孕酮栓放置時間對奶山羊同期發(fā)情效果的影響

孫 爽，趙青平，張嘉嬌，韓燦宇，余世鋒，童 超

（1.南陽師范學院生命科學與農業(yè)工程學院，南陽 473000；2.河南健羊牧業(yè)有限公司，南陽 473000；3.河南農業(yè)大學動物醫(yī)學院，鄭州 450000）

同期發(fā)情技術可實現(xiàn)奶山羊懷孕、產羔、泌乳的規(guī)范化集中管理，降低養(yǎng)殖成本、提高繁殖效率，滿足畜牧業(yè)發(fā)展需求［1-3］。同期發(fā)情常用的藥物包括孕酮、卵泡刺激素（FSH）等［4-5］。孕酮由卵巢黃體細胞分泌，可抑制卵泡發(fā)育、維持卵巢黃體的生物活性［6］。在奶山羊繁殖生產中，常用陰道海綿栓塞法進行孕酮處理。將孕酮海綿栓塞入母羊陰道，孕酮可緩慢釋放，使卵巢進入黃體期暫停卵泡發(fā)育。放置一定時間后撤出孕酮栓，可使原本受抑制的卵泡集中發(fā)育，促使母畜集中發(fā)情并排卵［7］。

孕酮栓的長期放置可損傷山羊陰道內環(huán)境，引發(fā)陰道炎，典型特征為撤栓時栓上有血跡、化膿性陰道分泌物或大量陰道白細胞［8］。陰道炎是阻礙生殖健康的重要疾病，主要由陰道受損或繼發(fā)感染而引起，可導致生殖道菌群紊亂，嚴重時繼發(fā)盆腔、子宮等處的炎癥感染，降低繁殖性能［9］。孕酮栓放置時間過長，還可增加養(yǎng)殖的時間成本與人力成本，最終造成養(yǎng)殖場的經濟損失［10］。

為探究一種同期發(fā)情效果好，副作用少的處理方案，本研究將336 只山羊分為4 組，分別放置陰道孕酮栓8、10、12、14 d進行同期發(fā)情處理。通過比較不同陰道栓放置時間對奶山羊繁殖性能的影響，為奶山羊產業(yè)的高質量發(fā)展提供理論參考。

1 材料

1.1 試驗動物

本試驗共選用336 只位于河南省南陽市西峽縣健羊牧業(yè)的2～4歲、未患有生殖炎癥、同質性好的健康雌性奶山羊，于2019 年9 月中旬開始對試驗羊只進行同期發(fā)情處理，試驗期間采用半舍飼半放牧管理方式，日糧由精飼料、苜蓿干草和全株青貯玉米組成，每日定量飼喂，自由飲水。每日機器擠奶2次。

1.2 藥品

孕酮海綿栓與放栓槍，購自美國Pharmacia& Upjohn 公司；卵泡刺激素（Follicle-stimulating hormone，F(xiàn)SH），購自寧波三生生物科技股份有限公司。

2 方法

2.1 試驗動物分組與給藥

將336 只奶山羊分為A、B、C、D 四組，每組84 只。各組試驗羊放置陰道孕酮海綿栓的時間不同，其中A組放置8 d、B組放置10 d、C組放置12 d、D組放置14 d。各組羊在撤栓前12 h肌內注射25 IU FSH，撤栓時再次注射25 IU FSH。具體操作流程如下：將羊只保定，使其自然站立；將孕酮栓裝入放栓槍內，在放栓槍頂端醮取加有紅霉素的甘油潤滑劑，將放栓槍緩緩插入母羊陰道直至前端完全沒入，隨后按壓放栓槍末端將孕酮栓打入陰道深處。放置完成后孕酮海綿栓尾部的棉線露在母羊陰道外。待放栓結束時，將棉線拉出即可撤栓。

2.2 試驗動物陰道炎的判定

撤栓時，根據(jù)Martins 等［8］所擬定的標準判斷母羊是否患有陰道炎。觀察從試驗羊只體內撤出的海綿栓，健康母羊陰道內取出的孕酮栓應形態(tài)完整、較濕潤、無異常分泌物附著；若撤出的海綿栓存在紅色或棕褐色血跡，或粘有混濁、黏著性或豆腐渣樣的分泌物，即可判斷為生殖道炎癥。陰道炎患病率=撤栓時發(fā)現(xiàn)陰道炎的羊只數(shù)/接受同期發(fā)情處理的羊只總數(shù)×100%。

