金龜子綠僵菌CQMa421與4種新煙堿類(lèi)農(nóng)藥混配對(duì)西花薊馬毒力的增效作用

孫秀文 王桂萍 劉曉 李霞 王光召 張偉麗 王希波 李麗莉 門(mén)興元 郭文秀 楊向黎 遲寶杰 于毅

摘要采用葉管藥膜法測(cè)定了金龜子綠僵菌CQMa421與新煙堿類(lèi)農(nóng)藥噻蟲(chóng)嗪、噻蟲(chóng)胺、吡蟲(chóng)啉、啶蟲(chóng)脒按照有效成分比（1∶9、3∶7、5∶5、7∶3、9∶1）混配對(duì)西花薊馬的室內(nèi)毒力。結(jié)果表明，4種新煙堿類(lèi)殺蟲(chóng)劑的24和48 h毒力為噻蟲(chóng)胺＞噻蟲(chóng)嗪＞啶蟲(chóng)脒＞吡蟲(chóng)啉，均高于金龜子綠僵菌CQMa421。綠僵菌與噻蟲(chóng)嗪和吡蟲(chóng)啉分別以1∶9、3∶7、5∶5、7∶3、9∶1的比例混配均具有顯著的增效作用，綠僵菌與噻蟲(chóng)胺和啶蟲(chóng)脒以9∶1、7∶3的比例混配亦具有良好的增效作用。綠僵菌與新煙堿類(lèi)農(nóng)藥混配有助于提高對(duì)西花薊馬的室內(nèi)毒力，為治理西花薊馬對(duì)新煙堿類(lèi)殺蟲(chóng)劑抗性提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞西花薊馬;金龜子綠僵菌CQMa421;新煙堿類(lèi)農(nóng)藥;增效作用;農(nóng)藥抗性

中圖分類(lèi)號(hào)S 763.37文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A

文章編號(hào)0517-6611（2023）24-0122-05

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2023.24.026

Synergistic Effect of Metarhizium anisopliae CQMa421 Mixed with Four Neonicotinoid? Pesticides on Virulence of Frankliniella occidentalis

SUN Xiuwen1，2，WANG Guiping1，LIU Xiao1，2 et al

（1.Institute of Plant Protection，Shandong Academy of Agricultural Sciences，Jinan，Shandong 250100;2.School of Agricultural Science and Technology，Shandong Academy of Agricultural Engineering，Jinan，Shandong 251100）

AbstractIn this study，leaf tube film method was used to determine the indoor virulence of Metartaria anisopliae CQMa421 mixed with neonicotinoid pesticides （thiamethoxam，thiamethoxidin，imidacloprid，and amidine） in different active component ratios （1∶9，3∶7，5∶5，7∶3，9∶1）.The results showed that the virulence of four neonicotinoid pesticides at 24 h and 48 h was in the order of thiamethoxam > thiamethoxam > acetamidine > imidacloprid，which was higher than that of Metarium anisopliae CQMa421，but the mixture of Metarium anisopliae with thiamethoxam and imidacloprid （1∶9，3∶7，5∶5，7∶3，9∶1） had significant synergistic effect.Metarhizium anisopliae mixed with clothianidin and acetamidine （9∶1，7∶3） also had a good synergistic effect.It can be seen that the mixture of Metartaria anisopliae and neonicotinoid pesticides can alleviate the pesticide resistance，which provides a reliable scientific basis and a new way for the resistance management of neonicotinoid pesticides in Frankliniella occidentalis.

