唐 巧,周 超,張 寧,何召云,張晶晶,付雙楠,李 昕,劉鵬程,張?zhí)锪x,張 瑾,宮 嫚
1南方醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院,廣東 廣州 510515;2解放軍總醫(yī)院第五醫(yī)學(xué)中心中醫(yī)肝病科,北京100039
自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎(SBP)是肝硬化合并腹水患者常見(jiàn)的并發(fā)癥,最近一項(xiàng)全球多中心研究顯示,在納入的1302例伴細(xì)菌感染的肝硬化患者中SBP占比高達(dá)27%[1],其預(yù)后不良[2],因此及時(shí)準(zhǔn)確地啟動(dòng)抗生素治療是改善患者預(yù)后的關(guān)鍵[3]。從2000年國(guó)際腹水俱樂(lè)部(IAC)、2010年歐洲肝病研究學(xué)會(huì)(EASL)至2021年美國(guó)肝臟病學(xué)會(huì)(AASLD)等發(fā)布的SBP診斷標(biāo)準(zhǔn)均為腹水中多形核細(xì)胞計(jì)數(shù)(PMN)≥250個(gè)/mm3,和(或)常規(guī)腹水細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性;當(dāng)腹水PMN計(jì)數(shù)<250個(gè)/mm3且腹水細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性時(shí),診斷為細(xì)菌性腹水(BA)[4-6]。由于常規(guī)腹水細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率低,且耗時(shí)較長(zhǎng),加上部分SBP患者臨床癥狀不典型等原因[5-7],臨床實(shí)踐中腹水PMN計(jì)數(shù)是SBP的主要診斷依據(jù)。但也有相關(guān)研究指出腹水PMN≥250個(gè)/mm3作為SBP診斷標(biāo)準(zhǔn)可能過(guò)于嚴(yán)苛,會(huì)造成約20%可疑患者漏診[8]。因此,即使沒(méi)有達(dá)到SBP的診斷標(biāo)準(zhǔn),當(dāng)患者腹水PMN計(jì)數(shù)<250個(gè)/mm3且伴發(fā)熱、腹痛、血白細(xì)胞升高等可疑SBP表現(xiàn)時(shí),也應(yīng)該高度懷疑SBP。也有個(gè)別研究指出,可疑SBP患者的病死率與普通SBP相近[9]。除此以外,目前尚無(wú)針對(duì)可疑SBP患者預(yù)后及其危險(xiǎn)因素的相關(guān)研究。因此需要進(jìn)一步的臨床證據(jù)為該類(lèi)患者抗生素應(yīng)用的診療決策提供參考,提高抗生素應(yīng)用的及時(shí)性及精準(zhǔn)性。為加深對(duì)可疑SBP患者的認(rèn)識(shí),更好地把握其臨床特征,本研究回顧性分析了2021年6月~2022年6月于解放軍總醫(yī)院第五醫(yī)學(xué)中心住院的323例肝硬化失代償期伴腹水患者的臨床資料,觀(guān)察SBP、BA、可疑SBP及無(wú)感染患者在臨床特征和預(yù)后上的差異,探索影響可疑SBP患者預(yù)后的危險(xiǎn)因素,為優(yōu)化可疑SBP患者臨床管理路徑、評(píng)估其預(yù)后提供參考及依據(jù)。
患者納入標(biāo)準(zhǔn)為:肝硬化失代償期合并中大量腹水;具有腹水常規(guī)及腹水細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果。排除標(biāo)準(zhǔn)如下:年齡<18周歲或>80周歲;合并其他嚴(yán)重慢性疾??;HIV患者;繼發(fā)性腹膜炎;孕婦;合并惡性腫瘤;合并其他部位感染者。根據(jù)腹水PMN計(jì)數(shù)、常規(guī)腹水細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果以及是否伴有可疑SBP表現(xiàn),將患者分為SBP組(腹水PMN計(jì)數(shù)≥250個(gè)/mm3)、BA組(PMN<250 個(gè)/mm3,且常規(guī)腹水細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果陽(yáng)性)、可疑SBP組(PMN<250個(gè)/mm3,常規(guī)腹水細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果陰性,伴可疑SBP表現(xiàn))及無(wú)感染組(PMN<250個(gè)/mm3,常規(guī)腹水細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果陰性,無(wú)可疑SBP感染表現(xiàn)),前3組患者均經(jīng)驗(yàn)性應(yīng)用頭孢三代或喹諾酮類(lèi)或根據(jù)藥敏結(jié)果予以針對(duì)性抗生素治療。納入分組流程見(jiàn)圖1。本研究已獲得中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院第五醫(yī)學(xué)中心倫理委員會(huì)批準(zhǔn)[批號(hào):KY-2022-11-74-1]。由于本研究為回顧性研究,患者的知情同意被放棄。
圖1 病例納入分組流程Fig.1 Flowchart of patient enrollment.
