飼料中添加不同脂肪源對(duì)克氏原螯蝦營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、脂肪酸組成的影響

楊旭紅， 黃 凱 ， 王丹丹， 曹鑫盛， 羅雨蕭， 于 凱， 黃 嬌

（1.廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，廣西南寧 530004； 2.天津贊蘭科技有限公司，天津 300000；3.廣西壯族自治區(qū)水產(chǎn)科學(xué)研究院，廣西南寧 530000）

克氏原螯蝦（Procambarus clarkii），俗稱小龍蝦，屬我國(guó)四大淡水主養(yǎng)蝦類之一，其分類屬甲殼綱（Crustacea）、十足目（Decapoda）、螯蝦科（Cambarus）、原螯蝦屬（Procambarus）（Shen 等，2014；蔡鳳金等，2010）。 2019 年以來(lái)，克氏原螯蝦養(yǎng)殖規(guī)模擴(kuò)增， 其年產(chǎn)量均已超過(guò)200 萬(wàn)t （劉敏等，2021），高性價(jià)比飼料的需求也逐步增大。目前，國(guó)內(nèi)外克氏原螯蝦的研究報(bào)道主要有育種 （宋亮，2012）、養(yǎng)殖模式（程小飛等，2021）、病害防控（霍詩(shī)天等，2022；Cai 等，2022）、 食品加工 （孔金花等，2022；Ye 等，2022）等領(lǐng)域，在飼料脂質(zhì)需求方面多為對(duì)脂肪水平的研究（莫翠琴等，2022；徐維娜等，2011）， 而對(duì)克氏原螯蝦飼料的適宜脂肪源的使用研究較少。

脂肪是水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育不可或缺的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，是體組織的組成成分，為機(jī)體提供能量來(lái)源，補(bǔ)充必需脂肪酸、激素和維生素等（Xu 等，2013）。魚(yú)油含有大量高不飽和脂肪酸， 且二十碳五烯酸（EPA）、二十二碳六烯酸（DHA）含量豐富，是水產(chǎn)飼料主要脂肪源（李愛(ài)杰，1996）。全球水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展， 魚(yú)油產(chǎn)量逐漸不能滿足水產(chǎn)飼料的需求，且價(jià)格波動(dòng)較大。因此，尋找新脂肪源，減少魚(yú)油的使用量，可降低飼料成本（New 等，2002）。而植物油替代魚(yú)油則是一種有效途徑。 相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，植物油對(duì)吉富羅非魚(yú)（Genetic Improvement of Farmed Tilapia，GIFT）（李新等，2016）、 泥鰍（Misgurnus anguillicaudatus）（高堅(jiān)等，2016）、日本沼蝦（Macrobrachium nipponense）（羅娜等，2017）等水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)有較好的促進(jìn)作用。 但也有相關(guān)研究表明， 亞麻籽油和大豆油替代魚(yú)油顯著影響了大菱鲆（Psetta maxima）肌肉的氣味、口感等品質(zhì)（Regost 等，2003）；大豆油替代魚(yú)油后，金頭鯛（Sparus aurata）和丁鯛（Tincatinca）肌肉中的醛類物質(zhì)含量升高且產(chǎn)生泥土味 （Turchini 等，2007；Izquierdo 等，2005）。與相應(yīng)的單一脂肪源相比，混合油更具有良好的生長(zhǎng)效應(yīng)。 陳家林等（2011）研究表明， 飼料中魚(yú)油與椰子油、 玉米油或亞麻油1∶1 混合后使用提高了異育銀鯽 （Carassius auratus gibelio）的生長(zhǎng)。 Lin 等（2007）研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)飼料中只添加魚(yú)油和玉米油時(shí)， 魚(yú)油與玉米油混合顯著增強(qiáng)了石斑魚(yú)（Epinephelussp）的非特異性免疫反應(yīng)。因此，本試驗(yàn)配制不同脂肪源的等氮等脂飼料飼養(yǎng)克氏原螯蝦， 對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分和脂肪酸進(jìn)行分析，以評(píng)價(jià)不同脂肪源的利用效果，為篩選克氏原螯蝦適宜的飼料脂肪源提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 克氏原螯蝦仔蝦來(lái)自廣西大學(xué)水產(chǎn)養(yǎng)殖基地， 試驗(yàn)飼料通過(guò)在相同基礎(chǔ)飼料中分別添加豬油（LO）、豆油（SO）、魚(yú)油（FO）、混合油（MO，F(xiàn)O 和SO 1：1 混合）配制而成，試驗(yàn)組依次標(biāo)記為L(zhǎng)O、SO、FO 和MO 組，飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1 。

