人參果化學(xué)成分及其抗氧化活性

王 誠，王艷萍，熊 毅，朱 萍2，，饒高雄，*

（1.云南中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，云南 昆明 650500； 2.云南省高校藥食同用資源養(yǎng)生產(chǎn)品工程研究中心，云南 昆明 650500； 3.云南昊辰制藥有限公司，云南 宜良 652100）

人參果是一種茄科茄屬多年生蔬菜、水果兼觀賞型草本植物，原產(chǎn)于南美的安第斯山北麓［1］，又名香瓜茄，香瓜梨、艷果、香艷茄、香艷梨、茄瓜、甜茄等，果實(shí)呈梨狀、橢圓形、乳黃色漿果，果實(shí)皮薄、肉厚且多汁，成熟時果皮呈淡綠色至黃色，并常帶有紫色或紫紅色條紋［2］，其富含人體必需的氨基酸、維生素C，不僅含有硒、鈷等微量元素，同時也是人體中鈣的良好來源［3］。從人參果中分離得到的主要次生代謝產(chǎn)物為生物堿類、黃酮類、酚酸類等［4］。目前國內(nèi)對人參果化學(xué)成分及藥理作用研究的報道較少，為更合理地開發(fā)利用該資源，擴(kuò)大其保健和藥用價值的應(yīng)用，本研究對人參果水提物及85%乙醇提取物進(jìn)行了抗氧化活性測定［5］。實(shí)驗(yàn)表明，人參果提取物顯示了一定的抗氧化能力，85%乙醇提取物的抗氧化能力高于人參果水提物的抗氧化能力。對85% 乙醇提取物進(jìn)行劃段處理，其中的30%甲醇部分抗氧化活性較好，抗氧化活性依次為30% 甲醇部分、甲醇部分、60%甲醇部分、水部分。同時對人參果85%乙醇提取物進(jìn)行系統(tǒng)的化學(xué)成分分離和結(jié)構(gòu)鑒定，共分離得到25 個化合物，其中化合物1～7、9～25 均為首次從人參果中分離得到。

1 材料

Bruker AvanceⅢ400 MHz 核磁共振儀（德國Bruker 公司）； Agilent 6545 LC／Q-TOF 四極桿串聯(lián)飛行時間質(zhì)譜儀（美國Agilent 公司）； 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（日本EYELA 公司）； WJX-A1000 型粉碎機(jī)（上海緣沃工貿(mào)有限公司）； JY1002 型電子天平（上海浦春計量儀器有限公司）； ZF8 紫外分析儀（上?？等A生化儀器制造有限公司）； 紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）； Sephadex LH-20 型葡聚糖柱（瑞典Pharmacia 公司）； MCI Gel CHP-20 （日本三菱公司）； RP-C18（日本富士硅化學(xué)株式會社）； 氧化鋁填料（成都金山化學(xué)試劑有限公司）； 薄層硅膠GF254、硅膠柱（青島海洋化工有限公司）； DPPH·、L-抗壞血酸（上海易恩化學(xué)技術(shù)有限公司）。試劑為分析純。

人參果采自云南石林，經(jīng)云南中醫(yī)藥大學(xué)陳紹田研究員鑒定為茄科茄屬植物人參果SolanummuricatumAit.的成熟果實(shí)，標(biāo)本存放于云南省高校藥食同用資源養(yǎng)生產(chǎn)品工程研究中心實(shí)驗(yàn)室。

2 提取與分離

人參果干品80.0 kg 粉碎至粗粉，10 倍量85%乙醇加熱提取2 次，每次2 h，合并提取液，減壓濃縮至稠浸膏（60.0 kg）。浸膏用1 倍量95%乙醇揉捏放置5 h，揉捏2 次，過濾，回收乙醇，得到浸膏（10.0 kg），濾渣舍棄，經(jīng)HP-20 柱，依次用水、95% 乙醇洗脫，得水洗脫部分 （7.7 kg）、95%乙醇洗脫部分（1.8 kg），水洗脫部分點(diǎn)板對照后主要為多糖及蛋白質(zhì)類成分，故舍棄。95%乙醇洗脫部分加少量水溶解后調(diào)節(jié)pH 至4，經(jīng)MCI柱，依次用水、甲醇洗脫，用丙酮沖洗柱子，得水洗脫部分（Fr.A，233.0 g）、第二份水洗脫部分（51.0 g）、甲醇洗脫部分（Fr.B，602.0 g），丙酮洗柱后的溶液回收溶劑得干膏（16.0 g），點(diǎn)板后與第二份水洗脫部分相同，將這兩部分合并，得Fr.C （67.0 g）。人參果粗粉用3%酸水提取后，二氯甲烷萃取，得到浸膏（Fr.D，60.0 g）。

