39份育成小麥品種（系）抗病基因分子檢測

李小雨，蔣 進(jìn)，費(fèi)德友，王淑榮

（南充市農(nóng)業(yè)科學(xué)院，四川 南充 637000）

由小麥條銹菌（Pucciniastriiformisf.sp.tritici）、禾谷鐮刀菌（Fusariumgramiearium）和白粉菌（Blumeria graminisf.sp.tritici）所引起的三大真菌性病害條銹?。╯tripe rust）、赤霉?。‵usariumhead blight,FHB）和白粉?。╬owdery mildew,Pm）是小麥生育期中最主要的病害，嚴(yán)重影響小麥生產(chǎn)。3種病害均為氣傳性病害，特別是條銹病菌能夠隨風(fēng)進(jìn)行遠(yuǎn)距離傳播，迄今已記載有5次全國范圍內(nèi)的條銹病大暴發(fā)，累計(jì)造成減產(chǎn)138億kg，2002年和2017年是最近2次大流行，導(dǎo)致小麥累計(jì)減產(chǎn)28 億kg[1]。赤霉病菌主要在開花期對小麥穗部進(jìn)行侵染，然后汲取小麥穗部營養(yǎng)，發(fā)病嚴(yán)重后會造成籽粒發(fā)育不完整產(chǎn)生干癟形態(tài)籽粒，進(jìn)而導(dǎo)致小麥減產(chǎn)并積累脫氧雪腐鐮孢菌烯醇(deoxynivalenol,DON)、雪腐鐮刀菌烯醇（nivalenol,NIV）和赤霉烯酮（zearalenol,ZEN）等多種真菌毒素[2-3]。在2001年到2018年的赤霉病流行19年間里，以2012年最為嚴(yán)重，當(dāng)年全國超過1.5億666.7 m2小麥面積遭受到不同程度的侵害，其中又以河南省最為嚴(yán)重[3]。小麥白粉病主要侵害小麥葉片及葉鞘，發(fā)生嚴(yán)重時(shí)也會延展至小麥穗部，基部葉片和葉片正面一般較上部葉片和背面發(fā)病重，發(fā)病充分時(shí)可以導(dǎo)致小麥葉片早枯，影響籽粒灌漿降低千粒重[4]。

以川西平原、川中北和川東北的成、德、綿、南為主的四川小麥種植區(qū)是西南麥區(qū)的主產(chǎn)大市，據(jù)2020年統(tǒng)計(jì)以上述4 大市為主的四川小麥播種面積約占西南冬麥區(qū)的70%。受到全球氣候變暖及極端氣候和秸稈還田農(nóng)作制度改變的影響，條銹病、赤霉病和白粉病病害呈現(xiàn)出日益蔓延并逐年加重的趨勢。四川省處在條銹病冬繁區(qū)，屬亞熱帶季風(fēng)濕潤氣候，冬季以暖冬為主，3—4月?lián)P花期間降雨頻繁，多形成陰雨連綿天，適宜的氣候條件和地理位置使得四川省小麥三大病害情況愈加嚴(yán)峻[5-8]。選育和利用抗病品種是控制條銹病、赤霉病和白粉病害最經(jīng)濟(jì)、有效和安全的手段[9]。因此，加快培育兼具抗條銹病、赤霉病和白粉病的品種是四川小麥育種的主要目標(biāo)之一。

