鉛對大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元γ-氨基丁酸A型受體介導電流及GABA能突觸傳遞的抑制作用

高文良，張紅，袁誼，郭蕊，劉興陽，鄧顯華，孫灝

（1.濟南市第二婦幼保健院，山東濟南 271100；2.安徽師范大學生命科學學院，安徽蕪湖 241000；3.廈門大學醫(yī)學院，福建廈門 361005）

谷氨酸是快速興奮性突觸傳遞的主要神經(jīng)遞質(zhì)，其受體分為兩大類：一類為離子型谷氨酸受體，包括N-甲基-D-天冬氨酸受體、海人藻酸受體和α-氨基-3-羥基-5-甲基-4-異唑受體；另一類屬于代謝型谷氨酸受體，它們與膜內(nèi)G 蛋白偶聯(lián)，被激活后通過信號轉(zhuǎn)導系統(tǒng)起作用，產(chǎn)生較緩慢的生理反應［1］。而γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid，GABA）被認為是快速抑制性突觸傳遞的主要神經(jīng)遞質(zhì)。GABA 受體分為GABA A，B 和C 型，A 型和C 型屬于離子型受體，其中C型僅存在于視覺通路；而B型為G 蛋白偶聯(lián)代謝型受體［2］。GABA A 型受體（GABAA受體）是哺乳動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)中最主要的抑制性受體，具有十分復雜的結(jié)構，包括5個主要的結(jié)合結(jié)構域。這些結(jié)合位點位于或接近氯離子通道、苯二氮類、巴比妥類和印防己毒素及甾醇類麻醉劑的結(jié)合位點。GABA系統(tǒng)與癲癇和焦慮癥的發(fā)病密切相關［3-5］。GABAA受體的激活導致氯離子內(nèi)流并抑制神經(jīng)元放電。因此，GABAA受體功能的調(diào)節(jié)會改變神經(jīng)元的興奮性［6］。

鉛（pb）是一種生物毒性和神經(jīng)毒性金屬，廣泛存在于周圍環(huán)境。慢性鉛暴露可導致學習和認知功能障礙，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育早期危害更大［7-8］。流行病學研究證實，兒童鉛暴露與認知功能缺陷之間存在很強的相關性，這些缺陷會持續(xù)到成年期［9-10］。有關鉛中毒機制研究一直是毒理學領域的研究熱點，但鉛作用于GABAA受體的機制研究甚少。為明確鉛對抑制性突觸傳遞的作用，本研究利用全細胞膜片鉗技術在培養(yǎng)細胞水平和腦片水平檢測Pb2+對大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元GABAA受體以及突觸傳遞的影響。

1 材料與方法

1.1 動物、試劑和主要儀器

實驗用SD 大鼠購自廈門大學動物實驗中心，動物使用許可證號：SYXX（閩）2018-0010，動物實驗均經(jīng)廈門大學動物倫理審查委員會批準。大鼠在通風良好、溫度23～25 ℃、濕度約50%的環(huán)境中飼養(yǎng)，自由飲食和飲水。取出生后0 d的SD 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元用于原代皮質(zhì)神經(jīng)元的培養(yǎng)；15～19 d日齡雄性SD大鼠用于電生理實驗腦片樣本的制備。

胰蛋白酶、多聚賴氨酸、阿糖胞苷、三磷酸腺苷二鈉（Na2-ATP），三磷酸鳥苷三鈉（Na3-GTP）、B27、6-氰基-7-硝基喹喔啉-2，3-二酮（6-cyano-7-nitroquinoxaline-2，3-dione，CNQX）、D-2-氨基-5-磷戊酸（D-2-amino-5-phosphonovaleric acid，AP-5）和荷包牡丹堿（bicuculine）購自美國Sigma 公司；DMEM、胎牛血清、F-12、neuronbasal 培養(yǎng)基和青霉素/鏈霉素購自美國Gibco 公司；河豚毒素購于河北水產(chǎn)公司；醋酸鉛和其他常見的無機鹽，如氯化鉀、氯化鈣、氯化鎂、氯化鈉等購自國藥集團化學試劑有限公司。