Fr.A 點(diǎn)板后與果糖對照，還含有大量果糖，用少量純化水溶解，經(jīng)MCI 柱，用水、甲醇依次洗脫，TLC 檢識，得甲醇部分（154.0 g），再經(jīng)硅膠柱，以氯仿-甲醇（1 ∶1）洗脫，得到Fr.A1 ～Fr.A2。Fr.A1 （2.9 g）經(jīng)硅膠柱，以氯仿-甲醇（1 ∶1）洗脫，合并相同組分，得到Fr.A1-1 ～Fr.A1-2。Fr.A1-1 經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以甲醇洗脫，得到化合物2 （4.0 mg）、4 （4.2 mg）。Fr.A2 （33.0 g）經(jīng)硅膠柱，以氯仿-甲醇（1 ∶0 ～0 ∶1）梯度洗脫，得到Fr.A2-1～Fr.A2-2。Fr.A2-1 （1.9 g）經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以甲醇洗脫，得到化合物3 （70.0 mg）。Fr.A2-2 （1.4 g）經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以甲醇洗脫，得到化合物1（36.9 mg）。

Fr.B 經(jīng)MCI 柱，用水、甲醇依次洗脫，TLC檢識，得甲醇部分（240.0 g），再經(jīng)硅膠柱，以氯仿-甲醇（1 ∶1）洗脫，得到Fr.B1～Fr.B2。Fr.B1（7.4 g）經(jīng)硅膠柱，以氯仿-甲醇（1 ∶1）洗脫，得到化合物5 （406.0 mg）、6 （200.5 mg），合并剩余相同組分，得到Fr.B1-1。Fr.B1-1 （2.1 g）經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以甲醇洗脫，得到化合物7 （1.8 g）、8 （533.0 mg）。Fr.B2 （30.3 g）經(jīng)硅膠柱，以氯仿-甲醇（1 ∶1）洗脫，合并相同組分，得到Fr.B2-1 ～Fr.B2-4。Fr.B2-1 （1.8 g）經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以氯仿-甲醇（1 ∶1）洗脫，再經(jīng)硅膠柱，以氯仿-甲醇（1 ∶0 ～0 ∶1）梯度洗脫，得到化合物10 （2.0 mg）、11 （2.0 mg）。Fr.B2-2 （2.1 g）經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以甲醇洗脫，再經(jīng)甲醇重結(jié)晶，得到化合物12 （256.2 mg）、13 （4.0 mg）。Fr.B2-3 （4.5 g）經(jīng)重結(jié)晶，得到化合物9 （1.6 g）。Fr.B2-4 （1.5 g）經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以甲醇洗脫，得到化合物14 （2.0 mg）。

Fr.C 經(jīng)硅膠柱，以氯仿-甲醇（1 ∶0 ～0 ∶1）梯度洗脫，得到Fr.C1～Fr.C3。Fr.C1 （1.1 g）經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以甲醇洗脫，得到化合物16 （630.3 mg）、17 （300.2 mg）。Fr.C2 （0.6 g）經(jīng)硅膠柱，以氯仿-甲醇（1 ∶0 ～0 ∶1）梯度洗脫，合并相同組分，再經(jīng)重結(jié)晶，得到化合物15（181.0 mg）。Fr.C3 （4.6 g）析出白色結(jié)晶，經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以甲醇洗脫，得到化合物18 （786.1 mg），剩余部分經(jīng)硅膠柱，以氯仿-甲醇（1 ∶0 ～0 ∶1）梯度洗脫，得到化合物19 （2.1 mg）。

Fr.D 用中性氧化鋁硅膠拌樣，裝柱，以環(huán)己烷-丙酮 （1 ∶ 1）洗脫，得到Fr.D1 ～Fr.D3。Fr.D1 （3.0 g）析出白色結(jié)晶，經(jīng)氯仿重結(jié)晶，得到化合物20 （43.0 mg），剩余部分經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以甲醇洗脫，得到化合物24 （480.0 mg）。Fr.D2 （2.5 g）析出淡黃色結(jié)晶，經(jīng)甲醇重結(jié)晶，得到化合物21 （33.7 mg），剩余部分經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以甲醇洗脫，得到化合物25 （1.0 g）。Fr.D3 （18.0 g）經(jīng)Sephadex LH-20純化，以甲醇洗脫，合并相同組分，再經(jīng)Sephadex LH-20 分離，以甲醇洗脫，得到化合物22 （109.8 mg）、23 （942.9 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：淡黃色粉末（甲醇），ESI-MSm／z：179［M＋H］＋，分子式C9H8O4。1H-NMR （400 MHz，CD3OD）δ：7.05 （1H，d，J＝2.1 Hz，H-2），6.78 （1H，d，J＝8.2 Hz，H-5），6.94 （1H，dd，J＝8.2，2.0 Hz，H-6），7.54 （1H，d，J＝16.2 Hz，H-7），6.21 （1H，d，J＝16.2 Hz，H-8）；13CNMR （ 100 MHz，CD3OD）δ：127.7 （ C-1），115.0 （ C-2），146.8 （ C-3），149.4 （ C-4），116.4 （ C-5），122.8 （ C-6），147.0 （ C-7），115.5 （C-8），171.0 （C-9）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［6］報道基本一致，故鑒定為咖啡酸。

