內(nèi)皮素-1、中性粒細胞/淋巴細胞比率、血小板/淋巴細胞比率及N 末端腦鈉肽前體在慢性阻塞性肺疾病合并肺動脈高壓患者中的表達水平及臨床意義

朱春梅

（前海人壽廣西醫(yī)院呼吸內(nèi)科，廣西 南寧 530200）

慢性阻塞性肺疾?。╟hronic obstructive pulmonary disease, COPD）是以不完全可逆氣流受限為特征的常見呼吸系統(tǒng)疾病。肺動脈高壓（pulmonary hypertension, PH）是該疾病嚴重的并發(fā)癥，也是該疾病進展惡化的首要原因。嗜中性粒細胞/淋巴細胞比率（NLR）和血小板/淋巴細胞比率（PLR）是炎癥診斷標(biāo)志物，COPD 合并PH 患者肺血管結(jié)構(gòu)改變后會誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致NLR、PLR 變化[1]。內(nèi)皮素-1 與多種血管性疾病有關(guān)，其能損傷內(nèi)皮細胞，引起血管收縮，導(dǎo)致PH 的發(fā)生，且PH 患者肺動脈壓力上升可導(dǎo)致右心室負荷增加，導(dǎo)致血清N 末端腦鈉肽前體（NT-ProBNP）分泌[2]。但目前針對內(nèi)皮素-1、NLR、PLR 及NT-proBNP 與COPD 并發(fā)PH 的關(guān)系尚不明確?；诖耍狙芯恐荚诜治鰞?nèi)皮素-1、NLR、PLR 及NT-proBNP 在COPD 合并PH 患者中的表達水平及臨床意義，為臨床診斷COPD 合并HP 提供依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2021年1月至2023年6月前海人壽廣西醫(yī)院收治的150 例COPD 患者，開展前瞻性研究。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《慢性阻塞性肺疾病診治指南（2013年修訂版）》[4]中COPD 的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②具有咳嗽、咳痰、進行性加重的呼吸困難癥狀；③經(jīng)胸X 線片檢查確診；④年齡>55 歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并COPD 以外的呼吸系統(tǒng)疾??；②合并惡性腫瘤、自身免疫性疾病、骨代謝疾病；③近6 個月內(nèi)有手術(shù)史。本研究嚴格遵循世界醫(yī)學(xué)大會《赫爾辛基宣言》要求，所有研究對象均簽署知情同意書。

1.2 分組方法將COPD 單發(fā)者作為對照組（54 例），COPD并發(fā)PH 者作為觀察組[96 例，按照2015年《ESC/ERS肺動脈高壓診斷與治療指南》，將COPD 患者超聲心動圖檢查肺動脈壓≥ 40 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）提示合并PH[3]]。另參照PH 診治指南[3]，根據(jù)PH 嚴重程度將觀察組患者分為PH- 輕度組、PH- 中度組及PH- 重度組，其中輕度：肺動脈壓40～50 mmHg，中度：肺動脈壓51～70 mmHg，重度：肺動脈壓≥ 71 mmHg。對照組患者男性32 例，女性22 例；年齡53～90 歲，平均（69.22±8.15）歲；BMI 15.5～29.1 kg/m2，平均（22.53±3.11） kg/m2；有吸煙史28 例；COPD 病程3～16年，平均（10.28±2.64）年。觀察組患者男性57 例，女性39 例；年齡53～89 歲，平均（70.13±7.52）歲；BMI 15.7～32.3 kg/m2，平均（22.61±4.02） kg/m2；有吸煙史46 例；COPD 病程3～18年，平均（10.64±3.02）年。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），組間可比。

