生化檢驗(yàn)項(xiàng)目與慢性乙型肝炎患者肝纖維化分期的關(guān)系分析

陳彩霞 ，馮令枝

（云浮市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 云浮 527300）

乙型肝炎病毒感染為慢性乙型肝炎發(fā)生的基礎(chǔ)，可誘導(dǎo)肝臟持續(xù)損傷，如未得到有效控制，可反復(fù)發(fā)作，可導(dǎo)致患者肝臟纖維化，甚至可能發(fā)展為肝硬化病變，嚴(yán)重影響患者正常生活。早期識(shí)別慢性乙型肝炎肝纖維化并及時(shí)治療，對(duì)改善患者疾病轉(zhuǎn)歸情況具有重要意義，有利于阻止肝硬化的發(fā)生與發(fā)展。肝穿刺活檢是診斷肝纖維化的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但其為創(chuàng)傷性檢查，尋求更簡便易行方法對(duì)肝纖維化進(jìn)行評(píng)估具有重要意義[1]。肝纖維化血清標(biāo)志物及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)作為無創(chuàng)檢測指標(biāo)在臨床應(yīng)用廣泛[2]，但是肝纖維化血清標(biāo)志物在肝纖維化各期的表達(dá)狀況、如何根據(jù)血清標(biāo)志物水平準(zhǔn)確判斷患者肝纖維化程度尚未完全明確。因此，本研究旨在探討生化檢驗(yàn)血清學(xué)指標(biāo)與慢性乙型肝炎患者肝纖維化分期的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料回顧性分析2021年7月至2023年7月云浮市人民醫(yī)院收治的110 例慢性乙型肝炎患者的臨床資料，將其作為觀察組。其中男性52 例，女性58例；年齡22～84 歲，平均（54.48±7.14）歲；BMI 16.00～27.00 kg/m2；平均（22.51±2.53） kg/m2；病程2～8年，平均（4.42±0.65）年。慢性乙型肝炎患者分組判斷標(biāo)準(zhǔn)[3]：于超聲引導(dǎo)下行肝穿刺，取肝活組織，用甲醛溶液浸泡后送病理檢查。肝纖維化的病理分期包括：S0 期：無肝纖維化；S1 期：匯管區(qū)纖維化擴(kuò)大，局限于竇周、小葉內(nèi)纖維化；S2 期：匯管區(qū)周圍纖維化，形成纖維間隔，大部分小葉結(jié)構(gòu)保留；S3 期：大量纖維間隔，致小葉結(jié)構(gòu)紊亂，尚無肝硬化；S4 期：肝硬化。以肝臟組織病理檢查結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)將觀察組患者分為S0 組（33 例）、S1～S2 組（41 例）、S3～S4 組（36 例），S0 組患者中男性15 例，女性18 例；年齡22～84 歲，平均（55.33±6.99）歲；BMI 16.00～27.00 kg/m2；平均（22.31±2.59） kg/m2。S1～S2 組患者中男性20 例，女性21 例；年齡21～80歲，平均（54.77±7.08）歲；BMI 16.00～26.00 kg/m2，平均（22.57±2.23） kg/m2。S3～S4 組患者中男性17 例，女性19 例；年齡23～81 歲，平均（53.94±7.23）歲；BMI 17.00～27.00 kg/m2，平均（22.44±2.12） kg/m2。另回顧性分析同期56 例健康體檢者的體檢資料，將其作為對(duì)照組，其中男性25 例，女性31 例；年齡21～79 歲，平均（53.11±6.78）歲；BMI 16.00～27.00 kg/m2；平均（22.31±2.55） kg/m2。觀察組4 組患者和對(duì)照組研究對(duì)象一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），組間可比。診斷標(biāo)準(zhǔn)：慢性乙型肝炎依據(jù)《慢性乙型肝炎防治指南（2019年版）》[4]中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①與上述診斷標(biāo)準(zhǔn)符合；②乙肝病毒檢測均為陽性并經(jīng)肝活組織檢查確診；③臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①除乙型肝炎外的其他類型病毒性肝炎；②失代償期肝硬化；③合并原發(fā)性肝癌或轉(zhuǎn)移性肝癌。本研究方案已經(jīng)通過云浮市人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)部門詳細(xì)審核，并在批準(zhǔn)通過后實(shí)施。