VT1200S型振動切片機，美國Leica公司；P-97型電極拉制儀，美國Sutter 公司；膜片鉗系統(tǒng)，美國Axon和Sutter公司；Axon 700B實驗使用放大器和DIC正置相差熒光顯微鏡，日本Olympus公司。

1.2 原代神經(jīng)元的培養(yǎng)和電生理記錄

分離出生后0 d SD大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元［11］。手術分離腦皮質(zhì)組織，用0.25%胰蛋白酶37 ℃處理15 min，細胞懸浮于DMEM 中用吸管機械分離。將多聚賴氨酸包被的蓋玻片置于培養(yǎng)皿中，在DMEM 培養(yǎng)基中添加10%胎牛血清，10% F-12 和100 kU·L-1青霉素/鏈霉素。培養(yǎng)24 h后，將培養(yǎng)基更換為neuronbasal 培養(yǎng)基（1.0 mL）并添加2%的B27，每3～4 d換液1次。培養(yǎng)4 d后加入阿糖胞苷（10 mg·L-1）用以阻斷非神經(jīng)元細胞的分裂。培養(yǎng)神經(jīng)元保持在37 ℃濕潤環(huán)境并通以95%空氣和5% CO2的混合氣。取培養(yǎng)7～14 d神經(jīng)元進行電生理記錄。

記錄培養(yǎng)神經(jīng)元時，標準外液包含（mmol·L-1）：NaCl 150，KCl 5，CaCl22，HEPES 10 和葡萄糖10，用Tris 堿調(diào)整pH 值為7.4。細胞內(nèi)液成分（mmol·L-1）：NaCl 30，KCl 120，CaCl20.5，MgCl21.0，HEPES 10 和EGTA 5.0，使用Tris 堿將pH 值調(diào)整為7.2。醋酸鉛首先溶于蒸餾水，使用前用生理鹽水稀釋到最終濃度。加藥方式采取Y型管法快速給藥［12］，該方法允許在20 ms 內(nèi)全部交換單個細胞周邊溶液。實驗時采用氧飽和人工腦脊液（artificial cerebrospinal fluid，ACSF）持續(xù)灌流，Y 管給藥瞬間轉(zhuǎn)為生理鹽水稀釋藥液浸潤整個被記錄細胞，從而激發(fā)和記錄GABAA受體介導的電流（IGABA）。給藥濃度由低到高，待完全洗脫后再依次添加更高濃度藥液。

1.3 腦片的制作和電生理記錄

腦片標本可保持相對完整的突觸連接。為此取15～19 d日齡雄性SD 大鼠進行腦片標本制備［13］。用乙醚麻醉大鼠，掐指反射消失后立即處死，迅速取出大腦，放入低溫（約0 ℃）含氧ACSF中。ACSF 含（mmol·L-1）：NaCl 125，NaHCO325，KCl 2.5，NaH2PO41.25，CaCl22.0，MgCl21.5，葡萄糖25，使用95% O2和5% CO2的混合氣飽和ACSF。冠狀腦切片厚度350 μm，室溫下孵育1 h，再轉(zhuǎn)移至膜片鉗記錄臺進行電生理數(shù)據(jù)記錄，氧飽和ACSF持續(xù)灌流（吊瓶式重力灌流，2 mL·min-1）。

大鼠皮質(zhì)錐體神經(jīng)元全細胞記錄在電壓鉗模式下進行（24～26 ℃）。玻璃電極使用1.5 mm 外徑的玻璃毛細管拉制。充有電極內(nèi)液的記錄電極電阻約為3～6 MΩ。電極內(nèi)液（mmol·L-1）：葡萄糖酸鉀122，NaCl 5，CaCl20.3，MgCl22.0，EGTA 1.0，HEPES 10，Na2-ATP 5，和Na3-GTP 0.4，用KOH調(diào)pH 值為7.2～7.4，蔗糖調(diào)節(jié)滲透壓至約280 mOsm·kg-1。Pb2+（10 μmol·L-1）處理前和處理5 min 后分別進行自發(fā)抑制性突觸后電流（spontaneous inhibitory post-synaptic currents，sIPSC）和微小抑制性突觸后電流（miniature inhibitory postsynaptic currents，mIPSC）（灌流液中另加入1.0 μmol·L-1的河豚毒素用以阻斷Na+通道）的記錄，每數(shù)據(jù)記錄10 min，三通用于切換ACSF 和10 μmol·L-1的Pb2+溶液（溶于ACSF）。記錄膜電位控制在0 mV，ACSF 中另加入CNQX 20 μmol·L-1和AP-5 50 μmol·L-1用以阻斷興奮性突觸傳遞。電流鉗模式下記錄動作電位（action potential，AP）。待記錄細胞狀態(tài)穩(wěn)定，向胞內(nèi)注入電流，從-40 pA起始，以20 pA的電流梯度注入，每次注入時長1 s，間隔1 s，直至180 pA 止。隨后統(tǒng)計所誘導動作電位頻率。實驗中70%～90%串聯(lián)電阻得到補償。

