巴戟天多糖對(duì)大鼠骨質(zhì)疏松的作用機(jī)制研究

張民珍,羅 文,楊黎艷,鄺慧芳

(海南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院,海南 ?？?570102)

骨質(zhì)疏松(Osteoporosis,OP)是以低骨質(zhì)量和骨組織細(xì)微結(jié)構(gòu)遭破壞為臨床表現(xiàn)的全身性疾病[1]。OP具有較高的發(fā)病率、復(fù)發(fā)率,降低患者生活質(zhì)量[2]。中醫(yī)學(xué)并無(wú)OP病名,醫(yī)學(xué)古代經(jīng)典文獻(xiàn)中有相仿癥狀的病癥記載,例如“骨痿”“骨枯”等。中醫(yī)認(rèn)為,腎精充足則“齒更發(fā)長(zhǎng)”,腎精的盛衰關(guān)乎骨的生長(zhǎng)、發(fā)育、強(qiáng)弱,骨骼強(qiáng)健有力,腎精虧損,骨骼失養(yǎng),產(chǎn)生骨病。中藥巴戟天用來(lái)健骨保腎、消腫止痛,治療骨質(zhì)疏松、股骨頭壞死等骨科疾病。巴戟天為雙子葉屬茜草科植物,又名雞眼藤、三角藤、雞腸風(fēng)等,張景岳在《景岳全書(shū)》中記載:“雖曰足少陰腎經(jīng)之藥,然亦能養(yǎng)心神,安五臟,補(bǔ)五勞,益志氣,助精強(qiáng)陰。治陰痿不起,腰膝疼痛及夜夢(mèng)鬼交,遺精尿池,小腹陰中相引疼痛等證”。陶弘景在《名醫(yī)別錄》中謂其具有“頭面游風(fēng),小腹及陰中相引痛,下氣,補(bǔ)五勞,益精,利男子”?，F(xiàn)代中藥學(xué)總結(jié)了前人的記錄,巴戟天其味甘、辛,性微溫,歸腎、肝經(jīng),具有補(bǔ)腎陽(yáng)、強(qiáng)筋骨、祛風(fēng)濕之功效,用于陽(yáng)痿遺精、月經(jīng)不調(diào)、宮冷不孕、少腹冷痛、筋骨痿軟、風(fēng)濕痹痛。近年來(lái),中醫(yī)在OP治療中呈現(xiàn)顯著優(yōu)勢(shì),OP發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,體內(nèi)環(huán)境、作息規(guī)律、新陳代謝水平及基因遺傳等因素都可能引發(fā)OP[3]。巴戟天多糖為巴戟天的有效活性成分,臨床試驗(yàn)及動(dòng)物模型均證實(shí),其改善骨質(zhì)量作用明顯,且不良反應(yīng)輕微[4-5]。因OP患者的骨密度和骨質(zhì)量下降,增加了骨折風(fēng)險(xiǎn),骨折并發(fā)癥多發(fā)生在50歲以上人群中,男女分別占比1/3、1/5,嚴(yán)重影響患者健康狀態(tài)。口腔中的廢用殘根會(huì)吸收剩余牙槽骨,降低剩余牙槽骨形態(tài),因長(zhǎng)久缺少咀嚼力刺激,骨小梁密度降低、疏松,骨髓間隙變大,弱化甚至喪失咀嚼功能。鈣結(jié)合蛋白-D9k(Calbindin-D9k,CaBp-D9k)是一種與腸道中鈣具有高度貼合性的細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì),主要集中在杯狀細(xì)胞與小腸刷狀緣的吸收細(xì)胞中,參與小腸鈣細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程,受活性維生素D調(diào)節(jié)[6]。骨生物力學(xué)將骨強(qiáng)度和抗骨折能力通過(guò)指標(biāo)檢測(cè)直接反映出來(lái),具有評(píng)價(jià)骨骼特性和抗OP藥物療效作用。本文主要研究巴戟天多糖對(duì)OP大鼠廢用殘根咀嚼功能、CaBp-D9k、骨生物力學(xué)的作用機(jī)制,為相關(guān)研究提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:30只SPF級(jí)SD雌性大鼠,鼠齡4～6周,平均體重(220±20)g,由河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供,大鼠[合格證號(hào)708068、許可證號(hào)SCXK(冀)2018-2-017],大鼠于海南醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心飼養(yǎng),平均溫度(24±2)℃,濕度50%～80%,12 h晝夜交替,正常飲食及攝水,按照《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》規(guī)定進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)藥物:干燥巴戟天根莖購(gòu)自美國(guó) Signal Chemical公司,用10倍溫水浸泡1 h后于75 ℃下熱煎,冷卻得到巴戟天浸膏,加入95%乙醇,配比為1∶4,置于2 ℃冰箱沉淀,經(jīng)離心得巴戟天多糖,經(jīng)低壓凍干、去蛋白、膜濾過(guò)及凝膠柱分離程序得到白色粉末狀巴戟天多糖成品,濃度2.0 g/ml溶液,4 ℃密封保存?zhèn)溆?結(jié)構(gòu)分析由海南醫(yī)學(xué)院中心實(shí)驗(yàn)室完成。