1.2 研究方法采集所有研究對(duì)象空腹靜脈血約6 mL，以轉(zhuǎn)速為3000 r/min 進(jìn)行離心處理15 min，分離血清，采用化學(xué)發(fā)光法檢測所有研究對(duì)象的血清透明質(zhì)酸（HA）、層粘連蛋白（LN）、IV 型前膠原（IV-C）、Ⅲ型前膠原（PC Ⅲ）水平；采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測所有研究對(duì)象血清缺氧誘導(dǎo)因子1α（HIF-1α）、巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子（MIF）水平。

1.3 觀察指標(biāo)①比較各組研究對(duì)象血清肝纖維化指標(biāo)HA、 LN、 IV-C、 PC Ⅲ水平。②比較各組研究對(duì)象實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)HIF-1α、 MIF 水平。③分析實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)與肝纖維化指標(biāo)及肝纖維化程度的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 26.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料經(jīng)S-W 法檢驗(yàn)證實(shí)符合正態(tài)分布且方差齊，以(±s)表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)；采用Pearson相關(guān)系數(shù)法分析實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)與肝纖維化指標(biāo)、肝纖維化程度的相關(guān)性。以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組研究對(duì)象肝纖維化指標(biāo)比較與對(duì)照組比，S0組、 S1～S2 組、 S3～S4 組患者血清HA、 LN、 IV-C、 PC Ⅲ水平均升高，且隨著肝纖維化分期的升高，各指標(biāo)均逐漸升高，各組間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表1。

表1 各組研究對(duì)象肝纖維化指標(biāo)比較(μg/L，±s)

表1 各組研究對(duì)象肝纖維化指標(biāo)比較(μg/L，±s)

注：與對(duì)照組比，*P＜0.05；與S0 組比，#P＜0.05；與S1～S2 組比，△P＜0.05。HA：透明質(zhì)酸；LN：層粘連蛋白；IV-C：IV 型前膠原；PC Ⅲ：Ⅲ型前膠原。

組別例數(shù)HALNIV-CPC Ⅲ對(duì)照組5620.63±5.398.67±2.286.45±2.267.34±1.81 S0 組3341.22±8.67*25.62±5.54*24.64±6.05*24.46±7.38*S1～S2 組4155.74±9.87*# 31.77±6.59*# 27.88±7.14*# 33.89±6.97*#S3～S4 組36 96.99±10.45*#△ 57.69±8.44*#△ 39.95±8.63*#△ 45.93±7.42*#△F 值606.658524.492236.640339.392 P 值＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05

2.2 各組研究對(duì)象實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較與對(duì)照組比， S0 組、S1～S2 組、 S3～S4 組患者血清HIF-1α、MIF 水平均升高；且隨著肝纖維化分期的升高，實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)逐漸升高，各組間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表2。

表2 各組研究對(duì)象實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較(μg/L， ±s)

注：與對(duì)照組比，*P＜0.05；與S0 組比，#P＜0.05；與S1～S2 組比，△P＜0.05。HIF-1α：缺氧誘導(dǎo)因子1α；MIF：巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子。

組別例數(shù)HIF-1αMIF對(duì)照組5634.63±6.3918.44±5.81 S0 組3345.22±8.67* 29.46±6.38*S1～S2 組4159.87±9.44*# 43.79±8.93*#S3～S4 組36 88.71±11.26*#△ 53.47±11.91*#△F 值291.308151.665 P 值＜0.05＜0.05

2.3 分析實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)與肝纖維化指標(biāo)及程度的相關(guān)性Pearson 相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血清HIF-1α、 MIF 水平與HA、 LN、 IV-C、 PC Ⅲ及纖維化程度均呈正相關(guān)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表3。

表3 分析實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)與肝纖維化指標(biāo)、肝纖維化程度的相關(guān)性

3 討論

慢性乙型肝炎肝纖維化患者可表現(xiàn)出乏力、食欲減退、厭油膩、右上腹不適等癥狀，治療難度較大，嚴(yán)重影響其預(yù)后，給患者和社會(huì)帶來沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。肝活組織病理檢查存在不能連續(xù)動(dòng)態(tài)監(jiān)測的缺點(diǎn)，且對(duì)機(jī)體損傷大，因此，尋找客觀、準(zhǔn)確的指標(biāo)來評(píng)價(jià)肝纖維化程度已經(jīng)成為研究熱點(diǎn)。

