不同溫度下PEG模擬干旱對瀕危植物狹葉坡壘種子萌發(fā)的影響

梁惠子 楊繼生 覃毅 潘韋虎 肖玉菲 黃榮林 王仁杰 蔣燚 劉雄盛

摘 要： ???狹葉坡壘（Hopea chinensis）種子為典型的頑拗性種子。為探究種子萌發(fā)對溫度和水分的適應(yīng)性，該研究在人工氣候培養(yǎng)箱內(nèi)設(shè)置3種溫度（15、20、25 ℃），采用6個聚乙二醇（PEG-6000）濃度（0%、5%、10%、15%、25%和35%）模擬干旱脅迫處理，研究狹葉坡壘種子的萌發(fā)特性。結(jié)果表明：（1）溫度對種子萌發(fā)具有顯著影響。同一干旱脅迫濃度下，種子的萌發(fā)率、萌發(fā)勢、萌發(fā)指數(shù)、胚根長、芽長和活力指數(shù)隨著溫度升高呈上升趨勢，萌發(fā)時滯隨溫度升高而降低，萌發(fā)歷期隨溫度升高而波動性上升。（2）干旱脅迫對種子萌發(fā)具有顯著影響。同一溫度下，種子的萌發(fā)率、萌發(fā)勢、萌發(fā)指數(shù)、萌發(fā)歷期、胚根長、胚芽長和活力指數(shù)隨著干旱脅迫程度加重呈降低的趨勢，萌發(fā)時滯隨干旱脅迫程度加重而升高。（3）溫度和干旱脅迫的交互作用對種子萌發(fā)具有顯著影響。干旱脅迫下，不同溫度條件下種子萌發(fā)的表現(xiàn)不同。在35% PEG-6000脅迫下，20 ℃和25 ℃時，種子萌發(fā)率分別為8.89%和15.55%，顯著高于15 ℃（0%）。綜上所述，適宜種子萌發(fā)的溫度為20 ℃和25 ℃，適宜幼苗早期生長最佳溫度為25 ℃；干旱程度越大，種子萌發(fā)受到的抑制作用越強(qiáng)，干旱脅迫對種子萌發(fā)的影響高于溫度因素，適當(dāng)增溫可緩解干旱脅迫對種子萌發(fā)的抑制作用。

關(guān)鍵詞： ?瀕危植物， 狹葉坡壘， 溫度， 干旱脅迫， 種子萌發(fā)

中圖分類號： ??Q945

文獻(xiàn)標(biāo)識碼： ???A

文章編號： ??1000-3142（2024）01-0068-09

Effects of simulated drought by PEG-6000 on the

germination of Hopea chinensis seeds under

different temperature conditions

LIANG Huizi1， YANG Jisheng1， QIN Yi2， PAN Weihu2， XIAO Yufei1，

HUANG Ronglin1， WANG Renjie1， JIANG Yi1， LIU Xiongsheng1*

（ 1. Guangxi Key Laboratory of Superior Trees Resource Cultivation， Guangxi Forestry Research Institute， Nanning 530002， China;

2. Guangxi Fangcheng Golden Camellias National Nature Reserve， Fangchenggang 538021， Guangxi， China ）

Abstract： ??Hopea chinensis is distributed in China and its seeds are typically reclacitrant. In order to investigate the germination adaptability of seeds to temperature and moisture， we carried out an experiment with three different constant temperatures （15， 20， 25 ℃） controlled by artificial climate incubators， and used six polyethylene glycol （PEG-6000） ?concentrations （0%， 5%， 10%， 15%， 25% and 35%） ?to simulate drought stress. The germination characteristics of these seeds were carefully examined. The results were as follows： （1） Temperature exerted a significant influence on seed germination. Regardless of the level of drought stress applied， higher temperatures positively affected the germination percentage， germination energy， germination index， radicle length， sprout length and vitality index of seeds， higher temperatures led to shorter germination delay and increased fluctuations in the germination duration. （2） Drought stress had a significant impact on seed germination. Under identical temperature conditions， increasing levels of drought stress resulted in decreasing of ?germination percentage， germination energy， germination index， germination duration， radicle length， sprout length and vitality index of seeds. Moreover， higher levels of drought stress led to longer germination delay of seeds. （3） The interaction between temperature and drought stress had a significant influence on seed germination. Under drought stress， seed germination exhibited different responses under different temperature conditions. Specifically， under conditions where a PEG-6000 concentration of 35% was applied as drought stress treatment， the germination percentage at temperatures of 20 ℃ and 25 ℃ were significantly higher than those observed at 15 ℃ （8.89% and 15.55% compared to lower percentage at 15 ℃）. However， it was important to note that when subjected to both 35% PEG-6000 and a temperature of 15 ℃， the seeds no longer germinate. In summary， our results indicate that the suitable temperatures for seed germination are identified as being at ?20 ℃ and 25 ℃. It is determined that the most favorable temperature for early seedling growth is 25 ℃. As the drought stress intensifies， the inhibitory effect on seed germination become stronger， the effect of drought stress on seed germination is higher than that of temperature. Additionally， moderate warming can help alleviate the inhibitory effect of drought stress on seed germination.

