不同種植區(qū)白木香結(jié)香前后根際土壤真菌群落結(jié)構(gòu)與理化因子相關(guān)性分析

關(guān)鍵詞：白木香；根際土壤；真菌多樣性；理化性質(zhì)；相關(guān)性

中圖分類號：S31 文獻標(biāo)志碼：A

根際土壤微生物與植物生長關(guān)系極為密切，其數(shù)量和種類對植物養(yǎng)分循環(huán)非常重要。一方面，土壤微生物能夠促進植物生長，影響植物根系發(fā)育，抑制和減輕植物病蟲害的發(fā)生；另一方面，土壤微生物也是陸地生態(tài)系統(tǒng)的重要生物驅(qū)動力之一[1]，在促進土壤生態(tài)平衡發(fā)展中發(fā)揮重要作用[2]。諸多研究發(fā)現(xiàn)，土壤特性、植被類型和土壤微生物有顯著相關(guān)性[3-4]，而真菌是土壤微生物的主要成員，是土壤中的分解者，能夠分解土壤中的有機物，提供植物所需要的養(yǎng)分，降解土壤中的植物殘體[5]。部分土壤真菌還可以提高植物的抗逆性，維持植物的正常生長，改善土壤的結(jié)構(gòu)[6]。

白木香[Aquilaria sinensis （Lour.） Spreng.]為熱帶及亞熱帶常綠喬木，是我國珍稀藥用植物也是我國唯一沉香基源植物[7]。白木香是海南省珍貴的鄉(xiāng)土樹種之一，該植物喜光，適宜較濕潤的環(huán)境[8-11]。沉香是白木香受傷后形成的含有樹脂的木材，其形成的過程非常復(fù)雜。國內(nèi)外對沉香樹的結(jié)香做了很多研究，認為沉香的形成是樹干受到傷害被真菌侵染，真菌的代謝產(chǎn)物使木材薄壁細胞的淀粉粒發(fā)生生物化學(xué)變化，形成脂類，不斷沉積而形成沉香[12-13]。王東光等[14]檢測20種真菌對白木香樹體揮發(fā)油成分的影響結(jié)果發(fā)現(xiàn)，龍眼焦腐病菌（Lasiodiplodia theobromae）、斑點青霉（Penicillium melengrinum）、青霉病病原菌（P. italicum）、黑綠木霉（Trichoderma atrowiride）、擬康木霉（T. koningiopsis）、腐皮鐮孢（Fusarium solani）、葡萄座腔菌（Botryosphaerianhodina）共7 種真菌菌液處理的白木香樹乙醇浸出物的質(zhì)量分?jǐn)?shù)超過10%，其他13 種真菌效果不明顯。韓曉敏等[15]采用氣質(zhì)聯(lián)用儀（GC-MS）對可可毛色二孢菌PDA 發(fā)酵液進行檢測，發(fā)酵液中檢測到茉莉酸類化合物（JAS）并能誘導(dǎo)白木香愈傷產(chǎn)生沉香倍半萜。有國外研究者對沉香樹的結(jié)香部位進行分離，發(fā)現(xiàn)分離到的真菌種類較多，包括色二孢菌（Diplodia spp.）、曲霉（Aspergillusspp.）、磚紅鐮孢（Fusarium laseritum）、可球二孢菌（Botryodiplodia theobromae）等，并認為它們與沉香的形成有顯著的關(guān)系[16-20]。在國內(nèi)，也有學(xué)者[21]分離出黃綠墨耳菌（Melanotus flavolivens）。鄒欣濤等[22]對白木香結(jié)香前后內(nèi)生真菌的多樣性研究發(fā)現(xiàn)，在白木香結(jié)香過程中，結(jié)香后內(nèi)生真菌種群顯著增加，但優(yōu)勢種群不明顯，并推測，白木香結(jié)香與宿主具共生關(guān)系的內(nèi)生菌也隨之發(fā)生動態(tài)變化。張苗苗[23]研究發(fā)現(xiàn)白木香結(jié)香過程中內(nèi)生真菌可能有復(fù)雜的規(guī)律性，而不是簡單的線性關(guān)系，其結(jié)香部位的菌群非常豐富且結(jié)構(gòu)復(fù)雜。因此在生態(tài)系統(tǒng)的恢復(fù)中，真菌群落的變化是一個關(guān)鍵性指標(biāo)。LIU 等[24]基于全球土壤調(diào)查的研究表明，關(guān)鍵真菌群的多樣性增加了全球范圍內(nèi)生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性，以及植物生產(chǎn)力對極端干旱事件的抵抗力和恢復(fù)力。CHEN 等[25]對土壤真菌和細菌的多樣性進行分析，結(jié)果表明土壤真菌在調(diào)控植物群落結(jié)構(gòu)和功能中具有重要的作用。