圖2 4組總體生存曲線(xiàn)Fig.2 Survival curves of the patients in the 4 groups.
肝硬化失代償期診斷符合中華醫(yī)學(xué)肝病學(xué)會(huì)2019年發(fā)布的《肝硬化診治指南》標(biāo)準(zhǔn)[10];納入患者中部分符合慢加急性肝衰竭(ACLF)診斷,診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)《肝衰竭診治指南(2018年版)》[11];中大量腹水診斷依據(jù)中華醫(yī)學(xué)肝病學(xué)會(huì)2017年發(fā)布的《肝硬化腹水及相關(guān)并發(fā)癥的診療指南》[7];SBP及BA診斷依據(jù)2021年AASLD發(fā)布指南[6]??梢蒘BP根據(jù)國(guó)內(nèi)外指南定義如下[5-7]:急性腹膜炎相關(guān)表現(xiàn):腹痛、腹部壓痛或反跳痛、腹肌張力增大、嘔吐、腹瀉或腸梗阻;全身炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS)表現(xiàn);無(wú)明顯誘因肝功能惡化;不明原因的肝性腦?。恍菘?;頑固性腹水或利尿劑突發(fā)無(wú)反應(yīng)或腎功能衰竭;急性胃腸道出血。
收集資料主要包括以下內(nèi)容:人口統(tǒng)計(jì)學(xué)資料、既往病史等;入院前3個(gè)月內(nèi)或本次住院癥狀好轉(zhuǎn),經(jīng)評(píng)估無(wú)感染,停用抗生素后的外周血白細(xì)胞(WBC)、中性粒細(xì)胞(NEU)計(jì)數(shù);行診斷性腹腔穿刺時(shí)的臨床癥狀、體征及實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果,包括白蛋白(ALB)、總膽紅素(TBIL)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、血肌酐(sCr)、血尿素氮(BUN)、血鈉(Na)、國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值(INR)、凝血酶原活動(dòng)度(PTA)、WBC、血小板(PLT)、NEU、降鈣素原(PCT)、C反應(yīng)蛋白(CRP);住院期間并發(fā)癥發(fā)生情況,包括消化道出血、肝性腦?。℉E)及急性腎損傷(AKI);終末期肝病模型(MELD)評(píng)分、終末期肝病血清鈉(MELD-Na)評(píng)分[12,13];生存資料通過(guò)對(duì)患者進(jìn)行電話(huà)隨訪(fǎng)或查詢(xún)門(mén)診、住院記錄獲得,隨訪(fǎng)時(shí)間為90 d或隨訪(fǎng)至死亡。
所有正態(tài)分布的計(jì)量資料均使用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)或ANOVA進(jìn)行;非正態(tài)分布計(jì)量資料使用中位數(shù)與四分位數(shù)間距表示;組間對(duì)比使用Mann-WhitneyU檢驗(yàn)或Kruskal-Wallis 檢驗(yàn),是否符合正態(tài)分布使用Kruskal-Wallis檢驗(yàn)進(jìn)行檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料用頻數(shù)和構(gòu)成比/率(%)表示,組間比較采用皮爾遜卡方檢驗(yàn)、Fisher確切概率法。為控制混雜因素,使納入傾向性評(píng)分匹配(PSM)模型的協(xié)變量在可疑SBP組與無(wú)感染組間趨于均衡可比,設(shè)定卡鉗值為0.1,使用1∶1最鄰近匹配法進(jìn)行匹配,以得到組間均衡性良好的可疑SBP組患者與無(wú)感染患者。各組患者生存情況使用Kaplan-Meier 法及Log-rank 法進(jìn)行分析比較。影響可疑SBP患者預(yù)后的危險(xiǎn)因素使用Cox回歸模型進(jìn)行分析。數(shù)據(jù)分析使用SPSS25.0進(jìn)行,P<0.05認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