Key words： ?Endangered plant， Hopea chinensis， temperature， drought stress， seed germination

種子萌發(fā)是植物種群自然更新的重要階段，對外界環(huán)境壓力的反應(yīng)最為敏感（李小雙等，2007）。種子能否萌發(fā)、出苗受到多種生態(tài)因子的綜合影響（魚小軍等，2006），它對環(huán)境變化的適應(yīng)能力是植物適應(yīng)環(huán)境的重要體現(xiàn)（雷春英等，2020），與植物本身的特性和適應(yīng)環(huán)境的生態(tài)策略有關(guān)（魚小軍等，2006；李小雙等，2007）。不同植物種子萌發(fā)所需的條件不同，對環(huán)境的適應(yīng)性表現(xiàn)不同。因此，探究生態(tài)因子對種子萌發(fā)的影響及其機(jī)制一直都是研究熱點（雷春英等，2020；范翠枝等，2021；關(guān)正等，2022）。

影響種子萌發(fā)的重要生態(tài)因子包括溫度和水分。有的植物種子在變溫條件下利于萌發(fā)（關(guān)正等，2022），有的則為恒溫、高溫（魚小軍等，2004）或低溫（盛海燕等，2004）。不同植物種子在不同水分脅迫條件下的萌發(fā)行為存在差異，眾多學(xué)者通過PEG-6000水溶液模擬干旱脅迫對植物種子萌發(fā)期的抗旱性進(jìn)行研究（李志萍等，2013；閆興富等，2016）。低濃度干旱脅迫可促進(jìn)種子萌發(fā)（汪建軍等，2016），如5%～10%濃度的PEG-6000溶液可促進(jìn)水杉（Metasequoia glyptostroboides）種子發(fā)芽和出苗整齊（吳漫玲等，2020），5%～10% PEG-6000處理促使小溪洞杜鵑（Rhododendron xiaoxidongense）種子打破休眠（李丹丹等，2022）。隨著PEG-6000溶液濃度增加，種子萌發(fā)受到抑制作用增強(qiáng)（汪建軍等，2016；陳士超等，2017），種子發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)等萌發(fā)指標(biāo)隨之下降（劉雪松等，2019）。溫度和水分的交互作用對種子萌發(fā)具有綜合影響，如適當(dāng)增溫可緩解較高濃度PEG溶液模擬干旱脅迫對歪頭菜（Vicia unijuga）種子萌發(fā)的抑制作用（唐偉和南志標(biāo)，2019），在較低溫度下檸條錦雞兒（Caragana korshinskii）種子對干旱脅迫的耐受性最強(qiáng)（閆興富等，2016）。研究種子萌發(fā)所需的溫度和水分條件，尤其是瀕危植物種子，有助于了解其萌發(fā)特性，掌握種群動態(tài)、調(diào)控與更新、生態(tài)適應(yīng)性等（Steven， 1991），可為揭示其瀕危機(jī)制、制定種群保護(hù)與恢復(fù)策略提供理論依據(jù)（張俊杰等，2018）。

狹葉坡壘（Hopea chinensis）是龍腦香科（Dipterocarpaceae）坡壘屬（Hopea）常綠喬木，是我國二級重點保護(hù)野生植物，全國極小種群物種，被世界自然保護(hù)聯(lián)盟（International Union For Conservation of Nature）列為極危（CR）物種。目前，對狹葉坡壘的研究集中在種群生態(tài)（黃仕訓(xùn)等，2008a）、光合特性（莫凌等，2009）、幼苗生理特性（周太久等，2013）、傳粉生物學(xué)（盧清彪等，2020）、野外種子分布格局及種子萌發(fā)特性（唐文秀等，2009）和種子生理特性（黃寧等，2022）等方面，以上研究對狹葉坡壘的種群生態(tài)學(xué)和生物學(xué)特性有了進(jìn)一步的了解。狹葉坡壘種子生物學(xué)特性研究表明，種子含水量高，無休眠期，在濕熱環(huán)境中易萌發(fā)（黃仕訓(xùn)等，2008b）。在自然生境中，成熟散落于巖石上的種子因風(fēng)干快速失水而失去活力（唐文秀等，2009）。黃寧等（2022）研究表明，自然脫水第8天時，種子萌發(fā)率僅為51.67%，接近半致死，干旱可能是影響種子萌發(fā)的重要因素之一。已有研究發(fā)現(xiàn)，種子在保濕條件12～13 ℃下貯藏，延遲至25 d后播種，發(fā)芽率低，僅為37%（黃仕訓(xùn)等，2008b），并且狹葉坡壘種子于12月至翌年1月成熟，此時正值廣西西南地區(qū)的冬季，溫度較低，低溫可能是影響種子萌發(fā)的另一個重要因素。狹葉坡壘區(qū)系具有熱帶性質(zhì)，萌發(fā)環(huán)境需濕熱條件，然而，目前溫度和水分條件對狹葉坡壘種子萌發(fā)的影響尚不清楚。鑒于此，本研究以狹葉坡壘種子為研究對象，采用不同溫度和不同濃度PEG-6000溶液模擬干旱脅迫處理的方法，對種子的萌發(fā)特性進(jìn)行分析，擬探討以下問題：（1）狹葉坡壘種子在不同溫度和不同干旱脅迫處理下的適應(yīng)機(jī)制；（2）種子萌發(fā)對不同溫度和不同干旱脅迫的響應(yīng)策略；（3）不同溫度與不同干旱脅迫處理及二者交互作用下，種子萌發(fā)的差異性。以期探究種子萌發(fā)所需的適宜生態(tài)條件，為狹葉坡壘種質(zhì)資源保存和苗木繁育提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗種子于2020年1月采自廣西壯族自治區(qū)防城金花茶國家級自然保護(hù)區(qū)南山保護(hù)站（108°02′33″ E、21°43′34″ N，海拔196 m，坡向朝南，坡度10°），供試種子千粒重為470.73 g，含水量為42.57%。所有種子均為母樹上自然脫落期間而采集的成熟種子。采集后將種子混合均勻，立即帶回廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院廣西優(yōu)質(zhì)用材林資源培育重點實驗室，去除雜質(zhì)后立即開展萌發(fā)試驗。所有采集活動均獲得當(dāng)?shù)毓芾聿块T和主管部門許可。