目前，國內(nèi)外對沉香樹內(nèi)生真菌多樣性及微生物多樣性的研究報道較多，而關(guān)于沉香樹根際土壤真菌研究極少。CHAIYASEN 等[26]對泰國種植地沉香根部及土壤中分布了叢枝菌根（Arbuscular mycorrhiza fungi，AM）真菌群，對其研究后發(fā)現(xiàn)該真菌群同時也出現(xiàn)在了珍貴樹種柚木（Tectona grandis L.f.）中。孫靜怡[27]對廣州蟲漏沉香進行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同生境蟲漏沉香土壤中的真菌分布有顯著差異，跟沉香中倍半萜類化合物與優(yōu)勢菌種中的青霉屬（Penicillium spp.）菌呈極顯著正相關(guān)，色酮類含量與真菌Alpha（α）指數(shù)均呈顯著正相關(guān)，提示土壤真菌物種越豐富，可能越有利于蟲漏沉香中色酮類成分的形成。NIMNOI 等[28]對沉香樹根際放線菌群落研究表明，放線菌群落與采樣點相對應(yīng)，表明土壤特征和當(dāng)?shù)貧夂驐l件是決定沉香樹根際放線菌群落的主要因素。通過上述對土壤微生物真菌群落的研究表明，不同的地理環(huán)境對沉香樹的結(jié)香質(zhì)量具有一定的影響，但目前關(guān)于不同種植地白木香結(jié)香前后根際土壤真菌群落多樣性和理化性質(zhì)，及其相關(guān)性的研究尚無系統(tǒng)全面的論述。

因此，發(fā)掘不同產(chǎn)地白木香生長與根際土壤微生物群落結(jié)構(gòu)和土壤理化性狀的差異及相關(guān)關(guān)系，促進其良好生長，并比較結(jié)香前后的差異非常必要。本研究以海南3 個不同種植區(qū)的白木香結(jié)香前后根際土壤為研究對象，采用高通量測序技術(shù)對不同種植區(qū)白木香根際土壤真菌群落結(jié)構(gòu)進行分析，并比較不同種植地白木香結(jié)香前后根際微生物的差異；測定根際土壤理化指標(biāo)（pH、有機質(zhì)、全氮、全磷、有效氮、有效磷、速效鉀），并比較不同種植區(qū)之間的差異；將不同種植區(qū)的白木香根際土壤微生物與土壤理化指標(biāo)進行相關(guān)性分析，并對比結(jié)香前后的差異。本研究將為白木香根際微生物互作、土壤理化性狀、結(jié)香、水肥管理等研究提供科學(xué)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗區(qū)概況 3個白木香試驗樣地分別位于海南省?？谖纳酱?、臨高東光農(nóng)場、樂東抱倫農(nóng)場，均采用微創(chuàng)結(jié)香技術(shù)造香，采樣點具體概況如表1所示。

1.1.2 根際土壤樣品采集 采用“S”路線采樣方法，在3 個種植區(qū)內(nèi)隨機選取18 棵白木香樹，即每個種植區(qū)隨機選取9 棵已結(jié)香和9 棵未結(jié)香的樹，均采集10～20 cm 范圍內(nèi)耕作層土壤，將各種植區(qū)結(jié)香的和未結(jié)香土壤樣品分別充分混勻。每3 株土壤樣品混合為1 份，每個處理3 個重復(fù)，每個重復(fù)隨機采集3 個點，共采集18 份白木香根際土壤，過2 mm 篩后陰干備用，用作土壤理化性質(zhì)的分析。另外一部分土壤，輕輕抖落附著在根系上的土壤裝入在無菌袋中，采樣記錄后立即放入低溫保溫冰盒，于–80℃低溫冰箱保存，用于土壤真菌群落高通量測序分析。