1.4 數(shù)據(jù)分析

GABA 的電流激活曲線（Pb2+處理和無Pb2+處理）使用最小二乘法，根據(jù)改良的Michaelis-Menten方程（I=ImaxCh（Ch+EC50h）］擬合而成。Imax為最大響應電流，C為藥物濃度，EC50為激活50%最大響應電流時的藥物濃度，h為表觀Hill系數(shù)。Pb2+的濃度-效應曲線采用公式I=Imax（IC50）h（Ch+IC50h）擬合，式中IC50為Pb2+引發(fā)50%最大抑制作用時的濃度，其余參數(shù)同上［14］。在統(tǒng)計學分析中，采用雙因素方差分析，組間兩兩比較采用成對t檢驗，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 不同濃度Pb2+對大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元GABA 激活電流的影響

原代培養(yǎng)的大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元的電生理記錄顯示，在-60 mV 下，由GABA 激活的IGABA幾乎存在于所有測試的神經(jīng)元中。而IGABA可以被荷包牡丹堿10 μmol·L-1完全阻斷（數(shù)據(jù)略）。單獨Pb2+（1～100 μmol·L-1）處理時，Pb2+未激發(fā)明顯可見電流。預先給予Pb2+（1～100 μmol·L-1）處理30 s后再加入GABA（100 μmol·L-1）所激活IGABA明顯小于GABA單獨激活的IGABA（圖1A），洗脫后電流大小基本恢復（圖2A），表明Pb2+可逆性抑制了IGABA，IC50為（68±20）μmol·L-1，希爾系數(shù)為0.91±0.11。Pb2+濃度為1，5，10，50和100 μmol·L-1對IGABA的抑制后電流分別為GABA 100 μmol·L-1單獨激活電流的（98±4）%（n=5），（91±15）%（n=6），（82±14）%（n=7，P＜0.05），（61±15）%（n=7，P＜0.01）和（39±34）%（n=8，P＜0.01）（圖1B）。由此可見，隨濃度升高，Pb2+對神經(jīng)元IGABA的抑制作用增強。

Fig.1 Effect of Pb2+ on γ-aminobutyric acid（GABA）A receptor induced currents（IGABA）in cultured neurons of SD rats.The holding potential（VH）was -60 mV.Pb2+ 10，50 or 100 μmol·L-1 was pre-applied for 30 s before co-application with GABA 100 μmol·L-1.A：sample traces of IGABA recorded from one neuron in the presence of Pb2+.±s，n=5-8.B：concentrationresponse relationship for Pb2+-induced inhibition of IGABA.

2.2 Pb2+對大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元不同濃度GABA 激活IGABA電流的影響

在Pb2+50 μmol·L-1和無Pb2+條件下，檢測GABA激活的IGABA的改變。圖2A 顯示，與無Pb2+組比較，Pb2+50 μmol·L-1對GABA 100 和500 μmol·L-1激活的IGABA具有抑制作用。圖2B 顯示，Pb2+使IGABA的濃度-效應曲線顯著右移，EC50由無Pb2+組的（20±6）μmol·L-1增大到（87±39）μmol·L-1，且GABA最大激活電流被明顯抑制（n=8，P＜0.01），提示Pb2+對GABA受體的抑制屬于非競爭性抑制。

