不同方法炮制黃精后其化學成分及藥理作用研究進展

常 暉 靳鵬博 馬存德 劉 峰

(1 陜西國際商貿(mào)學院,咸陽,712046; 2 陜西步長制藥有限公司,西安,710075)

黃精為百合科黃精屬植物滇黃精PolygonatumkingianumColl.et Hemsl.、黃精PolygonatumsibiricumRed.或多花黃精PolygonatumcyrtonemaHua的干燥根莖。黃精藥材商品按基原不同,分為“大黃精”“雞頭黃精”“姜形黃精”3種規(guī)格。黃精,味甘、平,歸脾、肺、腎經(jīng),有補氣養(yǎng)陰、健脾、潤肺、益腎的功效,用于脾胃氣虛、體倦乏力、胃陰不足、口干食少、肺虛燥咳、勞嗽咳血、精血不足、腰膝酸軟、須發(fā)早白、內(nèi)熱消渴[1]?，F(xiàn)代藥理研究表明,黃精具有抗衰老、降血糖、增強免疫力、提高學習和記憶能力、抗動脈硬化、保護心血管系統(tǒng)、抗腫瘤、抗炎、抗病原微生物等作用[2]。黃精的主要化學成分有多糖、甾體皂苷、醌類、生物堿、木脂素、維生素和多種氨基酸等[3]。

黃精在全國廣為分布,滇黃精主要分布在云南、廣西;黃精主要分布在陜西、河北、遼寧、吉林、湖北、山東等省;多花黃精主要分布于浙江、安徽、江西、四川等省[4]。近些年,黃精作為藥食同源中藥備受青睞,但目前依然缺乏全國統(tǒng)一的黃精炮制技術(shù)標準,黃精炮制前后的化學成分差異及藥理作用變化機制尚處于初步探索階段。為了更加科學地開展黃精炮制工藝研究,指導黃精炮制品臨床合理應(yīng)用,現(xiàn)系統(tǒng)梳理了近30年來黃精炮制后化學成分和藥理作用變化研究相關(guān)文獻。

1 黃精炮制方法歷史沿革

最早關(guān)于黃精炮制方法的記載見于漢末《名醫(yī)別錄》曰:“二月采根,陰干。”[5]此時期的黃精藥材為生制品。南北朝·《雷公炮炙論》曰:“凡采得,以溪水洗凈后,蒸,從巳到子,刀薄切,暴干用。”[6]現(xiàn)代分類稱之為單蒸法。據(jù)文獻記載,唐代黃精的炮制有重蒸法、九蒸九曝法[7];宋代增加了細銼陰干、搗羅為末、煮法、與蔓荊子九蒸九曝、黃精汁加酒熬等新方法[7];元·《丹溪心法》新增了“生搗汁”[7]。明、清時期又增加了與黑豆共煮、與蜂蜜熬成膏、酒浸法、復(fù)制法、酒蒸、蜜蒸等方法[8-9]。采用情報學研究方法對檢索到的古代文獻進行統(tǒng)計分析,發(fā)現(xiàn)文獻中出現(xiàn)頻次最高的炮制方法為九蒸九曬[10]?，F(xiàn)代黃精的炮制方法主要有切片干燥、清蒸法、炙法、酒燉法、酒蒸法[9,11]。2020版《中華人民共和國藥典》中記載了黃精和酒黃精2種炮制品。目前關(guān)于黃精炮制工藝研究已經(jīng)取得很多成果[12-16],此外,還有很多學者探索了高壓蒸制等黃精炮制的新方法[14,17-20]。

通過不同的炮制方法,可以緩解生黃精的不良反應(yīng)、增強療效。唐·《食療本草》和明·《救荒本草》均記載,生食黃精會“刺人咽喉”[21-22]。清·《醫(yī)林篡要·藥性》更為詳細論述了“生黃精,實有辛薟之味,戟人喉吻,惟蒸曬久,庶幾補養(yǎng)滋腎耳”[23]。因此需要經(jīng)過炮制使之變熟,以消除麻味、減輕對咽喉刺激。黃精經(jīng)過蒸制后能增強補脾潤肺、益腎的作用。又因黃精體質(zhì)柔潤,多服久服會妨礙消化,故需要進行酒制,酒可助藥熱,使其滋而不膩,增強其補中益氣、養(yǎng)脾胃的作用[7]。

2 不同炮制方法對黃精化學成分的影響

2.1 黃精炮制前后糖類成分的變化

黃精中的主要成分是糖類成分,且黃精多糖是2020版《中華人民共和國藥典》規(guī)定的唯一含量測定指標。近些年很多學者對不同方法炮制前后黃精糖類成分的變化做了大量的研究工作,3種黃精(滇黃精、黃精、多花黃精)經(jīng)不同方法炮制后,黃精糖類成分的含量、組分和比例均發(fā)生了變化。

2.1.1 酒制前后黃精中糖類的變化 滇黃精[24-25]、黃精[26-31]、多花黃精[32-33]經(jīng)酒制后,多糖含量均顯著降低。SUN等[34]研究表明,黃精多糖和酒黃精多糖的平均分子量分別為4.01 kDa和14.2 kDa。黃精中多糖主要由半乳糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖醛酸組成,摩爾比為29.63∶36.10∶15.09∶10.20,而酒黃精多糖主要由半乳糖、甘露糖和半乳糖醛酸組成,摩爾比為78.77∶5.50∶13.84。徐如靜等[35]發(fā)現(xiàn)生多花黃精多糖的分子量為5.34 kDa,經(jīng)酒制后多糖分子量增大,主要集中在76.4 kDa。多花黃精酒制前后多糖均由半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、甘露糖、鼠李糖組成,酒多花黃精多糖新增加的單糖組分為阿拉伯糖。酒多花黃精多糖的半乳糖醛酸含量比生多花黃精降低11.10%,而鼠李糖含量增加了5.31%。與生多花黃精比較,酒制后多花黃精多糖有19.64%羧基發(fā)生了酯化。

張艷雪等[36]發(fā)現(xiàn)黃精經(jīng)酒制后,單糖和寡糖類成分含量發(fā)生明顯變化。其中,D-蔗糖、棉子糖、蜜二糖含量均有不同程度降低,D-果糖、D-葡萄糖、D-木糖含量明顯增加。寡糖類成分D-蔗糖、棉子糖、蜜二糖在炮制過程中均產(chǎn)生質(zhì)變,水解為其對應(yīng)的單糖和(或)雙糖。楊云等[37]發(fā)現(xiàn)生品黃精中還原糖含量較低,隨著炮制時間的延長還原糖含量逐漸增高,酒燉樣品中還原糖含量在25 h達到最大值,隨后呈下降趨勢。曾林燕等[38]測定了滇黃精、黃精和多花黃精炮制前后小分子糖組成及含量變化,發(fā)現(xiàn)3種黃精生品中,小分子糖都為蔗糖和果糖。經(jīng)酒制后,黃精、多花黃精和滇黃精分別在酒蒸8 h或16 h的炮制品中檢測到了葡萄糖。蔗糖、果糖和葡萄糖的含量隨炮制時間的延長而增加,然后在不同時間點又呈降低趨勢。2種還原糖葡萄糖和果糖之和,以及小分子糖總量都在炮制16 h達到最高,為生品的4～27倍。SUN等[34]通過單糖成分分析發(fā)現(xiàn),生黃精主要由半乳糖(29.63%),甘露糖(36.10%),葡萄糖(15.09%)和半乳糖醛酸(10.20%)組成,而酒黃精中半乳糖的比例最高,達到78.77%,并且含有甘露糖(5.50%)和半乳糖醛酸(13.84%)。