化合物2：無色結(jié)晶（甲醇），ESI-MSm／z：165 ［M ＋Na］＋，分子式C6H6O4。1H-NMR （400 MHz，CD3OD）δ：7.87 （1H，s，H-2），2.33（3H，s，-CH3）；13C-NMR （100 MHz，CD3OD）δ：145.8 （ C-2），142.9 （ C-3），170.2 （ C-4），140.3 （C-5），151.8 （C-6），14.5 （-CH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［7］報道基本一致，故鑒定為5-羥基麥芽酚。

化合物3：無色油狀物（氯仿），ESI-MSm／z：155 ［M ＋Na］＋，分子式C5H8O4。1H-NMR （400 MHz，CDCl3）δ：2.68 （2H，m，H-2），2.64（2H，m，H-3），3.71 （3H，s，4-OCH3）；13CNMR （100 MHz，CDCl3）δ：177.4 （-COOH），172.8 （-COO-），52.0 （4-OCH3），28.8 （C-2），28.7 （C-3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8］報道基本一致，故鑒定為琥珀酸單甲酯。

化合物4：白色粉末（甲醇），ESI-MSm／z：124 ［M ＋H］＋，分子式C6H5NO2。1H-NMR （400 MHz，CD3OD）δ：9.14 （1H，d，J＝1.4 Hz，H-2），8.72 （1H，dd，J＝4.9，1.4 Hz，H-3），8.39 （1H，dt，J＝7.9，1.4 Hz，H-4），7.55（1H，dd，J＝7.9，4.9 Hz，H-6）；13C-NMR （100 MHz，CD3OD）δ：152.3 （C-2），127.3 （C-3），137.8 （ C-4），123.8 （ C-5），149.8 （ C-6），166.3 （C-7）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9］報道基本一致，故鑒定為煙酸。

化合物5：白色無定型粉末（DMSO），ESI-MSm／z：599 ［M ＋Na］＋，分子式C35H60O6。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ：5.33 （1H，s，H-6），4.42 （1H，t，J＝5.8 Hz，H-1′），0.83 （3H，m，H-21），0.66 （3H，s，H-18）；13C-NMR （ 100 MHz，DMSO-d6）δ：37.3 （C-1），29.7 （C-2），71.0 （C-3），38.8 （C-4），140.9 （C-5），121.6（C-6），31.8 （C-7），31.9 （C-8），50.1 （C-9），36.6 （C-10），21.0 （C-11），41.3 （C-12），42.3（C-13），56.0 （C-14），24.3 （C-15），28.2 （C-16），56.6 （C-17），12.1 （C-18），19.5 （C-19），35.9 （C-20），19.0 （C-21），33.8 （C-22），25.9（C-23），45.6 （C-24），29.2 （C-25），19.4 （C-26），20.1 （C-27），23.1 （C-28），12.2 （C-29），101.3 （C-1′），77.4 （C-2′），77.2 （C-3′），73.9（C-4′），70.6 （C-5′），61.5 （C-6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［10］報道基本一致，故鑒定為胡蘿卜苷。