1.2 試驗方法

1.2.1 不同溫度下PEG-6000模擬干旱脅迫對狹葉坡壘種子萌發(fā)影響試驗[HTSS] 參照陳士超等（2017）的方法，分別配置PEG-6000濃度為0%（蒸餾水）、5%、10%、15%、25%和35%6個模擬干旱脅迫處理，每個處理設(shè)置3個重復(fù)，每個重復(fù)選擇30粒去除果翅的健康種子，用0.2%高錳酸鉀溶液浸泡消毒5 min，流水沖洗后置于蒸餾水中浸泡24 h。之后將種子均勻播于鋪有2 層濾紙的120 mm培養(yǎng)皿中，分別加入PEG-6000處理液10 mL，根據(jù)狹葉坡壘原生境的氣候條件及預(yù)實驗結(jié)果，分別置于15、20、25 ℃，3 000 lx 12 h·d-1，80% 相對濕度（relative humidity，RH）的培養(yǎng)箱內(nèi)。每2 d更換1次濾紙和PEG-6000溶液。

[HTK]1.2.2 狹葉坡壘種子活力和萌發(fā)特性試驗[HTSS] 每天定時觀察記錄種子萌發(fā)情況，以胚根生長到種子長1/2時視為發(fā)芽。20 d試驗結(jié)束，測定胚根長（redicle length，Lr）和芽長（sprout length，Ls）。種子萌發(fā)指標(biāo)包括萌發(fā)率（gemination percentage，GP）、萌發(fā)指數(shù)（germination index，GI，從試驗開始培養(yǎng)到第一顆種子萌發(fā)所需的時間）、萌發(fā)時滯（germination delay，GD）、萌發(fā)歷期（germination duration，D，種子萌發(fā)過程所需的時間）、萌發(fā)勢（germination energy，GE）以及活力指數(shù)（vitality index，VI），計算公式如下（閆興富等，2016；雷春英等，2020）：

GP＝（發(fā)芽種子總數(shù)/供試種子數(shù)）×100%[JY]（1）

GI＝∑（時間t天萌發(fā)的種子數(shù)/對應(yīng)的萌發(fā)天數(shù)）[JY]（2）

GE＝（7 d內(nèi)正常發(fā)芽種子數(shù)/供試種子數(shù)）×100%[JY]（3）

VI＝GI×（Lr＋Ls）[JY]（4）

式中， Lr和Ls分別為萌發(fā)試驗結(jié)束時胚根長（cm）和芽長（cm）（本研究中幼苗根長為胚根及胚軸的總長度）。

1.3 數(shù)據(jù)分析

用SPSS 19.0對不同處理下狹葉坡壘種子各萌發(fā)指標(biāo)進(jìn)行方差分析（ANOVA）和多重比較（采用鄧肯氏新復(fù)極差法），采用雙因素方差分析探究溫度和干旱脅迫交互作用對種子萌發(fā)的影響（P＜0.05）。以上統(tǒng)計分析顯著性水平均設(shè)定為α= 0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同溫度對種子萌發(fā)的影響

由表1可知，0% PEG-6000濃度處理下，20 ℃和25 ℃時種子萌發(fā)率、萌發(fā)勢、萌發(fā)指數(shù)、胚根長均顯著高于15 ℃，萌發(fā)時滯均顯著低于15 ℃，其中萌發(fā)率分別比15 ℃時顯著高59%和56%，萌發(fā)勢比15 ℃時顯著高110%和120%，萌發(fā)指數(shù)比15 ℃時顯著低87%和99%，萌發(fā)時滯比15 ℃時顯著低29%和50%，胚根長比15 ℃時顯著高21%和46%，活力指數(shù)比15 ℃時顯著高344%和495%。25 ℃時種子萌發(fā)歷期、胚根長、芽長和活力指數(shù)均最高，分別為14.3 d、6.28 cm、6.56 cm、27.62，其中萌發(fā)歷期、胚根長和活力指數(shù)顯著大于其余2種溫度。