病原菌與寄主存在有協(xié)同進(jìn)化關(guān)系，這使得病原菌新生理小種同樣能夠不斷快速迭代導(dǎo)致品質(zhì)喪失抗病性，如2009年以條中24（CYR34）為主要的生理小種的出現(xiàn)，導(dǎo)致四川大部分主流品種喪失抗性，并在幾年后CYR34 開始成為優(yōu)勢生理小種，與CYR32、CYR33 及桂22-14 成為四川地區(qū)條銹病主要流行生理小種[10-13]。目前，國際上已正式命名了83個(gè)抗條銹病基因（Yr1～Yr83）、80多個(gè)主效抗白粉病基因（Pm1～Pm68、PmG3M 等）以及7 個(gè)抗赤霉病基因（Fhb1～Fhb7）[14-16]。小麥條銹病表型分為全生育期抗性（ASR）、成株期抗性（APR）和感病（S）類型，其中Yr5和Yr15等基因能夠有效抵御CYR32和CYR34 生理小種的侵染。同樣根據(jù)抵抗赤霉病菌侵染的不同程度可將小麥赤霉病抗病性分為抗初侵染（TypeⅠ）、抗拓展（TypeⅡ）、抗籽粒侵染（TypeⅢ）、耐病性（TypeⅣ）和抗DON積累（TypeⅤ）5種抗病類型。四川省雖然不是赤霉病及白粉病傳統(tǒng)發(fā)病區(qū)，但研究者在四川小麥主產(chǎn)地發(fā)現(xiàn)四川赤霉病菌種群主要以禾谷鐮刀菌和亞洲鐮刀菌（Fusariumsatcum）為主要生理小種，白粉病菌以V1a、V2、V3a等為主的毒株[17-20]。目前被發(fā)現(xiàn)位于3BL染色體上的Fhb1是目前被研究者認(rèn)為最有效、貢獻(xiàn)率最高的抗赤霉病主效基因。隨著生理小種的變化，Pm1等許多抗病性基因已經(jīng)部分或者完全喪失了抵抗白粉病菌侵染的能力，但來自于簇毛麥的Pm21在四川地區(qū)小麥育種中仍然被廣泛應(yīng)用。因此，了解當(dāng)?shù)匦←溒贩N（系）的抗病性及抗病基因攜帶類型，鑒定篩選出抗病材料對于優(yōu)異基因的轉(zhuǎn)移利用至關(guān)重要。

因此，本研究對來自于南充市農(nóng)業(yè)科學(xué)院近年培育的39份小麥品種（系）進(jìn)行條銹病、赤霉病田間多年鑒定，同時(shí)利用與條銹病、赤霉病和白粉病抗病基因連鎖的分子標(biāo)記對供試材料進(jìn)行檢測，明確其抗病性基因組成，篩選出抗條銹病、赤霉病和白粉病的優(yōu)良小麥品種（系），以期為今后新品種培育和生產(chǎn)示范推廣提供材料來源和參考。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試的39 份材料均為南充市農(nóng)業(yè)科學(xué)院近年所培育并保存的小麥品種（系），其中8 份通過四川省審定，其余31份為自育高代品系。條銹病誘發(fā)及對照采用銘賢169，赤霉病分別以蘇麥3號（高抗）、揚(yáng)麥158（中抗）和安農(nóng)8455（高感）作為感病對照。混合生理小種（CYR32、CYR33、CYR34、貴22-14、水源類型等）混合菌，由甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所賈秋珍研究員提供。禾谷鐮孢懸浮液（F0301、F0609、F0980 和F1312）由江蘇省淮安市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院提供。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 田間抗病性鑒定

條銹?。ń臃N鑒定）和赤霉?。ㄗ匀话l(fā)?。┨镩g抗性鑒定于2020—2023年間連續(xù)3年在四川省南充市農(nóng)業(yè)科學(xué)院試驗(yàn)基地完成。每份材料采用順序排列方式行播2 行，行長1.2 m，行距25 cm，旁邊垂直條播銘賢169 作為誘發(fā)及感病對照，并在其四周設(shè)置保護(hù)行。在小麥分蘗-拔節(jié)期時(shí)采用混合菌種-滑石粉比例混合涂抹法和噴霧接種結(jié)合進(jìn)行，按照DB51／T713-2007《小麥抗條銹病性田間鑒定技術(shù)規(guī)程》中關(guān)于小麥條銹病調(diào)查的要求進(jìn)行反應(yīng)型記載。在2022—2023年度里另設(shè)置一組赤霉病單花滴注試驗(yàn)。于揚(yáng)花期使用移液槍對每份材料的10 個(gè)單穗的中部進(jìn)行10 μL 孢子懸浮液滴注，套袋后每日4 次噴水保濕，在接種后的25 d 和30 d 進(jìn)行記載。按NY/T2954-2016標(biāo)準(zhǔn)記載嚴(yán)重度。1級：無病穗；2 級：1/4 以下小穗發(fā)病；3 級：1/4～1/2 小穗發(fā)??；4級：1/2～3/4小穗發(fā)??；5級：3/4以上小穗發(fā)病。

