氣相色譜法測定參芪健胃顆粒中土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯的含量

［摘 要］ ［目的］建立參芪健胃顆粒中土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯的含量測定方法。 ［方法］采用聚乙二醇20000（PEG-20M）毛細管柱，載氣為高純氮氣；進樣口溫度為260 ℃；檢測器溫度為280 ℃，柱溫為程序升溫；檢測器為氫火焰離子化檢測器（FID）。 ［結(jié)果］土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯分別在0.004 032～0.040 32 μg、0.004 06～0.040 6 μg范圍內(nèi)線性關系良好，平均回收率分別為100.0%和99.6%。 ［結(jié)論］該方法可用于參芪健胃顆粒的質(zhì)量控制，是一種操作簡單、快速準確的理想檢測方法。

［關鍵詞］參芪健胃顆粒；氣相色譜法；土木香內(nèi)酯；異土木香內(nèi)酯

［中圖分類號］R 286.0;O 657.71 ［文獻標志碼］A［文章編號］1005-0310（2024）04-0067-04

Determination of Alantolactone and Isoalantolactone in Shenqi Jianwei Granules by GC

YANG" Qin1， LI Hongyan2， GU Yaqin2， BAO" Yikang2 ， TIAN" Wei3

（1.Jiangsu Zhongxing Pharmaceutical Co.， Ltd.， Zhenjiang Jiangsu 212127 ， China; 2. Jiangsu Jibel Pharmaceutical Co.， Ltd.， Zhenjiang Jiangsu 212009， China; 3. College of Traditional Chinese Medicine， Nanjing University of Chinese Medicine， Taizhou Jiangsu 225300 ， China）

Abstract： ［Objective］To set up a content determination method for alantolactone and isoalantolactone in Shenqi Jianwei granules. ［Methods］Using a polyethylene glycol 20000 （PEG-20M） capillary column with high-purity nitrogen as the carrier gas; injection port temperature 260 ℃; the detector temperature is 280 ℃， column temperature is programmed heating， and the FID is the detector. ［Results］The linear relationships of alantolactone and isoalantolactone were good in the ranges of 0.004 032～ 0.040 32 μg and 0.004 06～ 0.040 6 μg， respectively. The average recoveries were 100.0% and 99.6%， respectively. ［Conclusion］This method can be used for the quality control of Shenqi Jianwei Granules and is an ideal detection method that is simple， fast， and accurate.

Keywords： Shenqi Jianwei Granules；GC；alantolactone；isoalantolactone

0 引言

參芪健胃顆粒原名為參芪健胃沖劑（胃炎靈沖劑），為衛(wèi)健委頒布標準，由黨參、黃芪、白術、蒲公英、土木香、當歸等14味中藥組成，具有溫中健脾、理氣和胃之功效。 該藥主治脾胃虛寒型慢性萎縮性胃炎，適用于胃脘脹痛、痞悶不適、喜熱喜按、噯氣呃逆等癥。該藥目前執(zhí)行的質(zhì)量標準相對簡單［1］，僅有一個顯色鑒別以及顆粒劑的常規(guī)檢查，無薄層 色譜鑒別及含量測定。有文獻報道利用HPLC、雙波長HPLC、UPLC-Q-Exactive四極桿-靜電場軌道阱高分辨率質(zhì)譜法等，測定參芪健胃顆粒中芍藥苷、阿魏酸、橙皮苷、甘草酸銨、檸檬苦素、川陳皮素、橘皮素、黨參炔苷等的含量［2-4］，但未見對該藥中土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯含量測定的報道。

處方中的土木香具有行氣止痛、健脾和胃、安胎之效，其主要成分為土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯。為更好地控制藥品生產(chǎn)過程中的產(chǎn)品質(zhì)量， 本研究參考文獻［5］～［10］，以土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯為指標，對參芪健胃顆粒中的土木香含量進行測定，以保證制劑產(chǎn)品的質(zhì)量。

1 儀器與試藥

Agilent Technologies 7820A氣相色譜儀 （安捷倫科技（中國）有限公司），YP2002電子天平（上海越平科學儀器制造有限公司），BY-320C醫(yī)用離心機（北京白洋醫(yī)療器械有限公司），KQ-500DE臺式數(shù)控超聲波清洗器（上海楚定分析儀器有限公司）。

