羊副結(jié)核病的診斷及防控

陳瓊琰,傅雯婕

1.甘肅省定西市安定區(qū)畜牧獸醫(yī)局稱鉤驛畜牧獸醫(yī)站,甘肅 安定 743000 2.甘肅省定西市安定區(qū)畜牧獸醫(yī)局,甘肅 安定 743000

0 引言

羊副結(jié)核病的致病原是副結(jié)核分枝桿菌,這種細(xì)菌是一種革蘭氏陽性桿菌,具有較強的耐酸性,是禽型分枝桿菌復(fù)合體的成員之一,屬于禽分枝桿菌副結(jié)核亞種。該病多呈現(xiàn)隱性感染,潛伏期長,傳播迅速,呈全球性分布,是一種危害動物健康的重大疫病,同時也是導(dǎo)致羊養(yǎng)殖效益低的重要原因之一。目前,羊副結(jié)核病尚無特效治療藥物,一旦發(fā)生該病,需要將患病羊直接淘汰,并加強羊群凈化,才能減少后續(xù)的養(yǎng)殖損失。

1 病原學(xué)

羊副結(jié)核病的致病原是副結(jié)核分枝桿菌,這種桿菌的形態(tài)以桿狀、棒狀為主,沒有莢膜、芽孢以及鞭毛,所以無法自主運動。副結(jié)核分枝桿菌是一種需氧菌,適宜培養(yǎng)溫度為37 ℃,適宜培養(yǎng)pH為6.7～7.1。在副結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁中,含有類脂成分,所以較難被染色。禽型分枝桿菌的菌落表面并不光滑,整體呈顆粒狀、比較粗糙,菌落的顏色為乳酪色或黃色。禽型分枝桿菌可通過抗酸染色,染色結(jié)果為紅色。

禽型分枝桿菌有著較強的外界適應(yīng)能力,即使沒有宿主存在,自身也可以在自然界中長期存活,最長存活時間可達(dá)1年之久。禽型分枝桿菌對高溫環(huán)境較敏感,在60 ℃條件下,禽型分枝桿菌只能存活約30 min。禽型分枝桿菌初代培養(yǎng)的難度較高,這是因為體外培養(yǎng)缺少這種細(xì)菌生長需要的草分枝桿菌素,所以在實際培養(yǎng)時,需要注意添加這種草分枝桿菌素,才能成功培養(yǎng)。與其他桿菌相比,禽型分枝桿菌的生長速度較慢,完成1次禽型分枝桿菌培養(yǎng)至少需要6周[1]。禽型分枝桿菌對哺乳動物尤其是反芻動物有著較強的易感性,例如牛、羊都較容易感染禽型分枝桿菌,患上副結(jié)核病。與牛感染禽型分枝桿菌相比,羊在感染禽型分枝桿菌后,潛伏期更長,且早期較多羊均為隱性感染,不易察覺,較容易被誤診或者忽略,這進一步增加了羊副結(jié)核病的防控難度。

2 流行特點

副結(jié)核病較容易感染牛、羊,與成年羊相比,羔羊有著更強的易感性?；疾⊙蛞约半[性感染羊是主要的感染源。羊在患上副結(jié)核病后,在排出的糞便中,通常會包含大量的致病菌,這些致病菌還會污染羊飼養(yǎng)工具、飼料、水源等,造成更大范圍的傳播,所以糞口傳播以及接觸性傳播是羊副結(jié)核病的主要傳播途徑。副結(jié)核病的病原主要通過消化道侵入羊的腸道絨毛膜以及腸系膜淋巴結(jié),引起羊腸道炎癥,不僅如此,病原菌也會入侵血液,然后從乳汁中排出,因此,若母羊患有副結(jié)核病,那么羔羊以及腹中的胎兒也會患有副結(jié)核病。副結(jié)核病流行沒有明顯的季節(jié)性,一年四季均會出現(xiàn)。但春季、秋季較為常見,整體呈散發(fā)性流行。從生產(chǎn)實踐來看,副結(jié)核病傳播相對較慢,所以整體呈散發(fā)性、地方性流行。尤其是在羊交易較為頻繁的地區(qū),更容易流行傳播。

3 癥狀表現(xiàn)

羊副結(jié)核病有著較長的潛伏期以及隱性感染期,潛伏期能夠達(dá)到數(shù)年,且在隱性感染期間,羊沒有明顯的癥狀表現(xiàn),這會進一步增加了羊副結(jié)核病的診斷難度。羊發(fā)病后精神萎靡、食欲減退,如果是母羊,可發(fā)現(xiàn)其泌乳量明顯減少且被毛粗亂失去光澤。隨著病情的發(fā)展,羊癥狀表現(xiàn)會越來越重,并開始出現(xiàn)腹瀉癥狀,排出水樣性糞便,在糞便中,可發(fā)現(xiàn)有一些泡沫與黏液。在羊副結(jié)核病進入后期,腹瀉癥狀表現(xiàn)越來越嚴(yán)重,且腹瀉的次數(shù)不斷增加,在羊的頜下、腹部下方,可發(fā)現(xiàn)有水腫情況。由于羊經(jīng)常腹瀉,導(dǎo)致身體虛弱,活動意愿下降,經(jīng)常臥地不起。肛門、尾部以及身體容易沾染糞便,造成嚴(yán)重的污染。伴隨著腹瀉,羊食欲基本廢絕,身體快速消瘦,抵抗力低下,很容易繼發(fā)感染其他疾病,使病羊的死亡率增加。羊副結(jié)核病的發(fā)病過程從初期到末期,歷經(jīng)較長時間,表現(xiàn)出慢性消耗性的癥狀特點,最終病羊會因為身體衰竭或繼發(fā)感染其他疾病死亡。