1.2.2 抗病基因檢測

小麥植株DNA 提取參照Hill-Ambroz 的改良CTAB法進(jìn)行[21]。采用20 μL體系進(jìn)行PCR擴(kuò)增，其中2× Taq PCR Mix 和所需引物由上海生工生物合成，PCR 程序參照所需標(biāo)記要求設(shè)置，產(chǎn)物在1.5%的瓊脂糖凝膠電泳和熒光定量分析。分子標(biāo)記選用與條銹?。╕rAs2388、Yr5、Yr9、Yr10、Yr15、Yr18、Yr26、Yr34/48、Yr36、Yr65、Yr80、Yr81）、赤霉?。‵hb1）和白粉?。≒m21）緊密連鎖的SSR 和KASP 等標(biāo)記進(jìn)行，具體所用引物序列見表1。

表1 小麥抗病性基因分子標(biāo)記信息Table 1 Molecular marker information for detection of wheat resistance genes

2 結(jié)果與分析

2.1 條銹病田間抗病性鑒定結(jié)果

采用混合生理小種（CYR32、CYR33、CYR34、貴22-14、水源類型等）2020—2023年連續(xù)3年接種鑒定供試材料成株期條銹病抗性鑒定，從表2 結(jié)果可以看出2021年成株期表現(xiàn)為中抗及以上的材料有16份，占供試材料的41%，其中南麥941、南麥995和南麥979 等6 份材料對混合菌種表現(xiàn)為高抗，占供試材料的15.4%；其余23份材料對混合菌種表現(xiàn)為感病（中感和高感水平），占比59%，中感和高感分別有4 份和19 份。2022年成株期表現(xiàn)為中抗及以上的材料有14 份，占供試材料的35.9%，其中南麥941、南麥904和YY-82這3份材料對混合菌種表現(xiàn)為高抗；其余25 份材料對混合菌種表現(xiàn)為感?。ㄖ懈泻透吒兴剑?，占比64.1%，中感和高感分別有6份和19 份。2023年成株期表現(xiàn)為中抗及以上的材料有20 份，占供試材料的51.3%，其中南麥941、南麥995 和南麥979 等6 份材料對混合菌種表現(xiàn)為高抗，占供試材料的15.4%；其余19 份材料對混合菌種表現(xiàn)為感?。ㄖ懈泻透吒兴剑?，占比48.7%，中感和高感分別有12 份和7 份。南麥941 等11 份材料在連續(xù)3年的觀察中對條銹混合菌種均表現(xiàn)為中抗及以上水平，占總供試樣本的28.2%，這表明所育材料在條銹病抗性水平上還需要有所提高。南麥941 和YY-82 這2 份材料連續(xù)3年均表現(xiàn)出高抗水平，表明該材料可以被繼續(xù)用來作為小麥抗病材料的重要親本，特別是南麥941 可以在生產(chǎn)上繼續(xù)推廣種植。