1.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑:TNF-α試劑盒(貨號(hào)ml002953,上海酶聯(lián)生物科技有限公司);IL-6試劑盒(貨號(hào)ml102828,上海酶聯(lián)生物科技有限公司);ALP試劑盒(貨號(hào)ml092964,上海酶聯(lián)生物科技有限公司);CaBp-D9k一抗(貨號(hào)D9K12-S,北京達(dá)科為生物技術(shù)有限公司);鈣結(jié)合蛋白-D28k(Calbindin-D28k,CaBp-D28k)一抗(貨號(hào)PRO-400,上海淳麥生物科技有限公司);二抗IgG[貨號(hào)A21020-1,亞科因(武漢)生物技術(shù)有限公司];GAPDH(批號(hào)C1319-100,北京普利萊基因技術(shù)有限公司)。

1.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器:高速離心機(jī)(型號(hào)GDR525C,深圳市三莉科技有限公司);雙能X線掃描骨密度儀(型號(hào)Dexa Pro-L,徐州品源電子科技有限公司);酶標(biāo)分析儀(型號(hào)RT-6100,Rayto公司);三點(diǎn)彎曲實(shí)驗(yàn)機(jī)(型號(hào) shqx,上海企想檢測(cè)儀器有限公司);顯微CT(型號(hào)nanoVoxel-1000,天津三英精密儀器股份有限公司);免疫分析儀(型號(hào)UNION-A,深圳市亞輝龍生物科技有限公司)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 動(dòng)物模型建立:對(duì)參與實(shí)驗(yàn)的大鼠常規(guī)飼養(yǎng),除正常組外,其余均建立OP大鼠模型。用110 mg/kg苯巴比妥鈉對(duì)大鼠進(jìn)行腹腔注射麻醉,麻醉完成后將大鼠固定于動(dòng)物手術(shù)臺(tái),常規(guī)消毒后從大鼠腰背側(cè)取切口,順子宮切除雙側(cè)卵巢,縫合皮膚,以云南白藥粉做傷口預(yù)防感染藥物,術(shù)后分籠飼養(yǎng)。術(shù)后第4周,采用數(shù)字化快速雙能X線掃描骨密度儀檢測(cè)大鼠右側(cè)股骨的骨密度(Bone mineral density,BMD)值,OP模型均已建立成功[7]。

1.2.2 分組及給藥:30只大鼠按照隨機(jī)數(shù)字表法分為正常組、模型組、巴戟天多糖低劑量組、巴戟天多糖中劑量組、巴戟天多糖高劑量組,每組6只。建模成功后,根據(jù)人與大鼠表面積換算法[8]計(jì)算給藥劑量。對(duì)巴戟天多糖低劑量組、巴戟天多糖中劑量組、巴戟天多糖高劑量組大鼠分別用1 ml注射器灌胃,濃度為50 mg/ml的1、2、3 ml巴戟天多糖溶液,其余組大鼠灌胃約2 ml的蒸餾水。各組大鼠均按每天2次灌胃,連續(xù)7 d。