表1 飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）%

1.2 試驗(yàn)分組與管理 從孵化的仔蝦暫養(yǎng)馴餌池中共挑選600 尾20 ~ 25 日齡體格健壯、 規(guī)格均勻、初始體質(zhì)量（3.50±0.50）g 的克氏原螯蝦仔蝦進(jìn)行分組。將仔蝦隨機(jī)分配至LO 組、SO 組、FO組和MO 組4 個(gè)試驗(yàn)養(yǎng)殖池，每組設(shè)3 個(gè)平行組，每個(gè)平行放50 尾仔蝦， 試驗(yàn)養(yǎng)殖周期為60 d；每日投喂2 次（06：00 和19：00），日投喂量約為蝦體質(zhì)量的3%。 養(yǎng)殖池水環(huán)境狀況見(jiàn)表2 。

表2 養(yǎng)殖試驗(yàn)條件的主要參數(shù)

1.3 樣品采集與測(cè)定方法 試驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)克氏原螯蝦禁食24 h 處理。 測(cè)定蝦體質(zhì)量、肝胰臟質(zhì)量和肌肉質(zhì)量，并計(jì)算出肉率（肌肉質(zhì)量與蝦體質(zhì)量的比值）和肝胰臟指數(shù)（肝胰臟質(zhì)量與蝦體質(zhì)量的比值）。

物性分析采用TMS-pro 型物性分析儀中Texture profile Analysis（TPA）模式對(duì)各組去殼腹部肌肉樣品進(jìn)行測(cè)定。水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分含量依次根據(jù)《GB 5009.3-2016 食品中水分的測(cè)定》直接干燥法、《GB 5009.5-2016 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》凱氏定氮法、《GB 5009.6-2016 食品中脂肪的測(cè)定》和《GB 5009.4-2016 食品中灰分的測(cè)定》進(jìn)行測(cè)定；脂肪酸采用GC Smart（GC-2018）氣象色譜儀和氣質(zhì)聯(lián)用法測(cè)定。

1.4 數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)均用SPSS 26.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析， 采用單因素方差分析 （one-way ANOVA）與Duncan’s 多重檢驗(yàn)進(jìn)行比較，所有數(shù)據(jù)值均由“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＜0.05 表示差異顯著。

2 試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 飼料脂肪源對(duì)克氏原螯蝦肌肉與肝胰臟質(zhì)量比及質(zhì)構(gòu)的影響 由表3 可知， 飼料脂肪源對(duì)克氏原螯蝦末體質(zhì)量、出肉率、肝胰臟指數(shù)無(wú)顯著影響（P＞0.05）；肌肉與肝胰臟的質(zhì)量比存在顯著差異（P＜0.05），其中MO 組和FO 組質(zhì)量比顯著大于LO 組。

表3 飼料脂肪源對(duì)克氏原螯蝦出肉率、肝胰臟指數(shù)及其比值的影響

由表4 結(jié)果可知，試驗(yàn)各組克氏原螯蝦肌肉硬度、彈性、凝聚性、回復(fù)性及咀嚼性無(wú)顯著差異（P＞0.05）；膠黏性存在顯著差異，其中MO 組和FO 組顯著大于LO 組（P＜0.05）。

表4 飼料脂肪源對(duì)克氏原螯蝦肌肉物性分析指標(biāo)的影響

2.2 飼料脂肪源對(duì)克氏原螯蝦肌肉和肝胰臟營(yíng)養(yǎng)成分的影響 由表5 可知，各組克氏原螯蝦肌肉中水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分無(wú)顯著差異（P＞0.05）；克氏原螯蝦肝胰臟粗蛋白質(zhì)、粗灰分和粗脂肪存在顯著差異，LO 組粗蛋白質(zhì)和粗灰分含量低于SO 組、FO 組和MO 組 （P＜0.05），F(xiàn)O組粗脂肪含量低于其他各試驗(yàn)組（P＜0.05）。

表5 飼料脂肪源對(duì)克氏原螯蝦肌肉和肝胰臟營(yíng)養(yǎng)成分的影響%

2.3 飼料脂肪源對(duì)克氏原螯蝦肌肉脂肪酸組成的影響 由表6 可知， 試驗(yàn)各組間肌肉中C18：2和C18：3 無(wú)顯著差異 （P＞0.05）。 試驗(yàn)FO 組（13.44%）ARA 含量顯著大于LO 組（11.21%）、SO組（11.50%）和MO 組（12.12%）（P＜0.05）。 試驗(yàn)MO 組 （9.89% ）EPA 含量顯著大于LO 組（6.99%）、SO 組 （7.64%） 和FO 組 （8.73%）（P＜0.05）。試驗(yàn)FO 組（5.15%）DHA 含量顯著大于LO組（2.05%）、SO 組（3.26%）和MO 組（4.03%）（P＜0.05）。 試驗(yàn)FO 組（47.31%）和MO 組（45.15%）∑PUFA 含量顯著大于LO 組 （37.54%） 和SO 組（39.95%）（P＜0.05）。