2.2 赤霉病田間抗病性鑒定結(jié)果

蘇麥3 號、揚(yáng)麥158 和安農(nóng)8455 均達(dá)到對照抗感發(fā)病水平，從表2 的連續(xù)3年赤霉病自然發(fā)病觀測結(jié)果可以看出，39份材料均沒有出現(xiàn)高抗及以上抗赤霉病的品種（系）。與對照相比，南麥941、南麥971、南麥990 和南麥991 在3年未接菌自然發(fā)病和單年單花滴注情況下均表現(xiàn)為中抗，南麥995在3年未接菌自然發(fā)病表現(xiàn)為中抗，在單花滴注情況下為中感。有10 份材料連續(xù)3年表現(xiàn)為中抗及以上水平，占比25.6%。在單花滴注鑒定中，僅有7份材料表現(xiàn)為中抗，比平均3年中抗材料占比下降17.9%；19 份材料為中感與往年相當(dāng)；13 份表現(xiàn)為高感，相比平均3年高感材料占比提升64.7%。

2.3 田間抗性鑒定綜合評價(jià)

根據(jù)39份供試材料連續(xù)3年的條銹?。ń臃N鑒定）和赤霉?。ㄗ匀话l(fā)?。┮约?年的赤霉病單花滴注鑒定結(jié)果顯示。所有供試材料中僅有南麥941這1份材料在條銹病達(dá)中抗及以上水平且赤霉病鑒定也為中抗，占比2.5%；南麥995這1份材料在條銹病表現(xiàn)為中抗及以上水平且赤霉病自然發(fā)病鑒定為中抗水平，占比2.5%；南麥987、南麥979、南麥969、南麥904、南麥619和YY-82等6份材料在連續(xù)3年條銹病接種鑒定且連續(xù)2年赤霉病自然發(fā)病鑒定下綜合表現(xiàn)為中抗水平，占比15.3%。

2.4 抗條銹病抗病基因分子標(biāo)記檢測結(jié)果

利用已知的Yr基因緊密連鎖標(biāo)記或基因標(biāo)記對39 份材料進(jìn)行12 個(gè)Yr基因掃描，檢測結(jié)果如表3。39 份材料中超過一半供試材料可能攜帶有Yr10、Yr26和Yr65基因，分別占比達(dá)到53.8%、61.5%和64.1%；在7份材料中檢測到Y(jié)rAs2388功能基因的目的條帶，占比17.9%（圖1）；有9份材料檢測到Y(jié)r5全生育期抗病基因目的條帶，占比23.1%；有16 份供試材料檢測到Y(jié)r9全生育期抗病基因目的條帶，占比41%；有5份材料檢測到Y(jié)r18基因連鎖標(biāo)記條帶，占比12.8%；在Yr36抗病基因標(biāo)記中僅有1 份材料檢測到目的條帶；此外，Yr15特異分子標(biāo)記、Yr34/48和Yr80的KASP 分子標(biāo)記檢測結(jié)果顯示，所有供試材料均不攜帶有上述3個(gè)目的基因；利用Yr81KASP檢測結(jié)果顯示，南麥995 等5 份供試材料可能攜帶有Yr81抗病基因（圖2）。從檢測結(jié)果來看，除Yr10、Yr26和Yr65基因分布頻率較高外，其余抗條銹病基因在整個(gè)供試材料中的出現(xiàn)頻率均較低。

圖1 YrAs2388擴(kuò)增部分供試小麥品種（系）Figure 1 Amplification of YrAs2388 in some tested wheat varieties(lines)

圖2 利用分子標(biāo)記KASP_3077熒光定量 PCR 檢測小麥育成品種(系)中Yr81基因Figure 2 Detection of Yr81 based on real-time PCR using molecular marker KASP_3077 of wheat cultivars and lines

表3 39份育成品種（系）抗病基因分子標(biāo)記檢測Table 3 Detection of resistance gene in 39 wheat varieties (lines)

2.5 抗赤霉病Fhb1分子標(biāo)記檢測結(jié)果

為提高抗赤霉病Fhb1基因的檢測結(jié)果準(zhǔn)確性，我們同時(shí)利用該基因的診斷性標(biāo)記His3B-4和功能基因標(biāo)記TaHRC-GSM對39份供試材料進(jìn)行雙向驗(yàn)證檢測是否攜帶有Fhb1。PCR檢測結(jié)果顯示，除陽性對照蘇麥3號外，所有材料均未能擴(kuò)增出1 309 bp和1 400 bp目的條帶，這說明嚴(yán)重缺少抗赤霉病Fhb1基因的資源材料，在今后的培育工作中需要加強(qiáng)該基因的轉(zhuǎn)移利用。

