白細(xì)胞介素-33在兒童細(xì)菌性、真菌性和病毒性腸炎診斷中的應(yīng)用價(jià)值

黃海 王洪麗 李慧雯 陳煥 陳佩瑜

廣州市婦女兒童醫(yī)療中心消化科，廣州 510060

兒童腸炎是指腸道炎癥，可由多種因素引起，包括病毒、細(xì)菌和真菌感染［1］。兒童腸炎的管理與成人推薦的管理不同，通?；谀c炎的具體病因。例如腸炎由病毒感染引起，治療包括補(bǔ)液和補(bǔ)充電解質(zhì)等；腸炎由細(xì)菌感染引起，可采用抗生素治療［2］。當(dāng)前，兒童腸炎的診斷和治療標(biāo)志物尚不完全清楚。白細(xì)胞介素-33（interleukin-33，IL-33）是IL-1 家族的一員，在組織穩(wěn)態(tài)、過(guò)敏和非過(guò)敏炎癥、病毒感染和癌癥中發(fā)揮重要作用［3］。研究表明，IL-33 可通過(guò)誘導(dǎo)Th2 細(xì)胞和固有淋巴細(xì)胞等免疫細(xì)胞產(chǎn)生促炎性細(xì)胞因子進(jìn)而促進(jìn)慢性炎癥的發(fā)生［4］。此外，IL-33還參與上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的活化，從而導(dǎo)致與這些疾病相關(guān)的組織損傷和炎癥［5］。已知IL-33在哮喘、炎癥性腸病和特應(yīng)性皮炎的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮關(guān)鍵作用［4，6］。然而，IL-33 在兒童腸炎中的診斷價(jià)值并不清楚。在本研究中，我們首先檢測(cè)細(xì)菌性、真菌性和病毒性腸炎患兒和健康對(duì)照兒童血清中的IL-33 水平，進(jìn)而評(píng)估IL-33 對(duì)兒童腸炎的診斷價(jià)值。

資料與方法

1.一般資料

選取廣州市婦女兒童醫(yī)療中心消化科2022 年6 月至2023年6月收治的187例細(xì)菌性腸炎、真菌性腸炎及病毒性腸炎患兒進(jìn)行回顧性分析，其中細(xì)菌性腸炎患兒72 例［男38例，女34例，年齡（9.6±3.2）歲］、真菌性腸炎患兒48例［男26 例，女22 例，年齡（10.7±3.8）歲］及病毒性腸炎患兒67 例［男33 例，女34 例，年齡（10.3±3.6）歲］，所有患兒均出現(xiàn)發(fā)熱、腹瀉、嘔吐、腹痛或脫水等臨床癥狀。另選取60例健康志愿者作為對(duì)照，其中男30例，女30例，年齡（10.9±4.2）歲。4組兒童的一般資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。

所有患兒和家屬均知情并簽署了同意書。本研究通過(guò)廣州市婦女兒童醫(yī)療中心倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)（穗婦兒科倫批字［2023］第388A07號(hào)）。

2.標(biāo)本采集

所有參與者均隔夜禁食12 h，早晨安靜狀態(tài)下取3 ml空腹靜脈血，血樣本采用枸櫞酸鈉抗凝，室溫靜置2 h后，5 000 r/min 離心10 min（離心半徑140 mm）。分離血清并保存于-80 ℃冰箱。

3. 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）

采用ELISA測(cè)定血清IL-33水平，試劑盒由Abcam公司提供，實(shí)驗(yàn)按照ELISA試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

4.統(tǒng)計(jì)分析

本研究數(shù)據(jù)用SPSS 23.0 軟件進(jìn)行分析，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，采用受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC）分析IL-33 對(duì)細(xì)菌性腸炎、真菌性腸炎和病毒性腸炎的診斷價(jià)值，P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

1.4組血清IL-33水平比較（圖1）

健康志愿者組IL-33 水平為（72.03±32.25）ng/L，細(xì)菌性腸炎組為（129.01±50.79）ng/L，真菌性腸炎組為（100.47±45.65）ng/L，病毒性腸炎組為（100.16±48.58）ng/L，細(xì)菌性腸炎組、真菌性腸炎組、病毒性腸炎組IL-33 水平均高于健康志愿者組（t=7.516、3.788、3.797，均P＜0.001）；真菌性腸炎組和病毒性腸炎組IL-33 水平均低于細(xì)菌性腸炎組（t=3.138、3.417，P=0.002、0.001）；真菌性腸炎組與病毒性腸炎組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.034，P=0.973）。

