高遷移率族蛋白B1在炎癥誘導(dǎo)早期自然流產(chǎn)中的病理機(jī)制研究

【摘要】目的 探討高遷移率族蛋白B1（HMGB1）表達(dá)在炎癥因子誘導(dǎo)發(fā)生早期流產(chǎn)中的病理機(jī)制，為臨床提供參考。方法 選取2021年8月至2022年12月珠海市婦幼保健院收治的40例早期自然流產(chǎn)者作為研究組，另選取珠海市婦幼保健院同期40例選擇手術(shù)終止妊娠者為對照組進(jìn)行回顧性分析。采集兩組研究對象的胎盤組織，比較兩組研究對象胎盤組織中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1（IL-1）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）水平及HMGB1表達(dá)情況，分析血清TNF-α、IL-1及IL-6與HMGB1表達(dá)的相關(guān)性。結(jié)果 研究組研究對象胎盤組織TNF-α、IL-1、IL-6水平及HMGB1表達(dá)水平高于對照組（Plt;0.05）。研究組研究對象人絨毛組織塊中TNF-α、IL-1及IL-6水平高于對照組（Plt;0.05）。研究組研究對象人絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞平均每cm2血管形成數(shù)量多于對照組（Plt;0.05）。相關(guān)性分析顯示TNF-α、IL-1及IL-6水平與HMGB1表達(dá)呈正相關(guān)（Plt;0.05）。結(jié)論 早期自然流產(chǎn)者的機(jī)體炎癥因子及HMGB1表達(dá)水平較高，且與HMGB1表達(dá)呈正相關(guān)，屬于早期自然流產(chǎn)的重要病理基礎(chǔ)。

【關(guān)鍵詞】高遷移率族蛋白 B1；炎癥因子；早期自然流產(chǎn)；相關(guān)性

【中圖分類號】R714.21 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】2096-2665.2023.15.0008.04

DOI：10.3969/j.issn.2096-2665.2023.15.003

Study on pathological mechanism of high mobility group protein B1 in early spontaneous abortion induced by inflammation

FENG Jiacheng CHEN Yongmei HUANG Yuanping CHEN Hailing

（1.Department of Pathology， Zhuhai Center For Maternal and Child Health Care; 2. Department of Obstetrics， Zhuhai Center For Maternal and Child Health Care， Zhuhai， 519000， Guangdong， China）

【Abstract】 Objective To explore the pathological mechanism of high mobility group protein B1 （HMGB1） expression in early spontaneous abortion induced by inflammatory factors， and to provide clinical reference. Methods 40 cases of early spontaneous abortion admitted to Zhuhai Center For Maternal and Child Health Care from August 2021 to December 2022 were selected as the study group， and 40 cases of surgical termination of pregnancy were selected as the control group for retrospective analysis. The placental tissues of the two groups were collected， and the expressions of tumor necrosis factor-α （TNF-α）， interleukin-1 （IL-1）， interleukin-6 （IL-6） and HMGB1 in the placental tissues of the two groups were compared， and the correlation between TNF-α， IL-1， IL-6 and HMGB1 expression was analyzed. Results The levels of TNF-α， IL-1， IL-6 and HMGB1" in placental tissues of the study group were higher than those in the control group （Plt;0.05）. The levels of TNF-α， IL-1 and IL-6 in human villus tissue blocks in the study group were higher than those in the control group （Plt;0.05）. The average number of blood vessel formation per cm2 in human villus tissue blocks in the study group was higher than that in the control group （Plt;0.05）. Correlation analysis showed a positive correlation of TNF- α， IL-1 and IL-6 levels with HMGB1 expression （Plt;0.05）. Conclusion The expression levels of inflammatory factors and HMGB1" in early spontaneous abortion are higher， and are positively correlated with the expression of HMGB1 ， which is an important pathological basis of early spontaneous abortion.