2.6 抗白粉病Pm21分子標(biāo)記檢測結(jié)果

在小麥的抗白粉病應(yīng)用中，Pm21基因是目前應(yīng)用最多的廣譜抗病性基因。利用Pm21抗病基因的標(biāo)記CINAU-NLR對所有材料進(jìn)行檢測，以綿麥367為對照，所有供試材料中僅有南麥660等6份材料擴(kuò)增出477 bp的目的條帶，占比15.4%，其余材料均未擴(kuò)增出目標(biāo)條帶（圖3）。

圖3 Pm21擴(kuò)增部分供試小麥品種（系）Figure 3 Amplification of Pm21 in some tested wheat varieties (lines)

3 討論

3.1 抗病基因轉(zhuǎn)移利用在南麥系列材料中的重要地位

四川省是中國重要的條銹病策源地和條銹病菌冬繁區(qū)，由于其特殊的地形和氣候條件，使得其不僅是條銹病的發(fā)病地也是條銹病流行區(qū)[12]。小麥種植大市南充市位于四川東北部，是典型的丘陵區(qū)，該地處于嘉陵江流域，冬季氣溫偏高且空氣濕度較大，近幾年的氣候條件均有利于條銹病菌的萌發(fā)和侵染[6]?；跅l銹病高發(fā)現(xiàn)實(shí)情況，條銹病抗性選育一直是南麥系列選育新品種的硬性條件之一。從本研究的結(jié)果來看，南麥系列的小麥品種（系）具有較好的條銹病抗性。從多份材料中檢測出Yr9、Yr10和Yr26等全生育期抗性基因，并且有多份材料在田間條銹病接種鑒定中表現(xiàn)出連續(xù)多年的中抗及以上水平。CYR34（V26）作為新的致病生理小種出現(xiàn)引起條銹病菌的流行，這使得以Yr10和Yr26等為主的抗病基因的攜帶品種開始逐步喪失抗病性[37]。研究中發(fā)現(xiàn)雖然CYR34對Yr10和Yr26具有聯(lián)合毒性，但Yr5、Yr15、Yr11-14、Yr16和Yr18等基因能夠減弱CYR34的侵染程度，特別是來自于野生二粒小麥G25的Yr15基因能夠抵御超過3 000個(gè)條銹病生理小種的侵染[13,38]。在本研究中，39 份材料均未檢測到Y(jié)r15基因，Yr5和Yr18基因也僅分別檢測到9 份和5 份攜帶有。目前，南充小麥抗病育種可用抗源嚴(yán)重匱乏，進(jìn)一步引進(jìn)篩選的新的抗病基因資源并應(yīng)用于抗條銹病育種，是實(shí)現(xiàn)南麥系列抗條銹病整體水平提升的重要途徑。因此，在今后小麥培育中南麥系列品種培育應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)Yr15等廣譜抗性基因的篩選和轉(zhuǎn)移利用。

