郭麗觀 廈門市第三醫(yī)院 (福建 廈門 361000)
內(nèi)容提要:目的:采用Sysmex XN-1000血液分析儀對血常規(guī)主要指標進行測定,分析脂血對其結(jié)果所產(chǎn)生的影響。方法:選取沒有溶血、脂血與黃疸的標本20份(當作對照組),對其實施離心操作,將上層血漿成分給予去除,將Sysmex XN-1000血液分析儀原裝配套稀釋液(同體積)加入,對血常規(guī)進行測定(試驗組),把最終結(jié)果對比于對照組;選取沒有脂血、黃疸、溶血且已經(jīng)測定的血常規(guī)標本66份,將其隨機分成三組,用貝克曼AU5800全自動生化分析儀對甘油三酯(TG)進行測定,依據(jù)TG含量的差異對脂血程度實施分級:輕度脂血組(沒有加脂肪乳劑的測定結(jié)果當作對照1組)、中度脂血組(沒有加脂肪乳劑的測定結(jié)果當作對照2組)與重度脂肪組(沒有加脂肪乳劑的測定結(jié)果當作對照3組);把測定結(jié)果均對比于沒有加脂肪乳劑者的測定結(jié)果。結(jié)果:對照1組較之輕度脂血組,13項參數(shù)結(jié)果對比并無顯著差異(P>0.05);中度脂血組較之對照2組,以及重度脂血組相比對照3組,白細胞(WBC)、平均紅細胞血紅蛋白濃度(MCHC)、平均紅細胞血紅蛋白含量(MCH)與血紅蛋白(Hb)都有明顯升高(P<0.05)。結(jié)論:在采用Sysmex XN-1000血液分析儀對血常規(guī)指標進行檢測時,中、重度脂血對WBC、MCH、Hb、MCHC參數(shù)有著較大影響,且伴隨脂血程度的加重,其影響也隨之加大。
Sysmex XN-1000血液分析儀實為一臺五分類血液分析儀,能夠?qū)崿F(xiàn)全自動操作,有著較快的檢測速度,其不僅運用了常規(guī)的射頻法、電阻抗法,而且還采用了較新型的流式細胞激光技術(shù),可通過與熒光染料、特殊化學試劑相結(jié)合,對靜脈血白細胞計數(shù)(white blood cell count,WBC)實施分類,故能促進WBC分析結(jié)果靈敏性與準確性的提高[1]。但需指出的是,所得到的血液細胞分析結(jié)果是否準確,不僅與儀器性能、標本采集及分析前患者準備情況等因素有關(guān),而且還與血液自身因素相關(guān),即血液當中可能存在一些干擾因素(如脂血、溶血等),會對血液分析儀的檢測結(jié)果造成影響[2]。本文圍繞輸注脂肪乳劑后出現(xiàn)脂血情況的標本,采用Sysmex XN-1000血液分析儀對血常規(guī)當中的一些常用指標進行測定與分析,且構(gòu)建了糾正措施。所選取的血常規(guī)指標有嗜堿性粒細胞(Basophil,BASO)百分比、單核細胞(Monocyte,MONO)百分比、中性粒細胞(Neutrophils,NEUT)百分比、平均紅細胞血紅蛋白含量(Mean corpuscular hemoglobin,MCH)、紅細胞比容(Hematocrit,HCT)、血小板計數(shù)(Platelet count,PLT)、WBC計數(shù)、嗜酸性粒細胞(Eosinophils,EOS)百分比、淋巴細胞(Lymphocyte,LYMPH)百分比、平均紅細胞血紅蛋白濃度(Mean corpuscular hemoglobin concentration,MCHC)、平均紅細胞容積(Mean corpuscular volume,MCV)、血紅蛋白(Hemoglobin,Hb)及紅細胞計數(shù)(Red blood cell count,RBC)等,現(xiàn)對測定結(jié)果及影響剖析如下。
儀器:血液分析儀[日本SYSMEX(希森美康)株式會社,XN-1000型];全自動生化分析儀(貝克曼公司,AU5800型);離心機(日本久保田公司,KUBOTA8420型)。