1.2.3 ELLSA法檢測(cè):檢測(cè)各組大鼠血清腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白細(xì)胞介素6(Interleukin-6,IL-6)、堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)水平。末次灌胃結(jié)束后,抽取各組大鼠腹腔動(dòng)脈血3 ml,取30 μg勻漿離心,15 min后分離上清液,設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、空白孔、反應(yīng)孔并加入不同濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品、稀釋樣品和蛋白裂解物,各50 μl,加酶密封,培養(yǎng)箱37 ℃孵育,1 h后棄去孔內(nèi)液體,甩干洗滌加DAB顯色底物,再入培養(yǎng)箱37 ℃孵育,15 min后加入終止液,多功能酶標(biāo)儀檢測(cè)波長(zhǎng)在450 nm處吸光度值,用ELLSA試劑盒檢測(cè)各組大鼠血清TNF-α、IL-6、ALP水平。

1.2.4 股骨頸BMD、骨鈣、骨磷含量測(cè)定:采用雙能X射線骨密度儀檢測(cè)各組大鼠股骨頸BMD值,BMD測(cè)定完成后,收集股骨置于800 ℃馬弗爐中高溫灰化,采用灰化的標(biāo)本中用乙二胺四乙酸(Ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)滴定法,通過(guò)與金屬離子發(fā)生絡(luò)合反應(yīng),利用金屬指示劑的光學(xué)方法滴定終點(diǎn)處,根據(jù)用量測(cè)定股骨頸中骨鈣、骨磷含量。

1.2.5 廢用殘根牙槽骨骨小梁解剖結(jié)構(gòu)形態(tài)計(jì)量學(xué)指標(biāo)測(cè)定:采用顯微CT掃描大鼠牙槽骨,記錄廢用殘根牙槽骨骨體積分?jǐn)?shù)、骨小梁數(shù)量、骨小梁分離度、骨小梁厚度骨形態(tài)計(jì)量學(xué)指標(biāo)。

1.2.6 骨生物力學(xué)參數(shù)測(cè)定:取大鼠股骨,剔除附著的肌肉組織并用0.9%氯化鈉溶液紗布和錫紙包裹,置于-20 ℃冰箱保存,測(cè)定時(shí),取出放入0.9%氯化鈉溶液于室溫下浸泡,3 h后取流變儀,對(duì)解凍的股骨進(jìn)行加載速度為5 mm/min、跨距為8 mm的三點(diǎn)彎曲實(shí)驗(yàn)。通過(guò)載荷-變形曲線計(jì)算最大載荷、最大橈度、彈性載荷及剛性系數(shù)。

1.2.7 股骨組織CaBp-D9k和CaBp-D28k蛋白表達(dá)測(cè)定:取大鼠股骨組織標(biāo)本剪切為細(xì)小碎片,加入裂解液,于12000 r/min離心10 min,留取上清液,收集蛋白。每100 μl的蛋白混合等體積5×上樣緩沖液,浴箱中100 ℃加熱5 min,待變性發(fā)生后進(jìn)行10%的SDS-PAGE凝膠電泳,通過(guò)轉(zhuǎn)膜、封閉、洗膜后加一抗CaBp-D9k(1∶200)、CaBp-D28k(1∶200),溫度選擇4 ℃孵育過(guò)夜,加入過(guò)氧化物酶抗兔IgG二抗(1∶2500),選擇時(shí)間2 h封閉完成后加入洗滌液進(jìn)行洗滌,10 min/次,重復(fù)3次。用DAB顯色試劑盒在X線膠片感光、顯影、定影完成后在暗室中完成顯色。內(nèi)參以GAPDH蛋白為標(biāo)準(zhǔn),IPP 6.0軟件檢測(cè)蛋白電泳帶灰度值、GAPDH條帶灰度值比值,比較對(duì)比值。

2 結(jié) 果

2.1 各組大鼠血清TNF-α、IL-6、ALP水平比較 見(jiàn)表1。與正常組比較,模型組大鼠TNF-α、IL-6水平升高,ALP含量降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與模型組比較,巴戟天多糖低劑量組、巴戟天多糖中劑量組、巴戟天多糖高劑量組大鼠TNF-α、IL-6水平逐漸降低,ALP含量逐漸升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。巴戟天多糖低劑量組、巴戟天多糖中劑量組、巴戟天多糖高劑量組大鼠組間比較,TNF-α、IL-6水平逐漸降低,ALP含量逐漸升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1 各組大鼠血清TNF-α、IL-6、ALP比較