本研究中所選取的39份材料，有一部分是已經(jīng)通過審定的品種，其余部分為高代或者中間材料，通過對供試材料進(jìn)行條銹病、白粉病和赤霉病進(jìn)行分子標(biāo)記檢測，以南麥941 為首的部分材料雖然檢測出多個(gè)抗條銹病基因和抗白粉病Pm21基因，但未檢測到抗赤霉病Fhb1基因。分析其原因，可能是由于前幾年在小麥揚(yáng)花期間晴朗天氣頻率高，赤霉病發(fā)病率和嚴(yán)重度低，使得作為非傳統(tǒng)赤霉病高發(fā)區(qū)缺乏自然選擇壓力和較低的人為選擇關(guān)注度。因此，培育出的材料大多缺乏赤霉病抗性基因Fhb1。在四川小麥品種抗病研究中，鄧清燕等[39]從156 份材料中篩選到1份高代材料中攜帶有Fhb1基因，張華等[40]從153份四川主推品種和后備材料中也僅篩選到12份材料可能攜帶有Fhb1基因。Fhb1是目前報(bào)道出抗赤霉病最強(qiáng)并且最穩(wěn)當(dāng)?shù)某嗝共】共』?，被廣泛應(yīng)用于育種和科學(xué)研究中。Fhb1基因主要來源于蘇麥3號和寧麥9號等材料及其衍生后代，以蘇麥3號為主的衍生后代中有些材料表現(xiàn)出產(chǎn)量較低、高稈等不利的農(nóng)藝性狀，以寧麥9號為主的衍生后代寧麥、揚(yáng)麥和鎮(zhèn)麥等材料在綜合農(nóng)藝性狀上有較大提升[41-43]。本研究通過診斷性標(biāo)記His3B-4 和功能基因標(biāo)記TaHRC-GSM相結(jié)合的方式進(jìn)行驗(yàn)證篩選，均未發(fā)現(xiàn)可能攜帶有Fhb1基因的材料。因此，想要快速提高南充小麥赤霉病品種的選育，可以選擇從河南、江蘇等赤霉病高發(fā)區(qū)引進(jìn)綜合性狀較好的抗病品種進(jìn)行轉(zhuǎn)移利用。

3.2 利用分子標(biāo)記促進(jìn)南麥系列材料抗病基因的聚合

歷史事件表明，單一抗源條銹病基因的品種在生產(chǎn)中進(jìn)行大面積使用，在短時(shí)期內(nèi)雖然能夠取得良好的防治效果，但由于條銹菌生理小種的快速變異，一但新毒性小種的出現(xiàn)常會導(dǎo)致單一抗性品種在生產(chǎn)中快速“喪失”抗病性，也能夠加速新毒性小種占據(jù)成為優(yōu)勢生理小種，引發(fā)區(qū)域內(nèi)條銹病大爆發(fā)[10,44]。在檢測結(jié)果中，榮春南麥1號和特研麥88 雖然攜帶有全生育期抗性基因Yr5，但在連續(xù)3年接種鑒定中均為高感。我們推測可能是田間菌源豐富，致使個(gè)別單基因品種難以克服多個(gè)混合小種。因此需要加強(qiáng)多基因聚合來提高對混合小種的侵染。采用分子標(biāo)記輔助選擇（marker-assisted selection，MAS）手段在進(jìn)行資源鑒定和育種選擇時(shí)可同時(shí)達(dá)到高效率與高精準(zhǔn)雙要求。李靜靜等[45]利用MAS 快速創(chuàng)制出攜帶有蘇麥3 號Fhb1基因的20 個(gè)新品系；高月等[46]利用MAS 將金禾9123、普冰01 和良星99 中的抗白粉病Pm21、Pm35和Pm25快速聚合至后代材料中。本研究通過抗病基因的分子標(biāo)記快速鑒定出所有供試材料可能攜帶抗病基因類型情況，雖然檢測出24 份材料同時(shí)攜帶有3 個(gè)以上抗條銹病Yr基因，但均缺乏Yr5、Yr15、Yr18及YrAs2388這些全生育期、成株期廣譜抗性多基因聚合類型。以南麥941為代表的材料聚合有（YrAs2388+Yr10+Yr26+Yr65）4個(gè)抗條銹病基因，該材料在田間觀測中連續(xù)3年均為高抗條銹病，故在今后培育中可以進(jìn)一步利用MAS 將廣譜抗性基因Yr15和赤霉病主效基因Fhb1聚合到南麥941 這一系列優(yōu)異材料中。本研究中對12 個(gè)抗條銹病Yr基因和1 個(gè)赤霉病Fhb1及1 個(gè)白粉病Pm21基因進(jìn)行功能標(biāo)記或者緊密連鎖標(biāo)記檢測，從檢測結(jié)果上看，這些基因都能夠通過相應(yīng)的標(biāo)記進(jìn)行快速識別。因此，在今后南麥品種培育中，可以使用條銹病、赤霉病和白粉病基因相關(guān)標(biāo)記進(jìn)行輔助選擇促使品種同時(shí)聚合多個(gè)抗病基因類型。