化合物6：白色片狀結(jié)晶 （DMSO），EI-MSm／z：574 ［M］＋，分子式C35H58O6。1H-NMR （400 MHz，DMSO-d6）δ：5.32 （1H，brs，H-7），0.50（3H，d，J＝6.8 Hz，18-CH3），0.66 （3H，s，19-CH3），0.83 （3H，s，21-CH3），4.86 （2H，m，H-23 ～24），0.92 （3H，d，J＝6.4 Hz，26-CH3），0.95 （3H，d，J＝6.8 Hz，27-CH3），0.79（3H，t，J＝5.6 Hz，29-CH3），3.64 （1H，dd，J＝5.6，6.0 Hz，H-3′）；13C-NMR （100 MHz，DMSO-d6）δ：36.7 （C-1），29.2 （C-2），77.2（C-3），35.0 （C-4），42.4 （C-5），29.2 （C-6），116.9 （C-7），140.9 （C-8），50.1 （C-9），33.9（C-10），19.3 （C-11），38.8 （C-12），45.7 （C-13），55.8 （C-14），21.1 （C-15），28.9 （C-16），55.9 （C-17），12.3 （C-18），13.0 （C-19），35.8（C-20），19.6 （C-21），138.5 （C-22），129.3（C-23），50.1 （C-24），31.8 （C-25），19.1 （C-26），18.6 （C-27），23.1 （C-28），12.1 （C-29），101.3 （C-1′），73.9 （C-2′），77.2 （C-3′），70.6（C-4′），77.2 （C-5′），61.6 （C-6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［11］報道基本一致，故鑒定為α-菠甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物7：淺黃色粉末（DMSO），ESI-MSm／z：673 ［M ＋Na］＋，分子式C30H34O16。1H-NMR （400 MHz，DMSO-d6）δ：4.24 （1H，d，J＝8.0 Hz，H-1），3.07 （1H，m，H-2），3.27 （1H，m，H-3），3.17 （1H，m，H-4），3.36 （1H，m，H-5），4.40 （1H，m，H-6a），4.16 （1H，m，H-6b），7.12 （1H，d，J＝1.2 Hz，H-2′），7.04 （1H，d，J＝8.0 Hz，H-5′），6.99 （1H，dd，J＝8.0，1.5 Hz，H-6′），7.41 （1H，d，J＝16.0 Hz，H-7′），7.33 （1H，d，J＝16.0 Hz，H-8′），4.88 （1H，d，J＝8.0 Hz，H-1″），3.32 （1H，m，H-2″），3.27 （1H，m，H-4″），3.72 （1H，m，H-5″），4.40 （1H，m，H-6″a），4.21 （1H，m，H-6″b），7.56 （2H，d，J＝8.0 Hz，H-2?，6?），6.79（2H，d，J＝8.0 Hz，H-3?，5?），7.52 （1H，d，J＝16.0 Hz，H-7?），6.35 （1H，d，J＝16.0 Hz，H-8?）；13C-NMR （100 MHz，DMSO-d6）δ：100.0（C-1），74.2 （C-2），76.7 （C-3），70.4 （C-4），73.6 （C-5），63.8 （C-6），128.4 （C-1′），114.4（C-2′），147.2 （ C-3′），147.4 （ C-4′），115.5（C-5′），120.7 （ C-6′），144.2 （ C-7′），116.8（C-8′），166.9 （C-9′），101.5 （C-1″），73.6 （C-2″），76.0 （C-3″），70.3 （C-4″），74.4 （C-5″），63.8 （ C-6″），125.4 （ C-1?），130.8 （ C-2?），115.5 （C-3?），160.4 （C-4?），116.3 （C-5?），130.2 （C-6?），145.3 （C-7?），114.4 （C-8?），166.8 （C-9?）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［12］報道基本一致，故鑒定為susaroyside A。

化合物8：無色針狀結(jié)晶 （甲醇），ESI-MSm／z：193 ［M-H］＋，分子式C10H10O4。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：7.19 （1H，d，J＝1.9 Hz，H-2），6.84 （1H，d，J＝8.2 Hz，H-5），7.10 （1H，dd，J＝1.9，8.3 Hz，H-6），7.63（1H，d，J＝15.9 Hz，H-7），6.35 （1H，d，J＝15.9 Hz，H-8），3.90 （3H，s，-OCH3）；13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ：127.7 （C-1），115.9 （C-2），150.4 （C-3），149.3 （C-4），116.4 （C-5），123.9 （ C-6），146.9 （ C-7），111.6 （ C-8），171.0 （C-9），56.4 （-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［13］報道基本一致，故鑒定為阿魏酸。

化合物9：白色結(jié)晶（丙酮），ESI-MSm／z：163［M＋H］＋，分子式C9H8O3。1H-NMR （400 MHz，Acetone-d6）δ：7.57 （2H，d，J＝8.5 Hz，H-2，6），6.90 （2H，d，J＝8.6 Hz，H-3，5），7.60（1H，d，J＝15.9 Hz，H-7），6.33 （H，d，J＝15.9 Hz，H-8）；13C-NMR （100 MHz，Acetone-d6）δ：127.0 （C-1），130.8 （C-2，6），116.6 （C-3，5），160.4 （C-4），145.5 （C-7），115.7 （C-8），168.1 （C-9）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［14］報道基本一致，故鑒定為對香豆酸。