Fig.2 Effect of Pb2+ on concentration-response relationship of IGABA.All currents were normalized to the peak amplitude of the current evoked by GABA at 100 μmol·L-1.A：sample recordings that show effects of Pb2+ 50 μmol·L-1 on the peak amplitude of IGABA activated by GABA 100 μmol·L-1 and by GABA 500 μmol·L-1.The traces from left to right were IGABA activated by GABA 100 μmol·L-1（control），IGABA activated by GABA 100 μmol·L-1 with Pb2+ 50 μmol·L-1，IGABA activated by GABA 100 μmol·L-1（washout），IGABA activated by GABA 500 μmol·L-1（control），IGABA activated by GABA 500 μmol·L-1 with Pb2+50 μmol·L-1 and IGABA activated by GABA 500 μmol·L-1（wash out），respectively.B：concentration-response relationship for IGABA in the absence and presence of Pb2+50 μmol·L-1.±s，n=5-8.

2.3 Pb2+降低大鼠腦片神經(jīng)元slPSC的頻率

為記錄大鼠腦片sIPSC，膜片鉗的鉗制電壓設置在0 mV。荷包牡丹堿10 μmol·L-1可完全阻斷sIPSC，證明所記錄成分為GABA 能的突觸傳遞（圖略）。圖3A 和3B所示，與無Pb2+組比較，Pb2+10 μmol·L-1可逆地降低神經(jīng)元sIPSC 的頻率（P＜0.01），但對振幅無明顯影響。圖3C 顯示，Pb2+10 μmol·L-1導致事件間隔（event intervals）累積概率曲線有一個明顯的右向平移，但并未改變振幅的累積概率曲線。

2.4 Pb2+未影響大鼠腦片神經(jīng)元mlPSC 的頻率和振幅

實驗采用sIPSC 記錄的相同條件，在灌流液中加入河豚毒素1.0 μmol·L-1，阻斷鈉離子通道和動作電位，以記錄大鼠腦片神經(jīng)元mIPSC。圖4 結(jié)果顯示，與無Pb2+組比較，Pb2+10 μmol·L-1對大鼠腦片神經(jīng)元mIPSC的頻率和振幅均無明顯影響，提示Pb2+對突觸行為的影響需要AP的支持。

Fig.4 Effect of Pb2+ exposure on miniature inhibitory post-synaptic currents（mlPSCs）in cortical neurons of slices.CNQX 20 μmol·L-1，AP-5 50 μmol·L-1 and tetrodotoxin 1.0 μmol·L-1 were added to ACSF to block AMAP，NMDA and sodium receptors respectively.A：representative traces of mIPSCs recording from cortical neurons treated with Pb2+ 10 μmol·L-1；B：quantification of mIPSCs frequency（B1）and amplitude（B2）.±s，n=8.C：cumulative distribution curves of mIPSCs frequency（C1）and amplitude（C2）from cortical neurons treated with Pb2+10 μmol·L-1.

2.5 Pb2+降低大鼠腦片神經(jīng)元誘發(fā)動作電位的頻率

電流鉗模式下記錄Pb2+對大鼠腦片神經(jīng)元AP的影響。圖5A 和5B 顯示，與無Pb2+組比較，Pb2+10 μmol·L-1明顯降低大鼠腦片神經(jīng)元AP 的頻率（P＜0.01），表明Pb2+對皮質(zhì)神經(jīng)元的整體興奮性具有明顯的抑制作用。

Fig.5 lnhibitory effect of Pb2+ on firing rate of cortical neurons of brain slices.A：representative traces of firings with or without Pb2+ 10 μmol·L-1 which were induced by current injection from -40 pA to 180 pA with step of 20 pA；B：statistical results of firing numbers against sequential current injection.±s，n=25.

3 討論

在大腦發(fā)育過程中，早期鉛暴露極大地影響突觸的功能。已知的鉛誘導神經(jīng)毒性機制為破壞神經(jīng)遞質(zhì)釋放，從而影響神經(jīng)遞質(zhì)受體的表達和功能［15-16］。例如，慢性鉛暴露導致對N-甲基-D-天冬氨酸受體抑制［17-18］和突觸傳遞抑制［19-20］以及突觸可塑性損害［21］。另一些研究表明，鉛可阻斷某些類型的電壓門控型鈣離子通道［22-23］、鈉離子通道［24］和鉀離子通道［25-26］，然而鉛作用于GABAA受體的機制研究甚少。