5% PEG-6000脅迫下，20 ℃和25 ℃時種子萌發(fā)率、萌發(fā)勢均顯著高于15 ℃，萌發(fā)率分別比15 ℃時顯著高42%和46%，萌發(fā)勢分別比15 ℃時顯著高100%和111%；25 ℃時種子萌發(fā)指數(shù)、萌發(fā)歷期、胚根長、芽長和活力指數(shù)均最高，其中萌發(fā)指數(shù)、萌發(fā)歷期、胚根長和活力指數(shù)顯著高于其余2種溫度。10% PEG-6000脅迫下，20 ℃和25 ℃時種子萌發(fā)率、萌發(fā)勢、萌發(fā)指數(shù)均顯著高于15 ℃，萌發(fā)率分別比15 ℃時顯著高48%和33%，萌發(fā)勢分別比15 ℃時顯著高175%和200%，萌發(fā)指數(shù)分別比15 ℃時顯著高77%和75%，萌發(fā)時滯均比15 ℃時顯著低35%，萌發(fā)歷期比15 ℃時顯著高44%和12%；25 ℃時種子胚根長、芽長和活力指數(shù)均最高，其中胚根長和活力指數(shù)顯著高于其余2種溫度。

15% PEG-6000脅迫下，3種溫度處理下種子萌發(fā)率均低于50%，種子達(dá)半致死率。25 ℃時種子萌發(fā)勢、胚根長、芽長和活力指數(shù)均最高。25% PEG-6000脅迫下，25 ℃時種子萌發(fā)率、萌發(fā)指數(shù)、胚根長和活力指數(shù)最高，種子萌發(fā)時滯最低，25 ℃萌發(fā)時滯比20 ℃和15 ℃時顯著低23%和28%，胚根長比20 ℃和15 ℃時顯著高21%和35%，活力指數(shù)比15 ℃顯著增高142%。35% PEG-6000脅迫下，3種溫度間的萌發(fā)率與其他濃度的干旱脅迫相較最低，僅在20 ℃和25 ℃條件下種子萌發(fā)且萌發(fā)率分別為8.89%和15.55%，萌發(fā)受到嚴(yán)重抑制。

2.2 不同PEG-6000濃度模擬干旱脅迫對種子萌發(fā)的影響

不同干旱程度對狹葉坡壘種子萌發(fā)的影響見表1。15 ℃時0%和5%脅迫下萌發(fā)率、萌發(fā)勢、萌發(fā)指數(shù)、胚根長和活力指數(shù)顯著高于其余PEG-6000濃度處理；0%、5%、10%脅迫下種子萌發(fā)時滯顯著低于其余3個脅迫濃度；0%、5%、10%、15%脅迫濃度處理下種子萌發(fā)歷期顯著高于其余2個脅迫濃度。

20 ℃時，0%濃度處理下種子萌發(fā)率、萌發(fā)指數(shù)和活力指數(shù)均顯著高于其余脅迫濃度；0%、5%、10%脅迫下種子萌發(fā)時滯顯著低于其余3個脅迫濃度；0%和5%脅迫下萌發(fā)歷期顯著低于10% PEG-6000脅迫，隨著干旱程度增加呈先升后降的趨勢。

25 ℃時，0%和5%脅迫下萌發(fā)率、萌發(fā)指數(shù)、胚根長、芽長和活力指數(shù)顯著高于其余脅迫濃度，萌發(fā)時滯顯著低于其余脅迫濃度；0%濃度處理下種子萌發(fā)勢、萌發(fā)歷期均顯著高于其余脅迫濃度。

2.3 溫度和PEG-6000模擬干旱脅迫對種子萌發(fā)的相互作用

由表2可知，溫度、PEG-6000模擬干旱脅迫及兩者間的交互作用對狹葉坡壘種子8個萌發(fā)指標(biāo)均有極顯著影響（P＜0.01）。不同溫度條件下，種子萌發(fā)對PEG-6000脅迫所表現(xiàn)的差異反映了溫度和PEG-6000模擬干旱脅迫對狹葉坡壘種子萌發(fā)的交互影響。例如，5% PEG-6000脅迫下，20 ℃和15 ℃種子萌發(fā)率分別為82.22%和57.78%，兩者相差24.44%；10% PEG-6000脅迫下，20 ℃和15 ℃種子萌發(fā)率分別為68.89%和46.67%，兩者相差22.22%，較5% PEG-6000脅迫下兩者差異降低（表1）。