化合物10：白色粉末（丙酮），ESI-MSm／z：195 ［M ＋H］＋，分子式C10H10O4。1H-NMR （400 MHz，Acetone-d6）δ：7.05 （1H，d，J＝2.0 Hz，H-2），6.87 （1H，d，J＝7.3 Hz，H-5），6.90（1H，dd，J＝7.5，2.0 Hz，H-6），6.28 （1H，d，J＝15.9 Hz，H-7），7.53 （1H，d，J＝15.8 Hz，H-8），3.73 （3H，s，-OCH3）；13C-NMR （100 MHz，Acetone-d6）δ：127.5 （C-1），115.7 （C-2），148.7 （C-3），149.8 （C-4），116.3 （C-5），122.5 （C-6），148.7 （C-7），115.0 （C-8），51.5（-OCH3），167.8 （-COOH）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［15］報道基本一致，故鑒定為咖啡酸甲酯。

化合物11：白色粉末（丙酮），ESI-MSm／z：207 ［M-H］-，分子式C11H12O4。1H-NMR （400 MHz，Acetone-d6）δ：7.05 （1H，d，J＝2.0 Hz，H-2），6.87 （1H，d，J＝7.3 Hz，H-5），6.90（1H，dd，J＝7.5，2.0 Hz，H-6），7.53 （1H，d，J＝15.8 Hz，H-7），6.28 （1H，d，J＝15.9 Hz，H-8），4.20 （2H，q，J＝7.1 Hz，H-1′），1.30（3H，t，J＝7.1 Hz，H-2′）；13C-NMR （100 MHz，Acetone-d6）δ：145.5 （ C-1），127.5 （ C-2），148.7 （ C-3），149.8 （ C-4），122.5 （ C-5），116.3 （ C-6），115.2 （ C-7），115.0 （ C-8），167.8 （C-9），60.4 （C-1′），14.6 （C-2′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［16］報道基本一致，故鑒定為咖啡酸乙酯。

化合物12：白色結(jié)晶（甲醇），ESI-MSm／z：187 ［M＋H］＋，分子式C9H16O4。1H-NMR （400 MHz，CD3OD）δ：1.48 （2H，t，J＝7.1 Hz，H-2，6），2.17 （2H，t，J＝7.0 Hz，H-3，5），1.21 （3H，s，H-8 ～9）；13C-NMR （100 MHz，CD3OD）δ：176.3（C-1，7），28.6 （C-2，6），33.2 （C-3，5），28.6（C-4），24.4 （C-8～9）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［17］報道基本一致，故鑒定為4，4-二甲基-庚二酸。

化合物13：白色結(jié)晶（丙酮），ESI-MSm／z：285 ［M ＋H］＋，分子式C16H12O5。1H-NMR （400 MHz，Acetone-d6）δ：8.20 （1H，s，H-2），8.10（1H，d，J＝8.8 Hz，H-5），6.91 （1H，dd，J＝8.6，2.2 Hz，H-6），7.00 （1H，d，J＝3.2 Hz，H-2′），9.68 （1H，s，3′-OH），6.98 （1H，d，J＝8.8 Hz，H-5′），7.08 （1H，dd，J＝8.3，2.1 Hz，H-6′），3.79 （3H，s，-OCH3）；13C- NMR（100 MHz，Acetone-d6）δ：152.6 （C-2），124.2（C-3），174.7 （C-4），127.6 （C-5），114.8 （C-6），162.4 （C-7），102.3 （C-8），157.9 （C-9），117.7 （C-10），125.4 （C-1′），116.0 （C-2′），146.2 （ C-3′），147.4 （ C-4′），111.2 （ C-5′），120.2 （C-6′），55.4 （4′-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［18］報道基本一致，故鑒定為毛蕊異黃酮。

化合物14：白色粉末（甲醇），ESI-MSm／z：213 ［M ＋H］＋，分子式C14H12O2。1H-NMR （400 MHz，CD3OD）δ：5.80 （2H，d，J＝12.8 Hz，H-1 ～2），6.65 （4H，d，J＝8.7 Hz，H-3ab′，5ab′），7.44 （ 4H，d，J＝ 8.6 Hz，H-2ab′，6ab′）；13C-NMR （100 MHz，CD3OD）δ：145.8（C-1 ～2），160.9 （ C-4ab′），130.9 （ C-2ab′，6ab′），116.7 （C-1ab′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［19］報道基本一致，故鑒定為反-4，4′-二羥基-二苯基乙烯。