2.IL-33診斷兒童細(xì)菌性腸炎的ROC分析（圖2）

以健康志愿者為陰性對(duì)照，通過(guò)ROC 分析計(jì)算IL-33的靈敏度、特異度和曲線下面積（area under the curve，AUC）。結(jié)果顯示，IL-33 對(duì)兒童細(xì)菌性腸炎的診斷價(jià)值較大，AUC 為0.826 9，95% 可信區(qū)間（95%CI）為0.758 4～0.895 3，靈敏度為68.06%，特異度為83.33%。

3.IL-33診斷兒童真菌性腸炎的ROC分析（圖3）

以健康志愿者為陰性對(duì)照，IL-33診斷兒童真菌性腸炎的AUC 為0.669 8，95%CI為0.564 7～0.774 9，靈敏度為39.58%，特異度為93.33%。

4.IL-33診斷兒童病毒性腸炎的ROC分析（圖4）

圖4 白細(xì)胞介素（IL）-33診斷兒童病毒性腸炎的受試者工作特征曲線（127例）

以健康志愿者為陰性對(duì)照，IL-33預(yù)測(cè)兒童病毒性腸炎預(yù)后情況的AUC 為0.669 9，95%CI為0.577 1～0.762 7，靈敏度為34.33%，特異度為93.33%。

討論

腸炎是指腸道發(fā)炎，可引起腹瀉、嘔吐、腹痛和其他消化道不適癥狀［7］。由于嘔吐物和糞便中的體液流失，嚴(yán)重的腸胃炎會(huì)導(dǎo)致脫水和血液中化學(xué)物質(zhì)的失衡。全世界每年約有30～50億次發(fā)病，最常見(jiàn)于5歲以下兒童［8］。

IL-33是一種主要由上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子。IL-33 在免疫應(yīng)答和炎癥調(diào)節(jié)中起著至關(guān)重要的作用，并參與多種過(guò)敏性疾病和自身免疫性疾病的發(fā)病機(jī)制［9］。IL-33 與其受體（由ST2L 和IL1RL1 亞基組成）結(jié)合，并觸發(fā)信號(hào)級(jí)聯(lián)，導(dǎo)致各種免疫細(xì)胞的激活［3］。IL-33還在樹突狀細(xì)胞的募集和激活中發(fā)揮作用，而樹突狀細(xì)胞對(duì)免疫應(yīng)答的啟動(dòng)至關(guān)重要［3］。IL-33 除了具有免疫功能外，還參與多種炎癥疾病的發(fā)病機(jī)制，包括哮喘、特應(yīng)性皮炎和慢性阻塞性肺疾?。?0-11］。最新的研究表明，IL-33可維持腸道穩(wěn)態(tài)［12］，通過(guò)增強(qiáng)腸道通透性加重感染性結(jié)腸炎［13］，還可調(diào)節(jié)腸道微生物群［14］。然而，IL-33 在兒童腸炎中的表達(dá)及預(yù)后價(jià)值并不清楚。

本研究得出細(xì)菌性腸炎、真菌性腸炎和病毒性腸炎患兒IL-33 水平均高于健康志愿者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.001）；細(xì)菌性腸炎患兒IL-33水平均高于真菌性腸炎和病毒性腸炎患兒，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。因此，IL-33在細(xì)菌性腸炎、真菌性腸炎和病毒性腸炎患兒血清中高表達(dá)，尤其是細(xì)菌性腸炎患兒。

ROC 是常用于評(píng)估二元分類器性能的有效工具，可將診斷性試驗(yàn)的靈敏度和特異度可視化［15］。其中，AUC 是評(píng)價(jià)變量對(duì)疾病診斷能力的綜合指標(biāo)［16］。通過(guò)ROC 分析發(fā)現(xiàn)，IL-33 診斷細(xì)菌性、真菌性和病毒性腸炎患兒的AUC 分別為0.826 9、0.669 8和0.669 9。研究表明，血清IL-33對(duì)兒童腸炎，尤其是細(xì)菌性腸炎具有一定的診斷價(jià)值。因此，IL-33可能是兒童腸炎的診斷標(biāo)志物。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

作者貢獻(xiàn)聲明 黃海：醞釀和設(shè)計(jì)試驗(yàn)，實(shí)施研究，采集數(shù)據(jù)，分析/解釋數(shù)據(jù)，文章撰寫，統(tǒng)計(jì)分析；王洪麗：實(shí)施研究，采集數(shù)據(jù)，分析/解釋數(shù)據(jù)，統(tǒng)計(jì)分析；李慧雯：實(shí)施研究，采集數(shù)據(jù)，分析/解釋數(shù)據(jù)，統(tǒng)計(jì)分析，支持性貢獻(xiàn)；陳煥：醞釀和設(shè)計(jì)試驗(yàn)，采集數(shù)據(jù)，分析/解釋數(shù)據(jù)，統(tǒng)計(jì)分析，支持性貢獻(xiàn)；陳佩瑜：統(tǒng)計(jì)分析，支持性貢獻(xiàn)