3 討論與結(jié)論

種子萌發(fā)需要適宜的生態(tài)條件， 各個生態(tài)因

子的相互作用影響著種子活力（魚小軍等，2006）。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，20 ℃和25 ℃時，狹葉坡壘種子萌發(fā)率、萌發(fā)勢、萌發(fā)指數(shù)、活力指數(shù)較高，胚根和胚芽較長，萌發(fā)時滯較短；而15 ℃時，萌發(fā)率、萌發(fā)勢、萌發(fā)指數(shù)和活力指數(shù)最低，胚芽不生長，萌發(fā)受到抑制，以上萌發(fā)指標(biāo)表明20～25 ℃是狹葉坡壘種子萌發(fā)的適宜溫度條件。其中，20 ℃時種子萌發(fā)歷期顯著低于25 ℃，萌發(fā)時間最短，表明20 ℃時全部種子萌發(fā)時間加快，25 ℃時種子于第2天開始萌發(fā)，胚根和胚芽最長，說明25 ℃為早期幼苗最佳生長溫度。適宜的溫度保證種子體內(nèi)酶具有較高活性，使得酶促反應(yīng)速度、呼吸作用和種子內(nèi)部貯藏的營養(yǎng)物質(zhì)分解加快，滿足種子萌發(fā)所需的物質(zhì)和能量（秦愛麗等，2020）。若外界溫度過高或過低，會改變種子體內(nèi)水解酶性質(zhì)，影響膜透性和膜結(jié)合蛋白的活性，從而抑制種子萌發(fā)（宋兆偉等，2010）。不同植物的最適萌發(fā)溫度不同，與其原生境密不可分，適時萌發(fā)的機(jī)制是植物對原生境適應(yīng)性的體現(xiàn)（李陽等，2021）。狹葉坡壘在15 ℃時萌發(fā)受到抑制，與望天樹（Shorea wantianshuea）、番龍眼（Pometia pinnata）等熱帶頑拗性種子不耐低于15 ℃的低溫結(jié)果相一致（文彬等，2002；閆興富和曹敏，2006），可能是因為溫度較低會造成低溫?fù)p傷，說明其不適合在溫度較低的地區(qū)生長。黃仕訓(xùn)等（2008b）研究表明，狹葉坡壘僅分布在廣西十萬大山海拔低于600 m的區(qū)域，北熱帶季風(fēng)氣候區(qū)的氣溫為其提供了生長所需條件，也限制了分布范圍。種子成熟于冬季，在分布區(qū)的自然生境中，偏低的溫度會使種子面臨難以形成幼苗的風(fēng)險，這可能是影響?yīng)M葉坡壘種群自然更新的重要因素。此外，狹葉坡壘種子在濕潤低溫條件下仍可萌發(fā)，表明這是一種適應(yīng)自然生境形成的生存策略，在低溫條件下，若遇到降水種子及時萌發(fā)形成幼苗以提高存活的機(jī)會。

種子萌發(fā)離不開足量的水分（秦愛麗等，2020）。在10% PEG-6000脅迫下，種子萌發(fā)受到抑制，在15%脅迫時種子萌發(fā)已達(dá)半致死率，在35%脅迫下嚴(yán)重抑制了種子萌發(fā)和幼苗生長，與干旱脅迫下脹果甘草種子（Glycyrrhiza inflata）（史薇等，2010）、紫花苜蓿（Medicago sativa）和高粱（Sorghum bicolor）種子（李文嬈等，2009）等研究結(jié)果類似，可能因為干旱脅迫抑制種子保護(hù)酶活性和體內(nèi)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)作用，從而抑制正常的生理代謝（李志萍等，2013）。狹葉坡壘種子萌發(fā)對干旱脅迫反應(yīng)敏感，可能與其原生境和繁育習(xí)性有關(guān)。狹葉坡壘是熱帶季節(jié)性雨林的代表樹種，種子成熟期正值最干旱的季節(jié)，若不具備萌發(fā)所需的濕潤條件，萌發(fā)受到抑制，可能是目前狹葉坡壘只在溝谷兩側(cè)的茂密森林和溪水岸邊分布的重要原因（黃仕訓(xùn)等，2008b）。

溫度和干旱脅迫對種子萌發(fā)有交互影響。20 ℃時，種子萌發(fā)歷期隨干旱脅迫增加呈先增后降的趨勢，說明種子在適宜溫度下調(diào)整萌發(fā)行為，通過延長萌發(fā)時間來抵御不穩(wěn)定的環(huán)境變化，減少死亡風(fēng)險，以確保種子能在適宜條件下進(jìn)行萌發(fā)（王慧慧等，2016；Zhang et al.， 2022）。在5% PEG-6000脅迫條件下，20 ℃和25 ℃時種子萌發(fā)率在分別為82.22%和84.45%，表明在低濃度干旱脅迫下，種子仍具有較高的萌發(fā)率，可能因為植物通過增加滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)和提高保護(hù)性酶的活性等措施來提高抗旱性（麥苗苗等，2009；張中峰等，2012）。在35% PEG-6000脅迫條件下，20 ℃和25 ℃時種子萌發(fā)率分別為8.89%和15.35%，胚根長分別為1.63 cm和2.04 cm，具有一定的生長活力，表明溫度升高可緩解干旱脅迫對種子萌發(fā)的抑制作用（唐偉和南志標(biāo)，2019）。此時，胚根仍在生長，利于吸收水分，表明在35% PEG-6000脅迫下種子表現(xiàn)出一定的活力，可能是種子在長期生活環(huán)境中形成的萌發(fā)策略，具有較強(qiáng)的環(huán)境適應(yīng)性（唐偉和南志標(biāo)，2019）。應(yīng)當(dāng)注意，在35% PEG-6000脅迫下，15 ℃時種子不再萌發(fā)，表明同時遭遇低溫和重度干旱脅迫，這樣會對狹葉坡壘種子萌發(fā)具有致命的打擊。

綜上所述，溫度和干旱脅迫均會影響?yīng)M葉坡壘種子的萌發(fā)進(jìn)程。15 ℃時種子萌發(fā)受到抑制，20～25 ℃為種子萌發(fā)的適宜溫度，其中25 ℃為幼苗早期生長最佳溫度，種子對水分要求高，隨著干旱脅迫程度增強(qiáng)，種子萌發(fā)受到的抑制作用增強(qiáng)，20～25 ℃可緩解35% PEG-6000干旱脅迫帶來的抑制作用，低溫和干旱可能是影響?yīng)M葉坡壘幼苗分布和自然更新的重要因素。人工培育狹葉坡壘，在保持水分充足情況下可以采用20～25 ℃促進(jìn)種子萌發(fā)，種子萌發(fā)后保持25 ℃左右環(huán)境溫度有利于幼苗生長。