HA 為肝星狀細(xì)胞合成的糖胺多糖，肝纖維化過程中合成HA 增加，進(jìn)入血液循環(huán)達(dá)到肝血竇內(nèi)皮細(xì)胞降解，肝血竇內(nèi)皮細(xì)胞受損導(dǎo)致失去代謝HA 能力，進(jìn)而使肝臟對(duì)血清HA 攝取減少，導(dǎo)致其水平異常升高[5]。LN 屬結(jié)構(gòu)性糖蛋白，存在于基膜的透明層中，為基底膜中特有的非膠原性結(jié)構(gòu)蛋白，與肝纖維化活動(dòng)程度呈正相關(guān)[6]。IV-C升高反映了肝臟內(nèi)纖維化的程度，其水平在機(jī)體血清含量逐漸升高，則病情發(fā)展由慢性肝炎逐漸轉(zhuǎn)化為肝硬化，繼而轉(zhuǎn)化為肝癌[7]。PC Ⅲ水平與肝纖維化病變程度關(guān)系密切，其能夠反映肝纖維合成的狀況及是否處于炎癥活動(dòng)性，在肝硬化早期有明顯升高[8]。本研究中，與對(duì)照組比，S0 組、S1～S2 組、S3～S4 組患者血清HA、LN、IV-C、PC Ⅲ水平均升高，且隨著肝纖維化分期的升高，各指標(biāo)均逐漸升高，提示慢性乙型肝炎患者肝纖維化程度加重與上述指標(biāo)密切相關(guān)。

HIF-1α 促進(jìn)肝纖維化的發(fā)展可能與激活轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）信號(hào)通路有關(guān)，研究發(fā)現(xiàn)，HIF-1α 可通過抑制TGF-β 信號(hào)通路的激活阻斷TGF-β 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，減少肝臟細(xì)胞外基質(zhì)的沉積，降低肝纖維化程度[9]。MIF作為免疫調(diào)節(jié)因子，主要在肝細(xì)胞表達(dá)，可抑制巨噬細(xì)胞游走，其在肝炎患者血清和局部病變中呈現(xiàn)高表達(dá)，患者肝纖維化程度與患者M(jìn)IF 釋放關(guān)系密切[10]。本研究中，與對(duì)照組比，S0 組、S1～S2 組、S3～S4 組患者血清HIF-1α、MIF 水平均升高，且隨著肝纖維化分期的升高，實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)變化幅度越大，說明上述實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)水平對(duì)于初步判斷慢性乙型肝炎患者肝組織纖維化程度具有一定的意義。

本研究Pearson 相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血清HIF-1α、MIF 水平與HA、LN、IV-C、PC Ⅲ及纖維化程度呈正相關(guān)。分析其原因，慢性乙型肝炎導(dǎo)致的肝纖維化為肝臟細(xì)胞外基質(zhì)膠原、蛋白多糖等病理性沉積，HA 反映肝內(nèi)細(xì)胞功能，LN 反映肝纖維化，正常肝臟間質(zhì)含少量LN，在纖維化和肝硬化時(shí)，肌成纖維細(xì)胞增多，大量合成和分泌膠原、LN 等間質(zhì)成分，IV-C 是基底膜的主要成分，PC Ⅲ反映Ⅲ型膠原代謝的活性，上述指標(biāo)均為纖維化特異性血清學(xué)標(biāo)志物，在肝臟組織纖維化過程中會(huì)逐漸被釋放入血，因此慢性乙型肝炎患者上述指標(biāo)明顯升高。HIF-1α 對(duì)肝纖維化的發(fā)展及肝星形細(xì)胞的活化具有重要調(diào)節(jié)作用，其可通過調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白酶/組織抑制劑基質(zhì)金屬蛋白酶-1 的表達(dá)促進(jìn)肝纖維化；MIF 作為一種參與遲發(fā)性超敏反應(yīng)和多種巨噬細(xì)胞功能淋巴因子，能夠抑制巨噬細(xì)胞的移動(dòng)，并參與炎癥及免疫疾病的發(fā)生，抑制MIF 活性能夠抑制周細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞表型分化，下調(diào)肝纖維化指標(biāo)的表達(dá)[11]。

綜上， 慢性乙型肝炎患者肝纖維化發(fā)生與發(fā)展均與血清HA、LN、IV-C、PC Ⅲ、HIF-1α、MIF 水平的升高密切相關(guān)，且肝纖維化指標(biāo)及肝纖維化程度均與HIF-1α、MIF水平正相關(guān)，臨床可通過檢測上述指標(biāo)水平診斷肝纖維病情，防治肝纖維化的發(fā)生與發(fā)展，降低慢性乙型肝炎患者發(fā)生肝纖維化的風(fēng)險(xiǎn)。