本研究納入患者以男性(263例,占81.42%)為主,最常見(jiàn)病因?yàn)橐倚透窝撞《鞠嚓P(guān)肝硬化(216 例,占66.87%)。年齡52.09±11.62歲,MELD評(píng)分為17.88±7.70。共22例患者失訪(fǎng),其中SBP組14例、BA組1例、可疑SBP組3例、無(wú)感染組4例。90 d隨訪(fǎng)期內(nèi)共118例患者死亡,其中SBP組54例、BA組25例、可疑SBP組29例及無(wú)感染組10例。
4組患者行診斷性腹腔穿刺時(shí)的臨床特征見(jiàn)表1??梢蒘BP組臨床癥狀較SBP組及BA組隱匿,其出現(xiàn)腹痛、感染性休克及發(fā)熱的比例顯著低于SBP 組及BA 組(P<0.05),實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)方面,可疑SBP 組ALB水平與無(wú)感染組及BA組無(wú)顯著差異,高于SBP組(P<0.001);SBP組、BA組及可疑SBP組3組間TBIL、sCr、BUN、WBC、NEU 無(wú)顯著差異,均高于無(wú)感染組患者(P<0.05);3組血Na水平低于無(wú)感染組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001);可疑SBP 組腹水WBC、PMN計(jì)數(shù)中位數(shù)顯著高于BA組及無(wú)感染組,低于SBP組(P<0.05)。4組患者中ACLF患者比例具有顯著差異(P<0.001),預(yù)后評(píng)分方面,無(wú)感染MELD 評(píng)分最低(14.29±5.45),可疑SBP組MELD評(píng)分(16.77±7.40)與BA組(17.59±7.61)無(wú)顯著差異(P>0.05),低于SBP組(21.35±8.03),4組間MELD評(píng)分差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001),4組間MELD-Na評(píng)分差異同樣具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。
表1 入組患者臨床特征Tab.1 Clinical characteristics of the enrolled patients
采用Kaplan-Meier 曲線(xiàn)分析4組患者生存情況,log-rank法檢驗(yàn)4組患者總體生存率差異,結(jié)果提示,90 d隨訪(fǎng)期內(nèi),可疑SBP組病死率與SBP組(Log-rankP=0.121)及BA組(Log-rankP=0.805)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,顯著高于無(wú)感染組(Log-rankP<0.001)。
采用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型評(píng)估年齡、性別、病因、是否具有可疑SBP、臨床指標(biāo)及MELD評(píng)分對(duì)可疑SBP組及無(wú)感染組死亡風(fēng)險(xiǎn)的影響(表2)。單因素Cox回歸提示可疑SBP顯著增加肝硬化腹水患者死亡風(fēng)險(xiǎn)[風(fēng)險(xiǎn)比(HR)=1.467,95%CI=1.068~2.015,P=0.018]。將所有單因素分析中P<0.1的變量納入多因素Cox回歸模型,結(jié)果顯示,可疑SBP是肝硬化腹水患者死亡危險(xiǎn)因素之一(HR=1.539,95%CI=1.048~2.261,P=0.028)。此外,PCT≥0.5 ng/mL(HR=1.550,95%CI=1.002~2.398,P=0.049)及MELD 評(píng)分≥15(HR=1.757,95%CI=1.185~2.607,P=0.005)也是影響肝硬化腹水患者90 d生存狀態(tài)的重要風(fēng)險(xiǎn)因素。