土木香內(nèi)酯對照品（標準物質(zhì)編號：110760-201811，標示含量：99.4%，供含量測定用）、異土木香內(nèi)酯對照品（標準物質(zhì)編號：110761-201806，標示含量：97.4%，供含量測定用），以上標準物質(zhì)均購自中國食品藥品檢定研究院。參芪健胃顆粒（批號：220410、220411、220412）、陰性樣品均由江蘇中興藥業(yè)有限公司提供；乙酸乙酯為色譜純（上海沃凱生物技術有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

PEG-20M毛細管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm，柱長30 m，內(nèi)徑0.25 mm，膜厚度0.25 μm）；進樣口溫度為260 ℃；檢測器溫度為280 ℃，氫火焰離子化檢測器（FID）；初始溫度為190 ℃，保持30 min，柱溫程序升溫， 以120 ℃/min的速度升至240 ℃，保持5 min；高純氮氣為載氣，氫氣流 速為30 mL/min，空氣流速為400 mL/min；進樣量：1 μL；理論塔板數(shù)按土木香內(nèi)酯峰計算應不低于14 000。

2.2 對照品與供試品溶液制備

對照品溶液：精密稱取干燥至恒重的土木香內(nèi)酯對照品20.16 mg、異土木香內(nèi)酯對照品20.30 mg，置于同一100 mL量瓶中，加乙酸乙酯至刻度并定容，制成每mL含土木香內(nèi)酯0.201 6 mg、異土木香內(nèi)酯0.203 0 mg的混合對照品溶液，備用。

供試品溶液：將參芪健胃顆粒研細，稱取16.0 g，置錐形瓶中，加入乙酸乙酯25 mL，稱定重量，加塞密閉超聲30 min（超聲頻率50 kHz，超聲功率 300 W），放至室溫后再稱定重量，用乙酸乙酯補足減失重量，搖勻，離心10 min （3 000 r/min），取上清液作為供試品溶液（進樣前用0.45 μm微孔濾膜過濾）。

2.3 陰性對照試驗

取參芪健胃顆粒陰性樣品（缺土木香）適量，按2.2節(jié)的方法制得陰性樣品溶液，將對照品溶液、供試品溶液和陰性樣品溶液分別進樣，得到相應的氣相色譜圖如 圖1所示。結(jié)果顯示：陰性樣品溶液在兩種內(nèi)酯對照品色譜圖的相應保留時間 處無干擾峰。

2.4 線性關系

以每mL分別含土木香內(nèi)酯0.201 6 mg、異土木香內(nèi)酯0.203 0 mg的混合對照品溶液為儲備液，分別精密量取該儲備液1、2、4、8、10 mL置50 mL量瓶中，加乙酸乙酯定容、搖勻，制得5種不同濃度的對照品溶液，依次進樣，進樣量為1 μL，測定峰面積。橫坐標X為進樣量（μg），縱坐標Y為峰面積值，進行線性回歸計算，結(jié)果顯示：土木香內(nèi)酯在0.004 032～ 0.040 32 μg、異土木香內(nèi)酯在0.004 06～0.040 6 μg范圍內(nèi)線性關系良好，且回歸方程分別為Y=12 931X+12.871（R=0.999 2）、Y=11 426X+10.305（R=0.999 2）。

2.5 進樣精密度實驗

精密量取混合對照品儲備溶液1 μL，按2.1節(jié)的方法連續(xù)測定6次，記錄峰面積，計算得到兩種內(nèi)酯峰面積的RSD分別為0.89%、0.71%，表明本實驗精密度良好。

2.6 供試品溶液穩(wěn)定性實驗

將同一份供試品溶液，分別在0、1、3、5、12 h進樣檢測，記錄兩種成分的峰面積，計算得到兩種內(nèi)酯峰面積的RSD分別為0.91%、0.87%，表明供試品溶液中的兩種成分在12 h內(nèi)具有良好的穩(wěn)定性。

