

注：對照組予鹽酸二甲雙胍治療；治療組予補(bǔ)腎化瘀方治療；PCOS 為多囊卵巢綜合征；TG 為三酰甘油；TC 為總膽固醇；LDL 為低密度脂蛋白；HDL 為高密度脂蛋白；與同組治療前比較，aP＜0.05

?

2.6 兩組PCOS 患者Galectin-3、IL-6、CRP 水平比較 治療前，兩組患者炎癥指標(biāo)水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療后，兩組患者Galectin-3、IL-6 及CRP 水平顯著降低（P＜0.05），治療組患者Galectin-3、IL-6 及CRP 水平顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表6。

表6 兩組PCOS 患者炎癥指標(biāo)比較（±s）

表6 兩組PCOS 患者炎癥指標(biāo)比較（±s）

注：對照組予鹽酸二甲雙胍治療；治療組予補(bǔ)腎化瘀方治療；PCOS 為多囊卵巢綜合征；Galectin-3 為半乳糖凝集素-3；IL-6 為白介素6；CRP 為C 反應(yīng)蛋白；與同組治療前比較，aP＜0.05

組別治療組對照組t 值P 值例數(shù)28 29 Galectin-3（ng/mL） IL-6（pg/mL） CRP（mg/L）治療前11.27±2.54 10.70±3.03 0.769 0.445治療后8.71±1.67a 9.91±2.23a-2.306 0.025治療前40.89±3.89 39.02±5.07 1.558 0.125治療后30.24±3.85a 32.62±4.97a-2.012 0.049治療前3.67±1.56 3.70±1.06-0.067 0.947治療后2.80±0.91a 3.32±0.64a-2.490 0.016

2.7 PCOS 患者Galectin-3、IL-6、CRP 與其他指標(biāo)的相關(guān)性分析 Spearman 相關(guān)性分析顯示，PCOS 患者血清中Galectin-3 水平與BMI、FINS、HOMA-IR、TG、TC、LDL、T、IL-6、CRP 呈正相關(guān)（P＜0.05），與年齡、WHR、FPG、HDL、FSH、LH、E2 及LH/FSH 無相關(guān)性（P＞0.05）；PCOS 患者血清中IL-6 水平與BMI、FPG、FINS、HOMA-IR、TG、TC、LDL、T、Galectin-3 和CRP 呈正相關(guān)（P＜0.05），與HDL 呈負(fù)相關(guān)（P＜0.01），與年齡、WHR、FSH、LH、E2 及LH/FSH 無相關(guān)性（P＞0.05）；PCOS 患 者 血 清 中CRP 水 平 與BMI、FPG、FINS、HOMA-IR、TG、TC、LDL、T、Galectin-3、IL-6 呈正相關(guān)（P＜0.05），與HDL 呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05），與年齡、WHR、FSH、LH、E2 及LH/FSH 無 相 關(guān) 性（P ＞0.05）。見圖1。

圖1 Spearman 分析PCOS 患者Galectin-3、IL-6、CRP 與各變量之間的相關(guān)性

3 討 論

近年來，越來越多研究關(guān)注PCOS 的慢性低度炎癥，并發(fā)現(xiàn)其與糖脂代謝異常、高雄激素血癥、排卵障礙等密切相關(guān)。研究指出，慢性低度炎癥可能通過肥胖、胰島素抵抗（IR）及高雄激素血癥參與PCOS 的病理過程[8]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，PCOS 患者血清Galectin-3 水平與BMI、FINS、HOMA-IR、TG、TC、LDL、T、IL-6、CRP 均呈正相關(guān)，IL-6 水平與BMI、FPG、FINS、HOMA-IR、TG、TC、LDL、T、CRP 及Galectin-3 水 平 呈 正 相 關(guān)，CRP 水 平 與BMI、FPG、FINS、HOMA-IR、TG、TC、LDL、T、Galectin-3 及IL-6水平呈正相關(guān)。多項(xiàng)研究表明，PCOS 患者血清Galectin-3 水平顯著升高，且與肥胖、糖代謝、高雄激素血癥、慢性低度炎癥和IR 密切相關(guān)，Galectin-3 可以作為Toll 樣受體4（TLR4）的配體，激活TLR4/核因子κB 途徑，釋放IL-6、轉(zhuǎn)化生長因子β1、白介素-10 等炎癥因子，導(dǎo)致慢性低度炎癥，可以抑制下游胰島素信號傳導(dǎo)，導(dǎo)致IR，可能是參與PCOS 發(fā)生發(fā)展的重要因子[4-5，9，11-13]。吳銳等[5]研究結(jié)果表明，PCOS 患者Galectin-3 水平與CRP、IL-6 水平呈正相關(guān)。IL-6在PCOS 患者體內(nèi)異常表達(dá)，且與高雄激素血癥、肥胖和IR 存在密切聯(lián)系[10，14-15]。CRP 水平在PCOS 患者血清中升高，可在IL-6 刺激下由肝臟產(chǎn)生，有證據(jù)表明，CRP 與IR、體質(zhì)量和脂肪量呈正相關(guān)[16]。

