基于西藏龍膽的種植及其功效的研究綜述

魏秀娟，周 鳳，次仁措姆，邊巴吉拉

（西藏昌都市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，西藏 昌都 854000）

西藏龍膽科植物大約有80 屬，700 種，主要分布在溫帶，我國有22屬，大約425種，而在我國西藏現(xiàn)有14 屬，約158 種［1］。我國幾乎一半的龍膽植物均可在西藏搜索到。其中如西藏特產(chǎn)龍膽花，生長于海拔4 000 m以上的高原牧場，食之可達清肝，具有清熱解毒，治療目赤、頭痛、咽炎，以及祛斑美容等功效。由于西藏特殊的環(huán)境，包括溫度低，日照長，晝夜溫差大，使得其種植的方式也需有一定的改進，在2011 年初，西藏自治區(qū)高原生物研究所經(jīng)過3 年人工栽培技術(shù)研究，首次成功培育出西藏龍膽種苗20 多萬株，栽培面積達0.67 hm2，也為后續(xù)西藏龍膽的栽培方式提供了技術(shù)支持。但是近年來，由于過度采挖和生境破壞，致使龍膽資源日益枯竭，國家也將此列為三級保護的藥材。

了解其生物學(xué)特性是保護其天然資源的重要前提，這也是種植龍膽的前提之一。龍膽為種子繁殖，但是關(guān)于龍膽種子萌發(fā)特性的研究非常少，目前只有1 篇文獻。而對于其功效的研究由來已久，《日華子本草》記載：“治客忤，疳氣，熱病狂語，瘡疥，明目，止煩。”在《本經(jīng)》中也有這樣的記述：“主骨間寒熱，驚瘸邪氣，續(xù)絕傷，定五臟，殺蠱毒?！弊鳛樗幉?，龍膽的功效很多，需求量也很大，因此研究其種植技術(shù)和藥用功效具有十分重要的實踐意義。

1 龍膽種植的技術(shù)研究

1.1 種子萌發(fā)特性研究

祿亞洲等［2］分別利用不同濃度的NaCl，PEG-6000，植物外源生長激素GA3 及6-BA 溶液處理，并發(fā)現(xiàn)NaCl，PEG-6000和6-BA溶液均抑制龍膽種子的萌發(fā)，而適宜濃度的GA3 處理和GA3 與6-BA浸種能顯著促進其萌發(fā)，得出了種植時用300 mg/L GA3 將西藏龍膽的種子浸種24 h 后再播種可提高萌發(fā)率的結(jié)論，此結(jié)論的得出為西藏龍膽的人工種植提供了非常重要的參考價值。

另外，祿亞洲等［3］在處理種子萌發(fā)之前已經(jīng)就西藏龍膽種子如何進行消毒進行了研究，發(fā)現(xiàn)先用75%乙醇消毒15 s，后用2% NaClO 消毒15 min 的效果較好，發(fā)芽率最高。從其前期研究的結(jié)果來看，對于西藏龍膽種子的特性總體分析就是其對干旱脅迫及鹽脅迫較為敏感，隨著濃度增高種子活率下降。在人工進行種植時應(yīng)該適時適當(dāng)控制土壤鹽分和補充水分，這也對龍膽種植有較大的指導(dǎo)意義。

1.2 西藏龍膽共生系統(tǒng)研究

植物根際中存在大量的微生物，根系微生物通過植物根系分泌物，黏液及脫落的根細胞影響根系活力，而這些土壤微生物在土壤功能及植物健康中起到重要作用。2020年，高嵩等［4］就不同種植年限龍膽草根際土壤真菌群落進行了高通量測序，而早在2012年，段雙全等［5］已經(jīng)在西藏龍膽根內(nèi)進行了寄生附球霉屬真菌菌株特性的研究，發(fā)現(xiàn)分離得到的菌株屬半知菌亞門絲孢綱瘤座孢目附球霉屬，但還存在一定的差別。這些菌株的發(fā)現(xiàn)對于進一步研究西藏龍膽的生長環(huán)境有一定的參考意義。