本研究首先采用原代培養(yǎng)大鼠神經(jīng)元，用細胞全細胞膜片鉗技術觀察了鉛對大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元IGABA的影響。實驗結(jié)果表明，Pb2+10，50和100 μmol·L-1對GABA 激活的神經(jīng)元IGABA的抑制作用增強，而單獨使用Pb2+并不能激活任何可檢測到的電流，提示Pb2+對GABA 激活的IGABA的抑制作用是一種調(diào)節(jié)作用，必須在GABAA受體被激活的情況下才能起效。從Pb2+對于GABA 激活電流曲線的影響可以看出，其對GABA 激活的最大IGABA也有抑制作用，同時明顯增加了GABA 的EC50值，提示Pb2+是通過非競爭性機制抑制神經(jīng)元的IGABA。鑒于Pb2+對IGABA快速且可逆的抑制，從時間上推測該作用經(jīng)由受體介導胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導或受體表達減少實現(xiàn)的可能性不大，因而推測其有可能通過改變GABAA受體的構象而降低GABAA受體和其配體的親和力，從而起到抑制IGABA的作用。

相對于原代培養(yǎng)細胞，腦片是更接近生理狀態(tài)的標本，在腦片中可保持相對完整的突觸連接。因此，本研究隨后用全細胞膜片鉗技術檢測了Pb2+對大鼠腦片神經(jīng)元抑制性突觸傳遞的影響。與原代培養(yǎng)神經(jīng)元的記錄所不同的是，鉗制電壓設置在0 mV。在此電壓下，IGABA較為顯著，有利于IPSC 的記錄。原代培養(yǎng)神經(jīng)元的實驗中，Pb2+使用由低到高5 個濃度（1，5，10，50 和100 μmol·L-1），旨在擬合Pb2+抑制GABA 激活IGABA的濃度-效應曲線，并未考量鉛中毒的實際生理濃度，其IC50值并不適合作為腦片灌流時Pb2+處理的濃度。因此，對腦片灌流狀態(tài)下Pb2+濃度的設定依據(jù)相關文獻［27］和美國疾病控制中心對兒童鉛中毒的定義［28］（血鉛濃度≥1.2 μmol·L-1），將Pb2+的濃度定為10 μmol·L-1，檢測Pb2+對大鼠腦片神經(jīng)元sIPSC 和mIPSC 的影響，同時也檢測了Pb2+對AP 的影響。結(jié)果表明，Pb2+對sIPSC 的頻率而不是振幅具有抑制作用，這提示Pb2+參與了突觸前的改變。有文獻報道，斑馬魚胚胎發(fā)育期Pb2+暴露，影響一系列GABA 相關基因的表達，其中包括GABA 囊泡轉(zhuǎn)運體（vesicular GABA transporter，vgat）基因，從而影響突觸前遞質(zhì)的轉(zhuǎn)運和釋放［29］。但本研究在mIPSC 記錄中并未發(fā)現(xiàn)Pb2+對sIPSC頻率的影響，于是推測Pb2+有可能通過減少AP 依賴的GABA 釋放來破壞GABAA受體介導的突觸傳遞。因此，本研究進一步評估了Pb2+對AP 的作用。結(jié)果顯示，Pb2+有效抑制了電流注入所誘發(fā)AP的發(fā)生頻率。據(jù)報道，出生后大鼠的鉛暴露導致中腦區(qū)域多巴胺能神經(jīng)元放電減少［30］，該結(jié)果與本研究AP 的實驗結(jié)果相似，提示Pb2+有可能通過抑制AP而影響突觸前囊泡的釋放。Ruan 實驗室的一項研究結(jié)果表明，慢性低水平鉛暴露增加海馬錐體神經(jīng)元的放電頻率［31］，該結(jié)果與本研究結(jié)果完全相反，這可從鉛暴露模型的不同和所記錄神經(jīng)元種類的不同來解釋兩者之間的差異。本研究Pb2+為急性給藥，作用迅速且可逆，可能的機制是對鈉、鉀和鈣等離子受體的快速調(diào)節(jié)以及GABAA受體的變構調(diào)節(jié)。而慢性鉛中毒模型產(chǎn)生影響的機制十分緩慢，可以是信號轉(zhuǎn)導以及基因調(diào)控和蛋白表達等，其內(nèi)在機制可能截然不同，而且鉛對神經(jīng)元受體的影響是全方位的，其內(nèi)在機制也各有不同。