2.7 重復性實驗

取參芪健胃顆粒樣品（批號：220412）6份，按 2.2節(jié)的方法操作，制得供試品溶液，進樣并測定樣品含量。樣品中土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯的平均含量分別為0.011 2 mg/g、0.012 6 mg/g，兩種成分的RSD分別為0.78%、0.63%。

2.8 加樣回收率

稱取參芪健胃顆粒樣品（批號：220412）6份約16.0 g，精密稱定，加入 2.2節(jié)的混合對照品溶液1 mL，按2.2節(jié)的方法制備供試品溶液，進樣1 μL，記錄峰面積，計算兩種內(nèi)酯成分的平均回收率，分別為100.0%和99.6%，RSD值分別為0.54%和0.60%，結(jié)果如表1所示。

2.9 樣品測定

稱取不同批次（220410、220411、220412）的參芪健胃顆粒樣品制備供試品溶液，測定峰面積，計算參芪健胃顆粒中兩種成分的含量，結(jié)果如表2所示。

3 結(jié)束語

1）參芪健胃顆粒是由十四味中藥組成的中藥復方制劑，原重量標準相對簡單，不能有效控制產(chǎn)品質(zhì)量。有文獻對處方中的白芍、當歸、陳皮、甘草、黨參等均采用HPLC法進行含量測定，但未見對參芪健胃顆粒中土木香含量進行檢測的研究。

2）土木香中土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯的含量測定方法主要有HPLC法和GC法，我們在研究過程中對兩種方法進行了比較研究，發(fā)現(xiàn)運用HPLC法對參芪健胃顆粒中土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯的含量進行檢測時干擾嚴重，主要由于中藥復方制劑 成分復雜，因此HPLC法不適合對其進行含量測定。GC法干擾少，操作方便，因此選擇運用GC法對土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯進行含量測定。

3）實驗過程中，參考《中國藥典》2020年版［11］中土木香藥材的含量測定方法，對提取溶劑的選擇，分別考察了苯、石油醚、乙酸乙酯、無水乙醇和甲醇，結(jié)果顯示：以乙酸乙酯為溶劑提取樣品中目標成分的含量最高；對提取方式（水浴回流、超聲提?。┖统晻r間（20、30、40 min）也進行了篩選，最后確定以乙酸乙酯為溶劑，超聲提取30 min為最佳條件。

4）色譜柱的選擇：實驗過程中分別 采用聚乙二醇20000（PEG-20 M）毛細管 色譜柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）、HP-5毛細管色譜柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）、HP-INNOWAX毛細管色譜柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）、RTX-5毛細管色譜柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm），經(jīng)過比對發(fā)現(xiàn)聚乙二醇20000（PEG-20 M）毛細管色譜柱的實驗結(jié)果比較理想。

5）在標準制定過程中，分別參考了《中國藥典》2020年版［11］以及相關文獻資料，最終確定本文中的色譜條件以及樣品提取方法作為參芪健胃顆粒中土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯的含量測定方法。

［參考文獻］

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［11］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：第一部［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2020：17.

（責任編輯 柴 智；責任校對 白麗媛）

［收稿日期］2023-07-18

［作者簡介］楊琴（1981—），女， 江蘇鎮(zhèn)江人，江蘇中興藥業(yè)有限公司副主任藥師，執(zhí)業(yè)藥師，主要研究方向為藥品質(zhì)量控制研究；顧亞琴（1986—），女，江蘇南通人，江蘇吉貝爾藥業(yè)股份有限公司中級工程師，執(zhí)業(yè)中藥師，主要研究方向為藥品生產(chǎn)及質(zhì)量標準研究；包宜康（1986—），男，江蘇句容人，江蘇吉貝爾藥業(yè)股份有限公司初級工程師，主要研究方向為藥品生產(chǎn)及質(zhì)量標準研究；田薇（2000—），女，江蘇丹陽人，南京中醫(yī)藥大學中藥學碩士研究生，主要研究方向為中藥資源可持續(xù)利用。

［通訊作者］酈紅巖（1977—），男， 江蘇鎮(zhèn)江人，江蘇吉貝爾藥業(yè)股份有限公司高級工程師，執(zhí)業(yè)中藥師，主要研究方向為藥品生產(chǎn)及質(zhì)量標準研究。E-mail：107344113@qq.com