1.2 方法

1.2.1 土壤理化性質(zhì)測定 土壤養(yǎng)分含量測定方法參照《土壤農(nóng)化分析》[29]，其中，采用pH 計（DELTA 320）測定pH；采用重鉻酸鉀容量法測定有機質(zhì)；采用凱氏定氮法測定全氮；堿解擴散法測定堿解氮；采用高氯酸-硫酸法測定土壤全磷；采用碳酸氫鈉-浸提-鉬銻抗比色法測定有效磷；采用原子吸收分光光度計測定速效鉀。

1.2.2 土壤真菌群落結(jié)構(gòu)的高通量測序 采用十六烷基三甲基溴化銨法（CTAB 法）對各地區(qū)白木香根際土壤微生物組樣本進行總DNA 提取，并通過瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA 提取質(zhì)量，同時采用紫外分光光度計對DNA 進行定量分析[30]。PCR 反應(yīng)體系：12.5 μL Phusion Hot start flex 2XMaster Mix，正反引物2.5 μL，基因組總DNA 50 ng，加入ddH2O 至反應(yīng)體系為25 μL[31]。PCR 擴增引物為擴增真菌ITS1 區(qū)的特異性引物（ITS86F：5′-GTGAATCATCGAATCTTT-GAA-3′）和（ITS4R：5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′）。PCR 反應(yīng)條件：98 ℃ 40 s，98 ℃ 10 s，54 ℃ 30 s，35 個循環(huán)；72 ℃ 10 min。接著進行35 個循環(huán)，54 ℃退火30 s，循環(huán)結(jié)束后72 ℃最終延伸10 min，每個樣本重復(fù)3 次，PCR 擴增產(chǎn)物通過2%瓊脂糖凝膠電泳進行檢測，采用AMPure XT beads 回收試劑盒。對純化后的PCR 產(chǎn)物使用Agilent Bioanalyzer2100（Agilent， CA， USA）和Illumina（KapaBiosciences， Woburn， MA， USA）的文庫定量試劑盒進行評估，合格的文庫濃度應(yīng)在2 nmol/L 以上。將合格的樣品上機測序，根據(jù)所需測序量按相應(yīng)比例混合，并經(jīng)NaOH 變性為單鏈進行上機測序；使用NovaSeq 6000 測序儀進行2×150 bp 的雙端測序，使用的試劑為NovaSeq 6000 SP Reagent Kit（500 cycles）。

1.3 數(shù)據(jù)處理

使用Cutadapt v1.9 軟件對測序得到的RawReads 進行過濾；使用fqtrim 軟件進行引物序列的識別與去除，得到不包含引物序列的高質(zhì)量Reads；通過Vsearch v2.3.4 軟件重疊對每個樣品高質(zhì)量的Reads 進行拼接，得到的拼接序列即CleanReads；基于得到的ASV（feature）特征序列和豐度表格進行alpha 多樣性分析和beta 多樣性分析。采用Excel、DPS 軟件進行數(shù)據(jù)分析和SPSS 20.0軟件進行多重比較和相關(guān)性分析，利用Canoco 5軟件冗余分析研究土壤理化指標(biāo)，并對真菌群落進行相關(guān)性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同種植區(qū)白木香結(jié)香前后根際土壤真菌群落結(jié)構(gòu)組成分析

2.1.1 不同種植區(qū)白木香結(jié)香前后根際土壤真菌OTU 比較通過對18 個土壤樣品進行高通量測序獲得序列經(jīng)過數(shù)據(jù)的優(yōu)化、拼接、過濾和質(zhì)控后，共獲得優(yōu)質(zhì)ITS 序列3 697 288 條，平均每個樣品205 404 條，平均長度約為255 bp。從圖1可知，Rishness 稀釋趨于平緩，表明數(shù)據(jù)能夠準(zhǔn)確反映樣本真菌群落結(jié)構(gòu)的組成。

2.1.2 不同種植區(qū)白木香結(jié)香前后根際土壤真菌OTU 聚類分析 從圖2 可知，3 個種植區(qū)結(jié)香和未結(jié)香共有54 個OTU。樂東結(jié)香和未結(jié)香、文山結(jié)香和未結(jié)香、臨高結(jié)香和未結(jié)香特有的OTU分別為588、866、198、190、168、392。從高至低依次為：LDWJXgt;LDJXgt;LGWJXgt;WSJXgt;WSWJXgt;LGJX。