4 病理剖檢

觀察病死羊可見,羊身體消瘦、體毛凌亂,肉眼觀察羊的各個組織器官,沒有明顯的病變表現(xiàn)。通過對病死羊進行剖檢可見羊小腸內(nèi)部有明顯的皺褶,褶皺的形態(tài)類似腦回樣,內(nèi)部有明顯的充血現(xiàn)象,羊的腸道黏膜增厚,顏色變成異常的灰白色或黃綠色。剖檢羊的回腸、空腸等處,也發(fā)現(xiàn)了上述病變情況,但整體的病變程度沒有小腸部位的病變程度嚴(yán)重。羊的腸系膜淋巴結(jié)腫脹明顯,整體呈漿液性浸潤?？傊?羊副結(jié)核病的特征性病理變化主要集中在腸道,主要表現(xiàn)為脂肪萎縮、慢性增生性腸炎和腸系膜淋巴結(jié)增生性炎。

5 診斷

5.1 皮膚變態(tài)反應(yīng)

皮膚變態(tài)反應(yīng)作為一種副結(jié)核病診斷方法,主要是利用遲發(fā)性皮膚變態(tài)反應(yīng)原理,本質(zhì)上是一種細(xì)胞免疫檢測診斷手段。在具體進行檢測診斷時,需要采用副結(jié)核菌素注入羊頸部左側(cè)中上1/3處的皮內(nèi),注入量為0.1 mL,且副結(jié)核菌素經(jīng)過了提純[2]。最后進行觀察分析,查看注射皮膚部位是否出現(xiàn)了局部炎癥反應(yīng)以及皮厚差,如果出現(xiàn)了炎癥反應(yīng),皮厚差在3 mm以上,說明患病羊為陽性。這種皮膚變態(tài)反應(yīng)檢測診斷方法只適合早期感染羊副結(jié)核病以及處于隱性感染羊副結(jié)核病的診斷。如果羊在患有副結(jié)核菌病后,已經(jīng)過了潛伏期,處于發(fā)病階段,采用這種檢測診斷方法,羊的皮膚變態(tài)反應(yīng)可能會消失,從而造成誤判,并且皮膚變態(tài)反應(yīng)診斷方法的特異性、敏感性均較低,較難辨別是自然感染還是免疫因素所導(dǎo)致。

此外,在自然環(huán)境中,羊副結(jié)核病的副結(jié)核分枝桿菌病原可能與其他分枝桿菌存在共同的抗原,所以較容易出現(xiàn)非特異性反應(yīng),且在實際應(yīng)用時,還需要對羊進行保定處理,實際操作難度也較大,費時費力,檢測結(jié)果具有一定不確定性,所以并不適于大規(guī)模檢測,僅限于疑似病例、早期感染以及隱性感染病例診斷應(yīng)用。

5.2 細(xì)菌學(xué)診斷

在采用細(xì)菌學(xué)診斷方法時,可通過對樣本進行處理,然后直接采用顯微鏡進行檢查,分析樣本中的病原菌是否符合副結(jié)核分枝桿菌的特點。這種檢測診斷方法較適合羊副結(jié)核病亞臨床期以及發(fā)病時期。在鏡檢時,選擇患病羊的糞便作為檢測樣本,然后進行抗酸染色,在光學(xué)顯微鏡下,如果樣本中確實存在副結(jié)核分枝桿菌,那么細(xì)菌經(jīng)抗酸染色后,顏色為紅色,細(xì)菌的形態(tài)為短桿狀或球桿狀。這種細(xì)菌學(xué)診斷檢測方法實際操作并不復(fù)雜,需要的儀器設(shè)備裝置數(shù)量少,檢測成本低,可以在短時間內(nèi)快速得出結(jié)果。但這種檢測診斷方法敏感性低,且無菌條件很難控制,容易受到其他抗酸菌的干擾,會在一定程度上影響檢測診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性,所以并不適合大規(guī)模批量檢測診斷應(yīng)用。

除了通過染色鏡檢觀察外,還可采用細(xì)菌分離培養(yǎng)方法進行檢測診斷,通過獲取羊糞便樣本進行細(xì)菌分離培養(yǎng)。這種檢測診斷方法特異性較高,但敏感性不穩(wěn)定,較容易受細(xì)菌脫落程度的影響。并且通過上文敘述可知,副結(jié)核分枝桿菌是一種典型的慢性生長菌,初代培養(yǎng)不僅需要耗費大量的時間,而且分離十分困難,需要滿足體外培養(yǎng)草分枝桿菌素的要求,整體的技術(shù)要求高、實驗周期長。因此,在實際應(yīng)用中,在沒有特殊要求的情況下,不建議采用細(xì)菌分離培養(yǎng)的方式診斷羊副結(jié)核病。