表2 可疑SBP組與無(wú)感染組患者Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型Tab.2 Cox proportional hazard model of probable SBP patients and non-infected patients
由于可疑SBP組與無(wú)感染組組間協(xié)變量不均衡,故進(jìn)一步使用PSM控制混雜因素,均衡協(xié)變量以評(píng)估兩組基線(xiàn)特征以及預(yù)后,PSM前可疑SBP組與無(wú)感染組相比平均年齡較大(P=0.006),TBIL、sCr、INR、MELD評(píng)分及MELD-Na評(píng)分均高于無(wú)感染組(P<0.05),血鈉低于無(wú)感染組(P<0.001)。納入PSM的因素為兩組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的單項(xiàng)臨床指標(biāo)變量(TBIL、sCr、INR、血鈉),使用1∶1最鄰近匹配法,設(shè)定卡鉗值為0.1,進(jìn)行PSM。成功匹配可疑SBP組與無(wú)感染組各46例,PSM后兩組間上述指標(biāo)達(dá)到均衡,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05,表3)。
表3 可疑SBP患者與無(wú)感染患者PSM前后臨床特征Tab.3 Clinical characteristics of probable SBP and non-infected ascites groups before and after propensity score matching.
對(duì)PSM前后兩組患者生存情況進(jìn)行分析,PSM前可疑SBP 組隨訪(fǎng)期間病死率顯著高于無(wú)感染組(P<0.001,圖3A);經(jīng)PSM得到組間均衡可比的46對(duì)可疑SBP患者與無(wú)感染患者,可疑SBP組隨訪(fǎng)期間病死率仍高于無(wú)感染組(P=0.038,圖3B),PSM前后結(jié)果一致。
圖3 可疑SBP組與無(wú)感染組總體生存曲線(xiàn)Fig.3 Survival curves for probable SBP and non-infected ascites groups before(A)and after(B)propensity score matching.
比較可疑SBP 患者中生存組與死亡組臨床特征(表4),結(jié)果顯示,死亡組TBIL、INR、AST、NEU、ΔNEU、PCT水平及MELD評(píng)分顯著高于生存組(P<0.05)。將上述在兩組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的連續(xù)變量及WBC、基線(xiàn)WBC、基線(xiàn)NEU 及ΔWBC 納入Cox 比例風(fēng)險(xiǎn)模型進(jìn)行分析(表5),單因素Cox分析結(jié)果顯示,AST>64.00U/L、NEU>3.95×109/L、PCT>0.48 ng/mL及MELD評(píng)分>15是影響可疑SBP患者90 d預(yù)后的危險(xiǎn)因素(P<0.05),將單因素分析中P<0.1的變量納入Cox多因素分析,結(jié)果顯示,PCT>0.48 ng/mL(HR=1.989,95%CI: 1.111~3.560,P=0.021)及MELD 評(píng) 分>15(HR=1.943,95%CI: 1.118~3.377,P=0.018)是可疑SBP患者90 d預(yù)后的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素。