2.2 各組大鼠股骨頸BMD及骨鈣、骨磷含量比較 見(jiàn)表2。與正常組比較,模型組大鼠股骨頸BMD、骨鈣、骨磷含量降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與模型組比較,巴戟天多糖低劑量組、巴戟天多糖中劑量組、巴戟天多糖高劑量組大鼠股骨頸BMD、骨鈣、骨磷含量逐漸升高,且巴戟天多糖高劑量組大鼠BMD、骨鈣、骨磷含量最高(P<0.05)。

表2 各組大鼠BMD及骨鈣、骨磷含量比較

2.3 各組大鼠骨形態(tài)計(jì)量學(xué)指標(biāo)比較 見(jiàn)表3。與正常組比較,模型組大鼠廢用殘根牙槽骨骨體積分?jǐn)?shù)、骨小梁厚度、骨小梁數(shù)量降低,骨小梁分離度升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與模型組比較,巴戟天多糖低劑量組、巴戟天多糖中劑量組、巴戟天多糖高劑量組大鼠廢用殘根牙槽骨骨體積分?jǐn)?shù)、骨小梁厚度、骨小梁數(shù)量逐漸升高,骨小梁分離度逐漸降低,且巴戟天多糖高劑量組大鼠骨體積分?jǐn)?shù)、骨小梁厚度、骨小梁數(shù)量最高,骨小梁分離度最低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表3 各組大鼠骨形態(tài)計(jì)量學(xué)指標(biāo)比較

2.4 各組大鼠骨生物力學(xué)參數(shù)比較 見(jiàn)表4。與正常組比較,模型組大鼠股骨頸最大載荷、最大橈度、彈性載荷、剛性系數(shù)均低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與模型組比較,巴戟天多糖低劑量組、巴戟天多糖中劑量組、巴戟天多糖高劑量組大鼠股骨頸最大載荷、最大橈度、彈性載荷、剛性系數(shù)逐漸升高,且巴戟天多糖高劑量組大鼠組的最大載荷、最大橈度、彈性載荷及剛性系數(shù)最高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表4 各組大鼠骨生物力學(xué)參數(shù)比較

2.5 各組大鼠股骨組織CaBp-D9k與CaBp-D28k蛋白表達(dá)比較 見(jiàn)表5(圖1)。與正常組比較,模型組大鼠股骨組織CaBp-D9k與CaBp-D28k蛋白表達(dá)均低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與模型組比較,巴戟天多糖低劑量組、巴戟天多糖中劑量組、巴戟天多糖高劑量組大鼠股骨組織CaBp-D9k與CaBp-D28k蛋白表達(dá)逐漸升高,且巴戟天多糖高劑量組大鼠CaBp-D9k與CaBp-D28k蛋白表達(dá)最高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