3.3 39份南麥系列材料中可能攜帶有未知抗病基因

Yr9和Yr10等基因已經(jīng)喪失了對CYR34（V26）小種的抗性，僅對小部分生理小種具有一定抵抗[37,47]。在本研究中，從南麥619 中檢測到Y(jié)r9和Yr10兩個(gè)條銹病基因，但在3年混合接種鑒定中均表現(xiàn)出中抗水平。由此我們推測在南麥619中可能還攜帶有其他抗條銹病基因未被檢測到。單一的條銹病基因或許已經(jīng)喪失抗性，但當(dāng)多個(gè)微弱基因聚合在一起的時(shí)候可能會產(chǎn)生加性效應(yīng)，能夠表現(xiàn)出抗病性[47]。在檢測中我們還發(fā)現(xiàn)南麥660 和南麥904 兩份材料均同時(shí)僅攜帶有Yr10和Yr65兩個(gè)微弱基因，但這兩份材料在連續(xù)3年接種鑒定中鑒定為中抗和高抗，原因可能是抗性基因Yr10和Yr65表現(xiàn)出抗性水平，也可能是這些基因組合存在加性效應(yīng)或上位效應(yīng)，抑或是由于該種質(zhì)攜帶其他未檢測到的已知或新的抗性基因存在。

目前對于赤霉病的遺傳研究，國內(nèi)外已經(jīng)定位到近100 個(gè)與赤霉病相關(guān)的QTL，這些位點(diǎn)在各個(gè)染色體上均有分布，其中僅有7 個(gè)Fhb1-Fhb7被正式的命名，其中Fhb1是被認(rèn)為最好的抗赤霉病基因[48]。在本研究中，南麥941、南麥971、南麥990 和南麥991 在3年自然發(fā)病鑒定和1年單花滴注鑒定中均表現(xiàn)為中抗表現(xiàn)，但這4 份材料在診斷性標(biāo)記His3B-4 和功能基因標(biāo)記TaHRC-GSM檢測下均未發(fā)現(xiàn)Fhb1基因目的條帶。我們推測可能在這些材料中還存在有其他未檢測的FHB基因類型。

4 結(jié)論

在四川盆地條銹病傳統(tǒng)高發(fā)區(qū)、赤霉病日益頻發(fā)狀態(tài)下，本研究利用流行的混合生理小種（CYR32、CYR33、CYR34、貴22-14、水源類型等）和赤霉病孢子懸浮液滴注對39 份南麥系列品種（系）進(jìn)行田間抗病性鑒定，獲得南麥941 和南麥995 等6 份高抗穩(wěn)定材料；南麥941和南麥971等4 份中抗赤霉病穩(wěn)定材料。利用已知的12 個(gè)條銹病抗病基因分子標(biāo)記檢測供試材料，Yr9、Yr10和Yr26分布頻率較高，Yr15廣譜抗性基因均未檢測到。因此，應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)對Yr15基因的轉(zhuǎn)移聚合。檢測到南麥941等7 份攜帶有YrAs2388基因，南麥995 等9 份攜帶Yr5基因，這些材料可以進(jìn)一步作為條銹病抗性基因轉(zhuǎn)移利用資源加以利用。39 份材料赤霉病分子標(biāo)記檢測結(jié)果現(xiàn)在均未攜帶Fhb1基因，但有部分材料田間觀察中均表現(xiàn)為中抗赤霉病，如南麥941 和南麥971 等4 份材料，可進(jìn)一步加強(qiáng)對該材料抗源和抗性基因的挖掘，結(jié)合分子標(biāo)記輔助選擇應(yīng)用于小麥育種中。