茯苓提取物對(duì)家兔生長(zhǎng)性能及免疫功能的影響

張 梅，郭志利，陳玉芬，王秀敏

（1.石家莊科技信息職業(yè)學(xué)院，河北石家莊 050500；2.石家莊醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校，河北石家莊 050500）

在飼料“全面禁抗”的時(shí)代背景下，天然中草藥提取物（如茯苓多糖、黃芪多糖等）受到行業(yè)廣泛關(guān)注（孫武等，2021）。目前畜牧業(yè)快速發(fā)展，常規(guī)飼料已無(wú)法滿(mǎn)足畜禽養(yǎng)殖的需求，因此，開(kāi)發(fā)非常規(guī)飼料及其添加劑已成為目前畜禽養(yǎng)殖關(guān)注的重點(diǎn)。植物多糖不僅具有來(lái)源廣泛、純天然等優(yōu)勢(shì)，且表現(xiàn)出優(yōu)異的免疫調(diào)節(jié)性能（邢林林等，2022）。其中，茯苓多糖作為茯苓中的主要活性成分之一，在提高畜禽抗氧化性能、增強(qiáng)免疫力等多個(gè)方面發(fā)揮諸多作用（陳麗玲等，2020）。研究表明，在雛雞飼料中添加茯苓多糖能提高雛雞機(jī)體中NK 細(xì)胞的活性，且提升其淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率，進(jìn)一步達(dá)到免疫增強(qiáng)作用（余建國(guó)等，2004）。同樣的，高鵬輝等（2015）發(fā)現(xiàn)，將發(fā)酵法提取的茯苓多糖加入飼料中能改善斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能，且通過(guò)改善斷奶仔豬的免疫功能提升其對(duì)疾病的抵抗能力，從而緩解斷奶仔豬的斷奶應(yīng)激。因此，茯苓多糖作為一種安全、價(jià)格低廉的免疫刺激劑，可以通過(guò)多種途徑增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，在畜禽養(yǎng)殖中得到廣泛應(yīng)用，但當(dāng)前關(guān)于茯苓多糖在家兔上的研究相對(duì)較少。此外，近年來(lái)，由于動(dòng)物疫病頻發(fā)，研發(fā)和投入使用畜禽預(yù)防性免疫增強(qiáng)劑至關(guān)重要。基于此，本文以茯苓中的主要提取物-茯苓多糖為研究對(duì)象，研究不同水平的茯苓多糖對(duì)家兔生長(zhǎng)性能、血清免疫指標(biāo)的影響，為茯苓多糖在家兔生產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供參考。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料與設(shè)計(jì) 茯苓提取物- 茯苓多糖由上海源葉公司提供，茯苓多糖含量為88.21%。采用單因素隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將健康、體重相近的100 只30 日齡的斷奶仔兔隨機(jī)分為4 組，每組5 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5 只。對(duì)照組家兔飼喂基礎(chǔ)（組成及營(yíng)養(yǎng)水平如表1 所示）。試驗(yàn)I、II 和III 組分別在每千克基礎(chǔ)日糧中添加0.5、1.0 和2.0 g 的茯苓多糖，換算添加比例分別為0.05%、0.1% 和0.2%。預(yù)飼期7 d，正試期42 d。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.2 飼養(yǎng)管理 在正式飼養(yǎng)前，對(duì)兔舍進(jìn)行徹底清掃、消殺和通風(fēng)，一周后開(kāi)始正式試驗(yàn)。試驗(yàn)過(guò)程中控制兔舍溫濕度和通風(fēng)情況，保障家兔的正常生長(zhǎng)。對(duì)家兔進(jìn)行自由采食和飲水，定期檢查家兔的健康情況且進(jìn)行及時(shí)診斷。其他清掃工作和消殺工作均按照?qǐng)鰞?nèi)規(guī)定進(jìn)行。

1.3 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.3.1 生長(zhǎng)性能測(cè)定 稱(chēng)量和記錄家兔的初重和末重，計(jì)算平均日增重。此外，通過(guò)稱(chēng)量家兔每天的投料量和剩余量計(jì)算家兔平均日采食量。以平均日采食量和日增重計(jì)算料重比，綜合反映家兔的生長(zhǎng)性能。

1.3.2 免疫指標(biāo)測(cè)定 飼養(yǎng)結(jié)束后每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取兩只家兔，取靜脈血10mL，分離血清后置于-20℃保存。血清IgA、IgG 和IgM 的含量通過(guò)Sysmex（日本）全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行測(cè)定。參照ELISA 試劑盒操作說(shuō)明測(cè)定血清中的IL-2、IL-6、IL-10 和TNF-α 等血清免疫指標(biāo)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 所有數(shù)據(jù)采用Excel 進(jìn)行預(yù)處理，通過(guò)SPSS 20.0 進(jìn)行單因素方差分析，采用LSD 法進(jìn)行多重比較，P＜0.05 表示組間差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 茯苓提取物對(duì)家兔生長(zhǎng)性能的影響 由表2 可以，試驗(yàn)組平均日增重顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），且各試驗(yàn)組之間的差異不顯著（P＞0.05），其中試驗(yàn)I、II 和III 組的平均日增重分別較對(duì)照組顯著增加1.79、1.56 和0.77 g/d（P＜0.05）。所有組別之間的平均日采食量無(wú)顯著差異（P＞0.05），試驗(yàn)組料重比均顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），而各試驗(yàn)組之間的差異不顯著，其中試驗(yàn)I、II 和III 組的料重比分別較對(duì)照組顯著降低4.42%、4.41% 和2.34%（P＜0.05）。不同處理之間的腹瀉率無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表2 日糧中添加不同比例茯苓提取物對(duì)家兔生長(zhǎng)性能的影響

