振幅整合腦電圖評(píng)分聯(lián)合微小RNA-422a檢測(cè)晚期早產(chǎn)兒腦損傷情況的臨床研究

歐陽(yáng)福連

【摘要】 目的 分析振幅整合腦電圖（amplitude-integrated electroencephalography，aEEG）評(píng)分聯(lián)合微小RNA（miRNA，miR）-422a檢測(cè)晚期早產(chǎn)兒腦損傷的效果。方法 回顧性分析2020年1月—2021年7月贛州市人民醫(yī)院南院收治的100例晚期早產(chǎn)兒的臨床資料，按照腦損傷情況將所有患兒分為腦損傷組45例與無(wú)腦損傷組55例，統(tǒng)計(jì)對(duì)比2組aEEG評(píng)分、miR-422a與新生兒20項(xiàng)行為神經(jīng)評(píng)分法（neonatal behavioral neuroiogical assessment，NBNA）評(píng)分的差異；以Pearson相關(guān)性分析法分析aEEG評(píng)分、miR-422a與NBNA評(píng)分間的相關(guān)性；另繪制受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC），分析aEEG評(píng)分、miR-422a二者單獨(dú)或聯(lián)合檢測(cè)診斷晚期早產(chǎn)兒腦損傷的效能。結(jié)果 腦損傷組的aEEG評(píng)分為（7.04±1.21）分、miR-422a為（1.69±0.45）分、NBNA評(píng)分為（30.22±2.09）分，低于對(duì)照組的（9.16±1.56）分、（3.41±0.63）分、（35.69±1.89）分，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；Pearson相關(guān)性分析顯示，aEEG評(píng)分、miR-422a與NBNA評(píng)分呈正相關(guān)（P<0.05）；ROC結(jié)果顯示，aEEG評(píng)分、miR-422a聯(lián)合檢測(cè)的曲線下面積（area under curve，AUC）為0.927（95%CI為0.878～0.976），高于二者單獨(dú)檢測(cè)的0.864（95%CI為0.792～0.936）、0.871（95%CI為0.801～0.940）。結(jié)論 aEEG評(píng)分、miR-422a聯(lián)合可有效診斷出晚期早產(chǎn)兒腦損傷，臨床應(yīng)用價(jià)值較高，可推廣。

【關(guān)鍵詞】 晚期早產(chǎn)兒；腦損傷；振幅整合腦電圖評(píng)分；微小RNA-422a；診斷效能

中圖分類號(hào)：R444；R446.1? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1672-1721（2023）34-0101-03

DOI：10.19435/j.1672-1721.2023.34.033

晚期早產(chǎn)兒是指胎齡在34～36+6周出生的新生兒，雖然其體型、身高等各方面均與足月兒較為相似，但實(shí)際上其生長(zhǎng)發(fā)育與足月兒間仍存在較大差異[1-2]。與足月兒相比，晚期早產(chǎn)兒的腦損傷發(fā)生率較高，如果未對(duì)患兒施以及時(shí)的診斷與治療，將會(huì)導(dǎo)致認(rèn)知、運(yùn)動(dòng)障礙等與神經(jīng)系統(tǒng)有關(guān)并發(fā)癥的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)增大，病情嚴(yán)重者甚至還會(huì)危及生命[3-4]。磁共振成像為現(xiàn)階段臨床診斷新生兒腦損傷的重要影像學(xué)措施，通過(guò)對(duì)患兒頂枕葉等皮質(zhì)損傷情況來(lái)診斷腦損傷情況。但該檢查對(duì)于設(shè)備的要求較高且新生兒配合度差，導(dǎo)致其臨床應(yīng)用較為受限。aEEG是運(yùn)用腦電波振幅分析腦功能的手段，現(xiàn)如今已在新生兒重癥監(jiān)護(hù)室內(nèi)大范圍使用。然而因少數(shù)晚期早產(chǎn)兒需采用呼吸機(jī)等輔助設(shè)備行生命支持，此類儀器會(huì)在一定程度上影響aEEG的檢測(cè)結(jié)果，繼而出現(xiàn)誤診、漏診現(xiàn)象，故有必要聯(lián)合其他診斷措施以提高檢查準(zhǔn)確度。微小RNA（miR）-422a為腦源性微小核糖核酸，在腦組織缺血與缺氧的狀態(tài)下可有效抑制腦組織損傷[5]。本研究回顧性分析100例晚期早產(chǎn)兒的臨床資料，探討aEEG評(píng)分、miR-422a診斷晚期早產(chǎn)兒腦損傷的效能，以期為臨床診斷提供可靠的依據(jù)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2020年1月—2021年7月贛州市人民醫(yī)院南院收治的100例晚期早產(chǎn)兒的臨床資料，按照腦損傷情況將所有患兒分為腦損傷組45例與無(wú)腦損傷組55例，無(wú)腦損傷組中男性34例，女性21例；孕周34～36+6周，平均孕周（35.33±0.16）周；分娩方式，31例順產(chǎn)，24例剖宮產(chǎn)。腦損傷組中男性26例，女性19例；孕周34～36+6周，平均孕周（35.28±0.21）周；分娩方式，28例順產(chǎn)，17例剖宮產(chǎn)。2組基線資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：患兒臨床資料完整；孕周在34～36+6周出生的活產(chǎn)新生兒；均為單胎。