1.3 研究方法采集所有患者清晨空腹靜脈血6 mL，分成3 份，第1 份抗凝后以2000 r/min 離心15 min，分離血漿待檢，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測血漿內(nèi)皮素-1水平；第2 份采用全自動血液細胞分析儀（深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司，型號：BC-20 型）檢測患者的全血中性粒細胞、淋巴細胞及血小板水平，NLR=中性粒細胞/淋巴細胞；PLR=血小板/淋巴細胞；最后1 份經(jīng)2000 r/min 離心15 min 后取血清，采用自動免疫定量分析儀（武漢明德生物科技股份有限公司，型號：QMT8000）檢測血清NT-proBNP 水平。應(yīng)用肺功能檢測儀器（徐州品源醫(yī)療科技有限公司，型號：LUD-V4）檢測所有患者肺功能指標(biāo)，包括第1 秒用力呼氣容量（FEV1）/用力肺活量（FVC）比值、殘氣量占預(yù)計值百分比（RV%）、肺總量占預(yù)計值百分比（TLC%）；采集動脈血2 mL，采用血氣分析儀（梅州康立高科技有限公司，型號：BG-800）檢測動脈血氧分壓（PaO2）、動脈血二氧化碳分壓（PaCO2）。

1.4 觀察指標(biāo)①比較對照組與觀察組患者肺功能和血氣指標(biāo)，包括FEV1/FVC、RV%、TLC%、PaO2、PaCO2、肺動脈壓。②血漿內(nèi)皮素-1，全血NLR、PLR 及血清NT-proBNP表達水平。③比較觀察組中不同嚴重程度PH 患者的血漿內(nèi)皮素-1、全血NLR、PLR 及血清NT-proBNP 表達水平。④分析COPD 合并PH 患者中各指標(biāo)表達水平與肺動脈壓的相關(guān)分析。⑤采用受試者工作特征（ROC）曲線分析血漿內(nèi)皮素-1、全血NLR、PLR 及血清NT-proBNP 預(yù)測COPD 并發(fā)PH 的診斷價值。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 23.0 統(tǒng)計學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計數(shù)資料以[例(%)]表示，行χ2檢驗；計量資料均使用S-W 法檢驗證實服從正態(tài)分布，以(±s)表示，兩組間采用t檢驗，3 組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用SNK-q檢驗。采用Pearson 或Spearman 相關(guān)分析法進行相關(guān)性分析，r>0.8 提示變量間高度相關(guān)；0.5＜r≤ 0.8提示變量間中度相關(guān)；0.3＜r≤ 0.5 提示變量間低度相關(guān)；r≤ 0.3 提示變量間不存在線性相關(guān)關(guān)系。采用ROC曲線分析內(nèi)皮素-1、NLR、PLR 及NT-proBNP 指標(biāo)預(yù)測COPD 并發(fā)PH 的診斷效能。以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對照組與觀察組肺功能和血氣指標(biāo)比較兩組患者FEV1/FVC、RV%、TLC%相比，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P>0.05）；觀察組患者PaO2低于對照組，PaCO2、肺動脈壓高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），見表1。

表1 對照組與觀察組患者肺功能和血氣指標(biāo)比較( ±s)

表1 對照組與觀察組患者肺功能和血氣指標(biāo)比較( ±s)

注：FEV1：第1 秒用力呼氣容量；FVC：用力肺活量；RV%：殘氣量占預(yù)計值百分比；TLC%：肺總量占預(yù)計值百分比；PaO2：動脈血氧分壓；PaCO2：動脈血二氧化碳分壓。1 mmHg=0.133 kPa。

組別例數(shù)FEV1/FVCRV%TLC%PaO2(mmHg)PaCO2(mmHg) 肺動脈壓(mmHg)對照組540.65±0.16146.39±28.75123.58±20.3269.25±3.2448.67±4.5732.56±5.38觀察組960.63±0.17150.26±33.02128.36±21.2561.55±3.0153.24±5.0257.92±6.42 t 值0.7060.7211.34314.6305.52424.570 P 值>0.05>0.05>0.05＜0.05＜0.05＜0.05

2.2 對照組與觀察組患者內(nèi)皮素-1、NLR、PLR 及NT-proBNP表達水平比較 觀察組患者血漿內(nèi)皮素-1，全血NLR、PLR 及血清NT-proBNP 水平均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），見表2。

表2 對照組與觀察組患者內(nèi)皮素-1、NLR、PLR 及NT-proBNP 表達水平比較( ±s)

表2 對照組與觀察組患者內(nèi)皮素-1、NLR、PLR 及NT-proBNP 表達水平比較( ±s)