2.1.2 九蒸九制前后黃精中糖類成分的變化 滇黃精[25,39]、黃精[40-42]、多花黃精[14,31-32,35,40,43-48]經(jīng)九蒸九制后,多糖含量均顯著下降?？傮w變化趨勢為:第1～3次蒸制后,多糖含量急劇下降,第4～9次蒸制后,多糖含量下降較為平緩。徐如靜等[35]研究發(fā)現(xiàn),生多花黃精多糖只有一個分子量片段,相對分子量為5.34 kDa,九蒸九曬多花黃精的分子量主要集中在1個片段,相對分子量分別為75.8 kDa、5.53 kDa。多花黃精九蒸九制前后多糖均由半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、甘露糖、鼠李糖組成,但九蒸九制多花黃精多糖中鼠李糖、甘露糖、半乳糖的占比增加,半乳糖醛酸和葡萄糖的占比減少。與生黃精比較,九蒸九曬多花黃精多糖有15.72%羧基發(fā)生了酯化。吳豐鵬等[42]研究結(jié)果表明,未蒸制黃精多糖的單糖組成為甘露糖(Man)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、阿拉伯糖(Ara),4種單糖的百分含量為52.47%、36.84%、7.32%、3.37%;九蒸九制后黃精多糖的單糖組成有所變化,隨著蒸制次數(shù)的增加,Man的含量不斷降低,從最初的52.4%減少至第9次蒸制時的18.86%;Glc的含量在前2次蒸制中降低,但隨著蒸制次數(shù)的增加其含量又不斷增加,最高為第9次蒸制時的52.2%;Gal和Ara隨著蒸制次數(shù)的增加,其含量相對增加,其中Gal含量增加的量相對比較大。

鄭曉倩等[46]研究了多花黃精九蒸九曬炮制過程中糖類成分動態(tài)變化,發(fā)現(xiàn)雙糖、單糖的含量在炮制過程中整體呈先增加后遞減的趨勢。多花黃精生品中蔗糖含量為3.48%,果糖和葡萄糖含量在多花黃精生品中最低分別為4.42%、1.27%,隨著炮制次數(shù)的增加,蔗糖含量先增加后減少,經(jīng)過6次蒸曬后便無法檢出,果糖和葡萄糖含量先增加后趨于穩(wěn)定。推測是由于炮制初期,多糖分解為單糖和低聚糖,而低聚糖會進一步分解為單糖,但炮制后期部分單糖與氨基酸發(fā)生美拉德反應(yīng),故單糖含量也有所降低。馬慕秾[45]發(fā)現(xiàn)九蒸九制多花黃精中還原糖含量是生多花黃精的2.85倍,隨著蒸制次數(shù)的增加還原糖含量先上升后下降。

2.1.3 不同炮制方法對黃精糖類成分的影響 吳英詳[28]發(fā)現(xiàn)黃精經(jīng)不同蒸制、煮制、酒燉(黃酒)工藝炮制后,多糖含量均有所降低,炮制時間與多糖含量成反比。在炮制時間相同的情況下,炮制后黃精中多糖含量減少值由高至低:煮制黃精>蒸制黃精>酒制黃精。戴萬生等[24]對比了清蒸、酒蒸、黑豆蒸、熟地黃蒸、蜂蜜蒸、蔓荊蒸6種炮制方法對滇黃精糖類成分影響,發(fā)現(xiàn)與滇黃精生品比較,各滇黃精炮制品中多糖含量均顯著下降,不同輔料蒸制品之間差別不明顯。炮制后的滇黃精中還原糖和小分子總糖含量顯著增加,非還原性低聚糖含量顯著下降,不同輔料蒸制品之間差別明顯,還原性糖含量由高至低依次為:蜂蜜蒸>清蒸>酒蒸>熟地黃蒸>蔓荊蒸>黑豆蒸>生品,小分子總糖含量由高至低依次為:蜂蜜蒸>熟地黃蒸>蔓荊蒸>清蒸>酒蒸>黑豆蒸>生品,非還原性低聚糖含量由高至低依次為:生品>黑豆蒸>熟地黃蒸>蔓荊蒸>蜂蜜蒸>酒蒸>清蒸。劉玲[33]研究發(fā)現(xiàn)多花黃精經(jīng)不同方法炮制后,多糖含量由高至低依次為:生多花黃精>蒸制多花黃精>酒制多花黃精。孫婷婷等[29]發(fā)現(xiàn)陜西產(chǎn)黃精的不同炮制品中多糖含量存在顯著差異,以黃精生飲片中多糖含量最高,酒蒸品次之,清蒸品最低。宋藝君等[30]發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)地黃精經(jīng)鮮切、干切、清蒸、酒蒸炮制后,多糖含量分別為10.8%～13.4%、8.9%～10.8%、5.5%～6.9%,5.6%～6.5%,與未炮制樣品(鮮切)比較,黃精經(jīng)干切、清蒸、酒蒸后多糖含量依次減少。馮婧等[32]發(fā)現(xiàn)多花黃精經(jīng)不同方法炮制后多糖含量均顯著降低,炮制后多糖含量由大到小依次為:生多花黃精>清蒸多花黃精>酒蒸多花黃精>九蒸九曬多花黃精。張洪坤等[31]比較了九蒸九制炮制過程中清蒸和酒蒸多花黃精中多糖含量的變化規(guī)律,發(fā)現(xiàn)各蒸次下酒蒸黃精多糖含量均略低于清蒸黃精。徐如靜等[35]研究發(fā)現(xiàn),酒制多花黃精中多糖含量高于九蒸九曬多花黃精。生多花黃精多糖的分子量僅為5.34 kDa,酒制后多糖分子量為76.4 kDa,而九蒸九曬多花黃精的分子量主要集中在2個片段,分別為75.8 kDa、5.53 kDa。與生多花黃精比較,酒制和九蒸九曬后分別有19.64%和15.72%羧基發(fā)生了酯化。單糖組成分析結(jié)果表明,生多花黃精、酒制多花黃精、九蒸九曬多花黃精中的多糖均含有一定量的半乳糖、鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖醛酸。與其他2種多糖比較,酒多花黃精中含有少量阿拉伯糖。

楊云等[37]發(fā)現(xiàn)黃精生品中還原糖含量較低,經(jīng)不同時間的清蒸和酒燉炮制后,黃精還原糖含量先增加,隨后又呈下降趨勢。清蒸黃精和酒燉黃精中還原糖的含量分別在炮制20 h和25 h時達到最大值?？傮w而言,酒燉黃精樣品的還原糖含量高于清蒸黃精,切片后進行蒸制和酒燉的樣品中還原糖含量明顯高于黃精蒸制和酒燉樣品。常亮等[49]測定了3種黃精(多花黃精、黃精、滇黃精)在2種方法(蒸法、炆法)炮制過程中果糖、葡萄糖、蔗糖、水蘇糖的含量變化,發(fā)現(xiàn)蒸法炮制過程中,隨炮制時間增加,3種黃精中果糖和葡萄糖的含量逐漸增加,在炮制8～12 h達到峰值,隨后出現(xiàn)含量下降。炆法炮制過程中,果糖和葡萄糖均表現(xiàn)為隨炮制時間增加含量也相應(yīng)增加。2種方法炮制后黃精中單糖成分變化存在明顯差異,表明蒸法和炆法炮制過程中發(fā)生的化學反應(yīng)有明顯差異。3種黃精經(jīng)2種方法炮制后,蔗糖含量變化均不大,可能是未參與反應(yīng)。而作為四糖的水蘇糖含量均呈下降趨勢,表明黃精炮制過程中多糖在高溫環(huán)境發(fā)生了水解反應(yīng)。張艷雪等[36]發(fā)現(xiàn)多花黃精經(jīng)酒蒸和炆制后,寡糖類成分D-蔗糖、棉子糖、蜜二糖的含量均顯著降低,單糖類成分D-果糖、D-葡萄糖、D-木糖含量明顯增加。酒蒸多花黃精中D-果糖、D-木糖的含量均高于炆制多花黃精,而D-葡萄糖、D-蔗糖、棉子糖的含量均低于炆制多花黃精。