試劑:采用Sysmex XN-1000血液分析儀相配套的原裝試劑以及全血質(zhì)控品;瀏陽市三力醫(yī)用科技有限公司生產(chǎn)的乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)真空采血管;貝克曼公司生產(chǎn)的甘油三酯(Triglyceride,TG)試劑;20%中/長鏈脂肪乳注射液(蘇州貝朗公司)。
標本來源:所有標本均來自本院2021年11月~2022年11月收治的住院患者,于清晨且空腹下,對靜脈血進行抽?。?mL),置入真空采血管(EDTA-K2)中,靜置(室溫狀態(tài)下),將溶血、黃疸、脂血對檢測結(jié)果所帶來的影響排除掉,在特定四件內(nèi)測完(2h內(nèi))。
首先選取沒有脂血、黃疸與溶血的標本20份,將其作為本次研究的對照組,于閉蓋模式下,對血常規(guī)進行測定,且將結(jié)果進行準確記錄。把標本離心處理(3000r/min,10min),將位于上層的血漿成分給予去除,然后把血液分析儀相配套的原裝稀釋液(同體積)加入,充分混勻,然后對血常規(guī)指標進行測定,當作試驗組,對比兩組結(jié)果。
選取沒有脂血、溶血與黃疸并且已經(jīng)測定血常規(guī)的標本66份,將其采用隨機數(shù)字表法分成三組,每組22例,用試驗組相同方法將上層血漿分別去除10μL、50μL、100μL,后在把相同體積的脂肪乳劑加入,采用全自動生化分析儀對TG實施測定,依據(jù)TG所呈現(xiàn)出的不同含量,把脂血程度實施準確分級,得知TG在6.0~10.0mmol/L有21例,即輕度脂血組,把其前所測結(jié)果當作對照1組;10.1~14.0mmol/L的21例,即中度脂血組,其前所測結(jié)果作為對照2組;>14.0mmol/L為24例,即為重度脂肪組,其前所測結(jié)果當作對照3組?;陂]蓋模式,對不同程度脂血標本的血常規(guī)進行測定,把結(jié)果對比于其前所測結(jié)果。
采用SPSS22.0進行數(shù)據(jù)處理,計量資料、計數(shù)資料分別行t檢驗、χ2檢驗,若組間經(jīng)對比差異顯著,則由P<0.05予以表示。
對照1組較之輕度脂血組的血常規(guī)各指標,其中,WBC、MCH、MCHC、BC、Hb差異顯著(P<0.05);但與Sysmex公司所規(guī)定的精密度要求以及2012年質(zhì)量管理基本要求的儀器校準允許偏差范圍(上海市臨床檢驗中心)相結(jié)合,本文對對照組、試驗組于同一時間內(nèi)對同一份標本進行先后檢測,因此,可依據(jù)儀器緊密度規(guī)定的允許偏差方位,結(jié)合臨床分析,對比各項指標,結(jié)果均不明顯(P>0.05),見表1。
表1.對比對照1組與輕度脂血組的血常規(guī)結(jié)果(±s)
表1.對比對照1組與輕度脂血組的血常規(guī)結(jié)果(±s)
組別n RBC(×1012/L)Hb(g/L)HCT(%)MCV(fL)MCH(pg)MCHC(g/L)PLT(×109/L)對照1組21 3.97±0.80 120.34±24.39 35.72±5.18 89.53±4.97 30.23±1.84 338.14±12.06 165.02±95.03輕度脂血組21 3.94±0.78 121.25±25.64 35.77±5.12 89.55±4.97 30.62±1.77 342.17±12.10 171.25±101.30 t 0.123 0.118 0.031 0.013 0.700 1.081 0.206 P 0.903 0.907 0.975 0.990 0.488 0.286 0.838
續(xù)表1.對比對照1組與輕度脂血組的血常規(guī)結(jié)果(±s)
表1.對比對照1組與輕度脂血組的血常規(guī)結(jié)果(±s)