Key wordsFrankliniella occidentalis;Metarium anisopliae CQMa421;Neonicotinoid pesticides;Synergistic effect;Pesticide resistance

西花薊馬（Frankliniella occidentalis）屬纓翅目（Thysanoptera）鋸尾亞目（Terebrantia）薊馬科（Thripidae），為多食性世界性檢疫害蟲(chóng)［1］。早期研究發(fā)現(xiàn)，西花薊馬寄主植物廣泛，幾乎所有的觀賞花卉及蔬菜均有可能成為其寄主［2］。該蟲(chóng)除以銼吸式口器危害葉子、花朵和果實(shí)，導(dǎo)致葉片產(chǎn)生黑點(diǎn)、葉片皺縮和葉片發(fā)育受損，影響水果品質(zhì)，降低經(jīng)濟(jì)價(jià)值外，還可傳播番茄斑萎病毒（tomato spotted wilt virus，TSWV）［3-5］和鳳仙花壞死斑病毒（impatiens necroyic spot virus，INSV）［6］等多種病毒病，已給我國(guó)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成了嚴(yán)重?fù)p失［7］?；瘜W(xué)藥劑是目前防治西花薊馬使用最多的方法，研究發(fā)現(xiàn)頻繁使用噻蟲(chóng)嗪、噻蟲(chóng)胺、吡蟲(chóng)啉、啶蟲(chóng)脒易誘導(dǎo)西花薊馬產(chǎn)生高水平抗性［8］。西花薊馬對(duì)新煙堿類(lèi)殺蟲(chóng)劑的抗藥性水平發(fā)展迅速，抗性治理措施難以發(fā)揮作用［9］。

金龜子綠僵菌（Metarhizium anisopliae）屬于半知菌亞門(mén)綠僵菌屬真菌，其中CQMa421菌株具有殺蟲(chóng)廣譜的特性，但作用效果緩慢。張英財(cái)?shù)龋?0］研究發(fā)現(xiàn)綠僵菌與啶蟲(chóng)脒、吡蟲(chóng)啉、溴氰菊酯等藥劑具有較好的相容性。裴松松等［11］研究發(fā)現(xiàn)金龜子綠僵菌對(duì)西花薊馬的防治效果顯著。張秀霞等［12］研究表明，金龜子綠僵菌CQMa421與其他化學(xué)農(nóng)藥混合使用對(duì)瓜蚜具有較好的持效性。彭國(guó)雄等［13］研究結(jié)果為活體微生物農(nóng)藥與其他殺蟲(chóng)劑、殺菌劑的聯(lián)合使用提供了依據(jù)。為減緩西花薊馬對(duì)新煙堿類(lèi)殺蟲(chóng)劑的抗性發(fā)展速度，筆者采用葉管藥膜法測(cè)定噻蟲(chóng)嗪［14］、噻蟲(chóng)胺［15］、吡蟲(chóng)啉［16］、啶蟲(chóng)脒［17］與金龜子綠僵菌CQMa421菌株混配對(duì)西花薊馬的室內(nèi)毒力，以期篩選“綠僵菌+化學(xué)藥劑”的最佳增效組合，實(shí)現(xiàn)對(duì)西花薊馬的綠色高效防控。

1材料與方法

1.1供試蟲(chóng)源西花薊馬由山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所溫室提供，于室內(nèi)溫度25 ℃條件下，在圓形糖果瓶中用新鮮的蕓豆飼養(yǎng)，培養(yǎng)10～12代建立室內(nèi)試驗(yàn)種群，選取發(fā)育階段一致的西花薊馬成蟲(chóng)進(jìn)行試驗(yàn)。

1.2供試殺蟲(chóng)劑

100%金龜子綠僵菌CQMa421可分散油懸浮劑（重慶聚立信生物工程有限公司提供），25%噻蟲(chóng)嗪水分散粒劑（瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司提供），20%啶蟲(chóng)脒可溶性粉劑（深圳諾普信農(nóng)化股份有限公司提供），20%噻蟲(chóng)胺懸浮劑（江蘇輝豐生物農(nóng)業(yè)股份有限公司提供），70%吡蟲(chóng)啉水分散粒劑（拜耳作物科學(xué)（中國(guó)）有限公司提供）。