2.1.3 不同種植區(qū)白木香結(jié)香前后根際土壤真菌群落豐度和多樣性差異 通過對3 個種植區(qū)白木香結(jié)香前后根際土真菌群落的豐富度和多樣性進行分析，得到物種豐度指數(shù)（Chaol index）、辛普森指數(shù)（Simpson index）、香農(nóng)-威納多樣性指數(shù)（Shannnon-wiener index）、譜系多樣性指數(shù)（PD_ whole_tree index），共4 個指數(shù)見表2，其中Chao1 指數(shù)常用來估計物種總數(shù)；辛普森指數(shù)和香農(nóng)-威納多樣性指數(shù)用于衡量物種多樣性，指數(shù)值越大，說明樣品的物種豐度和多樣性越高。譜系多樣性指數(shù)則基于OTU 序列進化樹的系統(tǒng)發(fā)育特征，評估多樣性程度，即譜系多樣性。Chao1指數(shù)和譜系多樣性指數(shù)從高到低順序為：LDWJXgt;LDJXgt;LGWJXgt;WSJXgt;WSWJXgt;LGJX。3個種植區(qū)中，辛普森指數(shù)和香農(nóng)-威納多樣性指數(shù)從高到低順序為：LDWJXgt;LDJXgt;LGJXgt;LGWJXgt;WSWJXgt;WSJX。以上結(jié)果均表明，樂東樣地結(jié)香前和結(jié)香后的真菌群落多樣性最大，文山樣地白木香根際土壤真菌群落最小。

2.1.4 不同種植區(qū)白木香結(jié)香前后門和綱水平群落結(jié)構(gòu)分析 通過對不同種植區(qū)白木香結(jié)香前后土壤真菌群落門和綱水平分析發(fā)現(xiàn)，其群落組成和優(yōu)勢分類單位相對豐度存在差異（圖3）。同一種植區(qū)白木香結(jié)香前后優(yōu)勢種群差異不顯著，但是優(yōu)勢種群豐度存在差異。在門水平上，3 個不同種植區(qū)的主要優(yōu)勢門為子囊菌亞門（Ascomycota45.93%，49.02%）和擔(dān)子菌亞門（BasiBasidiomycota4.07%，0.98%）。在綱水平上（圖4），海口文山優(yōu)勢綱依次為座囊菌綱（Dothideomycetes9.22%，9.05%）、糞殼菌綱（Sordariomycetes4.57%，5.01%）、子囊菌綱（Ascomycetes 1.87%，1.61%）、酵母綱（Saccharomycetes 0.49%，0.64%）、傘菌綱（Agaricomycetes 0.22%，0.11%）、p__Basidiomycota，c_unclassfied（0.17%，0.10%）等。臨高優(yōu)勢綱依次為糞殼菌綱（Sordariomycetes7.24%，9.57%）、子囊菌綱（Ascomycetes 5.75%，3.28%）、座囊菌綱（Dothideomycetes 3.25%，3.50%）、p__Basidiomycota，c_unclassfied（0.24%，0.13%）、散囊菌綱（Eurotiomycetes 0.09%，0.14%）、酵母綱（Saccharomycetes 0.04%，0.02%）等。樂東優(yōu)勢綱依次為子囊菌綱（Ascomycetes 6.54%，8.18%）、座囊菌綱（Dothideomycetes 3.84%，5.87%）、糞殼菌綱（Sordariomycetes 2.66%，1.96%）、傘菌綱（ Agaricomycetes 2.00% ， 0.28% ） 、p__Basidiomycota，c_unclassfied（1.36%，0.24%）、散囊菌綱（Eurotiomycetes 0.19%，0.06%）等。