【Keywords】High mobility group protein B1; Inflammation factor; Early spontaneous abortion; Correlation

自然因素導(dǎo)致的流產(chǎn)稱為自然流產(chǎn)，其中孕周12周以內(nèi)的自然流產(chǎn)屬于早期自然流產(chǎn)，病因涉及遺傳、內(nèi)分泌及免疫反應(yīng)等[1]。早期自然流產(chǎn)會給患者造成巨大的身心傷害，研究自然流產(chǎn)病理機(jī)制及尋找合理干預(yù)方式對保障產(chǎn)婦生理及心理健康有重要意義[2]。近年研究顯示，正常生殖過程中，母體可抵御外界微生物入侵引起的損傷情況，也可避免存在異源遺傳物質(zhì)胚胎出現(xiàn)的免疫排斥反應(yīng)，使胎兒能夠正常生長發(fā)育[3]。炎癥誘導(dǎo)生殖道感染是導(dǎo)致早期自然流產(chǎn)的關(guān)鍵因素，伴生殖道感染的妊娠女性較容易發(fā)生流產(chǎn)，并且大多數(shù)存在早期自然流產(chǎn)情況，這為炎癥誘導(dǎo)自然流產(chǎn)的病理研究奠定了基礎(chǔ)。為深入研究早期自然流產(chǎn)的病理機(jī)制，后續(xù)發(fā)現(xiàn)了高遷移率族蛋白B1（HMGB1）這一炎癥因子對于誘導(dǎo)流產(chǎn)具有一定作用，然而具體的病理機(jī)制尚不明確[4]。本研究以早期流產(chǎn)者為研究對象，明確炎癥因子與HMGB1的相關(guān)性，并分析HMGB1表達(dá)在早期自然流產(chǎn)發(fā)病中的作用，研究其病理機(jī)制，從而為疾病防治提供新思路，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2021年8月至2022年12月珠海市婦幼保健院收治的40例早期自然流產(chǎn)者作為研究組，另選取珠海市婦幼保健院同期40例非意愿妊娠而需手術(shù)終止妊娠者為對照組進(jìn)行回顧性分析。研究組研究對象年齡19～46歲，平均年齡（33.12±1.26）歲；BMI 18～27 kg/m²，平均BMI（22.04±1.26）kg/m²。對照組研究對象年齡19～42歲，平均年齡（32.75±1.31）歲；BMI 18～27 kg/m²，平均BMI（21.75±1.24）kg/m²。兩組研究對象一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（Pgt;0.05），組間具有可比性。本研究經(jīng)珠海市婦幼保健院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①研究組研究對象符合《自然流產(chǎn)診治中國專家共識（2020年版）》[5]中的早期自然流產(chǎn)的診斷標(biāo)準(zhǔn)及手術(shù)指征；②孕周≤12周；③無生殖器官結(jié)構(gòu)異常；④絨毛組織染色體結(jié)構(gòu)正常。排除標(biāo)準(zhǔn)：①復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)者；②合并自身免疫性疾病及內(nèi)分泌紊亂疾病者；③合并內(nèi)科及婦科等疾病者。

1.2 研究方法 均在兩組研究對象流產(chǎn)后采集胎盤組織，并收集盡可能新鮮的白色胚胎絨毛組織，裝入無菌采集袋后即刻送檢。

1.3 觀察指標(biāo) ①比較兩組研究對象胎盤組織中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1（IL-1）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）水平及HMGB1表達(dá)情況。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定組織標(biāo)本的TNF-α、IL-1及IL-6水平，采取免疫印跡實(shí)驗(yàn)（Western Blot）測定組織標(biāo)本的HMGB1表達(dá)情況。②比較兩組研究對象人絨毛組織塊中TNF-α、IL-1及IL-6水平。體外培養(yǎng)人絨毛組織塊，建立絨毛組織培養(yǎng)模型，采取ELISA測定培養(yǎng)液中炎癥因子TNF-α、IL-1及IL-6水平。③比較兩組研究對象人絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞HMGB1表達(dá)情況。體外培養(yǎng)人絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞，采取Western Blot法測定HMGB1表達(dá)情況，每cm2血管形成數(shù)量越多表示HMGB1表達(dá)越高。④分析胎盤組織中TNF-α、IL-1及IL-6水平與HMGB1表達(dá)的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 22.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)。計量資料以（x）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。采用Spearman相關(guān)系數(shù)進(jìn)行相關(guān)性分析。以Plt;0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組研究對象胎盤組織中TNF-α、IL-1、IL-6水平及HMGB1表達(dá)情況比較 研究組研究對象胎盤組織TNF-α、IL-1、IL-6水平及HMGB1表達(dá)水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（Plt;0.05），見表1。