2.2 黃精炮制前后皂苷類成分的變化

3種黃精(滇黃精、黃精、多花黃精)經(jīng)不同方法炮制后,總皂苷含量均相應(yīng)增加,但隨著炮制次數(shù)的增加,總皂苷含量呈現(xiàn)上下波動性變化。黃精經(jīng)炮制后,人參皂苷Rb1、羥基積雪草苷、新西伯利亞蓼苷、薯蕷皂苷等多種皂苷類成分的含量均發(fā)生了變化。黃精炮制后有舊的皂苷類成分消失,也有新的皂苷類成分產(chǎn)生。黃精和多花黃精經(jīng)炮制后,薯蕷皂苷元含量均顯著降低。

2.2.1 酒制前后黃精中皂苷類成分的變化 酒制后,滇黃精[24]和多花黃精[33]中總皂苷含量增加,而黃精[28]中的總皂苷含量減少。多花黃精[50]和黃精[51]經(jīng)酒制后,薯蕷皂苷元含量降低。廖念[14]發(fā)現(xiàn)多花黃精酒制后,薯蕷皂苷元和新西伯利亞蓼苷含量增加,羥基積雪草苷含量降低。林雨[25]發(fā)現(xiàn)滇黃精經(jīng)酒制后,人參皂苷Rb1和薯蕷皂苷的含量均有所降低。任洪民等[52]采用主成分分析及正交偏最小二乘法-判別分析篩選了多花黃精酒制前后差異成分,結(jié)果表明,甾體皂苷類成分:26-(β-glucopyranosyl)-22-methylfurost-5-ene-3β,14α,26-triol 3-O-β-lycotetraoside或其同分異構(gòu)體、cyrtonemoside A或其同分異構(gòu)體、kingianoside Z,是多花黃精酒制前后的主要差異成分之一。多花黃精酒制后,增加的甾體皂苷類成分有:原纖細薯蕷皂苷、(3β,25R)-furost-5-en-12-one,3-[(6-deoxy-4-O-β-D-glucopyranosyl-β-D-galactopyranosyl)oxy]-26-(β-D-glucopyranosyloxy)-22-methoxy、纖細薯蕷皂苷、cyrtonemoside A或其同分異構(gòu)體、kingianoside Z;減少的甾體皂苷類成分有:kingianoside E或其同分異構(gòu)體、huangjinoside D、kingianoside F或其同分異構(gòu)體、kingianoside A或其同分異構(gòu)體、(25S)-aspidistrin、26-(β-glucopyranosyl)-22-methylfurost-5-ene-3β,14α,26-triol 3-O-β-lycotetraoside或其同分異構(gòu)體。

2.2.2 九蒸九制前后黃精中皂苷類成分的變化 滇黃精[39]、黃精[41]、多花黃精[31]經(jīng)九蒸九制后,總皂苷含量均增加,九蒸九制過程中總皂苷含量動態(tài)變化研究結(jié)果顯示,滇黃精、黃精和多花黃精在第1次蒸制后總皂苷含量明顯增加,隨后呈上下波動性變化。但廖念[14]和李瑞[13]的研究報道中稱,多花黃精總皂苷含量從生品到一蒸一烘表現(xiàn)為增加,而從一蒸一烘到九蒸九烘則呈現(xiàn)下降的趨勢,且九蒸九烘后多花黃精中總皂苷含量低于生品。廖念[14]發(fā)現(xiàn)多花黃精九蒸九制后,薯蕷皂苷元和羥基積雪草苷含量增加,新西伯利亞蓼苷含量減少。張海潮等[48]發(fā)現(xiàn)多花黃精經(jīng)九蒸九制后,薯蕷皂苷含量顯著下降。林雨[25]發(fā)現(xiàn)與生滇黃精比較,九蒸九制滇黃精中薯蕷皂苷含量下降,而人參皂苷Rb1在第4次蒸制后便降為0。王倩等[53]研究表明,黃精中的薯蕷皂苷在炮制后轉(zhuǎn)化成延齡草苷和薯蕷皂苷元。

2.2.3 不同炮制方法對黃精皂苷成分的影響 張洪坤等[31]發(fā)現(xiàn)多花黃精經(jīng)清蒸和酒蒸后,其皂苷含量均顯著升高。低于4次的蒸制炮制中,清蒸多花黃精中皂苷含量高于酒蒸多花黃精。戴萬生等[24]對比了不同輔料蒸制對滇黃精皂苷含量的影響,結(jié)果表明滇黃精蒸制后總皂苷含量是生品的5～7倍,含量由高至低依次為:酒蒸>清蒸>熟地黃蒸=蜂蜜蒸>黑豆蒸>蔓荊蒸>生品。吳英詳[28]發(fā)現(xiàn)黃精經(jīng)不同蒸制、煮制、酒燉(黃酒)工藝炮制后,總皂苷含量均低于生品,炮制時間與總皂苷含量成反比。在炮制時間相同的情況下,煮制黃精的皂苷減少量高于蒸制黃精,蒸制黃精的皂苷減少量高于酒制黃精。孫婷婷等[51]發(fā)現(xiàn)不同黃精炮制品中薯蕷皂苷元含量差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),生品含量最高,清蒸品次之,酒蒸品最低。林雨[25]發(fā)現(xiàn)滇黃精經(jīng)不同方法炮制后,人參皂苷Rb1含量均呈下降趨勢,在炮制次數(shù)相同的情況下,酒制品中人參皂苷Rb1含量高于蒸制品。滇黃精中薯蕷皂苷含量較低,蒸制和酒制前后薯蕷皂苷含量無明顯變化,2種炮制品中薯蕷皂苷含量也無明顯差異。廖念[14]發(fā)現(xiàn)生多花黃精和4種(燙制、清蒸、酒蒸、九蒸)多花黃精炮制品中3種皂苷類成分含量存在差異。其中,薯蕷皂苷元含量依次為:九蒸多花黃精>燙多花黃精>酒蒸多花黃精>生多花黃精>清蒸多花黃精;羥基積雪草苷含量依次為:燙多花黃精>九蒸多花黃精>生多花黃精>酒蒸多花黃精>清蒸多花黃精;新西伯利亞蓼苷含量依次為:清蒸多花黃精>酒蒸多花黃精>生多花黃精>燙多花黃精>九蒸多花黃精。