2.1.5 不同種植區(qū)白木香結(jié)香前后根際土壤優(yōu)勢真菌屬組成不同種植區(qū)白木香結(jié)香前后土壤真菌群落組成在屬水平上，其群落組成和優(yōu)勢分類單位的相對豐度存在差異（圖5），相同種植區(qū)優(yōu)勢群落的相對豐度存在差異。海南文山優(yōu)勢屬依次為子囊菌屬（p__Ascomycota 9.22%，9.05%）、漆斑菌屬（Myrothecium 4.57%，5.01%）、座囊菌屬（ c__Dothideomycetes 1.87% ， 1.61% ） 、f__Didymellaceae （0.49% ， 0.64% ） 、枝孢屬（Cladosporium 0.22%，0.11%）、小不整球殼屬（Plectosphaerella 0.17%，0.10%）。臨高優(yōu)勢屬依次為漆斑菌屬（Myrothecium 7.24%，9.57%）、座囊菌屬（c__Dothideomycetes 3.25%，3.50%）、子囊菌屬（p__Ascomycota 5.75%，3.28%）、小不整球殼屬（Plectosphaerella 0.24%，0.13%）、球腔菌屬（f__ Mycosphaerellaceae 0.12%，0.14%）、f__Didymellaceae（0.04%，0.02%）等。樂東優(yōu)勢屬依次為座囊菌屬（c__Dothideomycetes 6.54%，8.18%） 、子囊菌屬（ p__Ascomycota 3.84%，5.87%）、漆斑菌屬（Myrothecium 2.66%，1.96%）、枝孢屬（Cladosporium 2.00%，0.28%）、小不整球殼屬（Plectosphaerella 1.36%，0.24%）等。

2.1.6 不同種植區(qū)真菌的bata 多樣性分析圖 6為PCoA 分析結(jié)果，其中PCoA1 和PCoA2 分別為41.44%和34.67%。同一種植區(qū)白木香結(jié)香前后真菌群差異性不大，但不同種植區(qū)間菌群具有顯著性差異；樣地間存在顯著差異，WSJX 和WSWJX，LDJX 和LDWJX，LGJX 和LGWJX 之間距離最近，距離越近說明物種組成結(jié)構(gòu)越接近，表明同一種植區(qū)菌群相似性特別高，菌群組成差異小。3 個不同種植區(qū)的真菌群落形成了各自獨立的區(qū)域，菌群結(jié)構(gòu)存在可區(qū)分的差異。

2.2 不同種植區(qū)白木香結(jié)香前后根際土壤理化性質(zhì)

對3 個不同種植區(qū)的白木香結(jié)香前后根際土壤研究發(fā)現(xiàn)（表3），3 個采樣點的土壤大量元素含量存在差異。不同種植區(qū)之間，臨高種植區(qū)全氮、有效氮、有效磷、有機質(zhì)的含量顯著高于樂東和文山；文山種植區(qū)全磷、速效鉀含量最高。樂東種植pH 高于文山和臨高。同一種植區(qū)內(nèi)，樂東樣地結(jié)香速效鉀含量高于未結(jié)香，文山樣地結(jié)香有機質(zhì)、有效氮含量高于未結(jié)香，樂東未結(jié)香中的有效磷含量高于結(jié)香，同一區(qū)域的同一元素含量變化趨勢相似。3 個樣地土壤均為酸性，土壤pH 的范圍為4.12～5.48，由高到低依次為LDJXgt;LDWJXgt;LGJXgt; WSJXgt;LGWJXgt; gt;WSWJX。

2.3 不同種植區(qū)白木香土壤理化性質(zhì)與真菌相關(guān)性分析

2.3.1 不同種植區(qū)白木香根際土壤真菌豐度、多樣性與土壤理化性質(zhì)相關(guān)性分析 由表4 可知，pH 與香農(nóng)-威納指數(shù)、辛普森指數(shù)、物種豐度指數(shù)、譜系多樣性呈顯著或極顯著正相關(guān)；全磷與香農(nóng)- 威納指數(shù)和辛普森指數(shù)呈顯著負相關(guān)（Plt;0.05）與物種豐度指數(shù)呈極顯著負相關(guān)（Plt;0.01）；有效磷與譜系多樣性呈顯著負相關(guān)（Plt;0.05）。表明pH、全磷等土壤理化指標(biāo)對白木香根際土壤主要真菌種群豐度和多樣性的影響比較顯著。