1.3試驗(yàn)方法

1.3.1殺蟲(chóng)劑對(duì)西花薊馬的室內(nèi)毒力測(cè)定。

將離心管蓋口和底部進(jìn)行打孔，底部用封口膜進(jìn)行纏繞，離心管口加一層濾紙，以避免離心管內(nèi)部缺氧。以清水將噻蟲(chóng)嗪、噻蟲(chóng)胺、吡蟲(chóng)啉、啶蟲(chóng)脒稀釋7～9個(gè)濃度后，浸泡離心管4 h，取出晾干，放入甘藍(lán)葉片供西花薊馬取食。采用干冰降低養(yǎng)蟲(chóng)瓶?jī)?nèi)溫度，使供試西花薊馬行動(dòng)遲緩，之后吸入離心管中。將處理后的試蟲(chóng)置于25 ℃、相對(duì)濕度70%、光周期L∶D=16∶8的養(yǎng)蟲(chóng)室內(nèi)。分別于24、48 h后檢查西花薊馬死亡數(shù)量，以毛筆尖輕觸蟲(chóng)體不能爬動(dòng)者視為死亡。以清水作為空白對(duì)照，每個(gè)濃度重復(fù)5次。

1.3.2綠僵菌與化學(xué)藥劑混配對(duì)西花薊馬的室內(nèi)毒力測(cè)定。

利用所得金龜子綠僵菌CQMa421和其他藥劑的LC50，將綠僵菌分別與上述4種藥劑按照有效成分比1∶9、3∶7、5∶5、7∶3、9∶1不同的5個(gè)配比進(jìn)行混配，測(cè)定混配組合對(duì)西花薊馬的農(nóng)藥抗性效果，測(cè)得混劑LC50值。

1.4數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel、SPSS 25.0軟件進(jìn)行計(jì)算和數(shù)據(jù)分析，得出毒力回歸方程、LC50值、置信區(qū)間。利用軟件得出單劑的LC50以及混劑LC50，再根據(jù)共毒系數(shù)公式計(jì)算出混劑的共毒系數(shù)（CTC）。若共毒系數(shù)＞120為增效作用；共毒系數(shù)在80～120為相加作用；共毒系數(shù)＜80為拮抗作用。對(duì)比不同混配組合的效果，選出具有協(xié)同增效作用的配比組合。

2結(jié)果與分析

2.1新煙堿類(lèi)殺蟲(chóng)劑對(duì)西花薊馬的室內(nèi)毒力

24 h時(shí)，噻蟲(chóng)嗪、噻蟲(chóng)胺、啶蟲(chóng)脒和吡蟲(chóng)啉對(duì)敏感種群西花薊馬的LC50分別是31.187、52.480、103.028和47.506 mg/L，金龜子綠僵菌CQMa421對(duì)敏感種群西花薊馬的LC50為291.497 mg/L。噻蟲(chóng)嗪對(duì)敏感種群西花薊馬的毒性最高，啶蟲(chóng)脒毒力最低（表1）。

48 h內(nèi)，噻蟲(chóng)胺、啶蟲(chóng)脒對(duì)敏感種群西花薊馬的LC50變化較大，噻蟲(chóng)胺LC50從52.480 mg/L變化到18.801 mg/L，啶蟲(chóng)脒LC50從103.028 mg/L變化到82.530 mg/L。48 h后，新煙堿類(lèi)殺蟲(chóng)劑對(duì)敏感種群西花薊馬的室內(nèi)毒力大小排列為噻蟲(chóng)胺＞噻蟲(chóng)嗪＞吡蟲(chóng)啉＞啶蟲(chóng)脒＞金龜子綠僵菌CQMa421（表2）。

2.2綠僵菌與化學(xué)藥劑混配對(duì)西花薊馬的24 h室內(nèi)毒力

金龜子綠僵菌CQMa421+吡蟲(chóng)啉混配，按照有效成分比（1∶9、3∶7、5∶5、7∶3、9∶1）對(duì)西花薊馬毒力測(cè)定，結(jié)果表明，24 h后金龜子綠僵菌CQMa421+吡蟲(chóng)啉按照有效成分（1∶9、3∶7、5∶5、7∶3、9∶1）5種配比的混劑LC50值為86.491、100.697、78.076、80.391、138.913 mg/L，共毒系數(shù)分別為156.935、152.958、227.996、262.274、186.111，配比組合共毒系數(shù)均大于120，均具有協(xié)同增效作用。5種混配組合中，配比組合7∶3表現(xiàn)出相對(duì)較好的增效結(jié)果，共毒系數(shù)為262.274，LC50值是80.391 mg/L（表3）。