表6 飼料脂肪源對(duì)克氏原螯蝦肌肉脂肪酸組成的影響%

2.4 飼料脂肪源對(duì)克氏原螯蝦肝胰臟脂肪酸組成的影響 由表7 可知，試驗(yàn)各組間肝胰臟中C18：2、C18：3 無(wú)顯著差異（P＞0.05）。 試驗(yàn)FO 組（4.09%）和MO 組（3.76%）ARA 含量與LO 組（2.31%）和SO（3.43%） 存在顯著差異 （P＜0.05）。 試驗(yàn)FO 組（2.23%）EPA 含量顯著大于LO 組（1.06%）、SO 組（1.18%）和MO 組（1.79%）（P＜0.05）。 試驗(yàn)FO 組（5.12%）DHA 含量顯著大于LO 組（2.97%）、SO 組（3.66%）和MO 組（4.55%）（P＜0.05）。 試驗(yàn)FO 組（38.55%）和MO 組（36.95%）∑PUFA 含量顯著大于LO 組（30.33%）和SO 組（33.51%）（P＜0.05）。

表7 飼料脂肪源對(duì)克氏原螯蝦肝胰臟脂肪酸組成的影響%

3 討論

3.1 飼料脂肪源對(duì)克氏原肌肉螯蝦質(zhì)構(gòu)特性的影響 本試驗(yàn)結(jié)果表明， 魚(yú)油組和混合油組克氏原螯蝦肌肉的膠黏性顯著高于豬油組。 胡芬等（2011）和李艷青等（2012）等在研究魚(yú)肉質(zhì)構(gòu)特性中發(fā)現(xiàn)， 肌肉的質(zhì)構(gòu)特性與蛋白質(zhì)和脂肪有關(guān)。Hatae 等（1990）在研究不同種類魚(yú)體肌肉蛋白質(zhì)的膠原物質(zhì)對(duì)肉質(zhì)影響中指出， 魚(yú)肉硬度和膠原物質(zhì)含量呈正相關(guān)。 Srinivasan 等（1997）和Bhat等（2009）的研究則進(jìn)一步表明，羥基氧化可破壞蛋白結(jié)構(gòu)的完整性， 發(fā)生變性的蛋白不能再形成穩(wěn)定的界膜而致使蛋白與脂肪交聯(lián)的能力下降，蛋白質(zhì)的氧化影響了肌原纖維蛋白間交聯(lián)從而阻礙凝膠形成。

3.2 飼料脂肪源對(duì)克氏原螯蝦營(yíng)養(yǎng)成分的影響本試驗(yàn)結(jié)果表明， 飼料脂肪源對(duì)克氏原螯蝦肌肉的粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗灰分無(wú)顯著差異，這與異育銀鯽（陳家林等，2011）及紅羅非魚(yú)（Oreochromis spp）（陳濤等，2017）研究上結(jié)果相似。但也有相關(guān)研究表明， 在彭澤鯽 （Carassius auratus var Pengze） （ 丁立云等，2021） 及西伯利亞鱘（Acipenser baerii）（周章等，2023） 肌肉中粗蛋白質(zhì)及粗脂肪含量有較大差異性， 造成這種差異的原因可能與魚(yú)蝦種類、 飼料的營(yíng)養(yǎng)水平和不同生境有關(guān)。

本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)， 飼料脂肪源對(duì)克氏原螯蝦肝胰臟中粗蛋白質(zhì)、 粗脂肪和粗灰分含量有顯著影響，這與郭楓（2019）、趙娟等（2013）和王恒等（2019） 分別研究脂肪源對(duì)黃鱔 （Monopterus albus）、擬穴青蟹幼蟹（Scylla paramamosain）、羅氏沼蝦（Macrobrachium rosenbergii）的體組成影響結(jié)果相似。 克氏原螯蝦肝胰臟粗脂肪含量以豬油最高。 這可能與豬油中含有更低的不飽和脂肪酸有關(guān)， 因?yàn)椴伙柡椭舅崮芷鸬浇档腕w脂沉積的作用（朱大世，2005；趙華等，2004）。

3.3 飼料脂肪源對(duì)克氏原螯蝦肌肉和肝胰臟脂肪酸的影響 研究顯示， 機(jī)體脂肪酸的組成受飼料脂肪源的直接影響 （Shapawi 等，2008；Ng 等，2004）。 本試驗(yàn)結(jié)果顯示，豬油、豆油、魚(yú)油和混合油對(duì)克氏原螯蝦肝胰臟和肌肉的脂肪酸組成有顯著影響。 李思萌等（2015）和王健懿等（2017）的研究結(jié)果也表明， 動(dòng)物機(jī)體脂肪酸組成的差異性主要是與魚(yú)油、 豆油和豬油等脂肪源中的脂肪酸組成有關(guān)，結(jié)合本試驗(yàn)結(jié)果，說(shuō)明豆油中單不飽和脂肪酸及魚(yú)油中多不飽和脂肪酸影響了克氏原螯蝦的脂肪酸組成。