5.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗

在采用酶聯(lián)免疫吸附試驗診斷檢測羊副結(jié)核病的過程中,最為常用的方法是酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)方法。通過該診斷檢測方法,可檢測出病羊血液、血清以及乳液中的副結(jié)核分枝桿菌抗體。該檢測診斷方法的實際操作十分簡單,檢測速度快,檢測條件要求不高,靈敏性、特異性強,因此適合大規(guī)模血清學(xué)檢測診斷或者流行病學(xué)調(diào)查。

5.4 分子生物學(xué)診斷

目前由于副結(jié)核分枝桿菌基因組中的IS900片段具有菌種特異性,所以可利用IS900片段,開展分子生物學(xué)檢測。例如可應(yīng)用PCR技術(shù)檢測出副結(jié)核分枝桿菌的特異性基因,可實現(xiàn)副結(jié)核分枝桿菌亞型分型,并采用PCR檢測診斷技術(shù),同樣有著十分高的特異性和敏感性,實際檢測的效率高,檢測結(jié)果不受外部條件的干擾,實際檢測結(jié)果比較可靠,所以適合大規(guī)模羊副結(jié)核病檢測診斷[3]。

6 防控措施

目前,羊副結(jié)核病并沒有有效的藥物治療方法,所以在防控的過程中,一旦發(fā)現(xiàn)陽性個體,需要及時淘汰。病死羊應(yīng)集中進行焚燒或深埋,做好無害化處理工作。此外,在實際進行羊副結(jié)核病防控時,還應(yīng)采取以下措施。

6.1 隔離與消毒

在發(fā)現(xiàn)疑似患有羊副結(jié)核病的羊后,一方面,應(yīng)加強診斷檢測,盡快確診;另一方面,還需要及時隔離飼養(yǎng)。在確診疑似病例后,須及時淘汰處理病羊。同時針對發(fā)現(xiàn)患病羊的羊舍,做好全面的消殺處理。首先,應(yīng)將羊舍內(nèi)的糞尿徹底打掃干凈,將糞尿統(tǒng)一運往外部進行高溫發(fā)酵處理;然后,對整個羊舍進行清水噴灑,全面清潔;最后,采用消毒液進行噴灑消毒,藥液用量為1 L/m2。針對墻壁、羊舍飼養(yǎng)工具等,可采用3%氫氧化鈉噴灑和刷洗,再用清水沖洗干凈,待干燥后,用0.5%過氧乙酸噴灑消毒。此外,可采用10%漂白粉、3%來蘇兒、5%熱草木灰等作為消毒劑,不同消毒劑交替使用,可更好地保證消毒清潔效果[4]。

6.2 自繁自養(yǎng)

由于羊副結(jié)核病帶來的危害較嚴(yán)重,所以養(yǎng)殖戶應(yīng)遵循自繁自養(yǎng)原則,可杜絕外來疫病的傳入。如果條件不允許,需要從外部引入種羊,一方面,不能從羊副結(jié)核病流行的地區(qū)引入種羊;另一方面,在引入種羊后,還需要加強隔離檢疫,隔離時期不少于1月,須在確保無疾病問題后才能混群飼養(yǎng)。

6.3 飼養(yǎng)與管理

在羊飼養(yǎng)過程中,應(yīng)提供優(yōu)質(zhì)全價飼料,精飼料與粗飼料應(yīng)合理搭配,保障飲水清潔,不提供發(fā)霉飼料。在合理飼喂的基礎(chǔ)上,還應(yīng)在飼料中配給骨粉、礦物質(zhì)和微量元素(鐵、銅、硒),確保羊營養(yǎng)攝入均衡全面[5]。在后續(xù)管理方面,應(yīng)注重營造良好的養(yǎng)殖環(huán)境,要求圈舍通風(fēng)干燥、飼養(yǎng)密度合理。加強對羊應(yīng)激因素的預(yù)防,例如注意關(guān)注外部天氣變化,加強保暖通風(fēng),加強羊舍欄舍防護,避免犬類動物闖入,減少不良應(yīng)激因素。通過采取上述管理措施,確保羊只具備良好的營養(yǎng)狀態(tài),避免造成應(yīng)激,進一步增強羊只免疫力,從而有效避免羊副結(jié)核病發(fā)生。

7 結(jié)束語

羊副結(jié)核病是一種危害較嚴(yán)重的疾病,一旦發(fā)生該病,由于沒有有效的治療手段,需要及時淘汰患病羊,才能避免造成更大的經(jīng)濟損失。為了降低羊副結(jié)核病的發(fā)病率,應(yīng)加強對該疾病的診斷分析,了解具體的致病原,探討相關(guān)的癥狀表現(xiàn),落實有效的診斷以及防控措施,降低羊副結(jié)核病帶來的負(fù)面影響,促進羊養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)實現(xiàn)穩(wěn)定發(fā)展。