表4 可疑SBP組生存與死亡患者臨床特征Tab.4 Clinical data of survivors and dead patients in probable SBP group
表5 可疑SBP患者Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型Tab.5 Cox proportional hazard model for probable SBP patients
目前研究普遍認(rèn)為細(xì)菌易位(BT)是SBP的主要發(fā)病機(jī)制,由于小腸細(xì)菌過(guò)度生長(zhǎng)、宿主免疫功能低下及腸道屏障功能受損,原本腸道里的活細(xì)菌及其產(chǎn)物(如細(xì)菌DNA等)轉(zhuǎn)移到腸系膜淋巴結(jié)或身體其他部位,包括腹水及血液中,導(dǎo)致免疫系統(tǒng)過(guò)度激活,誘發(fā)炎癥反應(yīng)從而加重病情[14,15]。多項(xiàng)研究指出常規(guī)腹水細(xì)菌培養(yǎng)陰性,且PMN計(jì)數(shù)<250個(gè)/mm3的肝硬化患者腹水中同樣能檢測(cè)到細(xì)菌DNA,且腹水細(xì)菌DNA陽(yáng)性患者較陰性患者預(yù)后不良[15-18]。因此,即使未明確診斷SBP,當(dāng)患者出現(xiàn)可疑SBP表現(xiàn)時(shí),同樣提示可能存在BT,應(yīng)予以重視。然而目前關(guān)于可疑SBP研究有限,為進(jìn)一步加深對(duì)可疑SBP的認(rèn)識(shí),本研究納入了323例肝硬化并腹水患者,發(fā)現(xiàn)在90 d隨訪(fǎng)期內(nèi),即使并未確診SBP或BA,可疑SBP患者同樣具有不可忽視的不良預(yù)后。與本研究結(jié)果一致,既往研究也發(fā)現(xiàn)可疑SBP 患者與SBP、BA患者預(yù)后相似[9]。此外,為提高研究結(jié)論的可信度,本研究在增加樣本量的基礎(chǔ)上采用PSM均衡各因素在可疑SBP組與無(wú)感染組之間的分布,使協(xié)變量在兩組之間均衡可比,發(fā)現(xiàn)PSM后可疑SBP患者總體生存率仍然顯著低于無(wú)感染患者,進(jìn)一步驗(yàn)證了其不良預(yù)后。
目前臨床實(shí)踐中腹水PMN 計(jì)數(shù)≥250 個(gè)/mm3是SBP的主要診斷依據(jù),但既往研究指出,由于SBP患者多存在大量腹水,導(dǎo)致腹水PMN計(jì)數(shù)不能達(dá)到診斷標(biāo)準(zhǔn)[19]。已有學(xué)者報(bào)道使用PMN計(jì)數(shù)≥250個(gè)/mm3作為SBP 診斷閾值會(huì)導(dǎo)致20%~40%患者漏診,使用腹水PMN≥100個(gè)/mm3作為SBP診斷閾值可以減少漏診[8,20],國(guó)外相關(guān)研究也指出PMN計(jì)數(shù)≥100個(gè)/mm3是后續(xù)發(fā)展為SBP的危險(xiǎn)因素[21]。本研究可疑SBP組患者預(yù)后不良,PMN計(jì)數(shù)雖未達(dá)到SBP診斷標(biāo)準(zhǔn),但顯著高于BA及無(wú)感染組患者,與以上文獻(xiàn)研究結(jié)果相互印證,提示當(dāng)患者出現(xiàn)可疑SBP表現(xiàn)且PMN計(jì)數(shù)≥100個(gè)/mm3時(shí)應(yīng)引起臨床醫(yī)師高度重視。