2.3 黃精炮制前后揮發(fā)性成分的變化

美拉德反應(yīng)是羰基化合物(還原糖類)和氨基化合物(氨基酸和蛋白質(zhì))間的反應(yīng),經(jīng)過復(fù)雜的歷程最終生成棕色甚至是黑色的大分子物質(zhì)類黑精或稱擬黑素,故又稱羰氨反應(yīng)。黃精在炮制過程中也發(fā)生了美拉德反應(yīng),黃精炮制品的顏色也由淺黃色變?yōu)樽厣翞鹾谏?并產(chǎn)生了一系列的美拉德反應(yīng)產(chǎn)物。5-羥甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,5-HMF)是美拉德反應(yīng)的標志性產(chǎn)物之一,還有呋喃類成分、醛類、烷烴類等揮發(fā)性成分均在黃精炮制前后均發(fā)生了顯著變化。據(jù)文獻[13-14,54-61]報告統(tǒng)計,炮制后黃精中有17種揮發(fā)性成分消失,新生產(chǎn)52種揮發(fā)性成分。

2.3.1 酒制前后黃精中揮發(fā)性成分的變化 滇黃精[54]、黃精[30]、多花黃精[55-56]經(jīng)酒制后,5-HMF含量增加。曾林燕等[54]發(fā)現(xiàn)3種黃精(滇黃精、黃精、多花黃精)酒制后均產(chǎn)生5-羥甲基麥芽酚(2,3-dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl-4(H)-pyran-4-one,DDMP)和5-HMF 2種新成分,其含量在種間存在一定差異。多花黃精中DDMP含量先隨炮制時間的延長逐漸升高,至24 h達到最高,隨后降低,而5-HMF的含量隨炮制時間的延長一直呈遞增趨勢。王淳等[56]研究表明,3種黃精(黃精、多花黃精、滇黃精)經(jīng)酒制16 h后,A280(280 nm吸光度)均增加,滇黃精、黃精和多花黃精酒制品的A280分別是生品的1.6、15.7、2.7倍。3種黃精炮制16 h后的酒制品中二氯甲烷組分pH值與生品比較均呈現(xiàn)酸性變化趨勢,但3種黃精的pH值變化程度不同,多花黃精變化幅度最大。以上結(jié)果也表明3種黃精之間存在成分差異。隨著炮制時間的延長,酒制多花黃精二氯甲烷組分的A280逐漸增加,pH值呈降低趨勢。5個不同炮制時間的酒多花黃精共新產(chǎn)生了15個化合物,其中4、8、16、24、32 h酒多花黃精分別有5、6、6、13、10個。其中,正己酸、3-羥基二氫-2(3H)-呋喃酮、4-羥基二氫-2(3H)-呋喃酮和5-羥甲基糠醛4種化合物的含量隨炮制時間延長呈增加趨勢;3,5-二羥基-6-甲基-2,3-二氫-4H-吡喃-4-酮、4-甲基-2,6-二叔丁基苯酚和2-乙基己基草酸己酯3種化合物含量隨炮制時間延長先升高后下降;乙基鄰苯二甲酸酯、乙基亞油酸酯和2-乙基己基草酸己酯3種化合物含量隨炮制時間延長呈起伏波動變化。李瑞[13]從未炮制的多花黃精藥材中檢測出42個揮發(fā)性物質(zhì),酒制多花黃精中檢測出了50個揮發(fā)性物質(zhì)。酒制后新產(chǎn)生的物質(zhì)有18個,主要為呋喃類、醛類、醇及烷烴類。酒制后未檢測到物質(zhì)有11個,主要為烷烴和脂肪酸類物質(zhì)。

2.3.2 九蒸九制前后黃精中揮發(fā)性成分的變化 李瑞等[44]在多花黃精生品中未檢測到5-HMF,炮制后5-HMF含量變化明顯,一蒸一烘后5-HMF含量為1.15%,從一蒸到九蒸略微呈現(xiàn)下降的趨勢。韓笑等[57]發(fā)現(xiàn)未經(jīng)炮制的多花黃精、一蒸一曬、二蒸二曬的多花黃精中均未檢測到5-HMF,從三蒸三曬至六蒸六曬5-HMF含量逐漸增加,從六蒸六曬至九蒸九曬5-HMF含量又逐漸降低。林雨[25]對比了滇黃精生品和九蒸九制過程中5-HMF含量的變化,發(fā)現(xiàn)生滇黃精中不含5-HMF。隨著蒸制次數(shù)的增加,滇黃精中5-HMF含量逐漸升高,第7次蒸制后5-HMF含量達到最高為0.735%,隨后略呈下降趨勢。

2.3.3 不同炮制方法對黃精揮發(fā)性成分的影響 常亮等[58]測定了3種黃精(多花黃精、黃精和滇黃精)經(jīng)2種方法炮制過程中5-HMF含量變化,發(fā)現(xiàn)未經(jīng)炮制的3種黃精中5-HMF含量差異有統(tǒng)計學意義,由高至低依次為:滇黃精>多花黃精>黃精,其中,未炮制的黃精中5-HMF含量為0。經(jīng)炆法和蒸法炮制后,3種黃精中5-HMF含量都有相應(yīng)的增加,炆制品>蒸制品。隨著炮制時間的延長,3種黃精中5-HMF含量均在炮制16 h左右出現(xiàn)峰值,隨后急劇下降。宋藝君等[30]發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)地黃精經(jīng)鮮切和干切后,均未檢測到5-HMF,而經(jīng)清蒸和酒蒸炮制后黃精中均可檢測到5-HMF,酒蒸黃精中5-HMF含量高于清蒸黃精。林雨[25]發(fā)現(xiàn)在相同炮制次數(shù)下,酒制滇黃精中5-HMF含量顯著低于蒸制滇黃精。

王進等[59]發(fā)現(xiàn)蒸制后多花黃精的揮發(fā)性成分在含量和組成上均明顯降低。多花黃精生品中揮發(fā)性成分相對含量大于2.0%的主要成分有10種,分別為:正己醛、1,7,7-三甲基三環(huán)[2.2.1.0(2,6)]庚烷、蒎烯、莰烯、2-正戊基呋喃、10S,11S-雪松3(12),4-二烯、棕櫚酸、亞油酸、油酸酰胺、芥酸酰胺,占主要成分總和的61.66%。而蒸制后相對含量大于2.0%的主要成分僅有5種,分別是十五烷酸、棕櫚酸、亞油酸、油酸酰胺、芥酸酰胺,且這5種物質(zhì)在生品中均有檢出,占主要成分總和的66.89%。對比發(fā)現(xiàn)多花黃精經(jīng)炮制后,部分揮發(fā)油主要成分的含量明顯降低,如正己醛、1,7,7-三甲基三環(huán)[2.2.1.0(2,6)]庚烷、莰烯、2-正戊基呋喃、10 s,11 s-雪松-3(12),4-二烯等化合物。生黃精具有“久聞其生味,有刺目之感”,而炮制后的黃精無此氣味,推測炮制后黃精中含量明顯降低的揮發(fā)性成分可能是引起生黃精的刺激性和不良反應(yīng)的主要成分。郭磊等[60]對3種黃精不同方法炮制前后的11種呋喃類成分進行氣相色譜-質(zhì)譜半定量測定,發(fā)現(xiàn)3種黃精中呋喃類成分含量差異有統(tǒng)計學意義,多花黃精>滇黃精>黃精。炮制后3種黃精中呋喃類成分都有相應(yīng)的增加,蒸制品>炆制品。吳毅等[61]發(fā)現(xiàn)3種黃精(滇黃精、多花黃精、黃精)經(jīng)2種方法炮制后,11種呋喃類化合物的含量變化明顯。3種黃精中成分含量最高的是糠醛,經(jīng)過2種方法(蒸制、炆制)炮制后,糠醛類成分含量為:蒸制品>炆制品。3種黃精炮制后除部分情況1-(2-呋喃基)-乙酮及2-戊基呋喃含量減少,其余9種呋喃類成分含量大多有所增加,蒸制品>炆制品。廖念[14]對4種(燙制、清蒸、酒蒸、九蒸)多花黃精炮制品的化學成分進行了分析,發(fā)現(xiàn)2-正戊基呋喃、愈創(chuàng)木烯、鄰苯二甲酸二異辛酯、Balanophonin B、桉葉油醇、松柏醛、反式-2,4-癸二烯醛共7種揮發(fā)性成分的含量在生多花黃精和不同多花黃精炮制品之間均存在不同程度的差異。李瑞[13]從多花黃精藥材與3種炮制品(生多花黃精:燙制-切制-干燥、酒多花黃精、蒸多花黃精)共鑒定出71種化合物。其中黃精藥材中檢測出化合物42個、生黃精44個、酒黃精50個、蒸黃精41個。多花黃精藥材與炮制品中檢測到24種相同成分,相對含量超過2%的僅有鄰苯二甲酸二丁酯與乙酸丁酯2種。多花黃精蒸制后新產(chǎn)生的成分有25個,主要為呋喃類、醛類、醇及烷烴類化合物。蒸制后未檢測到的化合物有9個,主要為烷烴和脂肪酸類物質(zhì)。炮制后新產(chǎn)生了具有美拉德反應(yīng)標志特征的化合物有2,2-二甲基四氫呋喃、2,3-二氫-3,5二羥基-6-甲基-4(H)-吡喃-4-酮等。