化合物15：白色粉末（氯仿），ESI-MSm／z：463 ［M ＋Na］＋，分子式C31H52O。1H-NMR （400 MHz，CDCl3）δ：3.29 （ 1H，s，H-3），0.97（6H，s，H-18，29），0.89 （ 3H，s，H-21），0.90 （3H，s，H-28），0.81 （3H，s，H-30），4.72 （1H，brs，H-31a），4.67 （1H，brs，H-31b）；13C-NMR （100 MHz，CDCl3）δ：32.0 （C-1），30.4 （C-2），78.9 （C-3），40.5 （C-4），47.1 （C-5），21.1 （C-6），28.2 （C-7），48.0（C-8），20.0 （C-9），26.0 （C-10），26.1 （C-11），35.6 （C-12），45.3 （C-13），48.8 （C-14），32.9 （C-15），26.5 （C-16），52.3 （C-17），18.0（C-18），29.9 （C-19），36.1 （C-20），18.3 （C-21），35.0 （C-22），31.3 （C-23），156.9 （C-24），33.8 （C-25），21.9 （C-26），22.0 （C-27），19.3 （ C-28），25.4 （ C-29），14.0 （ C-30），105.9 （C-31）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［20］報道基本一致，故鑒定為24-亞甲基環(huán)阿爾廷醇。

化合物16：淡黃色油狀物（氯仿），ESI-MSm／z：283 ［M ＋H］＋，分子式C18H34O2。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：2.27 （2H，t，J＝7.4 Hz，H-2），1.60 （2H，m，H-3），1.31 ～1.22 （20H，m，H-4～7，12 ～17），2.02 （4H，m，H-8，11），5.31 （2H，m，H-9 ～10），0.95 （3H，t，J＝7.1 Hz，H-18）；13C-NMR （ 100 MHz，CDCl3）δ：173.4 （C-1），34.2 （C-2），24.9 （C-3），29.6 ～29.1 （C-4～7，12 ～15），27.1 （C-8，11），129.8（C-9），130.0 （C-10），31.9 （C-16），22.6 （C-17），14.1 （C-18）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［21］報道基本一致，故鑒定為油酸。

化合物17：無色油狀物 （氯仿），ESI-MSm／z：311 ［M ＋H］＋，分子式C20H38O2。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：2.29 （2H，t，J＝7.3 Hz，H-2），1.63 （2H，t，J＝6.8 Hz，H-3），1.22 ～1.31 （23H，m，H-4 ～7，12 ～17，2′），2.04（4H，t，J＝6.7 Hz，H-8，11），5.35 （2H，dt，J＝6.1 Hz，H-9 ～10），0.91 （3H，t，J＝6.6 Hz，H-18），4.12 （2H，dd，J＝4.3，7.1 Hz，H-1′）；13C-NMR （100 MHz，CDCl3）δ：173.4 （C-1），34.2 （C-2），25.4 （C-3），27.1 （C-4），29.0 ～29.6 （C-5 ～8，12 ～16），130.0 （C-9），129.8 （ C-10），31.9 （ C-11），22.9 （ C-17），14.0 （C-18），59.9 （C-1′），14.1 （C-2′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［22］報道基本一致，故鑒定為油酸乙酯。

化合物18：白色粉末（甲醇），ESI-MSm／z：437 ［M＋Na］＋，分子式C29H50O。TLC 噴灑10%硫酸-乙醇后于105 ℃烘烤顯色呈紫紅色，與對照品TLC 比較Rf值與顯色一致，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［23］報道基本一致，故鑒定為β-谷甾醇。

化合物19：白色粉末（甲醇），ESI-MSm／z：449 ［M ＋Na］＋，分子式C30H50O。1H-NMR （400 MHz，CD3OD）δ：3.10 （1H，dt，J＝12.0，3.5 Hz，H-3），5.22 （1H，dd，J＝6.0，1.5 Hz，H-7），0.59 （3H，s，H-18），0.87 （3H，s，H-19），2.87 （1H，m，H-25），0.99 （6H，d，J＝6.4 Hz，H-26 ～27），1.61 （3H，d，J＝6.8 Hz，H-29），0.97 （3H，d，J＝4.8 Hz，H-30）；13CNMR （100 MHz，CD3OD）δ：37.3 （C-1），29.8（C-2），76.7 （C-3），40.8 （C-4），47.2 （C-5），27.1 （C-6），118.6 （C-7），140.0 （C-8），51.0（C-9），34.7 （C-10），21.5 （C-11），39.6 （C-12），44.4 （C-13），56.1 （C-14），22.4 （C-15），27.8 （C-16），57.3 （C-17），12.2 （C-18），27.8（C-19），36.8 （C-20），19.4 （C-21），35.8 （C-22），27.8 （C-23），146.4 （C-24），29.0 （C-25），21.5 （C-26），21.4 （C-27），117.8 （C-28），12.9 （C-29），14.6 （C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［24］報道基本一致，故鑒定為檸檬二烯醇。