圖1 各組大鼠CaBp-D9k、CaBp-D28k蛋白電泳圖

表5 各組大鼠股骨組織CaBp-D9k與CaBp-D28k蛋白表達(dá)比較

3 討 論

OP主要表現(xiàn)為BMD減少,骨微結(jié)構(gòu)斷裂[9-10]。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為,巴戟天所含β-蒽醌、2,4-二乙基膽固醇、多糖等活性成分可預(yù)防組織氧化,保護(hù)腎臟,提高成骨細(xì)胞活性[11]。中醫(yī)認(rèn)為,OP由腎精弱骨骼失養(yǎng)引發(fā)[12-13]。巴戟天可滋補(bǔ)腎陽(yáng),益氣強(qiáng)筋骨,平和臟器。巴戟天的多種提取物包括醚類化合物、寡糖及多糖等均可以刺激體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞增殖,對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化發(fā)揮誘導(dǎo)作用,其中巴戟天多糖能夠上調(diào)骨骼內(nèi)礦物質(zhì)及微量元素含量,效果明顯。巴戟天為我國(guó)南方藥材之中較為著名者,以肉質(zhì)根入藥,始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》:“巴戟天,味辛,微溫。生山谷。治大風(fēng)邪氣,陰痿不起,強(qiáng)筋骨,安五臟,補(bǔ)中增志益氣”[14]。《本草綱目》曾介紹:巴戟天,性味甘辛,溫,具有補(bǔ)腎壯陽(yáng)、益精血、強(qiáng)筋骨、明目、消腫等功效,主治腎虛陽(yáng)痿、遺精、早泄、腰膝冷痛、四肢無(wú)力、耳聾、目暗、久咳、癲癇等癥狀。巴戟天包含糖類、有機(jī)酸類以及微量元素等多種功能因子,除具有補(bǔ)腎壯陽(yáng)、祛風(fēng)濕等作用外,在抗抑郁、炎癥、痛感、氧化、衰老及免疫調(diào)節(jié)等方面均有影響。巴戟天為雙子葉屬茜草科植物,屬于酸性多糖,具有糖的特性和三股螺旋結(jié)構(gòu),溶解性較好,不含蛋白質(zhì)或多肽,可強(qiáng)筋骨、安五臟,其有效成分中的巴戟天多糖可刺激成骨細(xì)胞合成、分泌和礦化,恢復(fù)骨骼重建的動(dòng)態(tài)平衡,改善OP。巴戟天從中藥藥理的角度來(lái)看屬于補(bǔ)虛藥,其現(xiàn)代藥理作用的臨床應(yīng)用也很廣泛,對(duì)骨生長(zhǎng)是其重要作用之一。巴戟天含有直接刺激體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞增殖的成分,能夠促進(jìn)成骨細(xì)胞分泌ALP、骨鈣素。巴戟天多糖作為巴戟天活性成分,對(duì)體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞增殖具有促進(jìn)作用,提高分化中成骨細(xì)胞分泌ALP水平,增加骨鈣素,使局部磷酸根PO43-濃度升高,破壞鈣化抑制劑,啟動(dòng)鈣化,增加鈣含量。