2.4 黃精炮制前后黃酮類成分的變化

2.4.1 酒制前后黃精中黃酮類成分的變化 吳英詳[28]發(fā)現(xiàn)與黃精生品比較,酒制后黃精中總黃酮含量均有所下降,黃酮含量與酒制時間成反比。廖念[14]發(fā)現(xiàn)多花黃精經(jīng)酒制后,Disporopsin、Odoratumone B、新甘草苷、楊梅素共4種黃酮類成分的含量均增加。任洪民等[52]采用主成分分析及正交偏最小二乘法-判別分析對多花黃精酒制前后化學成分進行了分析,發(fā)現(xiàn)黃酮類成分是多花黃精酒制前后的主要差異成分之一。3種差異性黃酮類成分分別為:甲基麥冬黃烷酮B、5,7-dihydroxy-3-(4′-hydroxybenzyl)-chroman-4-one、disporopsin,其中甲基麥冬黃烷酮B僅存在于生品中。

2.4.2 九蒸九制前后黃精中黃酮類成分的變化 張海潮等[48]發(fā)現(xiàn)多花黃精在九蒸九制不同炮制階段總黃酮的含量變化顯著,隨著炮制時間的增加,總黃酮含量顯著升高,在七蒸時達到最高峰,總黃酮為4 582 μg/g,約為多花黃精生品453 μg/g的10倍,之后總黃酮含量隨炮制時間的增加而逐漸下降。高興[62]對黃精九蒸九曬炮制前后差異性成分的分離與純化,發(fā)現(xiàn)炮制前后主要的差異性化學成分的化學成分為4′,5,7-三羥基-6,8-二甲基高異黃烷酮,化學式為C18H18O5,同時此物質(zhì)也是黃精九蒸九曬炮制后含量損失最大的化學物質(zhì)。廖念[14]發(fā)現(xiàn)多花黃精經(jīng)九蒸九制后,Disporopsin、Odoratumone B、楊梅素的含量均增加,新甘草苷含量減少。

2.4.3 不同炮制方法對黃精中黃酮類成分的影響 吳英詳[28]發(fā)現(xiàn)不同蒸制工藝、煮制工藝、酒制工藝的黃精炮制品中黃酮含量與生品比較均有所降低,且隨著炮制時間的延長,黃酮的含量明顯下降。相同炮制時間,不同方法炮制后黃精中總黃酮的含量由高至低依次為:酒制黃精>蒸制黃精>煮制黃精。廖念[14]對比不同方法炮制前后多花黃精中黃酮類成分的變化,不同炮制品中Disporopsin和Odoratumone B的含量均依次為:清蒸多花黃精>酒蒸多花黃精>九蒸九制多花黃精>燙多花黃精>生黃精;新甘草苷含量依次為:清蒸多花黃精>酒蒸多花黃精>生多花黃精>燙多花黃精>九蒸九制多花黃精;楊梅素含量依次為:清蒸多花黃精>燙多花黃精>九蒸多花黃精>酒蒸多花黃精>生多花黃精。

2.5 不同炮制方法對黃精中氨基酸類成分的影響 氨基酸是人體必需營養(yǎng)物質(zhì),黃精作為滋補類中藥也含有較多的氨基酸成分,炮制后黃精中氨基酸總量和成分均有相應(yīng)的增加,這可能是黃精炮制后補益作用增強的物質(zhì)基礎(chǔ)之一。吳毅等[63]發(fā)現(xiàn)3種黃精(滇黃精、黃精、多花黃精)生品中氨基酸的含量差異有統(tǒng)計學意義,16種水解氨基酸總含量,由高到低依次為:黃精>多花黃精>滇黃精。不同方法炮制后,3種黃精中總氨基酸都有相應(yīng)的增加,黃精和滇黃精的不同炮制品中總氨基酸含量依次為:蒸制品>炆制品>生品,多花黃精的不同炮制品中總氨基酸含量依次為:炆制品>蒸制品>生品。黃精經(jīng)炮制后共新產(chǎn)生了8種氨基酸成分。見表1。任洪民等[52]發(fā)現(xiàn)氨基酸類成分L-焦谷氨酸C5H7NO3僅存在于生品多花黃精中,酒制多花黃精中未檢測到。

表1 黃精藥材炮制后新產(chǎn)生氨基酸成分變化

2.6 不同炮制方法對黃精中其他類成分的影響 3種黃精(滇黃精、黃精、多花黃精)經(jīng)不同方法炮制后,蒽醌、蛋白質(zhì)、糖醛酸、多酚、生物堿、有機酸等成分均產(chǎn)生了差異性變化。田先嬌等[39]發(fā)現(xiàn)滇黃精九蒸九制過程中,蒽醌含量總體呈下降趨勢。SUN等[34]研究發(fā)現(xiàn),與黃精粗多糖比較,酒黃精粗多糖的總碳水化合物含量為減少了41.43%,蛋白質(zhì)含量增加了26.17%,糖醛酸含量增加了10.71%,多酚含量增加了2.76%。廖念[14]對比了生多花黃精和4種(燙制、清蒸、酒蒸、九蒸)多花黃精炮制品的化學成分差異,發(fā)現(xiàn)β-谷甾醇(甾體)、月桂酸(飽和脂肪酸)、鵝掌楸堿(生物堿)3種成分的含量在生多花黃精和各炮制品之間均存在不同程度的差異。任洪民等[52]研究表明,生物堿類成分是多花黃精酒制前后的主要差異成分之一。酒制后新產(chǎn)生3種生物堿類成分:2,3,4,6-tetrahydro-lH-β-carboline-3-carboxylic acid、polygonatine B、4-(9H-β-carbolin-1-yl)-4-oxo-but-2-enoic acid methyl ester。亞油酸和天師酸2個有機酸在炮制前后也發(fā)生了變化,炮制后天師酸的響應(yīng)強度減少,亞油酸的響應(yīng)強度增加。其他類成分如:8-hydroxychromogen、環(huán)(L-亮-L-異亮)二肽、(6R,9R)-長壽花糖苷、3-(9,12)-十八碳二烯?；视?則僅存在于生品多花黃精中。張海潮等[48]發(fā)現(xiàn)九蒸九制過程中,隨著炮制時間的增加,總酚含量顯著升高。