排除標(biāo)準(zhǔn)：遺傳代謝性疾病者；存有神經(jīng)系統(tǒng)先天性畸形者；存有低血糖腦損傷、膽紅素腦損傷者。

1.2 方法 aEEG檢測(cè)。以Neurofax EEG-1200腦電圖儀進(jìn)行檢查，檢測(cè)前清洗患兒電極放置部位，按國(guó)際10～20標(biāo)準(zhǔn)導(dǎo)聯(lián)法于患兒雙側(cè)額葉（Fp1—Fp2）、中央（C3—C4）與顳葉（T3—T4）分別放置記錄電極；在電極內(nèi)注入導(dǎo)電膏，電極與頭皮間電阻控制于20 kΩ，靈敏度為70 μV/cm，濾波頻率0.5～35 Hz；收集腦電信號(hào)后以半對(duì)數(shù)的方式存儲(chǔ)，并記錄常規(guī)腦電波（electroencephalogram，EEG）；全部患兒均于出生后的12 h內(nèi)統(tǒng)計(jì)，每次持續(xù)時(shí)間均需>6 h。參照Burdjalov提出的aEEG評(píng)分系統(tǒng)[6]分別從連續(xù)性（0～2分）、下邊界振幅（0～2分）、睡眠-覺(jué)醒周期（0～5分）、帶寬（0～4分）方面評(píng)估，總分共13分，分?jǐn)?shù)越高腦發(fā)育越成熟，功能越好。miR-422a，于患兒出生后24 h內(nèi)采集其2 mL靜脈血，以Trizol法提取其總核糖核酸（ribonucleic acid，RNA），獲取RNA后以反轉(zhuǎn)錄試劑盒將總RNA合成cDNA。之后制備反應(yīng)體系，在37 ℃環(huán)境下行實(shí)時(shí)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)15 min，在85 ℃條件下保持15 s后終止；以逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA作為模板行qPCR反應(yīng)，以磷酸甘油脫氫酶（GAPDH）的表達(dá)量作為內(nèi)參，采用2-ΔΔCt法計(jì)算miR-422a表達(dá)量。新生兒20項(xiàng)行為神經(jīng)評(píng)分法（NBNA）[7]評(píng)分系統(tǒng)包括被動(dòng)肌張力（4個(gè)條目）、新生兒行為能力（6個(gè)條目）、主動(dòng)肌張力（4個(gè)條目）、原始反射（3個(gè)條目）、一般評(píng)估（3個(gè)條目），各項(xiàng)為0～2分，總分0～40分，分?jǐn)?shù)越高神經(jīng)功能越好。

腦損傷判斷標(biāo)準(zhǔn)：（1）原始反射出現(xiàn)活躍、減弱或消失等變化；（2）呼吸困難；（3）出生后48 h內(nèi)出現(xiàn)肌張力下降或上升，或存在癇性發(fā)作；（4）出現(xiàn)興奮、嗜睡或昏迷等意識(shí)改變；（5）結(jié)合CT、磁共振成像等檢查對(duì)患兒顱內(nèi)出血、腦白質(zhì)損傷等情況行診斷，依據(jù)判斷結(jié)果將患兒分為腦損傷組與無(wú)腦損傷組。

1.3 觀察指標(biāo) （1）2組aEEG評(píng)分、miR-422a、NBNA評(píng)分的差異。統(tǒng)計(jì)對(duì)比2組的aEEG評(píng)分、miR-422a、NBNA評(píng)分。（2）aEEG評(píng)分、miR-422a與NBNA評(píng)分的相關(guān)性。（3）aEEG評(píng)分、miR-422a檢測(cè)晚期早產(chǎn)兒腦損傷的效能。繪制ROC曲線，分析aEEG評(píng)分、miR-422a 二者單獨(dú)或聯(lián)合檢測(cè)診斷晚期早產(chǎn)兒腦損傷的效果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料以百分比表達(dá)，行χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以x±s表示，行t檢驗(yàn)；相關(guān)性檢驗(yàn)采用Pearson分析；以ROC曲線下面積（AUC）評(píng)價(jià)診斷效能，AUC≤0.5提示無(wú)診斷價(jià)值；0.50.9則提示診斷價(jià)值較高；P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組aEEG評(píng)分、miR-422a、NBNA評(píng)分對(duì)比 腦損傷組的aEEG評(píng)分、miR-422a、NBNA評(píng)分均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表1。