化合物20：白色粉末（氯仿）。ESI-MSm／z：375 ［M＋Na］＋，分子式C25H52。1H-NMR （400 MHz，CDCl3）δ：0.82 （6H，t，J＝6.6 Hz，H-1，25），1.18 （46H，m，H-2 ～24）；13C-NMR （100 MHz，CDCl3）δ：13.1 （C-1，25），21.7 （C-2，24），30.9 （C-3，23），28.6 （C-4，22），28.7 （C-5 ～21）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［25］報道基本一致，故鑒定為二十五烷。

化合物21：無色針晶（丙酮），ESI-MSm／z：653 ［M ＋H］＋，分子式C45H80O2。1H-NMR （400 MHz，Acetone-d6））δ：2.29 （2H，t，J＝7.2 Hz，H-4），5.31 （1H，d，J＝5.2 Hz，H-6），0.71 （ 3H，s，H-18），1.0 （ 3H，s，H-19），0.96 （3H，m，H-21），0.85 （3H，s，H-26），0.81 （3H，s，H-27），0.83 （3H，m，H-29），0.87 （ 3H，m，H-16′）；13C-NMR （ 100 MHz，Acetone-d6）δ：37.7 （C-1），32.0 （C-2），71.2（C-3），42.8 （C-4），141.8 （C-5），121.0 （C-6），32.1 （C-7），32.0 （C-8），50.7 （C-9），36.8 （C-10），21.3 （C-11），40.2 （C-12），42.6（C-13），57.1 （C-14），24.4 （C-15），28.4 （C-16），56.3 （C-17），21.8 （C-18），19.3 （C-19），36.4 （C-20），18.8 （C-21），34.1 （C-22），26.2（C-23），46.2 （C-24），29.2 （C-25），19.6 （C-26），19.2 （C-27），23.2 （C-28），11.7 （C-29），178.1 （C-1′），34.1 （C-2′），24.5 （C-3′），29.2（C-4′ ～5′），29.3 （C-6′），29.4 （C-7′），29.5（C-8′），29.6 （C-9′），29.8 （C-10′～13′），32.0（C-14′），23.2 （C-15′），14.3 （C-16′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［26］報道基本一致，故鑒定為β-谷甾醇棕櫚酸酯。

化合物22：淡黃色粉末（丙酮），HR-ESI-MSm／z：167 ［M ＋H］＋，分子式C9H10O3。1H-NMR（400 MHz，Acetone-d6）δ：6.82 （1H，d，J＝3.3 Hz，H-3），6.57 （1H，d，J＝3.3 Hz，H-4），4.57 （2H，s，H-6），6.55 （1H，d，J＝16.0 Hz，H-7），7.33 （1H，d，J＝16.0 Hz，H-8），2.27（3H，s，H-10）；13C-NMR （100 MHz，Acetone-d6）δ：152.5 （C-2），117.6 （C-3），113.5 （C-4），155.8 （C-5），64.8 （C-6），125.6 （C-7），130.2（C-8），197.7 （C-9），27.9 （C-10）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［27］報道基本一致，故鑒定為 （E）-4-［5- （hydroxymethyl）furan-2-yl］but-3-en-2-one。

化合物23：淡黃色針晶 （丙酮），ESI-MSm／z：257 ［M ＋Na］＋，分子式C12H10O5。1H-NMR（400 MHz，Acetone-d6）δ：6.72 （2H，d，J＝2.5 Hz，H-3，3′），7.40 （2H，d，J＝2.5 Hz，H-4，4′），4.69 （4H，s，H-6，6′），9.65 （2H，s，-CHO）；13C-NMR （100 MHz，Acetone-d6））δ：177.5 （C-1，1′），157.5 （C-2，2′），111.8 （C-3，3′），122.3 （ C-4，4′），153.1 （ C-5，5′），64.0 （C-6，6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［28］報道基本一致，故鑒定為雙- （5-甲酰基糠基）醚。

化合物24：淡黃色油 （甲醇），HR-ESI-MSm／z：180 ［M］＋，分子式C10H12O3。1H-NMR （400 MHz，CD3OD）δ：6.81 （1H，d，J＝3.4 Hz，H-3），6.53 （1H，d，J＝3.4 Hz，H-4），4.45 （2H，s，H-6），6.61 （1H，d，J＝16.0 Hz，H-7），7.39 （1H，d，J＝16.0 Hz，H-8），2.34 （3H，s，H-10），3.39 （3H，s，-OCH3）；13C-NMR （100 MHz，CD3OD）δ：152.3 （C-2），118.2 （C-3），113.2 （C-4），156.4 （C-5），67.1 （C-6），125.0（C-7），131.5 （C-8），200.6 （C-9），27.3 （C-10），58.3 （-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［27］報道 基 本 一 致，故 鑒 定 為 （E）-4- ［5-（methoxymethyl）furan-2-yl］but-3-en-2-one。