使用甲哨唑氯化鈉注射液（安徽國森藥業(yè)有限公司）對患陰道炎的山羊進行陰道灌洗，每日灌洗2 次，直至痊愈。

2.3 試驗動物發(fā)情反應的統(tǒng)計

在撤栓后0～72 h，每隔12 小時進行發(fā)情檢測。試情時，首先將所有母羊成排保定好，牽拉公羊緩慢地在母羊身后走過，逐一對母羊試情。當母羊出現(xiàn)頻繁搖尾、暴露陰門、接受爬跨且靜止不動的行為時，即可判斷為發(fā)情。

發(fā)情率=撤栓后0～72 h表現(xiàn)出發(fā)情行為的母羊數(shù)/接受同期發(fā)情處理的總羊只數(shù)×100%；發(fā)情起始時間=自CIDR栓撤栓時至羊只發(fā)情開始的時間；發(fā)情持續(xù)時間=撤拴后羊只表現(xiàn)發(fā)情行為所持續(xù)的時間；返情率=指配種后一定時間內表現(xiàn)發(fā)情的母羊只數(shù)占配種母羊總只數(shù)的百分比。

2.4 試驗動物產羔性能的統(tǒng)計

撤栓后，如果母羊初次發(fā)情在早上，則當天下午進行第1 次人工授精，第2 天早上進行第2 次人工授精；如果母羊初次發(fā)情在下午，則第2天早上進行第1次人工授精，下午進行第2 次人工授精。采用假陰道法采集種公羊精液，所采集的原精中，精子活力＞85%，精子密度＞2×109/mL，精子畸形率＜5%的精液，無異味、無異常顏色和污染物方可用于人工授精。使用添加了青霉素和鏈霉素的脫脂鮮羊奶對原精進行3 倍稀釋。所有發(fā)情羊只均采用子宮頸口輸精的方法進行2次輸精。

2.5 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析

使用SPSS 26.0 軟件分析試驗數(shù)據(jù)。百分率數(shù)據(jù)使用卡方檢驗進行分析。除百分率外的所有數(shù)據(jù)均采用單因素方差分析（One-way ANOVA）進行顯著性檢驗，結果以平均值±標準差表示。

3 結果與分析

3.1 不同內置孕酮栓時間對陰道炎患病率的影響

由表1 可知，放栓14 d 的D 組羊陰道炎患病率顯著高于放栓8 d 的A 組（P＜0.05），其余各組間差異不顯著（P＞0.05）。

表1 不同內置孕酮栓時間對試驗羊陰道炎患病率的影響

3.2 不同內置孕酮栓時間對發(fā)情反應的影響

由表2 可知，放栓8 d 的A 組母羊的發(fā)情率顯著低于放置12 d 的C 組羊和14 d 的D 組羊（P＜0.05）。發(fā)情起始時間A組羊顯著高于B、C、D組（P＜0.05），其余各組間均差異不顯著（P＞0.05）；試驗羊只的發(fā)情持續(xù)時間各組間均不存在顯著差異（P＞0.05）。

表2 不同內置孕酮栓時間對試驗羊只發(fā)情反應的影響

3.3 不同內置孕酮栓時間對試驗羊只產羔性能的影響

如表3所示，C組羊的受胎率顯著高于A組羊和B組羊（P＜0.05），與D組差異不顯著（P＞0.05）。C組羊的返情率顯著低于A組羊和B組羊（P＜0.05），與D組差異不顯著（P＞0.05）；A組羊返情率顯著高于C組和D組（P＜0.05），與B組差異不顯著（P＞0.05）。各組試驗羊的流產率、產羔率、公羔率、母羔率間均不存在顯著差異（P＞0.05）。

表3 不同內置孕酮栓時間對試驗羊只產羔性能的影響

如表4 所示，C 組母羊分娩的羔羊斷奶重顯著高于A組（P＜0.05），其余各組間差異不顯著（P＞0.05）；各組試驗羊所產羔羊的出生重和斷奶成活率均不存在顯著差異（P＞0.05）。