注：NLR：中性粒細胞/淋巴細胞比率；PLR：血小板/淋巴細胞比率；NT-proBNP：N 末端腦鈉肽前體。

組別例數(shù)內(nèi)皮素-1(ng/L)NLRPLRNT-proBNP(pg/mL)對照組545.85±0.832.53±0.82158.12±50.27186.39±60.89觀察組968.63±3.243.64±1.28242.00±85.79302.56±79.69 t 值6.1845.7406.5729.290 P 值＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05

2.3 COPD 合并不同嚴重程度PH 患者中各指標(biāo)表達水平比較PH- 中度組、PH- 重度組患者血漿內(nèi)皮素-1，全血NLR、PLR，血清NT-proBNP 水平均高于PH- 輕度組，且PH- 重度組均高于PH- 中度組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），見表3。

表3 COPD 合并不同嚴重程度COPD 并發(fā)PH 患者中各指標(biāo)表達水平比較( ±s)

表3 COPD 合并不同嚴重程度COPD 并發(fā)PH 患者中各指標(biāo)表達水平比較( ±s)

注：與PH- 輕度組比，△P＜0.05；與PH- 中度組比，▲P＜0.05。COPD：慢性阻塞性肺疾??；PH：肺動脈高壓。

組別例數(shù)內(nèi)皮素-1(ng/L)NLRPLRNT-proBNP(pg/mL)PH- 輕度組386.22±0.582.94±0.86175.95±37.03234.63±74.63 PH- 中度組36 8.36±1.94△ 3.41±0.93△ 268.75±77.39△ 296.95±97.61△PH- 重度組2213.27±2.69△▲ 5.20±1.03△▲ 312.32±81.21△▲ 429.08±84.60△▲F 值109.44343.09335.01335.634 P 值＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05

2.4 COPD 合并PH 患者中各指標(biāo)表達水平與肺動脈壓的相關(guān)分析COPD 合并PH 患者的肺動脈壓與全血NLR和血清NT-proBNP 呈中度正相關(guān)（r=0.528、0.517），與血漿內(nèi)皮素-1 和全血PLR 呈低度正相關(guān)（r=0.419、0.329），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。ROC 曲線分析顯示，血漿內(nèi)皮素-1、全血NLR、PLR 及血清NT-proBNP 預(yù)測COPD 并發(fā)PH 的AUC 均超過0.7，且以血清NT-proBNP的診斷效能最高，有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表4、圖1。

圖1 內(nèi)皮素-1、NLR、PLR 及NT-proBNP 預(yù)測COPD 并發(fā)PH的ROC 曲線

3 討論

COPD 表現(xiàn)為進行性氣流受限，過度充氣、低氧血癥、高碳酸血癥和肺血管壓力升高，而合并PH 的患者內(nèi)膜纖維化和增厚，血管內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞增殖，血管阻力增加，血管擴張減弱，從而導(dǎo)致肺動脈壓力增大。本研究中，觀察組患者PaO2低于對照組，PaCO2、肺動脈壓高于對照組，表明COPD 伴PH 患者存在更明顯的低氧狀態(tài)，肺動脈壓明顯升高。分析其原因為，COPD 患者長期過度的低氧、二氧化碳潴留致肺血管收縮，最終使肺血管阻力增加而產(chǎn)生PH[5]。