化合物25：紅色油（甲醇），HR-ESI-MSm／z：302 ［M］＋，分子式C17H18O5。1H-NMR （400 MHz，CD3OD）δ：6.53 （1H，d，J＝3.3 Hz，H-3，3′），6.50 （1H，d，J＝3.3 Hz，H-4，4′），4.44 （2H，s，H-6），6.97 （1H，d，J＝15.7 Hz，H-7，7′），7.51 （1H，d，J＝ 15.7 Hz，H-8，8′），3.35（3H，s，-OCH3）；13C-NMR （100 MHz，CD3OD）δ：151.5 （C-2，2′），117.1 （C-3，3′），111.9（C-4，4′），155.1 （C-5，5′），65.8 （C-6，6′），123.7 （C-7，7′），129.5 （C-8，8′），188.9 （C-9），57.0 （-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［27］報道基本一致，故鑒定為1，5-bis （5-methoxymethyl）furan-2-yl-penta-1，4-dien-3-one。

4 抗氧化活性研究

參考文獻(xiàn)［5］報道，將人參果水提物及人參果85%乙醇提取物濃縮，取一定量梯度稀釋，得到不同濃度的樣品溶液，以L-抗壞血酸為陽性對照，取2 mL 樣品溶液及陽性對照溶液，分別加入配制好的DPPH 溶液2 mL，充分混勻，在室溫下避光靜置30 min，在517 nm 波長處測定吸光度（A1），用水（85% 乙醇）替代樣品溶液測定吸光度（A0），用水（85%乙醇）替代DPPH 自由基溶液測定吸光度（A2）。以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（X），DPPH 自由基清除率為縱坐標(biāo)（Y），進(jìn)行線性回歸，并以半數(shù)抑制濃度（IC50）為評價指標(biāo)，重復(fù)3 次，取平均值，計算IC50值，結(jié)果見圖1。各溶劑提取物均具有一定的抗氧化能力，在50 ～300 μg／mL 范圍內(nèi)對DPPH 自由基的清除能力隨著質(zhì)量濃度的增加而增加，IC50值分別為119.50、103.60 μg／mL，L-抗壞血酸的IC50值為1.01 μg／mL，人參果85%乙醇提取物抗氧化能力強(qiáng)于人參果水提物。

圖1 人參果不同提取溶劑對DPPH 自由基的清除情況Fig.1 DPPH radical scavenging of S.muricatum with different extraction solvents

人參果85%乙醇提取物分別用水、30%甲醇、60%甲醇、甲醇洗脫，濃縮得各部分浸膏，進(jìn)行DPPH 自由基活性測定，結(jié)果見圖2。各極性段均具有一定的抗氧化能力，IC50值分別為594.04、4.16、53.30、24.89 μg／mL，抗氧化能力依次為30%甲醇部分、甲醇部分、60% 甲醇部分、水部分。

圖2 人參果85%提取物不同極性段對DPPH 自由基的清除情況Fig.2 DPPH radical scavenging in different polar segments of 85% extracts of S.muricatum

4 討論

本研究采用DPPH 法對人參果果實(shí)提取物進(jìn)行體外抗氧化活性篩選，發(fā)現(xiàn)人參果總提取物及85%乙醇提取物各極性段均有一定的自由基清除能力，其中30%甲醇部分顯示出較好的自由基清除能力； 通過硅膠、MCI gel、Sephadex LH-20、RPC18等方法從人參果中分離得到11 個酚酸及其酯、6 個甾醇、2 個呋喃、2 個雙呋喃、1 個苯丙素、1個異黃酮、2 個其他類化合物。研究發(fā)現(xiàn)，人參果中的化學(xué)成分主要以酚酸類化合物居多，酚酸類化合物具有抗炎、抗氧化、抗癌等生物活性［29］。人參果提取物抗氧化實(shí)驗(yàn)表明，人參果提取物具一定抗氧化活性，通過分離實(shí)驗(yàn)表明人參果中起到抗氧化作用的化合物為酚酸類化合物。據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)報道，化合物7 具有一定的保肝活性和抗炎活性［30］；化合物13 具有抗腫瘤生物活性，有望成為治療惡性腫瘤的潛在藥物成分［31］； 化合物14 具有較強(qiáng)的抗氧化活性［32］； 化合物22、24 具有抑制免疫的活性； 化合物25 具有抑制ADP 體外刺激的正常小鼠血小板聚集的活性。本研究豐富了人參果化學(xué)成分，為人參果抗氧化的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及功能性產(chǎn)品開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。