2.3.2 不同種植區(qū)白木香根際土壤優(yōu)勢真菌屬與土壤理化性質(zhì)相關(guān)性分析 對3 個種植區(qū)白木香根際土壤理化性質(zhì)與根際真菌的主要菌門屬進行相關(guān)性分析（表5）表明，pH、有機質(zhì)、堿解氮、全氮、全磷、有效磷含量對根際土壤中主要真菌屬有影響。pH 與子囊菌屬呈顯著正相關(guān)；有機質(zhì)與座囊菌屬呈顯著負相關(guān)，與小不整球殼屬、肉座菌屬呈正相關(guān)；全氮與座囊菌屬呈負相關(guān)，與小不整球殼屬、f__Didymellaceae、糞殼菌屬、肉座菌屬呈正相關(guān)；堿解氮與座囊菌屬、球腔菌屬呈負相關(guān)，與f__Didymellaceae、糞殼菌屬呈正相關(guān)； 全磷與枝孢屬、球腔菌屬呈正相關(guān)， 與f__Didymellaceae 呈負相關(guān)；有效磷與座囊菌屬呈負相關(guān)，與糞殼菌屬呈正相關(guān)。

3 討論

3.1 白木香不同種植區(qū)根際土壤理化性質(zhì)差異

通過比較白木香不同種植區(qū)之間的土壤理化性質(zhì)研究發(fā)現(xiàn)，不同種植區(qū)之間存在顯著差異，而結(jié)香前后并無明顯差異。白木香喜歡偏酸性的土壤，3 個種植地pH 均在4.21～5.58，含量從高至低依次為：樂東gt;文山gt;臨高。其中有機質(zhì)的含量從高至低依次為：臨高gt;樂東gt;文山。臨高種植區(qū)全氮、有效氮、有效磷、有機質(zhì)的含量顯著高于樂東和文山；文山種植區(qū)全磷、速效鉀含量最高，顯著高于樂東和臨高樣地。樂東種植區(qū)pH、速效鉀高于文山和臨高。王龍仁等[32]探討了人工結(jié)香初期營養(yǎng)代謝變化規(guī)律，分析了結(jié)香前后白木香葉片和土壤中大量元素氮、磷、鉀和微量元素含量變化，結(jié)果表明，環(huán)境因子與結(jié)香關(guān)系密切，其中土壤因子交換性鈣、交換性鎂與沉香特征性成分呈不同程度負相關(guān)。馬惠芬等[33]對白木香結(jié)香質(zhì)量與環(huán)境因子的關(guān)系進行了研究，結(jié)果表明結(jié)香質(zhì)量相關(guān)性較高的因子為pH、交換性鈣和鎂。本次研究表明不同種植地的環(huán)境因子對白木香根際土壤理化性質(zhì)影響較大。

3.2 白木香不同種植區(qū)根際土壤真菌群落多樣性差異

本研究中，白木香根際土壤樣品真菌物種組成豐富，不同種植區(qū)白木香根際土壤真菌群落組成、分類單元的相對豐度及優(yōu)勢分類單元受環(huán)境條件的影響均存在不同程度差異。在門水平上，擔(dān)子菌門（Basidiomycota）和子囊菌門（Ascomyota）為優(yōu)勢真菌菌群，其中子囊菌門占比為94.95%，擔(dān)子菌門為5.05%。潘爭艷等[34]對遼寧省14 種藥用植物根際土壤真菌研究也發(fā)現(xiàn)，子囊菌門在藥用植物根際真菌中的種類和豐度較高，說明子囊菌門真菌適應(yīng)性廣泛，在不同的生境條件下均有分布。也有研究者發(fā)現(xiàn)子囊菌門能夠產(chǎn)生大量的分生孢子，無性繁殖能力強，增長迅速，所以在數(shù)量上占有明顯的優(yōu)勢，其次子囊菌門群落主要由腐生菌構(gòu)成，而腐生菌可以為土壤中的植物提供養(yǎng)分，是土壤養(yǎng)分循環(huán)過程中的重要真菌[35]。擔(dān)子菌門可與植物共生形成菌根[36]，可增強植株抗性。在屬水平上，3 個種植區(qū)優(yōu)勢屬和豐度之間存在差異，文山優(yōu)勢屬為子囊菌屬（p__Ascomycota） ， 臨高優(yōu)勢屬為漆斑菌屬（ Myrothecium），樂東優(yōu)勢屬為座囊菌屬（c__Dothideomycetes）。