參考文獻(xiàn)：

CH EN SC， WANG M， WANG J， et al.， 2017. Response of seed germination and seedling physiological characteristics of Medicago sativa to the simulated osmotic potential of PEG6000 ［J］. Chin J Appl Ecol， 28（9）： 2923-2931. ?［陳士超， 王猛， 汪季， 等， 2017. 紫花苜蓿種子萌發(fā)及幼苗生理特性PEG-6000模擬滲透勢的響應(yīng) ［J］. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報， 28（9）： 2923-2931.］

FAN CZ， WU XY， GUAN X， et al.， 2021. Concentration effects and its physiological mechanism of soaking seeds with brassinolide on tomato seed germination under salt stress ［J］. Acta Ecol Sin， 41（5）： 1857-1867. ?［范翠枝， 吳馨怡， 關(guān)欣， 等， 2021. 油菜素內(nèi)酯浸種對鹽脅迫番茄種子萌發(fā)的影響及其生理機(jī)制 ［J］. 生態(tài)學(xué)報， 41（5）： 1857-1867.］

GUANG Z， WANG LJ， DUAN L， et al.， 2022. Effects of PEG simulated drought stress on seed germination of Abutilon theophrasti medicus ［J］. Seed， 41（8）： 66-70. ?［關(guān)正， 王麗君， 段玲， 等， 2022. PEG模擬干旱脅迫對苘麻種子萌發(fā)的影響 ［J］. 種子， 41（8）： 66-70.］

HUANG N， LIU XS， LIAO NY， et al.， 2022. Study on desiccation sensitivity of seeds of extremely endangered plant Hopea chinensis ［J］. Guangxi For Sci， 51（5）： 634-640. ?［黃寧， 劉雄盛， 廖南燕， 等， 2022. 極度瀕危植物狹葉坡壘種子脫水敏感性研究 ［J］. 廣西林業(yè)科學(xué)， 51（5）： 634-640.］

HUANG SX， CHEN H， PAN B， et al.， 2008a. Characteristics of Hopea chinensis community， an endemic and endangered species in Guangxi ［J］. Acta Bot Boreal-Occident Sin， 28（1）： 164-170. ?［黃仕訓(xùn)， 陳泓， 盤波， 等， 2008a. 廣西特有瀕危植物狹葉坡壘群落特征研究 ［J］. 西北植物學(xué)報， 28（1）： 164-170.］

HUANG SX， CHEN H， TANG WX， et al.， 2008b. Biological and ecological characteristics of Hopea chinensis， a plant endemic to Guangxi ［J］. Biodivers Sci， 16（1）： 15-23. ?［黃仕訓(xùn)， 陳泓， 唐文秀， 等， 2008b， 狹葉坡壘生物生態(tài)學(xué)特征及致瀕原因研究 ［J］. 生物多樣性， 16（1）： 15-23.］

LEI CY， ZHANG H， ZHANG DD， et al.， 2020. Effects of temperature， salinity and light on seed germination of Betula halophila ［J］. Chin Wild Plant Resour， 39（11）： 39-43. ?［雷春英， 張浩， 張丹丹， 等， 2020. 溫度、鹽分和光照對瀕危植物鹽樺（Betula halophila）種子萌發(fā)特性的影響 ［J］. 中國野生植物資源， 39（11）： 39-43.］

LI DD， LI XH， LIU J， et al.， 2022. Effects of single treatments of gibberellin and drought stress on seed germination of rare and endangered plant Rhododendron xiaoxidongense ［J］. J Plant Resour Environ， 31（4）： 57-64. ?［李丹丹， 李曉花， 劉杰， 等， 2022， 赤霉素和干旱脅迫單一處理對珍稀瀕危植物小溪洞杜鵑種子萌發(fā)的影響 ［J］. 植物資源與環(huán)境學(xué)報， 31（4）： 57-64.］

LI WR， ZHANG SQ， SHAN L， 2009. Seeds germination characteristics and drought tolerance of alfalfa and sorghum seedling under water stress ?［J］. Acta Ecol Sin， 29（6）： 3066-3074. ?［李文嬈， 張歲岐， 山侖， 2009. 水分脅迫下紫花苜蓿和高粱種子萌發(fā)特性及幼苗耐旱性 ［J］. 生態(tài)學(xué)報， 29（6）： 3066-3074.］

LI XS， PENG MC， DANG CL， 2007. Research progress on natural regeneration of plants ［J］. Chin J Ecol， 26（12）： 2081-2088. ?［李小雙， 彭明春， 黨承林， 2007. 植物自然更新研究進(jìn)展［J］. 生態(tài)學(xué)雜志， 26（12）： 2081-2088.］

LI Y， LI X， DING FB， et al.， 2021. Responses of Potentilla rupestris seeds germination to environmental factors ［J］. Seed， 40（4）： 85-89. ?［李陽， 李想， 丁芳兵， 等， 2021. 石生委陵菜種子萌發(fā)對環(huán)境因素的響應(yīng) ［J］. 種子， 40（4）： 85-89. ］