表4 不同內置孕酮栓時間對羔羊生長發(fā)育的影響

4 討論

本研究中，放栓8、10、12、14 d 的試驗羊陰道炎患病率分別為0%、1.19%、2.38%、7.14%，放栓14 d 的試驗羊陰道炎患病率顯著高于放栓8 d 的羊。作為物理性刺激，孕酮栓放置時間過長會導致母畜陰道內生物菌群發(fā)生改變，易導致葡萄球菌的感染［10］。此外，同期發(fā)情處理后母畜體內的生殖激素含量發(fā)生了較大變化，使生殖道更易受病原微生物的侵害，導致陰道炎患病率的增加［11］。本研究結果表明，試驗羊的陰道炎患病率隨放栓時間的延長呈上升趨勢，并且放栓時間過長會增加養(yǎng)殖成本，因此在不影響繁殖性能的基礎上，放栓時間更短的同期發(fā)情方案更具有應用價值［12］。

在本試驗中放栓8 d的A組羊發(fā)情率僅為88.10%，顯著低于C 組（100.00%）和D 組（96.43%）。山羊完整的發(fā)情周期為（20±1）d，推測孕酮栓放置時間過短無法使山羊形成一個較完整的黃體期，從而造成發(fā)情率的下降。放栓8 d 的A 組羊平均在撤栓后41.53 h 開始發(fā)情，發(fā)情起始時間顯著大于其他各組。這可能是由于部分放栓時間較短的母羊撤栓后體內仍有一定量的孕酮殘留，從而抑制了雌激素的分泌，導致發(fā)情率降低和發(fā)情起始時間推遲。前人研究發(fā)現(xiàn)，短期放栓的同期發(fā)情方案撤栓時母畜體內的孕酮濃度較高，致使發(fā)情時間推遲，這一結果與本研究結果相似［13］。本試驗羊只平均發(fā)情持續(xù)時間均在37 h 以上，但各組間差異不顯著，說明陰道栓的放置時間對發(fā)情集中度不造成影響。

受胎率是反映母畜繁殖性能的重要指標［2］。在本試驗中，放栓12 d 的C 組羊受胎率最高（89.29%），D 組羊次之（80.95%），且兩組羊的受胎率均顯著高于放栓8 d的A 組（63.10%）。發(fā)情山羊接受人工授精處理后，成功受孕的山羊一般不再返情；而部分未孕山羊在下一情期，表現(xiàn)發(fā)情并排卵。本試驗對返情山羊及時補配并統(tǒng)計返情率，結果表明，放栓12 d的C組羊的返情率（4.76%）最低；放栓8 d 的A 組羊返情率（20.27%）最高。這是由于A組受胎率低，返情羊只最多。此外，各組都存在少數(shù)山羊未受胎也不返情的現(xiàn)象，這可能是由于本試驗時間在繁殖季節(jié)的中后期，少數(shù)未受孕的山羊在逐漸進入非繁殖季節(jié)后不表現(xiàn)發(fā)情，最終導致了當年的空懷。

在本試驗中，各試驗組羊的繁殖力良好，產羔率均可達到161%以上。此外，試驗羊的產羔率、公羔率、母羔率、出生重，以及斷奶時羔羊的成活率各組間均無顯著差異（P＞0.05）。

羔羊斷奶重與斷奶后的生產性能呈正相關，斷奶體重大的動物通?？共∧芰?、體質好。在本研究中，A 組羊所產羔羊90 d 斷奶時的體重（20.05 kg）顯著低于C 組（21.24 kg），說明C 組母羊所產羔羊具有更優(yōu)的體況。

5 結論

相較而言，放栓12 d 同期發(fā)情處理組奶山羊的發(fā)情率、受胎率最高，且陰道炎的發(fā)病率未見顯著增加，具有最優(yōu)的繁殖性能；該方案比傳統(tǒng)的放栓14 d 的同期發(fā)情方案更為節(jié)省時間和成本，具有更高的應用價值。該方案可在山羊繁殖生產中廣泛應用。