3.3 白木香不同種植區(qū)根際土壤理化性質(zhì)與微生物相關(guān)性

本研究結(jié)果表明pH、有機質(zhì)、堿解氮、全氮、全磷、有效磷含量對根際土壤中大多數(shù)主要真菌屬有影響。其中，全磷與根際土壤豐富度指數(shù)和多樣性指數(shù)均呈顯著負相關(guān)，這可能是由于磷是微生物細胞結(jié)構(gòu)的重要組成元素，從而導(dǎo)致微生物表現(xiàn)出對磷養(yǎng)分的依賴。CLEVELAND 等[37]在熱帶雨林里也發(fā)現(xiàn)土壤磷含量是影響土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的主要因子。但?MILAUER[38]認為土壤磷與真菌群落結(jié)構(gòu)或多樣性并無顯著相關(guān)性是相互矛盾的，可能與試驗地土壤條件和管理等因素有關(guān)，具體因素有待進一步探究。土壤pH 也是影響真菌群落結(jié)構(gòu)組成的重要環(huán)境因子，對土壤真菌的生長繁殖具有顯著影響[39]；pH 能夠影響土壤中化合物形態(tài)，進而影響土壤微生物對養(yǎng)分的吸收利用，最終影響土壤真菌群落[40]。本研究的6組土樣的pH 在4.0～5.5 之間，呈酸性，pH 與小不整球殼屬呈負相關(guān)，與紅耳屬呈正相關(guān)。因此，作為植物與土壤的溝通橋梁，真菌群落結(jié)構(gòu)必然會受到植物和土壤環(huán)境因子的直接或間接的影響。其中C/N 是影響真菌群落的重要因素。有機質(zhì)與座囊菌屬呈顯著負相關(guān)，與小不整球殼屬、肉座菌屬呈正相關(guān)；全氮與座囊菌屬呈負相關(guān)，與小不整球殼屬、f__Didymellaceae、糞殼菌屬、肉座菌屬呈正相關(guān)；堿解氮與座囊菌屬和球腔菌屬呈負相關(guān)，與f__Didymellaceae、糞殼菌屬呈正相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，臨高樣地的有機質(zhì)和氮元素更豐富，從調(diào)查也發(fā)現(xiàn)，臨高樣地白木香的生長狀況比其他2 個種植地更好，表明C/N 比值可能是影響白木香生長的一個關(guān)鍵因素。SRIVASTAVA等[41]研究也發(fā)現(xiàn)土壤C/N 比值是影響真菌生長的主要因素，因為真菌的有機底物利用率較高，因此C/N 比值高的土壤更有利于真菌的生長。因此，真菌群落結(jié)構(gòu)作為連接植物和土壤的橋梁，必然受到植物和土壤環(huán)境因子的直接或間接影響。

3.4 白木香相同種植地土壤根際土壤理化性質(zhì)與真菌、微生物差異的影響因素

通過對同一產(chǎn)地白木香結(jié)香前后研究發(fā)現(xiàn)，同一區(qū)域的土壤元素含量和真菌群落的變化趨勢相似，表現(xiàn)出同增或同減的趨勢，但在屬水平上，結(jié)香后樣品在屬水平上分類單位的相對豐度均小于未結(jié)香，推測在結(jié)香過程中樹木受到了一定的創(chuàng)傷和激素的影響，降低了其土壤真菌的多樣性與豐富度；有研究表明，植物受到傷害后病原菌大量積累，有益菌群數(shù)量逐漸降低，最終導(dǎo)致群落整體水平降低[42]。宋杰等[43]的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同生境條件下，相同品種結(jié)香部位真菌群落結(jié)構(gòu)存在顯著差異，而相同生境條件下，同種白木香結(jié)香部位非常相似，表明不同環(huán)境因子會對真菌群落造成一定的影響。王冉等[44]對我國野生土沉香的4 個分布區(qū)（海南屯昌、廣東陸河、廣東東莞、海南臨高）的土壤特性及營養(yǎng)進行分析，結(jié)果表明，不同種植區(qū)的同一土層土壤理化性質(zhì)有顯著差異（Plt;0.05），而相同種植區(qū)之間土壤差異不大。