LI ZP， ZHANG WH， CUI YC， 2013. Effects of PEG simulated drought stress on seed germination and growth physiology of Quercus variabilis ［J］. Acta Bot Boreal-Occident Sin， 33（10）： 2043-2049. ?［李志萍， 張文輝， 崔豫川， 2013. PEG模擬干旱脅迫對栓皮櫟種子萌發(fā)及生長生理的影響 ［J］. 西北植物學(xué)報， 33（10）： 2043-2049.］

LIU XS， 2019. Effects of temperature， light， and PEG on seed germination in different ecotypes of Achnatherum inebrians ［J］. Pratac Sci， 36（6）： 1600-1607. ［劉雪松， 2019. 溫度、光照及PEG脅迫對不同生態(tài)型醉馬草種子萌發(fā)的影響 ［J］. 草業(yè)科學(xué)， 36（6）： 1600-1607.］

LU QB， ZHU XZ， LIU CQ， et al.， 2020. Pollination biology of Hopea chinensis ［J］. Guihaia， 40（11）： 1628-1637. ?［盧清彪， 朱曉珍， 劉長秋， 等， 2020. 狹葉坡壘傳粉生物學(xué)初探 ［J］. 廣西植物， 40（11）： 1628-1637.］

MAI MM， SHI DX， WANG ML， et al.， 2009. Seed germination and seedling growth of Cercidiphyllum japonicum with PEG treatment ［J］. Sci Silv Sin， 45（10）：94-99. ?［麥苗苗， 石大興， 王米力， 等， 2009. PEG處理對連香樹種子萌發(fā)與芽苗生長的影響 ［J］. 林業(yè)科學(xué)， 45（10）： 94-99.］

MO L， TANG WX， MAO SZ， et al.， 2009. Photosynthesis characteristics of rare and endangered plant Hopea chinensis ［J］. J Fujian Coll For， 29（4）： 357-361. ?［莫凌， 唐文秀， 毛世忠， 等， 2009. 珍稀瀕危植物狹葉坡壘的光合特性 ［J］. 福建林學(xué)院學(xué)報， 29（4）： 357-361.］

QIN AL， GUO QS， MA FQ， et al.， 2020. Effects of temperature， light and water conditions on seed germination of Thuja sutchuenensis Franch. ［J］. Seed， 39（2）： 15-20. ?［秦愛麗， 郭泉水， 馬凡強(qiáng)， 等， 2020. 溫度、光照和水分對珍稀瀕危樹種崖柏種子萌發(fā)的影響 ［J］. 種子， 39（2）： 15-20.］

SHENG HY， GE Y， CHANG J， et al.， 2004. Influence of environmental factors on seed germination of two species in Umbellaceae ［J］. Acta Ecol Sin， 24（2）： 221-226. ［盛海燕， 葛瀅， 常杰， 等， 2004. 環(huán)境因素對傘形科兩種植物種子萌發(fā)的影響 ［J］. 生態(tài)學(xué)報， 24（2）： 221-226.］

SHI W， XU HL， ZHAO XF， et al.， 2010. Physiological and biochemical responses to drought stress during seed germination of Glycyrrhiza inflata ［J］. Acta Ecol Sin， 30（8）： 2112-2117. ?［史薇， 徐海量， 趙新風(fēng)， 等， 2010. 脹果甘草種子萌發(fā)對干旱脅迫的生理響應(yīng) ［J］. 生態(tài)學(xué)報， 30（8）： 2112-2117.］

SONG ZW， HAO LZ， HUANG ZY， et al.， 2010. Effects of light and temperature on the germination of ?Pugionium cornutum （L.） Gaertn. and Pugionium dolabratum Maxim. seeds ［J］. Acta Ecol Sin， 30（10）： 2562-2568. ?［宋兆偉， 郝麗珍， 黃振英， 等， 2010. 光照和溫度對沙芥和斧翅沙芥植物種子萌發(fā)的影響 ［J］. 生態(tài)學(xué)報， 30（10）： 2562-2568.］

STEVEN DD， 1991. Experiments on mechanisms of establishment in old-field succession： seedling emergence ［J］. Ecology， 72 （3）： 1066-1075.

TANG W， NAN ZB， 2019. Effects of osmotic stress by PEG-6000 on germination of Vicia unijuga seeds under different temperature conditions ［J］. Pratac Sci， 36（5）： 1323-1332. ?［唐偉， 南志標(biāo)， 2019. 不同溫度下PEG-6000滲透脅迫對歪頭菜種子發(fā)芽的影響 ［J］. 草業(yè)科學(xué)， 36（5）： 1323-1332.］

TANG WX， MAO SZ， PAN B， et al.， 2009. Spatial distribution pattern of seed rain and seed germination characteristics of endangered plant Hopea chinensis ［J］. J Fujian Coll For， 29（2）： 149-154. ?［唐文秀， 毛世忠， 盤波， 等， 2009. 狹葉坡壘種子雨的空間格局及種子萌發(fā)特性 ［J］. 福建林學(xué)院學(xué)報， 29（2）： 149-154.］

WANG HH， WANG PC， ZHAO G， et al.， 2016. Seed size and germination strategy of Sophora davidii under drought stress ?［J］. Acta Ecol Sin， 36（2）： 335-341. ?［王慧慧， 王普昶， 趙鋼， 等， 2016. 干旱脅迫下白刺花種子大小與萌發(fā)對策 ［J］. 生態(tài)學(xué)報， 36（2）： 335-341.］