3 不同炮制方法對黃精藥理作用的影響

3.1 酒制前后黃精藥理作用變化

3.1.1 增強免疫作用 3種黃精(滇黃精、黃精、多花黃精)酒制前后均可通過增加胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、細胞活力、吞噬能力、調(diào)節(jié)細胞因子分泌等方式增強機體免疫功能,其物質(zhì)基礎(chǔ)主要為黃精中的多糖類成分,酒制后黃精提高免疫活性的能力顯著增強。

欒妮娜[20]發(fā)現(xiàn)與生品組小鼠比較,常壓酒蒸和加壓酒蒸炮制后滇黃精可使溫熱藥致陰虛模型小鼠胸腺指數(shù)顯著升高(P<0.05)。SUN等[34]發(fā)現(xiàn)黃精粗多糖和酒黃精粗多糖均可增強細胞活力、吞噬能力、酸性磷酸酶活性和RAW 264.7細胞的一氧化氮產(chǎn)生,以增強RAW 264.7細胞的體外免疫調(diào)節(jié)活性,且酒黃精粗多糖的作用大于黃精粗多糖。黃精粗多糖和酒黃精粗多糖還可通過改善胸腺和脾臟指數(shù),恢復(fù)外周血白細胞、淋巴細胞和紅細胞數(shù)量,使血清中白細胞介素-2,白細胞介素-6,腫瘤壞死因子-α和γ干擾素的分泌恢復(fù)到正常范圍,降低脾臟和胸腺的負形態(tài)變化等途徑增強脾虛小鼠免疫抑制模型的免疫功能。與黃精粗多糖比較,酒黃精粗多糖顯示出更強的免疫活性。張瑩等[64]發(fā)現(xiàn)酒制多花黃精能顯著提高小鼠平均吞噬指數(shù)和平均校正廓清指數(shù),且與生品多花黃精組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),表明酒制多花黃精增加小鼠非特異性免疫功能的作用優(yōu)于生品。鐘凌云等[55]發(fā)現(xiàn)與生品多花黃精比較,酒制多花黃精的二氯甲烷部位能顯著提高小鼠碳粒廓清指數(shù)(P<0.05)和吞噬系數(shù)(P<0.05),提示酒制多花黃精能顯著提高小鼠非特異性免疫功能。萬曉瑩等[65]對多花黃精炮制前后多糖的免疫活性比較,對于正常小鼠腹腔巨噬細胞,酒多花黃精粗多糖能顯著促進細胞分泌腫瘤壞死因子-α(P<0.01),但多花黃精粗多糖無明顯作用。對于脂多糖誘導巨噬細胞模型,酒多花黃精粗多糖和多花黃精粗多糖均能顯著抑制細胞分泌腫瘤壞死因子-α和白細胞介素-1β(P<0.01),且酒多花黃精粗多糖作用更強。酒多花黃精粗多糖和多花黃精粗多糖增強免疫調(diào)節(jié)作用主要是通過抑制炎癥反應(yīng),且多花黃精在酒制后其多糖成分抑制炎癥反應(yīng)的作用增強。

3.1.2 健脾作用 欒妮娜[20]發(fā)現(xiàn)與生品組小鼠比較,常壓酒蒸和加壓酒蒸炮制后的滇黃精可使溫熱藥致陰虛模型小鼠體質(zhì)量增長率、脾臟指數(shù)顯著升高(P<0.05)。SUN等[34]發(fā)現(xiàn)與脾虛組小鼠比較,黃精粗多糖和酒黃精粗多糖處理后的脾虛組小鼠體質(zhì)量以劑量依賴性方式增加。酒黃精粗多糖在恢復(fù)小鼠體質(zhì)量方面比黃精粗多糖具有更高的活性。

3.1.3 抗氧化作用 王淳等[56]對比了相同生藥質(zhì)量濃度(40 mg/mL)的3種酒黃精(滇黃精、黃精、多花黃精)炮制品(炮制16 h)的二苯基苦基苯肼(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率變化。發(fā)現(xiàn)酒制后,滇黃精DPPH自由基清除率從18.89%增加至49.20%(P<0.05),黃精從36.89%增加至68.58%(P<0.05),多花黃精從33.21%增加至66.16%(P<0.05),與生品黃精比較,3種黃精酒制品的二氯甲烷組分DPPH自由基清除率均明顯增加。馮婧等[32]發(fā)現(xiàn)多花黃精酒制后,可以提高其DPPH自由基、ABTS自由基的清除能力,酒制后多花黃精水提物與醇提物的總還原力均高于生品。

3.1.4 抗疲勞作用 欒妮娜[20]研究發(fā)現(xiàn),與生品組小鼠比較,常壓酒蒸和加壓酒蒸滇黃精后,小鼠游泳時間明顯延長(P<0.05),小鼠耐缺氧存活時間明顯延長(P<0.05)。

3.1.5 降低毒性和刺激性 清·《醫(yī)林篡要·藥性》記載“生黃精,實有辛薟之味,戟人喉吻”,現(xiàn)代研究表明黃精炮制后可降低其毒性和刺激性,減少不良反應(yīng)的產(chǎn)生。欒妮娜[20]發(fā)現(xiàn)滇黃精生品的刺激性比較明顯,生品滇黃精處理后,兔眼黏膜可見血管充血,虹膜角膜都有炎癥水腫現(xiàn)象,各酒制品無明顯刺激性。急性毒性實驗結(jié)果顯示,滇黃精生品大劑量40.0 g/(kg·d)(藥材/(小鼠體質(zhì)量·d)可使小鼠活動減少,隨著時間的延長,藥物作用減弱,可逐漸恢復(fù)正常。滇黃精酒制品以及滇黃精生品的中低劑量對小鼠活動、飲水、攝食均無明顯影響,也無其他不良反應(yīng)。說明滇黃精生品雖具有一定的不良反應(yīng),但不良反應(yīng)較小,可以耐受。酒制后可明顯降低其不良反應(yīng),保證用藥安全。

3.1.6 滋陰作用 景軍強等[66]發(fā)現(xiàn)陰虛模型組小鼠在給予生黃精和酒蒸黃精后各項指標均有所改善,其治療效果依次為:酒黃精2#(先切后蒸)>酒黃精1#(先蒸后切)>生黃精,表明酒蒸后黃精滋陰作用有所增強。

3.1.7 其他作用 欒妮娜[20]研究發(fā)現(xiàn),與生品組滇黃精小鼠比較,常壓酒蒸品和加壓酒蒸滇黃精對溫熱藥致陰虛模型小鼠的痛閾均顯著升高(P<0.05)。