本文研究結(jié)果顯示,與模型組比較,巴戟天多糖低劑量組、巴戟天多糖中劑量組、巴戟天多糖高劑量組大鼠BMD、骨鈣、骨磷、ALP含量及CaBp-D9k與CaBp-D28k蛋白逐漸升高,血清TNF-α、IL-6水平逐漸降低,且生物力學(xué)功能改善明顯,說(shuō)明巴戟天多糖可抑制炎癥因子活化,增加大鼠BMD、骨鈣、骨磷及ALP含量,增強(qiáng)廢用殘根的咀嚼功能,并呈劑量依賴性。BMD可反映OP發(fā)展程度,與ALP共同由成骨細(xì)胞分泌合成,作為骨轉(zhuǎn)換和骨形成的特異性指標(biāo)出現(xiàn)。OP發(fā)生后,骨總量減少,骨鈣、骨磷喪失明顯,血清TNF-α、IL-6表達(dá)增高,對(duì)成骨細(xì)胞成熟進(jìn)行抑制,加重骨吸收。咀嚼過(guò)程中,廢用殘根通過(guò)牙周膜作用,將垂直壓力轉(zhuǎn)換成拉力于牙槽骨上,牙槽骨骨小梁受拉力刺激增加,增強(qiáng)骨組織致密性,延緩患牙的牙槽骨吸收。研究表明,巴戟天多糖能夠有效升高OP大鼠BMD含量,恢復(fù)血清磷水平,增加ALP分泌[15]。巴戟天多糖能升高OP大鼠BMD,增加尿鈣、血鈣、血磷含量,促進(jìn)OP恢復(fù)[16]。文獻(xiàn)證實(shí),對(duì)切除卵巢后OP大鼠給予巴戟天多糖干預(yù)后,BMD升高,血清IL-6、TNF-α水平得到抑制,增加血清鈣、磷等微量元素,并呈劑量依賴性,說(shuō)明巴戟天多糖能提高切除卵巢后大鼠BMD,可能通過(guò)降低血清IL-6、TNF-α表達(dá),刺激成骨細(xì)胞成熟,改善OP作用[17]。巴戟天含有豐富的多酚類化合物,如黃酮類和酚酸類,這些化合物具有強(qiáng)大的抗氧化作用,可以中和自由基,增強(qiáng)機(jī)體免疫功能,減少炎癥反應(yīng)和損傷。通過(guò)觀察廢用殘根的骨小梁參數(shù),可以了解骨小梁微觀結(jié)構(gòu)反映的咀嚼能力退化情況。骨生物力學(xué)將經(jīng)典力學(xué)與骨科學(xué)相結(jié)合,對(duì)骨的力學(xué)問(wèn)題進(jìn)行分析,直接反映骨的結(jié)構(gòu)與骨強(qiáng)度、硬度、韌性之間的關(guān)系,最大載荷、彈性載荷反映抵抗破壞能力,剛性系數(shù)、彈性模量代表骨抵抗變形能力。OP會(huì)引發(fā)鈣吸收障礙,降低營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)生物利用度,而CaBp-D9k、CaBp-D28k是腸道鈣主動(dòng)吸收的協(xié)助蛋白,CaBp-D9k、CaBp-D28k活性下降會(huì)加重鈣吸收障礙,促進(jìn)OP發(fā)展。巴戟天具有激活維生素D受體作用,維生素D在人體內(nèi)被激活后,能夠增加腸道對(duì)鈣的吸收。因此,巴戟天通過(guò)激活維生素D受體,可促進(jìn)鈣吸收。研究表明,對(duì)OP大鼠主動(dòng)增強(qiáng)咀嚼功能后,骨體積分?jǐn)?shù)增加,骨小梁厚度、骨小梁數(shù)量升高明顯,降低了骨小梁分離度[18]。咀嚼負(fù)荷減小會(huì)降低生長(zhǎng)期大鼠下頜骨的力學(xué)性能,弱化咀嚼功能[19]。目前,臨床應(yīng)用巴戟天多糖對(duì)OP廢用殘根咀嚼功能的研究較少,巴戟天多糖可能通過(guò)改善OP大鼠廢用殘根牙槽骨骨小梁解剖結(jié)構(gòu)形態(tài)計(jì)量學(xué)指標(biāo),提升咀嚼功能。有研究發(fā)現(xiàn),對(duì)大鼠進(jìn)行彎曲實(shí)驗(yàn)后,正常對(duì)照組大鼠彎曲破壞載荷、彎矩、彎曲應(yīng)力、彈性模量等彎曲性能指標(biāo)均大于OP組,說(shuō)明OP會(huì)對(duì)骨結(jié)構(gòu)力學(xué)產(chǎn)生影響[20],這與本文研究一致。巴戟天多糖可增加大鼠椎骨松質(zhì)骨骨小梁面積,增加股骨最大負(fù)荷和模數(shù),改善去卵巢OP大鼠模型的骨物理學(xué)骨生物力學(xué)和形態(tài)學(xué)指標(biāo),具有治療OP作用[21]。研究顯示,OP大鼠模型的小腸黏膜CaBP-D9k mRNA、CaBP-D28k mRNA表達(dá)水平下降[22]。有研究發(fā)現(xiàn),維生素D3的活性代謝產(chǎn)物1,25二羥維生素D3[1,25-dihydroxy vitamin D3,1,25(OH)2D3]可與維生素D受體結(jié)合,提升CaBp-D9K活性水平,延緩OP發(fā)展,增加CaBp-D9K基因轉(zhuǎn)錄[23]。研究表明,與空白組、假手術(shù)組相比,OP組大鼠血清1,25(OH)2D3水平和小腸CaBp-D9k mRNA表達(dá)降低,說(shuō)明去卵巢大鼠OP的發(fā)生可能與腸黏膜CaBp-D9k mRNA表達(dá)降低所致的鈣吸收障礙密切相關(guān)[24]。通過(guò)增加OP大鼠腸道CaBP-D9k基因表達(dá),增強(qiáng)CaBP-D9k合成,可平衡負(fù)鈣狀態(tài),抑制破骨,促進(jìn)成骨形成[25]。本文認(rèn)為,巴戟天多糖通過(guò)抑制炎癥因子活化,增加骨鈣、磷及BMD、ALP含量,增加鈣離子在機(jī)體彌散速度,促進(jìn)鈣吸收,改善骨生物力學(xué)功能,實(shí)現(xiàn)治療骨質(zhì)疏松目的。

本研究表明,巴戟天多糖對(duì)骨質(zhì)疏松具有明顯保護(hù)作用,為臨床治療OP提供理論依據(jù),但本文存在一定不足,存在時(shí)間及樣本量不足,未進(jìn)行更多實(shí)驗(yàn)組別及實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,可能對(duì)結(jié)果產(chǎn)生一定影響,后期應(yīng)加強(qiáng)合作,擴(kuò)大樣本量,充實(shí)內(nèi)容,為OP研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。