宮頸癌患者血清SCC、CA125及PD-L1水平與細(xì)胞凋亡指數(shù)相關(guān)性的研究

吳 倩,張 微,方呈祥

(湖北民族大學(xué)附屬民大醫(yī)院,湖北 恩施 445000)

宮頸癌是常見(jiàn)的女性生殖器官惡性腫瘤,其發(fā)生發(fā)展與人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染、免疫抑制、性生活過(guò)早、性伴侶過(guò)多、生育年齡過(guò)早、生育次數(shù)多等多種因素密切相關(guān)[1-2]。宮頸癌患者臨床表現(xiàn)為陰道異常流血,白色或血性、水樣或米泔水樣有腥臭味的陰道排液等,其嚴(yán)重影響患者的正常生活[3-4]。另外,宮頸癌患者早期癥狀并不明顯,待患者自覺(jué)癥狀明顯入院檢查時(shí)病情已發(fā)展至中晚期,治療效果不佳,預(yù)后較差。目前,宮頸癌的發(fā)病率和死亡率逐漸增加,使患者的生命受到了嚴(yán)重地威脅,對(duì)宮頸癌的防范與治療也帶來(lái)了巨大挑戰(zhàn)。鱗狀細(xì)胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCC)是臨床上常用的宮頸癌輔助診斷標(biāo)志物[5];糖鏈抗原125(carbohydrate antigen125,CA125)也是近年來(lái)腫瘤研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)[6],其可作為腫瘤標(biāo)志物用于宮頸癌的診斷及預(yù)后評(píng)估[7];可溶程序性死亡分子1(programmed death ligand-1,PD-L1)與腫瘤免疫逃逸和耐受密切相關(guān)[8]。細(xì)胞凋亡在腫瘤的發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)歸中均發(fā)揮著重要作用[9],細(xì)胞凋亡指數(shù)可作為宮頸癌潛在的診斷指標(biāo)[10]。本研究比較了宮頸癌患者與健康婦女的血清SCC、CA125及PD-L1水平及細(xì)胞凋亡指數(shù),并分析了宮頸癌患者不同臨床病理特征血清SCC、CA125及PD-L1水平的變化情況及其與細(xì)胞凋亡指數(shù)的相關(guān)性,為臨床宮頸癌的治療提供參考依據(jù)。

1 研究對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2020年10月至2022年2月在湖北民族大學(xué)附屬民大醫(yī)院就診的76例宮頸癌患者為實(shí)驗(yàn)組。納入標(biāo)準(zhǔn):①患者均經(jīng)過(guò)陰道活檢、病理檢查等確診為宮頸癌;②均為首次確診;③未進(jìn)行過(guò)相關(guān)治療;④臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn):①伴有其他惡性腫瘤;②自身免疫系統(tǒng)疾病;③嚴(yán)重的心肺肝腎功能不全;④伴有其他宮頸類(lèi)疾病。另選同時(shí)期來(lái)院進(jìn)行體檢的76例健康女性為對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組的年齡為33～71歲,平均年齡(52.50±8.62)歲;對(duì)照組的年齡為31～72歲,平均年齡(53.55±9.15)歲,兩組的年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P>0.05)。

本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(編號(hào):20200208),患者及家屬知情同意。

1.2 方法

1.2.1血清SCC和CA125及PD-L1水平的測(cè)定

收集實(shí)驗(yàn)組患者入院次日及對(duì)照組體檢者的清晨空腹靜脈血5mL,保存于EDTA抗凝管,靜置30～120min,以3 500r/min離心15min,分離上層血清,通過(guò)全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑盒檢測(cè)血清SCC、CA125、PD-L1水平。

1.2.2細(xì)胞凋亡指數(shù)的檢測(cè)

采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡指數(shù)。實(shí)驗(yàn)組取宮頸癌組織、對(duì)照組取正常宮頸組織,浸于磷酸鹽緩沖液,剪碎過(guò)篩,制成單細(xì)胞懸液,濃度為1×106/mL,取1mL單細(xì)胞懸液,離心、棄上清,加1mL磷酸鹽緩沖液,離心、棄上清,預(yù)冷的70%乙醇固定細(xì)胞,于4℃冰箱過(guò)夜。次日離心、棄上清,磷酸鹽緩沖液漂洗,加Pnase合成期酶37℃作用30min,加50μg/mL碘化丙啶1mL,4℃避光染色20min,過(guò)濾,CELLQUEST軟件計(jì)算細(xì)胞凋亡指數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 兩組血清SCC、CA125及PD-L1水平的對(duì)比