1.3 西藏龍膽的種植研究

孫鳳環(huán)等［6］在2008 年發(fā)表的關(guān)于西藏龍膽的人工栽培方面的研究指出，龍膽喜濕，在5～10 ℃時即可在根部出芽，12～18 ℃時可開花結(jié)果，15～25 ℃地下根增粗增快。冬季-15 ℃以上根狀莖保持活率。在栽培地方面，種植龍膽需要平坦地塊，土壤以砂質(zhì)為佳。另外，采種應(yīng)在9 月下旬至10 月上旬，在播種前10～15 d，土壤及種子均需消毒，土壤利用1%代森鋅噴灑地表，用地膜覆蓋7 d，去除藥味即可，種子用1%高錳酸鉀溶液浸泡30 min，后期進行病蟲害的防治，如褐斑病為龍膽的常見病害。種植后經(jīng)過3年進行采收。

在2010 年由蔣思平等［7］繼續(xù)研究的西藏龍膽人工種植的技術(shù)項目達到了較好的種植效果，西藏龍膽的發(fā)芽率達到了88%，此項目也在一定程度上調(diào)整了西藏農(nóng)業(yè)結(jié)構(gòu)，為農(nóng)戶帶來收益，也在藏藥廠投入生產(chǎn)。

1.4 龍膽種子保存研究

龍膽的種子資源的再生在種植環(huán)節(jié)也較為重要，其中對其愈傷組織的誘導(dǎo)在對龍膽的保存及進一步研究次生代謝產(chǎn)物起到了關(guān)鍵的作用?？山梃b晉海軍等［8］對于紅花龍膽愈傷組織的誘導(dǎo)及其生理生化特性的研究，對其植物進行組培，篩選出了愈傷組織誘導(dǎo)最佳的培養(yǎng)基：MS+NAA 0.8 mg/L+6-BA 0.43 mg/L+KT 0.71 mg/L，誘導(dǎo)率達到了97.62%，并且提出了不同激素對于愈傷組織誘導(dǎo)率的影響從大到小順序為NAA，6-BA，KT，為龍膽的再生體系的研究提供了基礎(chǔ)資料。

2 西藏龍膽的功效研究

2.1 龍膽功能性研究

由于野生龍膽種子資源的稀缺，關(guān)于種植龍膽的研究為后期進一步研究及繁育西藏龍膽提供了便利。在西藏，龍膽又名秦膠、左扭、右擰等，西藏龍膽屬于藏藥中邦見類藥材，具有清濕熱、瀉肝膽火等等功效，可用于治療感冒發(fā)燒、肺炎及肝損傷，但是龍膽還有潛在的功效需要研究。首先，對于龍膽藥材進行不同等級的劃分，方法是收集不同產(chǎn)地的龍膽藥材樣品，對其外觀進行分類，分類項分別是藥材長度、須根數(shù)、直徑和色度。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，龍膽藥材外觀性狀與龍膽內(nèi)在成分呈正相關(guān)性，長度越長，須根越多，直徑越大及顏色越淺，其內(nèi)在成分如馬錢苷酸就越多，因此將龍膽藥材分為兩個等級，對建立其等級標準具有科學(xué)指導(dǎo)意義［9］。

就其本身的功能而言，藏藥龍膽的功效主要是集中于氣管炎咳嗽等方面，這也是已知的研究最多的功效之一。甘肅藏藥十五味龍膽丸對于慢性支氣管炎有著關(guān)鍵的治療作用［10］，在臨床效果上的研究也十分重要，利用對照組（常規(guī)治療）和研究組（藏藥十五位龍膽龍膽+常規(guī)治療）進行分別給藥，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在咳嗽及住院時間上，研究組明顯優(yōu)于對照組且不良反應(yīng)無統(tǒng)計學(xué)意義［11］。其對治療變異性哮喘也有一定的臨床改善效果［12］。另外藏藥中十味龍膽顆粒治療急性氣管-支氣管炎也有優(yōu)良的效果，可以改善肺功能，促使癥狀快速消失。在臨床上選取了急性氣管炎-支氣管炎患者作為研究對象［13］，分為對照組及研究組，結(jié)果發(fā)現(xiàn)研究組較對照組咳嗽，肺部癥狀改善時間更短，又揭示了其臨床上的重要應(yīng)用。