3.2 九蒸九制前后黃精藥理作用變化

3.2.1 增強免疫作用 林雨[25]發(fā)現(xiàn)九蒸九制滇黃精可以顯著提高環(huán)磷酰胺損傷小鼠的外周血白細胞計數(shù)、紅細胞計數(shù)、血紅蛋白、血小板含量,而生滇黃精組沒有顯著改善作用。九蒸九制滇黃精還可以提高血虛模型小鼠的免疫器官指數(shù)。蒸制3～9次的熟滇黃精對小鼠脾指數(shù)有明顯改善,而生滇黃精沒有明顯作用。

3.2.2 健脾作用 馬慕秾[45]發(fā)現(xiàn)與市售多花黃精組比較,九制多花黃精組模型大鼠體質(zhì)量顯著升高(P<0.05),增長率為83.44%;市售多花黃精組對體質(zhì)量無明顯影響。表明九制后多花黃精在提高氣陰兩虛模型大鼠的體質(zhì)量方面具有更強的活性。

3.2.3 抗氧化作用 馮婧等[32]發(fā)現(xiàn)與生多花黃精比較,傳統(tǒng)九蒸九曬多花黃精的水提液在清除自由基能力和總還原能力上有明顯優(yōu)勢。陳楊楊等[67]發(fā)現(xiàn)九制多花黃精炮制品在5、10、15 g/kg 3個劑量均對游泳力竭小鼠具有明顯抗氧化作用,且九制品的作用效果優(yōu)于生藥多花黃精。九制品在延長游泳力竭時間、增加糖原含量以抗疲勞、降低脾丙二醛含量且提高脾超氧化物歧化酶活力等方面的抗氧化作用效果比生多花黃精強。吳豐鵬等[42]研究了九蒸九制后的黃精抗氧活性的變化,發(fā)現(xiàn)蒸制后的黃精多糖對自由基的清除能力明顯高于未蒸制黃精(P<0.05),但蒸制次數(shù)對黃精多糖抗氧化活性影響不大。蒸制后的黃精多糖對自由基平均清除能力的半抑制濃度均低于未蒸制黃精多糖,說明蒸制后的黃精多糖抗氧化性更強。

3.2.4 抗疲勞作用 陳靚雯等[68]發(fā)現(xiàn)同等劑量下,古法炮制(九制)多花黃精提取液與市售多花黃精提取液比較,具有更顯著的延長負重游泳時間、降低血清尿素氮水平、提高肝糖原含量、降低血乳酸水平的作用。表明古法炮制多花黃精在延緩疲勞的產(chǎn)生、提高運動耐力及消除運動代謝廢物方面具有更顯著的效果。陳楊楊等[67]發(fā)現(xiàn)與多花黃精生藥比較,九制后多花黃精可顯著延長小鼠游泳力竭時間。與正常對照組比較,生藥黃精和九制品處理后小鼠肝糖原含量明顯升高,九制品對雌小鼠的效果要強于多花黃精生藥;九制品對雄小鼠促進作用效果總體來說不如生藥黃精明顯。

3.2.5 降低毒性和刺激性 林雨[25]研究發(fā)現(xiàn),在相同濃度下,“九蒸九制”熟黃精甲醇提取物對RAW 264.7細胞受到脂多糖刺激后產(chǎn)生一氧化氮的抑制作用顯著強于生黃精組(P<0.01)。表明滇黃精經(jīng)過炮制后,熟滇黃精的體外抗炎活性增強,可以有效降低生黃精的刺激性。滇黃精炮制前后的溶血活性分析結(jié)果表明,滇黃精經(jīng)第二次蒸制后,不同炮制品的甲醇提取物及水提物均可顯著降低其溶血率,其中“八蒸八制”和“九蒸九制”熟滇黃精降低其刺激性活性最顯著(P<0.001)。

3.2.6 滋陰作用 馬慕秾等[69]以市售黃精、九制黃精的水提物處理氣陰兩虛模型大鼠,發(fā)現(xiàn)九制黃精組大鼠面溫均低于市售黃精組,且存在顯著差異(P<0.05)。但市售黃精組在降低氣陰兩虛模型大鼠的熱成像溫度方面優(yōu)于九制黃精。

3.2.7 改善血虛癥狀 林雨[25]發(fā)現(xiàn)九蒸九制滇黃精可以顯著改善血虛證小鼠外周血白細胞計數(shù)、紅細胞計數(shù)、血紅蛋白、血小板含量降低的情況,而生滇黃精組沒有顯著改善作用。表明炮制可增強滇黃精對小鼠血虛癥狀的改善作用。

3.3 不同炮制方法對黃精藥理作用變化

3.3.1 健脾作用 馬慕秾[45]分別用市售多花黃精、四制多花黃精、九制多花黃精的水提物對氣陰兩虛模型大鼠進行灌胃(用量10 g/kg),給藥6周后,四制多花黃精組、九制多花黃精組模型大鼠體質(zhì)量顯著升高(P<0.05),增長率分別為84.04%、83.44%;市售多花黃精組對體質(zhì)量無明顯影響。表明炮制后多花黃精在提高氣陰兩虛模型大鼠的體質(zhì)量方面具有更強的活性。給藥6周,與市售多花黃精組比較,四制多花黃精組大鼠的尾徑顯著增大(P<0.01)。周巧等[70]研究表明,生多花黃精和炆多花黃精均可提高脾虛小鼠的胃腸運動功能,改善脾虛小鼠胃腸激素水平,從而起到健脾作用,但以炆多花黃精效果最佳。

3.3.2 抗氧化作用 馮婧等[32]對生多花黃精和不同多花黃精炮制品(清蒸黃精、酒黃精、九蒸九曬黃精)水提液和醇提液進行體外抗氧化試驗,結(jié)果表明不同方法炮制后均能提高多花黃精水提液與醇提液對DPPH自由基和ABTS自由基的清除能力。生品與各炮制品醇提物的清除自由基和總還原作用均遠低于各品種水提物。其中,傳統(tǒng)九蒸九曬黃精的水提液在清除自由基作用和總還原作用上有明顯優(yōu)勢。

3.3.3 抗疲勞作用 杜小琴等[71]對多花黃精炮制品與生品中多糖類成分、皂苷類成分、黃酮類成分的抗運動疲勞作用進行比較研究,結(jié)果表明多花黃精炮制品中多糖類成分為抗運動疲勞活性物質(zhì),多花黃精生品中多糖類成分、皂苷類成分為抗運動疲勞活性物質(zhì)。多糖類成分為多花黃精主要的抗運動疲勞活性物質(zhì),生品中多糖類成分抗運動疲勞活性強于炮制品。

3.3.4 降低毒性和刺激性 馮敬群等[72]將生黃精及清蒸品、酒蒸品的水提醇沉液按450 g/(kg·24 h)(相當于原生藥)的劑量給小鼠灌服后,生品組小鼠全部死亡,而炮制組小鼠均無死亡且活動正常。表明黃精生品具有一定的毒性,黃精經(jīng)炮制后毒性明顯降低。