組別n WBC(×109/L)NEUT(%)LYMPH(%)MONO(%)EOS(%)BASO(%)對照1組21 9.15±4.00 76.50±13.56 16.13±2.78 5.50±2.03 1.61±0.80 0.22±0.05輕度脂血組21 9.30±3.93 76.48±13.49 16.20±2.84 5.50±2.02 1.56±0.74 0.20±0.04 t 0.123 0.005 0.081 0.000 0.210 1.431 P 0.903 0.996 0.936 1.000 0.835 0.160
對照2組相比中度脂血組,中度脂血組的RBC有明顯下降,而MONO、MCHC、WBC、MCV、MCH、Hb都有明顯升高,7項指標對比,差異顯著(P<0.05);但依據(jù)儀器規(guī)定的精密度允許偏差范圍,且與臨床分析相結(jié)合,對照2組各指標結(jié)果較之中度脂血組,僅4項指標存在差異,即WBC、MCH、Hb與MCHC(P<0.05),見表2。
表2.對比對照2組與中度脂血組的血常規(guī)指標(±s)
表2.對比對照2組與中度脂血組的血常規(guī)指標(±s)
組別n RBC(×1012/L)Hb(g/L)HCT(%)MCV(fL)MCH(pg)MCHC(g/L)PLT(×109/L)對照2組21 4.13±0.75 127.36±22.20 37.31±6.16 90.16±4.85 30.64±1.72 340.26±10.37 186.31±56.34中度脂血組21 4.10±0.64 147.28±23.64 37.49±6.27 90.63±4.84 33.00±1.75 364.65±10.46 192.07±60.37 t 0.139 2.815 0.094 0.314 4.407 7.588 0.320 P 0.890 0.008 0.926 0.755 0.000 0.000 0.751
續(xù)表2.對比對照2組與中度脂血組的血常規(guī)指標(±s)
表2.對比對照2組與中度脂血組的血常規(guī)指標(±s)
組別n WBC(×109/L)NEUT(%)LYMPH(%)MONO(%)EOS(%)BASO(%)對照2組21 6.82±1.05 67.58±13.82 24.70±6.13 5.44±1.36 2.00±0.43 0.24±0.03中度脂血組21 7.88±1.69 66.67±13.64 24.12±6.62 5.88±1.81 1.96±0.61 0.26±0.05 t 2.441 0.215 0.295 0.891 0.246 1.572 P 0.019 0.831 0.770 0.378 0.807 0.124
對照3組相比重度脂血組,重度脂血組中的LYMPH、RBC均有下降,而MONO、NEUT、PLT、WBC、MCH、MCHC、Hb、HCT與MCV都有升高,11項指標對比,存在明顯差異(P<0.05),但依據(jù)儀器規(guī)定的精密度允許偏差范圍,且與臨床分析進行結(jié)合,得知對照3組較之重度脂血組各指標結(jié)果,僅4項指標(WBC、MCHC、Hb、MCH)存在差異(P<0.05),見表3。
表3.對比對照3組與重度脂血組的血常規(guī)指標(±s)
表3.對比對照3組與重度脂血組的血常規(guī)指標(±s)
組別n RBC(×1012/L)Hb(g/L)HCT(%)MCV(fL)MCH(pg)MCHC(g/L)PLT(×109/L)對照3組24 4.14±0.72 119.29±19.67 31.34±5.41 66.77±5.93 28.87±2.16 333.64±8.64 141.34±52.36重度脂血組24 3.12±0.32 137.54±20.36 35.37±7.36 87.47±6.70 33.46±2.59 383.67±7.56 186.64±67.16 t 6.342 3.158 2.161 11.334 6.668 21.349 2.606 P 0.000 0.003 0.036 0.000 0.000 0.000 0.012
續(xù)表3.對比對照3組與重度脂血組的血常規(guī)指標(±s)
表3.對比對照3組與重度脂血組的血常規(guī)指標(±s)