對于龍膽功效的探究，還有很多不同的方向。索朗等［14］在西藏龍膽和帕里龍膽這兩種龍膽科植物治療肝損傷的功效之間進行了比較。他們利用樣品1（SL-1，帕里龍膽根部提取浸膏）及樣品2（SL-2，西藏龍膽地上部分提取浸膏）針對小鼠及大鼠給藥后，發(fā)現(xiàn)兩種龍膽對CCl4致急性肝損傷小鼠具有一定的肝損傷保護作用，而對于CCl4亞急性肝損傷大鼠沒有明顯的保護作用，兩者也表現(xiàn)出相似的功效。這一發(fā)現(xiàn)對于臨床藥用替代藥具有借鑒作用，方便繼續(xù)進行其功效的研究。

2.2 龍膽的有效成分研究

分析龍膽的功能，進行進一步探究，找出其中一些功效成分的含量。在一些研究中，發(fā)現(xiàn)各種龍膽植物中的有效成分各不相同。2015 年，楊芳等［15］用HPLC 法（色譜）對藏藥大花龍膽中的龍膽苦柑、異紅草苷、芒果苷及齊墩果酸的含量進行了測定；而2017 年，趙露等［16］又在龍膽草有效成分研究的時候分別測定了龍膽草樣品中龍膽苦柑、獐牙菜柑、獐牙菜苦柑、熊果酸和齊墩果酸5 種有效成分的含量，將其表型性狀與有效成分之間的相關(guān)性進行了分析，發(fā)現(xiàn)龍膽草莖色及葉色等性狀與其有效成分存在一定的相關(guān)性，這也為龍膽植物株選或特征類型篩選提供了參考。這些測定活性成分也成為龍膽功效研究的參考成分［17］。

對龍膽功效成分的研究結(jié)果對篩選評估質(zhì)量良好的龍膽也有一定的借鑒作用。在龍膽中分別測定有效成分的含量，利用化合物的含量多少來整體評價龍膽藥材的優(yōu)劣［18］。

2.3 西藏龍膽功效的實際應(yīng)用研究

對于龍膽功效真正的應(yīng)用，研究其天然抗氧化活性成分有望對呼吸道感染有輔助治療的作用，也為臨床治療提供了思路。呼吸道感染中巨噬細胞激活與細胞中的活性氧信號相關(guān)，包括病毒感染。天然植物活性化合物利用傳統(tǒng)的化學(xué)成分提取，分離及結(jié)構(gòu)鑒定的方法費時耗力，而張國英等［19］利用色譜在線分析方法對藏藥大花龍膽的抗氧化活性成分進行快速鑒定篩選，發(fā)現(xiàn)大花龍膽柑B 的空間構(gòu)象與烏奴龍膽A 和E 的差距較大，揭示了這些差異可能導(dǎo)致抗氧化活性的差異。

最近3 年流行的新型冠狀病毒肺炎一直牽動著全國人民的心，而由于其變異快的特性，針對性藥物的研究往往跟不上變異的速度。對于這個局面，學(xué)界在研究中藥內(nèi)是否具有能夠緩解新冠癥狀的成分，成都中醫(yī)藥大學(xué)的趙芡等［20］探尋了藏藥三味龍膽花片對新冠肺炎的作用，分別檢查了其中的白花龍膽和甘草及蜂蜜干膏的化學(xué)成分，通過數(shù)據(jù)庫查詢了化學(xué)成分的對應(yīng)靶點，構(gòu)建了化合物及靶點網(wǎng)絡(luò)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)藏藥三味龍膽可通過多成分，多靶點及通路的協(xié)同作用對抗新型冠狀病毒肺炎起到作用。

3 討論

目前對于龍膽的研究越來越多，通過其培育方式的優(yōu)化及進一步進行功效成分的分析愈發(fā)重要。種植龍膽的技術(shù)也已經(jīng)進行較為深入的研究，對于龍膽進一步功效的探索起到了關(guān)鍵作用。對其功效的研究結(jié)果在臨床上的重要性日益增加，對于治療一些疾病也具有借鑒意義。龍膽的種類較為豐富，雖然對于西藏龍膽的研究較少，但這一分支已經(jīng)成為了藏藥中不可或缺的一部分。龍膽種植在增加當(dāng)?shù)剞r(nóng)戶收入的同時，其“渾身是寶”的特點也會使其更多地應(yīng)用到醫(yī)學(xué)治療中，造福于患者。