由于肝硬化患者普遍存在脾功能亢進(jìn),導(dǎo)致NEU破壞增加、釋放減少以致NEU壽命縮短[22],故肝硬化患者外周血基線(xiàn)WBC、NEU值常低于正常值,“正?!狈秶腤BC計(jì)數(shù)可能已經(jīng)是其基線(xiàn)值的2~3倍甚至更高。因此,在診斷肝硬化患者感染時(shí),應(yīng)該結(jié)合其基線(xiàn)值進(jìn)行判斷。本研究對(duì)可疑SBP組患者基線(xiàn)、行診斷性穿刺時(shí)WBC、NEU值進(jìn)行了動(dòng)態(tài)評(píng)估,發(fā)現(xiàn)可疑SBP組患者行診斷性腹腔穿刺時(shí)外周血WBC、NEU較其基線(xiàn)值均出現(xiàn)了顯著升高,證實(shí)部分可疑SBP患者存在感染。由于正常參考值對(duì)于肝硬化患者感染的診斷參考價(jià)值有限,本研究通過(guò)繪制ROC曲線(xiàn),采用約登指數(shù)最大法,計(jì)算得到最佳cut-off值,將WBC及NEU轉(zhuǎn)化為二分類(lèi)變量再后納入Cox回歸模型進(jìn)行分析,Cox單因素分析顯示外周血NEU>3.95×109/L是影響可疑SBP患者預(yù)后的危險(xiǎn)因素,既往關(guān)于BA患者預(yù)后危險(xiǎn)因素的研究也發(fā)現(xiàn)死亡組患者與生存組患者NEU存在顯著差異[23],故應(yīng)該重視外周血NEU計(jì)數(shù)在腹腔感染患者診斷以及預(yù)后評(píng)估方面的作用,并積極應(yīng)用抗生素治療。
作為一項(xiàng)常用的細(xì)菌感染標(biāo)志物,PCT在臨床上被廣泛應(yīng)用于輔助SBP的診斷。既往已經(jīng)有多項(xiàng)研究證實(shí)了PCT輔助SBP診斷方面的價(jià)值[24-26],中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)2017年發(fā)布的肝硬化腹水及相關(guān)并發(fā)癥的診療指南提出,PCT>0.5 ng/mL伴可疑腹膜炎表現(xiàn)即可診斷SBP[7]。除了診斷價(jià)值,既往多項(xiàng)研究也發(fā)現(xiàn)PCT對(duì)于肝硬化患者預(yù)后評(píng)估方面也存在一定價(jià)值[25,27]。本研究發(fā)現(xiàn)PCT>0.48 ng/mL為影響可疑SBP患者預(yù)后的危險(xiǎn)因素,與上述研究相符,進(jìn)一步印證了在PCT水平較高的可疑SBP患者中使用抗生素的必要性。
作為肝硬化患者常用預(yù)后評(píng)分模型,MELD評(píng)分越高,意味著預(yù)后越差。過(guò)去關(guān)于MELD評(píng)分在SBP以及BA患者的預(yù)后評(píng)估中的作用已經(jīng)有較多的研究[28,29],但MELD評(píng)分在可疑SBP患者預(yù)后評(píng)估中的研究比較有限,本研究發(fā)現(xiàn)MELD評(píng)分對(duì)于可疑SBP患者預(yù)后也有著較好的預(yù)測(cè)效果,行診斷性腹腔穿刺時(shí)MELD評(píng)分>15的患者90 d預(yù)后不良,有利于識(shí)別高危患者,及時(shí)啟動(dòng)抗生素治療,改善患者預(yù)后。
本研究尚存在一定的局限性。第一、由于本研究屬于單中心回顧性研究,納入患者數(shù)量有限,隨訪(fǎng)時(shí)間有限,因此未來(lái)需要增加樣本量進(jìn)行前瞻性、多中心、長(zhǎng)隨訪(fǎng)周期的臨床研究以增加結(jié)果的可信度。第二、由于樣本量有限,導(dǎo)致Cox回歸模型納入變量有限,部分單因素分析具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的變量無(wú)法進(jìn)一步納入模型。
綜上所述,本研究發(fā)現(xiàn),可疑SBP病情較重,TBIL、sCr 顯著高于無(wú)感染組;感染指標(biāo)如外周血及腹水WBC、NEU顯著高于無(wú)感染組。預(yù)后不佳,其病死率與SBP、BA相近??梢蒘BP是影響肝硬化腹水患者預(yù)后的重要危險(xiǎn)因素之一。PCT及MELD評(píng)分升高是影響其預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。因此應(yīng)引起臨床醫(yī)師高度重視。
南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)2023年12期