動脈導(dǎo)管介入測量是COPD 合并PH 的常規(guī)檢查，該方式有創(chuàng)且費用較高，而生化指標(biāo)檢測簡單易行，可用于診斷COPD 合并PH。內(nèi)皮素-1 能促進COPD 患者肺動脈平滑肌增殖，從而增加肺部血管的壓力，形成PH，因而內(nèi)皮素-1 大量的釋放會加重患者病情[6]。NLR 可一定程度反映機體炎癥狀況，其中淋巴細胞介導(dǎo)血管重構(gòu)，主要表現(xiàn)為輔助T 淋巴細胞數(shù)量（肺血管重塑）和調(diào)節(jié)T 細胞數(shù)量（抑制肺動脈內(nèi)皮炎癥及內(nèi)皮細胞凋亡）增多；中性粒細胞所分泌的細胞因子（如白細胞介素-6）可促進血管內(nèi)皮生長因子生成，并減少骨形成蛋白Ⅱ型受體和轉(zhuǎn)化生長因子β 受體2 的表達，進而加快肺血管平滑肌細胞增殖，最終促進PH 形成，NLR 越高，表明COPD 合并PH 患者病情越嚴重[7]。PLR 主要反映機體炎癥反應(yīng)與免疫狀態(tài)，水平升高反映血小板相對增多，淋巴細胞數(shù)目相對減少。COPD 患者體內(nèi)炎癥因子過度激活，誘發(fā)應(yīng)激反應(yīng)，造成肺血管內(nèi)皮損傷，可能激活血小板，導(dǎo)致血小板聚集，同時體內(nèi)應(yīng)激反應(yīng)促進糖皮質(zhì)激素大量分泌，加上炎癥因子分泌，導(dǎo)致淋巴細胞比值下降及免疫功能減退，從而促進PH 發(fā)生[8]。NT-proBNP 由心肌細胞在刺激后分泌，其水平上升提示心臟前后負荷的增高，而肺動脈壓力上升，將進一步刺激右心室，促進NT-proBNP 的上升[9]。

本研究中，觀察組的血漿內(nèi)皮素-1、全血NLR、PLR、血清NT-proBNP 水平均高于對照組，且PH- 輕度組、PH- 中度組和PH- 重度組上述指標(biāo)水平逐漸升高。表明血漿內(nèi)皮素-1、全血NLR、PLR、血清NT-proBNP 水平在COPD 和COPD 合并PH 患者中表達上升，且合并PH 患者病情越嚴重，上述指標(biāo)水平越高。此外，本研究結(jié)果顯示，血漿內(nèi)皮素-1、全血NLR、PLR 及血清NT-proBNP 預(yù)測COPD并發(fā)PH 的AUC 均超過0.7，且以血清NT-proBNP 的診斷效能最高，提示血漿內(nèi)皮素-1、全血NLR、PLR 及血清NT-proBNP 可用來檢測COPD 患者發(fā)生PH 的發(fā)生，血清NT-proBNP 對COPD 合并PH 的診斷價值最高，推測其原因可能為，COPD 患者的肺動脈壓力快速上升時，可使心臟前后負荷的加劇，NT-proBNP 偏高，且NT-proBNP 干擾因素少，有較高的敏感性和陽性預(yù)測價值。

內(nèi)皮素-1 能夠促進氣道的平滑肌細胞和肺成纖維細胞的增生肥大，進而激活血小板并損害內(nèi)皮細胞，最終導(dǎo)致血管收縮和血管壁增厚，加速 COPD 患者PH 癥狀的產(chǎn)生[10]。NLR 和PLR 均有隨患者肺動脈壓增加而增高的趨勢，但目前NLR、PLR 與COPD 繼發(fā)PH 相關(guān)的確切機制尚不明確，推測可能是因為，病毒及細菌促進了促炎和趨化因子形成；同時，活化的中性粒細胞和血小板誘導(dǎo)炎癥因子釋放；這些因子導(dǎo)致肺泡結(jié)構(gòu)異常改變，加重氣道重建及肺實質(zhì)炎癥，且隨著COPD 的持續(xù)惡化，PH 形成風(fēng)險增加[11]。隨著PH 的加重，心臟收縮后負荷增高，NT-proBNP 含量增高[12]。本研究中，COPD 合并PH 患者的肺動脈壓與血漿內(nèi)皮素-1、全血NLR、PLR、血清NT-proBNP 呈低度或中度相關(guān)，表明這些指標(biāo)對COPD 患者PH 的形成有一定影響。

綜上，COPD 伴PH 患者存在更明顯的低氧狀態(tài)，肺動脈壓明顯升高，其血漿內(nèi)皮素-1、全血NLR、PLR、血清NT-proBNP 水平表達上升，且與COPD 合并PH 患者的肺動脈壓呈正相關(guān)，臨床可通過動態(tài)觀察上述指標(biāo)來監(jiān)測COPD 患者PH 的發(fā)生和發(fā)展。