中醫(yī)認(rèn)為PCOS 屬“月經(jīng)病”“閉經(jīng)”“不孕”等范疇，其病位在腎，與肝、脾相關(guān)，以腎虛血瘀為基本病機(jī)，腎者主水，腎陽不足，無以運(yùn)化水濕，聚而成痰，日久成瘀，痰瘀互結(jié)，發(fā)為炎癥，阻塞胞脈，則天癸失序，卵子生長發(fā)育障礙，月事失期，乃至不孕。因此，臨床治療中應(yīng)當(dāng)以補(bǔ)腎活血為主。補(bǔ)腎化瘀方（毓麟珠合芎歸二陳湯加減）中含有菟絲子、杜仲、枸杞子、炒當(dāng)歸、丹參、川芎、生地黃、炒黨參、炒蒼術(shù)、茯苓、陳皮、浙貝母、夏枯草、香附、甘草，取毓麟珠補(bǔ)益氣血，溫養(yǎng)肝腎，強(qiáng)固沖任，調(diào)經(jīng)助孕之意。方中去毓麟珠之鹿角霜、川椒，以防藥性過于溫燥；去白芍，改熟地為生地以防滋膩礙胃，加枸杞子，同杜仲、菟絲子合用，共奏補(bǔ)益肝腎，養(yǎng)陰生津之效；加丹參、香附，同當(dāng)歸、川芎合用，起養(yǎng)血行氣，活血化瘀之能；改白術(shù)為蒼術(shù)，調(diào)人參為黨參，加陳皮，合以茯苓，四者合用，健脾助運(yùn)以化痰濕；加浙貝、夏枯草消腫散結(jié)；佐以甘草調(diào)和諸藥。諸藥合用，共奏補(bǔ)腎活血，化痰散結(jié)之效。

本研究顯示，與對照組比較，治療組治療后排卵率明顯較高，中醫(yī)證候積分降低更為顯著，提示補(bǔ)腎化瘀方治療腎虛血瘀型PCOS 患者，方藥對證，故可有效緩解臨床癥狀，改善排卵，取得較為滿意的療效。在妊娠率方面，治療組與對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，考慮與研究缺乏大數(shù)據(jù)支持，且部分患者無生育要求相關(guān)。在糖脂代謝及性激素方面，兩種治療方案均能顯著降低FPG、FINS 和HOMA-IR 水平，但補(bǔ)腎化瘀方更有效降低LH、T、LH/FSH、TG、TC 及LDL 水平，提高HDL 水平，這與張麗等[17]研究結(jié)果基本一致，提示補(bǔ)腎化瘀方可糾正腎虛血瘀型PCOS 患者性激素、糖脂代謝紊亂狀態(tài)。已有研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)腎活血法聯(lián)合西藥治療可降低PCOS 患者IL-6、IL-8、CRP 等促炎細(xì)胞因子濃度[18-19]；本研究顯示，兩種治療方案均能降低Galectin-3、IL-6 及CRP 水平，其中治療組降低更為顯著，提示補(bǔ)腎化瘀方可有效清除炎癥因子，改善慢性炎癥狀態(tài)，結(jié)合補(bǔ)腎化瘀方可降低T、TG、TC 及LDL 水平，降低HOMA-IR 值，推測其可能通過改善慢性炎癥微環(huán)境，繼而改善IR、高雄激素血癥及脂代謝，從而在臨床上發(fā)揮治療PCOS 的作用。

綜上所述，采用補(bǔ)腎化瘀方治療腎虛血瘀型PCOS 患者臨床療效佳，可有效緩解臨床癥狀，降低血清炎癥指標(biāo)Galectin-3、IL-6 及CRP 水平，改善糖脂代謝紊亂，調(diào)節(jié)性激素水平，促進(jìn)排卵。