實(shí)驗(yàn)組的血清SCC、CA125及PD-L1水平均高于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表1。

表1 兩組血清SCC、CA125及PD-L1水平的比較

2.2 兩組細(xì)胞凋亡指數(shù)的對(duì)比

實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞凋亡指數(shù)為(6.87±2.89),對(duì)照組的凋亡指數(shù)為(2.44±0.56),實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞凋亡指數(shù)高于對(duì)照組(t=13.132,P<0.001)。

2.3 宮頸癌患者不同臨床病理特征血清SCC、CA125及PD-L1水平的對(duì)比

臨床分期為Ⅲ～Ⅳ期宮頸癌患者的血清SCC、CA125及PD-L1水平均高于Ⅰ～Ⅱ期者(P<0.05);腫瘤分化程度為高分化宮頸癌患者的血清SCC、CA125及PD-L1水平均高于中分化者,且中分化者均高于低分化者(P<0.05);淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移宮頸癌患者的血清SCC、CA125及PD-L1水平均高于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移者(P<0.05);不同病理分類(lèi)宮頸癌患者的血清SCC、CA125及PD-L1水平比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P>0.05),見(jiàn)表2。

表2 宮頸癌患者不同臨床病理特征血清SCC、CA125及PD-L1水平的比較

2.4 宮頸癌患者血清SCC、CA125及PD-L1水平與細(xì)胞凋亡指數(shù)的關(guān)系

宮頸癌患者血清SCC、CA125及PD-L1水平均與細(xì)胞凋亡指數(shù)呈正相關(guān)(r值分別為0.689、0.662、0.495,P<0.001),各散點(diǎn)圖均由左下角區(qū)域分布到右上角區(qū)域,見(jiàn)圖1。

圖1 宮頸癌患者血清SCC、CA125及PD-L1水平與細(xì)胞凋亡指數(shù)相關(guān)性散點(diǎn)圖

3 討論

宮頸癌是女性中常見(jiàn)的生殖系統(tǒng)惡性腫瘤,近年來(lái)其發(fā)病率及病死率有所增加,對(duì)女性的身體健康和生命安全造成了極大的威脅[11]。早期宮頸癌患者的臨床表現(xiàn)及體征并不明顯,且不具備特異性,待癥狀明顯已進(jìn)展為浸潤(rùn)癌,此時(shí)腫瘤細(xì)胞突破基底膜,侵入血管、淋巴管,易發(fā)生淋巴結(jié)血行轉(zhuǎn)移,治療效果不佳,預(yù)后較差[12]。因此,探索與宮頸癌病情相關(guān)的指標(biāo)并分析其與臨床病理特征的關(guān)系對(duì)早期宮頸癌的診斷及防治具有參考意義。目前,隨著醫(yī)療技術(shù)的進(jìn)步與生物、免疫學(xué)的發(fā)展,血清學(xué)指標(biāo)檢測(cè)以操作簡(jiǎn)便、用時(shí)較短成為重要的檢查手段,已廣泛應(yīng)用于癌癥的監(jiān)測(cè)中,參考價(jià)值較高。本研究對(duì)比了宮頸癌患者與健康婦女血清SCC、CA125及PD-L1水平及細(xì)胞凋亡指數(shù),并觀察了不同臨床病理特征宮頸癌患者血清SCC、CA125及PD-L1水平的變化情況,分析了血清SCC、CA125及PD-L1水平與細(xì)胞凋亡指數(shù)的關(guān)系,為宮頸癌的早期診斷及治療提供參考依據(jù)。