2.2 茯苓提取物對(duì)家兔血清免疫球蛋白含量的影響 由表3 可知，試驗(yàn)組IgA 和IgG 含量顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。各試驗(yàn)組血清IgM 含量和對(duì)照組無(wú)顯著差異（P＞0.05），但均高于對(duì)照組。

表3 日糧中添加不同比例茯苓提取物對(duì)血清免疫指標(biāo)的影響 mg/L

2.3 茯苓提取物對(duì)家兔血清細(xì)胞因子含量的影響 由表4 可知，試驗(yàn)組TNF-α 含量較對(duì)照組顯著降低（P＜0.05），且從各試驗(yàn)組間的差異看，試驗(yàn)II 組的TNF-α 含量最低，試驗(yàn)I 組的TNF-α 含量最高，但都顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）。試驗(yàn)組IL-1β 含量和對(duì)照組無(wú)顯著差異（P＞0.05）。試驗(yàn)II 和III 組IL-6 含量顯著低于對(duì)照組和試驗(yàn)I 組（P＜0.05），試驗(yàn)組IL-10 含量顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），且其中試驗(yàn)II 和III 組的IL-10 含量均顯著高于試驗(yàn)I組（P＜0.05）。

表4 日糧中添加不同比例茯苓提取物對(duì)血清細(xì)胞因子含量的影響 mg/L

3 討論

茯苓多糖是茯苓的主要活性成分，大量研究發(fā)現(xiàn)，茯苓多糖具有抗炎、抗免疫及氧化等生物活性（關(guān)玉婷等，2022 ；張熠璇等，2022 ；蔣逸凡等，2021）。其中，免疫調(diào)節(jié)作為中藥材多糖的主要生物活性之一得到了廣泛的關(guān)注和研究。其中，茯苓多糖在細(xì)胞、體液及黏膜免疫等方面均表現(xiàn)出明顯的增強(qiáng)或修復(fù)作用（陳凱琴等，2022 ；劉星汶等，2021）。因此，茯苓多糖作為植物多糖中的重要一員，不僅在人類(lèi)臨床醫(yī)學(xué)上得到廣泛關(guān)注，而且在畜牧生產(chǎn)中也逐漸被廣泛應(yīng)用。研究表明，添加0.06% 的白術(shù)茯苓多糖能顯著改善斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能，緩解腹瀉率（陳麗玲等，2020）。同時(shí)，龔澤修等（2020）研究發(fā)現(xiàn)，在母豬中添加100 mg/kg 的茯苓多糖能改善母豬和仔豬的血清免疫性能和抗氧化性能。本研究結(jié)果顯示，茯苓多糖能顯著提高家兔的平均日增重，且降低了家兔的料重比，在家兔中添加0.1% 茯苓多糖對(duì)家兔的生長(zhǎng)性能改善效果最佳。

茯苓多糖能通過(guò)提高巨噬細(xì)胞的吞噬活性，調(diào)整T 細(xì)胞亞群的比值來(lái)發(fā)揮其免疫調(diào)節(jié)活性，改善機(jī)體的免疫能力。初宇軒等（2022）研究發(fā)現(xiàn)，添加1% 的茯苓多糖能顯著提升鸚鵡魚(yú)肝臟中非特異性免疫指標(biāo)溶菌酶、AKP 活力，進(jìn)一步改善鸚鵡魚(yú)的免疫能力。同樣也有研究發(fā)現(xiàn)，中添加0.1% 的茯苓多糖能顯著改善肉雞的生長(zhǎng)速度，提高肉雞的免疫指數(shù)（王寬波等，2020）。其中，血清免疫球蛋白質(zhì)水平是影響機(jī)體抵抗外界病毒侵襲的重要指標(biāo)之一。研究發(fā)現(xiàn)，白術(shù)多糖能刺激小鼠產(chǎn)生特異性IgG 抗體，顯著提升小鼠IgG 和IgA 的含量（胡曉蕾等，2006）。此外，孫洲等（2020）發(fā)現(xiàn)，在中添加0.1% 茯苓多糖能顯著提高仔豬血清中的白蛋白、IgG、IgM、IgA 含量，表明其具有顯著的免疫改善效果。本試驗(yàn)結(jié)果表明，家兔中添加不同比例的茯苓多糖能顯著提升IgA 和IgG 的含量，且不同程度地提升IgM 的含量，添加0.1% 茯苓多糖時(shí)，家兔血清中IgA、IgG和IgM 的含量最高，表明在此添加比例下，家兔的免疫性能改善效果最佳。

此外，TNF-α、IL-1、IL-6 等促炎細(xì)胞因子在機(jī)體發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)過(guò)程中發(fā)揮著重要作用（董瑛等，2017）。其中IL-10 能抑制TNF-α、IL-1、IL-6 等分泌，因此，在機(jī)體中起到保護(hù)性抗炎的作用（郭媛媛等，2023）。在本試驗(yàn)中，家兔中添加不同比例的茯苓多糖均能顯著降低TNF-α 和IL-6 的含量，顯著提高IL-10 的含量。這與陳麗玲等（2020）的研究結(jié)果一致，其發(fā)現(xiàn)在基礎(chǔ)日糧中添加0.06% 的白術(shù)多糖能顯著降低斷奶仔豬血清中的腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和白細(xì)胞介素-6（IL-6）含量，顯著提高了血清白細(xì)胞介素-10（IL-10）的含量，有效改善了仔豬的免疫水平。以上結(jié)果表明，中添加適宜的茯苓多糖能有效提升家兔的細(xì)胞免疫水平。

4 結(jié)論

綜上所述，中添加茯苓多糖能提高家兔的平均日增重，降低其料重比，改善機(jī)體的免疫水平。在本試驗(yàn)條件下，家兔中茯苓多糖的適宜添加水平為0.1%。