2.2 aEEG評(píng)分、miR-422a與NBNA評(píng)分的相關(guān)性 Pearson相關(guān)性顯示，aEEG評(píng)分、miR-422a與NBNA評(píng)分呈正相關(guān)（P<0.05），見(jiàn)表2。

2.3 aEEG評(píng)分、miR-422a檢測(cè)晚期早產(chǎn)兒腦損傷的效能 ROC結(jié)果顯示，aEEG評(píng)分、miR-422a聯(lián)合檢測(cè)的AUC高于二者單獨(dú)檢測(cè)，見(jiàn)表3、圖1。

3 討論

近些年因妊娠期糖尿病等而引發(fā)妊娠并發(fā)癥的患病人數(shù)增加，早產(chǎn)兒特別是晚期早產(chǎn)兒的出生率持續(xù)上漲[8]。晚期早產(chǎn)兒腦組織對(duì)缺氧、感染等耐受力較足月兒顯著降低，故極易出現(xiàn)腦損傷。腦損傷指的是產(chǎn)前、產(chǎn)時(shí)、出生后的不同病理因素造成早產(chǎn)兒不同程度的腦缺血或缺血性損傷，可出現(xiàn)對(duì)應(yīng)的癥狀與體征，對(duì)于病情嚴(yán)重者還將構(gòu)成程度不一的神經(jīng)系統(tǒng)損害[9-10]。因而如何早期診斷、及時(shí)治療晚期早產(chǎn)兒腦損傷，降低其神經(jīng)系統(tǒng)不良預(yù)后發(fā)生率，一直是臨床的研究重點(diǎn)。

現(xiàn)如今，臨床對(duì)于晚期早產(chǎn)兒腦損傷多是按照患兒臨床表現(xiàn)與影像學(xué)檢查進(jìn)行診斷，但部分患兒缺乏典型臨床表現(xiàn)，且患兒的配合度較低，故易出現(xiàn)漏診、誤診等現(xiàn)象。aEEG屬于腦電監(jiān)測(cè)技術(shù)，具有無(wú)創(chuàng)、操作便利、圖形直觀、可床邊監(jiān)測(cè)、連續(xù)性監(jiān)測(cè)等優(yōu)勢(shì)，且可反映腦電背景活動(dòng)的變化，故在監(jiān)測(cè)晚期早產(chǎn)兒腦損傷方面意義重大[11-12]。雖然aEEG較常規(guī)的腦電圖信號(hào)干擾極大程度的降低，但對(duì)于少數(shù)患兒而言，在行腦電圖采集時(shí)需要使用呼吸機(jī)等輔助治療設(shè)備，而此類設(shè)備在一定程度上會(huì)干擾腦電波，進(jìn)而產(chǎn)生較實(shí)際振幅更大的aEEG圖像，最終導(dǎo)致誤判。NBNA評(píng)分能夠有效反映新生兒體格發(fā)育與視聽(tīng)感等神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育情況，但易受到評(píng)估者臨床經(jīng)驗(yàn)的影響，具有一定的主觀性。而miR-422a屬于腦源性微小核糖核酸，如果腦組織處于缺血、缺氧狀況，該因子將會(huì)抑制腦組織的損傷。本研究結(jié)果顯示，腦損傷組的aEEG評(píng)分、miR-422a、NBNA評(píng)分低于對(duì)照組，且Pearson相關(guān)性顯示，aEEG評(píng)分、miR-422a與NBNA評(píng)分呈正相關(guān)，表明對(duì)于出現(xiàn)腦損傷的晚期早產(chǎn)兒患兒，其aEEG評(píng)分、miR-422a與NBNA評(píng)分均較低。本研究ROC結(jié)果顯示，aEEG評(píng)分、miR-422a聯(lián)合檢測(cè)的AUC為0.927（95%CI為0.878～0.976），高于二者單獨(dú)檢測(cè)的0.864（95%CI為0.792～0.936）、0.871（95%CI為0.801～0.940）。由此提示，aEEG評(píng)分、miR-422a二者聯(lián)合可有效提升診斷準(zhǔn)確度。這可能與血清miR-422a檢查受呼吸機(jī)等輔助治療設(shè)備的影響較小，有利于減小因輔助治療對(duì)診斷結(jié)果所造成的干擾有關(guān)，從而提升檢查準(zhǔn)確度[13]。

綜上所述，aEEG評(píng)分、miR-422a二者聯(lián)合可提高晚期早產(chǎn)兒腦損傷的檢出準(zhǔn)確度，具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值，可大力推行。

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（收稿日期：2023-10-8）