3.1 血清SCC和CA125及PD-L1水平與宮頸癌的關(guān)系

SCC是存在于口腔、肺、子宮、子宮頸等鱗狀上皮細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的一種抗原,其分泌、合成與機(jī)體內(nèi)的鱗癌細(xì)胞密切相關(guān),能夠調(diào)控細(xì)胞凋亡過(guò)程,還參與細(xì)胞外基質(zhì)降解及癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移、侵襲等過(guò)程[13]。相關(guān)研究指出,鱗狀細(xì)胞發(fā)生惡性改變時(shí),SCC的基因表達(dá)與調(diào)控出現(xiàn)異常改變,蛋白質(zhì)的合成也受到干擾,引起SCC基因活化,使其分泌與合成大量增加,從而出現(xiàn)SCC異常高表達(dá)[14]。CA125是與卵巢癌診斷相關(guān)的一種大分子糖蛋白,其表達(dá)水平在卵巢癌的早期診斷、病情監(jiān)測(cè)及預(yù)后評(píng)估中具有重要意義。有研究表明,在子宮內(nèi)膜、宮頸內(nèi)膜、輸卵管等機(jī)體組織中均檢測(cè)出CA125,另外,約有半數(shù)以上的宮頸癌患者存在血清CA125水平異常升高,且其水平變化與臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移也密切關(guān)聯(lián)[15]。宮頸癌的發(fā)病與免疫逃逸及免疫監(jiān)視功能減弱存在密切相關(guān)性,PD-L1與宮頸癌的發(fā)病、病情進(jìn)展存在密切聯(lián)系。PD-L1屬于協(xié)同抑制因子,在多種細(xì)胞中表達(dá),其與T細(xì)胞抑制信號(hào)密切相關(guān),能夠降低患者體內(nèi)抗腫瘤免疫反應(yīng),協(xié)助腫瘤細(xì)胞進(jìn)行免疫逃逸,促進(jìn)腫瘤發(fā)展[16]。有研究表明,宮頸癌伴有PD-L1異常高表達(dá)[17]。本研究通過(guò)電化學(xué)發(fā)光法測(cè)定宮頸癌患者血清SCC、CA125及PD-L1水平發(fā)現(xiàn),宮頸癌患者的血清SCC、CA125及PD-L1水平均高于健康女性,提示血清SCC、CA125及PD-L1水平與宮頸癌的發(fā)病密切相關(guān)。

3.2 血清SCC和CA125及PD-L1水平與細(xì)胞凋亡指數(shù)的關(guān)系

細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的一種基本生物學(xué)現(xiàn)象,其在內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定中發(fā)揮著重要作用,在癌癥患者體內(nèi),細(xì)胞凋亡對(duì)腫瘤的發(fā)展、治療同樣發(fā)揮著重要作用[18]。本研究進(jìn)一步檢測(cè)兩組的細(xì)胞凋亡指數(shù),結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著增加,表明宮頸癌的發(fā)病與細(xì)胞凋亡水平有關(guān)。隨著病情嚴(yán)重程度的進(jìn)展,細(xì)胞凋亡指數(shù)發(fā)生改變,破壞了宮頸上皮細(xì)胞原有的平衡,導(dǎo)致病情加重。本研究又進(jìn)一步檢測(cè)了宮頸癌患者不同臨床病理特征的血清SCC、CA125及PD-L1水平,并分析其與細(xì)胞凋亡指數(shù)的關(guān)系,結(jié)果顯示,伴有臨床分期加重、腫瘤分化程度增加、出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌患者,其血清SCC、CA125及PD-L1水平增幅更大(P<0.05),而不同病理分類(lèi)(鱗狀細(xì)胞癌與腺癌)的血清SCC、CA125及PD-L1水平比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);另外,宮頸癌患者的血清SCC、CA125及PD-L1水平均與細(xì)胞凋亡指數(shù)呈正相關(guān),提示血清SCC、CA125及PD-L1水平可能與宮頸癌的進(jìn)展有關(guān),臨床可將其作為監(jiān)測(cè)、診斷及治療宮頸癌的參考指標(biāo)。

但本研究也存在一定的局限性,一方面,患者來(lái)源單一且樣本數(shù)較少,研究結(jié)果缺乏廣泛性;另一方面,關(guān)于血清SCC、CA125及PD-L1水平的變化與宮頸癌進(jìn)展相關(guān)的機(jī)制通路尚不清楚,因此仍需進(jìn)一步研究探索。

綜上所述,宮頸癌患者血清SCC、CA125及PD-L1水平顯著升高,與臨床分期、腫瘤分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切關(guān)聯(lián),且與細(xì)胞凋亡指數(shù)均呈正相關(guān),提示臨床上可將血清SCC、CA125及PD-L1作為對(duì)宮頸癌早期診斷和治療的重要檢測(cè)指標(biāo)。