WANG JJ， MA AW， WANG ZG， et al.， 2016. Effects of different temperature and moisture conditions on seed germination of Festuca sinensis ［J］. Acta Pratac Sin， 25（4）： 73-80. ?［汪建軍，麻安衛(wèi)， 汪治剛， 等， 2016. 不同溫度和PEG處理對中華羊茅種子萌發(fā)的影響 ［J］. 草業(yè)學(xué)報， 25（4）： 73-80.］

WEN B， YIN SH， LAN QY， et al.， 2002. Ecological characteristics of seed germination of ?Pometia tomentosa ［J］. Guihaia， 22（5）： 408-412. ?［文彬， 殷壽華， 蘭芹英， 等， 2002. 絨毛番龍眼種子萌發(fā)生態(tài)特性的研究 ［J］. 廣西植物， 22（5）： 408-412. ］

WU ML， ZHU J， AI XR， et al.， 2020. Influences of PEG simulating drought stress on seed germination of Metasequoia glyptostroboides under different temperatures ［J］. Guihaia， 40（11）： 1691-1698. ?［吳漫玲， 朱江， 艾訓(xùn)儒， 等， 2020. 不同溫度條件下PEG模擬干旱脅迫對水杉種子萌發(fā)的影響 ［J］. 廣西植物， 40（11）： 1691-1698.］

YAN XF， CAO M， 2006. Influence of light and temperature on the germination of Shorea wantianshuea （Dipterocarpaceae） seeds ［J］. Chin Bull Bot， 23（6）： 642-650. ?［閆興富， 曹敏， 2006. 光照和溫度對望天樹種子萌發(fā)的影響 ［J］. 植物學(xué)通報， 23（6）： 642-650. ］

YAN XF， ZHOU LB， SI BB， et al.， 2016. Stress effects of simulated drought by polyethylene glycol on the germination of Caragana korshinskii Kom. seeds under different temperature conditions ［J］. ?Acta Ecol Sin， 36（7）： 1989-1996. ?［閆興富， 周立彪， 思彬彬， 等， 2016. 不同溫度下PEG-6000模擬干旱對檸條錦雞兒種子萌發(fā)的脅迫效應(yīng) ［J］. 生態(tài)學(xué)報， 36（7）： 1989-1996.］

YU XJ， SHI SL， LONG RJ， et al.， 2006. Research progress on effects of ecological factors on seed germination ［J］. Pratac Sci， 23（10）： 44-49. ［魚小軍， 師尚禮， 龍瑞軍， 等， 2006. 生態(tài)條件對種子萌發(fā)影響研究進(jìn)展 ［J］. 草業(yè)科學(xué)， 23（10）： 44-49.］

YU XJ， WANG YR， ZENG YJ， et al.， 2004. Effects of temperature and osmotic potential on seed germination of Cleistogenes songorica and Plantago lessingii ［J］. Acta Ecol Sin， 24（5）： 883-887. ?［魚小軍， 王彥榮， 曾彥軍， 等， 2004. 溫度和水分對無芒隱子草和條葉車前種子萌發(fā)的影響 ［J］. 生態(tài)學(xué)報， 24（5）： 883-887. ］

ZHANG JJ， CHAI SF， WEI X， et al.， 2018. Germination characteristics of the seed of a rare and endangered plant，Garcinia paucinervis ［J］. Sci Silv Sin， 54（4）： 174-185.［張俊杰， 柴勝豐， 韋霄， 等， 2018. 珍稀瀕危植物金絲李種子的萌發(fā)特性 ［J］. 林業(yè)科學(xué)， 54（4）： 174-185.］

ZHANG R， CHEN DL， LIU HZ， et al.， 2022. Effect of temperature and water potential on the germination of seeds from three different populations of Bidens pilosa as a potential Cd hyperaccumulator ［J］. BMC Plant Biol， 22（1）： 1-13.

ZHANG ZF， YOU YM， HUANG YQ， et al.， 2012. Effects of drought stress on Cyclobalanopsis glauca seedlings under simulating karst environment condition ［J］. Acta Ecol Sin， 32（20）： 6318-6325. ?［張中峰， 尤業(yè)明， 黃玉清， 等， 2012. 模擬喀斯特生境條件下干旱脅迫對青岡櫟苗木的影響 ［J］. 生態(tài)學(xué)報， 32（20）： 6318-6325.］

ZHOU TJ， DENG T， TANG WX， et al.， 2013. Physiological responses of seedlings of Hopea chinensis to PEG simulated drought stress ［J］. Hubei Agric Sci， 52（24）： 6079-6083. ?［周太久， 鄧濤， 唐文秀， 等， 2013. 狹葉坡壘幼苗對PEG模擬干旱脅迫的生理響應(yīng) ［J］. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)， 52（24）： 6079-6083.］

（ 責(zé)任編輯 李 莉 ）

收稿日期： ??2023-08-11

基金項目： ??國家自然科學(xué)基金（32301464）； 廣西青年科學(xué)基金（2020GXNSFBA297043）。

第一作者： ?梁惠子（1992-），碩士，工程師，主要從事環(huán)境生態(tài)學(xué)方面的研究，（E-mail）289631276@qq.com。

* 通信作者： ??劉雄盛，碩士，副研究員，主要從事林木遺傳育種研究，（E-mail）517261654@qq.com。