24 h后金龜子綠僵菌CQMa421+噻蟲(chóng)嗪按照有效成分（1∶9、3∶7、5∶5、7∶3、9∶1）5種配比LC50分別是39.352、34.522、35.067、51.204、71.656 mg/L，共毒系數(shù)分別為248.601、332.469、395.874、342.967、333.454，5種組合共毒系數(shù)均大于120，5種配比組合都對(duì)防治西花薊馬具有增效作用。其中有效成分比為5∶5時(shí)，LC50值是35.067 mg/L，共毒系數(shù)為395.874，增效效果最好（表4）。

金龜子綠僵菌CQMa421+啶蟲(chóng)脒兩者混配，兩者有效成分比為1∶9時(shí)，共毒系數(shù)為51.275，LC50值為214.823 mg/L，表明2種殺蟲(chóng)劑混配對(duì)西花薊馬產(chǎn)生拮抗作用；按有效成分3∶7、5∶5、9∶1時(shí)LC50值為115.073、149.022、222.062 mg/L，共毒系數(shù)分別為111.078、102.163、110.969，3種比例混配組合產(chǎn)生相加作用；有效成分比為7∶3時(shí)，LC50值為136.798 mg/L，共毒系數(shù)為137.582，具有增效作用（表5）。

金龜子綠僵菌CQMa421+噻蟲(chóng)胺混配，有效成分比為1∶9、9∶1時(shí)，共毒系數(shù)為126.20、136.59，具有增效作用；有效成分比為7∶3時(shí)，共毒系數(shù)為74.33，小于80，表明對(duì)西花薊馬的防治產(chǎn)生拮抗作用；有效成分比為5∶5、3∶7時(shí)，共毒系數(shù)分別為88.73、90.91，共毒系數(shù)在80～120，屬于相加作用（表6）。

2.3綠僵菌與化學(xué)殺蟲(chóng)劑混配對(duì)西花薊馬的48 h室內(nèi)毒力

48 h后金龜子綠僵菌CQMa421+吡蟲(chóng)啉、金龜子綠僵菌CQMa421+噻蟲(chóng)嗪對(duì)西花薊馬共毒系數(shù)分別為177.928～399.027、271.517～478.295，均表現(xiàn)出良好的增效作用，與吡蟲(chóng)啉混配后混劑的LC50值分別為42.007、41.917、41.950、34.962、92.388 mg/L；與噻蟲(chóng)嗪混配后LC50值分別為19.554、14.818、24.846、30.364、54.442 mg/L；金龜子綠僵菌CQMa421+啶蟲(chóng)脒的效果與24 h表現(xiàn)的效果一致，混劑LC50分別為124.373、91.720、121.135、106.306、159.190 mg/L，共毒系數(shù)為70.171～125.201，隨時(shí)間的變化復(fù)配組合共毒系數(shù)的大小也發(fā)生改變。金龜子綠僵菌CQMa421+噻蟲(chóng)胺混配后混劑的LC50分別是31.572、36.145、82.766、93.435、84.165 mg/L；有效成比1∶9、3∶7、5∶5、7∶3的共毒系數(shù)均在80以下，表明2種殺蟲(chóng)劑混配對(duì)西花薊馬的防治為拮抗作用（表7）。