3.3.5 滋陰作用 2020版《中華人民共和國藥典》記載黃精具有“補氣養(yǎng)陰、潤肺、益腎”的功效[1],現(xiàn)代研究表明,黃精經(jīng)炮制后可顯著增強其滋陰作用,并可通過提高機體免疫力、氧化應(yīng)激作用、維持機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)、降低器官損傷、調(diào)節(jié)基因表達等多種途徑,改善機體肺、腎陰虛狀況。林雨[25]研究結(jié)果表明:1)炮制滇黃精對肺陰虛小鼠有顯著改善作用。a.滇黃精可以通過提高機體免疫力以及氧化應(yīng)激作用、降低體內(nèi)炎癥介質(zhì)含量、維持機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)等起到對肺陰虛小鼠的保護作用。改善九蒸九”黃精>一蒸一制黃精>生黃精,且“酒制”黃精的效果優(yōu)于“蒸制”黃精。b.炮制黃精能夠有效改善肺陰虛小鼠肺泡體積增加、空泡多、炎癥細胞浸潤的情況,對肺陰虛小鼠肺組織的損傷起到保護作用。改善效果九蒸九制黃精>一蒸一制黃精>生黃精。c.炮制黃精可以顯著下調(diào)Wnt4基因、上調(diào)Gsk-3β基因的mRNA及蛋白的表達水平,從而使β-連環(huán)素被磷酸化而不會進入細胞核影響細胞正常的增殖和分化,起到“滋陰潤肺”的效果。2)炮制黃精對腎陰虛小鼠有顯著的改善作用。a.滇黃精可以提高腎陰虛小鼠的免疫力以及氧化應(yīng)激作用并且起到維持陰虛小鼠體內(nèi)能量代謝平衡及內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的作用。改善九蒸九制黃精>“一蒸一制”黃精>生黃精,且“酒制”黃精的效果優(yōu)于“蒸制”黃精。b.滇黃精能夠有效改善腎陰虛小鼠腎小球體積增加、腎小球破損及炎癥細胞浸潤的情況,對腎陰虛小鼠腎組織的損傷起到保護作用。改善“九蒸九制”黃精>“一蒸一制”黃精>生黃精的效果。c.給藥滇黃精及其炮制品后,可以抑制Wnt4基因mRNA及蛋白表達量,上調(diào)Gsk-3β基因的mRNA及蛋白的表達量,從而抑制β-連環(huán)素基因及蛋白的表達量,β-連環(huán)素是Wnt信號通路的關(guān)鍵蛋白,表明滇黃精“滋陰”的效果可能與抑制Wnt信號通路的異常激活相關(guān)。馬慕秾等[69]分別用市售黃精、四制黃精、九制黃精的水提物對氣陰兩虛模型大鼠進行灌胃(用量10 g/kg),給藥6周,大鼠的面溫由高至低依次為:市售黃精組>四制黃精組>九制黃精組,大鼠的熱成像溫度由高至低依次為:四制黃精組>九制黃精組>市售黃精組。

3.3.6 其他作用 馬慕秾等[69]發(fā)現(xiàn)不同受試液處理氣陰兩虛模型大鼠6周后,四制多花黃精組和九制多花黃精組對大鼠血液中谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶水平的降低效果優(yōu)于市售多花黃精組,其中九制多花黃精組的效果最為顯著,表明炮制后可以增強多花黃精改善肌肉損傷及肝功能的作用。

4 小結(jié)

綜上所述,黃精炮制前后其化學成分和藥理作用均發(fā)生了顯著變化。不同輔料制、蒸制、煮制、酒制、炆制工藝炮制后,各黃精炮制品的化學成分、藥理作用也存在顯著差異。糖類、皂苷類、揮發(fā)性物質(zhì)、黃酮類等化學成分是黃精炮制前后主要的差異物質(zhì)。黃精經(jīng)炮制后可降低其不良反應(yīng)和刺激性,并對其增強免疫、健脾、抗氧化、抗疲勞、益氣養(yǎng)陰等藥理作用均有一定的促進效果。

在整理文獻過程中也發(fā)現(xiàn)一些問題:1)滇黃精、黃精、多花黃精3個物種來源的黃精藥材,其化學成分和藥理作用均存在一定的差異,在實際應(yīng)用中如何合理調(diào)配需做進一步試驗研究。2)黃精的炮制方法各式各樣無統(tǒng)一標準,導致各專家學者之間的研究結(jié)果存在矛盾,亟待制定全國統(tǒng)一的黃精炮制標準。3)黃精炮制品中具體化學成分和藥理作用的關(guān)聯(lián)性研究不足,需開展藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究,明確黃精炮制品中的化學成分,從而制定合理的臨床用藥指導意見。

5 討論

王進等[59]研究發(fā)現(xiàn)多花黃精經(jīng)炮制后,對人的眼、鼻、咽喉具有刺激性的揮發(fā)性成分正己醛和莰烯的含量均顯著降低,分別由9.13%和18.05%降為3.89%和2.35%,據(jù)此推測正己醛和莰烯可能是生黃精中引起刺激性的主要成分。中醫(yī)認為“黃色入脾,白色入肺,黑色入腎”,生黃精一般為黃白色,主入脾、肺,認為生黃精補益脾肺功效較強,而炮制后黃精色黑入腎,故其滋陰補腎功效較強?，F(xiàn)代研究表明,酒黃精的蛋白質(zhì)含量是生黃精的8.67倍[34],3種黃精經(jīng)炮制后總氨基酸含量和氨基酸種類均有相應(yīng)的增加,而蛋白質(zhì)和氨基酸均是人體必需的營養(yǎng)物質(zhì)之一,故推測黃精炮制后補益作用的增加與蛋白質(zhì)和氨基酸的增加具有一定的關(guān)系。杜小琴等[71]研究發(fā)現(xiàn)黃精中的多糖類成分為其抗疲勞作用的主要物質(zhì)基礎(chǔ),故生黃精的抗疲勞活性優(yōu)于炮制品,這與炮制后黃精多糖含量的降低和多糖組成成分變化存在一定聯(lián)系。美拉德反應(yīng)產(chǎn)物具有一定的抗氧化活性,而黃精在炮制過程中也發(fā)生了美拉德反應(yīng)[73]。多酚具有一定的抗氧化功能[74],SUN等[34]發(fā)現(xiàn)酒黃精中的多酚含量為3.03%,而生黃精中僅為0.27%。故推測炮制后黃精的抗氧化作用的增加與美拉德反應(yīng)產(chǎn)物和多酚含量的增加有一定的關(guān)聯(lián)性。鐘凌云等[55]研究表明,黃精炮制前后差異較大的二氯甲烷部位的主要成分之一為5-羥甲基糠醛,經(jīng)炮制后其含量顯著增加,而炮制后黃精的二氯甲烷部位能明顯提高小鼠非特異性免疫功能,推測制黃精增強免疫功能可能與炮制后5-羥甲基糠醛含量變化相關(guān)。研究表明,5-羥甲基糠醛具有抗氧化、抗腫瘤、抗糖尿病、抗組織缺氧、抗心肌缺血、改善血液流變學、保護神經(jīng)、改善學習能力等作用[75-76]。炮制后黃精各方面功效的增強或許與5-羥甲基糠醛含量的增加相關(guān)。藥理研究表明,黃精總皂苷具有調(diào)節(jié)血糖、抗腫瘤、改善學習記憶、抗氧化、調(diào)節(jié)免疫、抗抑郁等作用,炮制后黃精中總皂苷含量均高于生品,故黃精炮制品種總皂苷所產(chǎn)生的藥理藥效作用應(yīng)有所增強[77-78]。

總之,目前黃精炮制前后各化學成分變化與藥理作用的“靶向關(guān)系”研究尚處于探索階段,需要更多學者進行深入研究,以闡明黃精炮制過程藥理作用變化機制,指導不同黃精炮制品的臨床應(yīng)用,為黃精中藥效良好的天然產(chǎn)物開發(fā)奠定基礎(chǔ)。