本研究中在原代培養(yǎng)神經(jīng)元水平和腦片水平均證實了Pb2+對GABAA受體的抑制作用。所不同的是，在原代培養(yǎng)神經(jīng)元上，Pb2+很可能是通過變構調(diào)節(jié)來改變GABAA受體的構象，從而非競爭性抑制IGABA；而在腦片水平，Pb2+僅僅抑制sIPSC 的頻率而非振幅，提示突觸前機制參與其中。相比sIPSC 頻率的改變，Pb2+處理后mIPSC 頻率和振幅皆未改變，因此有理由認為Pb2+正是通過抑制AP 進而抑制AP 依賴的囊泡釋放，表現(xiàn)為突觸后電流數(shù)目的減少，從而降低sIPSC 的頻率。Ruan 實驗室的另一項研究顯示，Pb2+通過抑制海馬錐體神經(jīng)元突觸前電壓依賴性鈣通道來抑制AP 的發(fā)生［27］，也從側(cè)面支持了本研究結(jié)果。然而，不同濃度的Pb2+處理以及不同的Pb2+暴露方式，往往在對突觸傳遞的影響中扮演重要的角色。有實驗室用培養(yǎng)神經(jīng)元探討慢性Pb2+暴露對海馬神經(jīng)元E/I平衡的影響，發(fā)現(xiàn)Pb2+1.0 μmol·L-1抑制mEPSC 的頻率卻增加mIPSC 的頻率［32］。該實驗室另一項研究證實，Pb2+對海馬突觸傳遞的抑制源于細胞周期蛋白依賴性激酶5 對突觸蛋白1 的磷酸化［33］，該報道中Pb2+5 μmol·L-1同時抑制mEPSC和mIPSC。

本研究結(jié)果顯示，Pb2+對大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元IGABA有明顯抑制作用，其內(nèi)在機制可能通過對GABAA受體的變構調(diào)節(jié)，這與腦片實驗中Pb2+僅抑制大鼠腦片皮質(zhì)神經(jīng)元sIPSC 的頻率而未抑制振幅似乎矛盾。實際上，原代神經(jīng)元的培養(yǎng)采用很高的Pb2+濃度（50 μmol·L-1），而用于激活IGABA的GABA 濃度也高達100 甚至1000 μmol·L-1。腦片實驗中Pb2+濃度僅為10 μmol·L-1。更為關鍵的是，腦片狀態(tài)下突觸區(qū)域GABA 的濃度僅限于自身突觸前囊泡的釋放，其作用范圍也僅限于突觸范圍，其濃度和作用空間無法與原代神經(jīng)元培養(yǎng)實驗相比。在培養(yǎng)過程中，原代培養(yǎng)神經(jīng)元部分形成了有效的突觸連接，但神經(jīng)元的形態(tài)和功能已經(jīng)發(fā)生了很大的改變，其生理功能的完整性距離腦片標本有很大的差距，這也是造成Pb2+作用機制差異的主要原因。因此，在腦片實驗中未能檢測出Pb2+對突觸后GABAA受體明顯的抑制效應也屬合理。

綜上所述，Pb2+對原代培養(yǎng)神經(jīng)元IGABA具有抑制作用；在腦片實驗中，Pb2+通過抑制皮質(zhì)神經(jīng)元的AP 實現(xiàn)對sIPSC 頻率的抑制；兩者均可能是鉛神經(jīng)毒性的內(nèi)在機制之一。大鼠皮質(zhì)原代培養(yǎng)的神經(jīng)元雖然也能形成有效的突觸連接，但相對于腦片天然的突觸連接仍然有本質(zhì)的不同。本研究2項不同類型實驗的探究均有利于獲得更多鉛中毒機制的信息。鑒于突觸活動是發(fā)育早期建立穩(wěn)定突觸連接的關鍵機制，Pb2+很可能通過影響突觸區(qū)域GABAA受體構象、干擾自發(fā)的遞質(zhì)釋放，從而對神經(jīng)元成熟以及可塑性產(chǎn)生持久影響，從而造成鉛的神經(jīng)毒性。