3結(jié)論與討論

該研究選擇噻蟲(chóng)嗪、噻蟲(chóng)胺、啶蟲(chóng)脒、吡蟲(chóng)啉4種殺蟲(chóng)劑進(jìn)行室內(nèi)毒力試驗(yàn)，結(jié)果表明，噻蟲(chóng)嗪對(duì)于西花薊馬的作用效果最好，LC50在24.004～31.187，其次為噻蟲(chóng)胺，其他殺蟲(chóng)劑對(duì)于西花薊馬也有明顯的作用，且48 h各殺蟲(chóng)劑對(duì)西花薊馬的防治效果比24 h均有所提高。張志鵬等［18］研究表明，在濟(jì)南、壽光、泰安、聊城采集的4個(gè)西花薊馬種群對(duì)噻蟲(chóng)嗪和吡蟲(chóng)啉均產(chǎn)生了不同程度的抗藥性。這與單劑毒力試驗(yàn)結(jié)果一致。

綠僵菌與4種新煙堿類(lèi)農(nóng)藥混配試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，綠僵菌CQMa421與吡蟲(chóng)啉、噻蟲(chóng)嗪、噻蟲(chóng)胺和啶蟲(chóng)脒混配均表現(xiàn)良好的增效作用。由于長(zhǎng)時(shí)間大面積單一使用化學(xué)藥劑防治西花薊馬，目前已經(jīng)在很多地方產(chǎn)生了抗性種群。王圣印等［19］研究表明西花薊馬對(duì)于常用藥劑都產(chǎn)生不同程度的抗性，其中多殺菌素已產(chǎn)生高水平抗性，吡蟲(chóng)啉、啶蟲(chóng)脒為中等水平抗性。綠僵菌與4種新煙堿類(lèi)農(nóng)藥混配，使用化學(xué)藥劑濃度較低，效果顯著，可能是綠僵菌萌發(fā)的孢子穿透昆蟲(chóng)體壁形成通道，使得藥劑更容易借助通道直接進(jìn)入昆蟲(chóng)體內(nèi)，同時(shí)侵入體內(nèi)的綠僵菌菌絲利用昆蟲(chóng)體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)進(jìn)行擴(kuò)繁，最終兩者共同作用，快速殺死昆蟲(chóng)，從而有效降低了西花薊馬的抗藥性。

樊宗芳等［20］研究發(fā)現(xiàn)，乙基多殺菌素對(duì)西花薊馬的效果最好，其次為吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪。該研究將綠僵菌與4種化學(xué)農(nóng)藥混配，效果均比單劑使用顯著，有效降低西花薊馬的抗藥性，減少化學(xué)農(nóng)藥的使用，改善植物生長(zhǎng)環(huán)境。綠僵菌與噻蟲(chóng)嗪、吡蟲(chóng)啉混配均表現(xiàn)出良好的增效作用；綠僵菌與噻蟲(chóng)胺、啶蟲(chóng)脒混配效果雖不如噻蟲(chóng)嗪、吡蟲(chóng)啉效果顯著，但仍比其單劑使用效果顯著。張治科等［21］研究表明吡蟲(chóng)啉對(duì)西花薊馬的敏感性LC50為46.396 4 mg/L，與該試驗(yàn)吡蟲(chóng)啉LC50數(shù)值基本一致。

目前西花薊馬的抗藥性日漸增強(qiáng)，有關(guān)西花薊馬的防治雖然有一些新的突破，但大部分是采用新型單一藥劑進(jìn)行防治，未能有效運(yùn)用2種藥劑混配的方法協(xié)同降低西花薊馬對(duì)農(nóng)藥的抗性。綠僵菌與噻蟲(chóng)嗪、吡蟲(chóng)啉、啶蟲(chóng)脒、噻蟲(chóng)胺混配使用，對(duì)于西花薊馬的防治效果優(yōu)于單一藥劑的使用，推薦綠僵菌與噻蟲(chóng)嗪、吡蟲(chóng)啉混配使用在生產(chǎn)中防治西花薊馬，有助于治理西花薊馬抗藥性。研究結(jié)果為使用微生物和新煙堿類(lèi)殺蟲(chóng)劑延緩西花薊馬抗藥性發(fā)展治理西花薊馬抗藥性提供了新思路。

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