組別n WBC(×109/L)NEUT(%)LYMPH(%)MONO(%)EOS(%)BASO(%)對照3組24 7.06±0.95 71.80±11.36 21.13±3.38 5.20±1.08 1.94±0.60 0.25±0.08重度脂血組24 8.64±1.14 79.77±13.64 18.20±3.10 6.84±1.50 1.83±0.53 0.24±0.05 t 5.216 2.200 3.130 4.347 0.673 0.519 P 0.000 0.762 0.033 0.001 0.504 0.606
對于脂血而言,其是臨床當中對血液分析儀進行血常規(guī)檢測造成影響的常見因素,會對全部型號的血液分析儀的多項指標造成干擾,比如WBC、PLT、Hb、MCH等。
本文圍繞不同脂血程度,深入剖析其對Sysmex XN-1000血液分析儀檢測血常規(guī)指標所產(chǎn)生的影響,最終結(jié)果得知,在所選取的13項指標當中,與對照組相比較,輕、中、重度脂血組當中分別有5項、7項、11項與之存在明顯差異,但與臨床實踐相結(jié)合得知,TG在6.0~10.0mmol/L的輕度脂血,對檢測結(jié)果有著較小的影響,而中、重度脂血(10.1~14.0、>14.0mmol/L)對4項指標具有較大影響,分別為WBC、Hb、MCH與MCHC,且伴隨血脂程度的持續(xù)增加,其對血常規(guī)結(jié)果的影響程度也隨之增加。原因為:①影響WBC檢測。通過對流式細胞技術(shù)的應(yīng)用,對各通過檢測部位的顆粒或者細胞實施逐一剖析,防止漏檢或者重復(fù)檢測情況的發(fā)生,但不管是流式細胞技術(shù),還是電阻抗法,均難以對所有細胞均實施完全性識別,故會對結(jié)果檢測造成干擾[3];②影響RBC/PLT的檢測。對于RBC/PLT而言,其大多用電阻抗原理進行檢測,通過雙鞘流(也就是前、后鞘流)的應(yīng)用,使流經(jīng)檢測部位的RBC/PLT可以逐一通過,可以較好地預(yù)防細胞側(cè)向或并列通過情況的發(fā)生,以免對檢測結(jié)果造成影響,預(yù)防誤差發(fā)生;但脂肪乳顆粒在流經(jīng)檢測部位時,會對檢測造成干擾,進而影響到RBC計數(shù),使MCH、MCV的最終結(jié)果發(fā)生偏移[4];③影響Hb檢測。檢測此指標的基本原理是Fe2+(亞鐵血紅素當中)被十二烷基磺酸鈉氧化,從而形成大量的SLS-Hb衍生物,于555波長上,通過實施比色檢測,脂肪乳乳白色渾濁可能會干擾到比色法對Hb的檢測,增加Hb的假性,使MCH、MCHC的檢測結(jié)果出現(xiàn)偏差[5];④影響到WBC的分類?;驹頌榛诎雽w激光流式細胞原理,與細胞化學熒光染色技術(shù)相結(jié)合,圍繞白細胞實施檢測,當半導體激光對被檢細胞進行照射時,根據(jù)各細胞所形成的信號,對細胞進行辨別,其如縱坐標(Y)軸所代表的是側(cè)向熒光強度,可以將亞甲藍對細胞當中RNA、DNA的染色強度給反映出來,而橫坐標(X)軸則對側(cè)向散射光強度給予表示,能夠?qū)⒓毎麅?nèi)容物反映出來,另外,通過對熒光信號、散射光信號同時進行檢測,能夠形成所需要的直方圖與散點圖,因此,可對MONO、LYMPH與NEUT進行準確區(qū)分[5]。針對BASO、EOS分類技術(shù)來講,Sysmex XN-1000血液分析儀設(shè)有EOS/BASO通道,將溶血劑加入,對其他細胞急性溶解,形成裸核,僅對EOS/BASO的完整性給予保留,然后依據(jù)細胞大小、體積等實施測定,這可能是輕、中、重度脂血檢測中,BASO、EOS并未受干擾的原因所在。
綜上所述,在檢測血常規(guī)指標時,中、重度脂血會對Sysmex XN-1000血液分析儀的檢測結(jié)果造成影響,而影響較大的是WBC、MCH、Hb、MCHC;另外,隨著脂血程度不斷加深,其相應(yīng)影響程度,會隨之增加。