多不飽和脂肪酸具有參與動(dòng)物體內(nèi)細(xì)胞膜流動(dòng)性的調(diào)節(jié)和促進(jìn)幼體生長(zhǎng)等作用，而甲殼動(dòng)物自身合成不飽和脂肪酸的能力較弱，所以需要從食物攝入（田娟等，2017；Cossins 等，1998）。 魚(yú)油相對(duì)于豆油和豬油，多不飽和脂肪酸中的EPA 和DHA 含量相對(duì)豐富。 本試驗(yàn)結(jié)果表明，魚(yú)油組克氏原螯蝦肌肉和肝胰臟的EPA 和DHA 等多不飽和脂肪酸含量顯著高于其他試驗(yàn)組。這說(shuō)明魚(yú)油滿足了幼蝦生長(zhǎng)的脂肪酸需求和促進(jìn)蝦體肌肉及肝胰臟等部位的EPA 和DHA 等多不飽和脂肪酸的積累。

豆油與魚(yú)油和豬油相比， 富含有油酸、 亞油酸、亞麻酸等必需脂肪酸，具有促進(jìn)蝦類生長(zhǎng)和脂肪酸代謝等重要功能（Merican 等，1996； 徐學(xué)良等，1992）。試驗(yàn)結(jié)果顯示，豆油組克氏原螯蝦中油酸（C18：1）和棕櫚油酸（C16：1）等單不飽和脂肪酸含量顯著高于其他試驗(yàn)組。 這可能與飼料脂肪源中亞麻酸和亞油酸比值影響去飽和酶有關(guān)，因?yàn)槿ワ柡兔笗?huì)影響油酸和棕櫚油酸等不飽和脂肪酸的生成過(guò)程。 與Blanchard 等（2008）在歐亞鱸魚(yú)上的研究結(jié)果類似。Xu 等（2002）通過(guò)體外示蹤試驗(yàn)證實(shí)了這個(gè)說(shuō)法。與單一脂肪源相比，混合油富含有EPA 、DHA、油酸、亞油酸和亞麻酸等不飽和脂肪酸。 飼料中搭配合理的不飽和脂肪酸比例能夠降低飼料系數(shù)。 飼料中C18：1n9、 亞油酸、EPA、DHA，其中任何一種含量較低時(shí)都會(huì)提高飼料消耗，不利于降低飼養(yǎng)成本（林向東等，2011）。

不同脂肪酸在不同組織中的沉積率有所不同， 肌肉中C18∶0 與C22∶0 含量高于它們?cè)诟我认僦械暮浚?肌肉中單不飽和脂肪酸含量比相對(duì)應(yīng)的飼料中的含量要低， 這表明了這些脂肪酸是根據(jù)各個(gè)組織的需要和功能進(jìn)行選擇性沉積。 肌肉中C18∶2n-6 和C18∶3n-3 含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于它們?cè)诟我认僦械暮?，而C20∶4n-6、EPA、DHA 含量在肌肉中的含量高于它們?cè)诟我认僦械暮俊?這些結(jié)果表明C18∶2n-6 和C18∶3n-3 在肝胰腺沉積率較大，而HUFA 則在肌肉中沉積率較大。 有研究發(fā)現(xiàn)，碳鏈延長(zhǎng)的酶系存在于肝細(xì)胞的微粒系統(tǒng)和線粒體內(nèi)（周順伍，2004），Kanazawa 等（1979）和任澤林等（1994）發(fā)現(xiàn)，C18∶2n-6、C18∶3n-3 可以通過(guò)去飽和作用以及碳鏈延長(zhǎng)轉(zhuǎn)化為HUFA。本試驗(yàn)結(jié)果表明，C18∶2n-6 和C18∶3n-3 在對(duì)蝦肝胰腺內(nèi)通過(guò)去飽和和碳鏈延長(zhǎng)作用在對(duì)蝦體內(nèi)轉(zhuǎn)化為HUFA運(yùn)送至肌肉組織中與上述結(jié)果相一致。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，4 種脂肪源均能影響蝦體中肌肉與肝胰臟營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和脂肪酸組成。 但豬油含有高飽和脂肪酸，不易消化；而豆油缺乏EPA和DHA，不能滿足機(jī)體需要；魚(yú)油富含機(jī)體所需的必需脂肪酸，但市場(chǎng)價(jià)格昂貴。而魚(yú)油+豆油1：1 在基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和脂肪酸組成均與魚(yú)油相近。故推薦魚(yú)油+豆油1：1 作為克氏原螯蝦的飼料脂肪源。