2.2 兩組研究對象人絨毛組織塊中TNF-α、IL-1及IL-6水平比較 研究組研究對象人絨毛組織塊中TNF-α、IL-1及IL-6水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（Plt;0.05），見表2。

2.3 兩組研究對象人絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞HMGB1表達(dá)情況比較 研究組研究對象平均每cm2血管形成數(shù)量為（11.25±1.25）個，對照組研究對象平均每cm2血管形成數(shù)量為（7.45±1.31）個，研究組研究對象人絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞平均每cm2血管形成數(shù)量多于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=18.346，Plt;0.05），見圖1。

2.4 胎盤組織中TNF-α、IL-1及IL-6水平與HMGB1表達(dá)的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析顯示，TNF-α、IL-1及IL-6水平與HMGB1表達(dá)呈正相關(guān)（Plt;0.05），見表3。

3 討論

隨著社會經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，人們的生活及工作壓力越來越大，這使早期自然流產(chǎn)發(fā)生率也逐漸增加，嚴(yán)重影響女性的身體健康[6-7]。關(guān)于自然流產(chǎn)發(fā)生機(jī)制，研究認(rèn)為炎癥反應(yīng)與流產(chǎn)病理機(jī)制存在聯(lián)系，主要表現(xiàn)為自然流產(chǎn)者的血清IL-6、TNF-α等檢測指標(biāo)水平高于正常妊娠女性，但也有部分的流產(chǎn)者存在相關(guān)炎癥因子無明顯改變的情況，這樣難以明確炎癥同自然流產(chǎn)的關(guān)聯(lián)[8]。

而通過進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，在自然流產(chǎn)者炎癥因子中HMGB1可見表達(dá)增高情況，且在人體胎盤組織中顯示HMGB1有一定表達(dá)，而其中先兆子癇或者早產(chǎn)者也可見HMGB1表達(dá)水平的升高[9-10]。本研究結(jié)果顯示，研究組研究對象胎盤組織、人絨毛組織塊中TNF-α、IL-1、IL-6水平及HMGB1表達(dá)水平高于對照組，且人絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞平均每cm2血管形成數(shù)量多于對照組，這表明對于早期流產(chǎn)者，可出現(xiàn)HMGB1表達(dá)的升高。原因主要是早期自然流產(chǎn)女性廣泛存在滋養(yǎng)細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶水平的異常，引起滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤能力的降低，繼而引發(fā)流產(chǎn)情況[11]。對于處在正常分娩期的女性，胎盤組織及血液中均存在HMGB1的表達(dá)，早期自然流產(chǎn)者表達(dá)水平增加，同時HMGB1在炎癥反應(yīng)、細(xì)胞遷移及細(xì)胞分化等的過程發(fā)揮重要作用，提示HMGB1可能參與早期自然流產(chǎn)發(fā)生過程[12]。而TNF-α、IL-1及IL-6等炎癥因子在研究組中呈現(xiàn)高表達(dá)情況，提示上述指標(biāo)的異常增高可導(dǎo)致自然流產(chǎn)的發(fā)生[13]。TNF-α、IL-1及IL-6在流產(chǎn)者外周血中及子宮內(nèi)膜組織中出現(xiàn)不協(xié)調(diào)表達(dá)情況，而以上炎癥因子作用情況存在一些差異性。

妊娠作為女性重要的生理過程，等同于半同體異體移植過程，在妊娠過程中，母體內(nèi)胚胎界面存在的免疫細(xì)胞、細(xì)胞因子構(gòu)成免疫耐受環(huán)境，在這一環(huán)境中胎兒免受母體免疫系統(tǒng)排斥反應(yīng)及免疫攻擊行為，保證生長及供應(yīng)相關(guān)營養(yǎng)物質(zhì)[14]。本研究相關(guān)性分析顯示，胎盤組織TNF-α、IL-1及IL-6水平與HMGB1表達(dá)呈正相關(guān)，提示HMGB1與炎癥誘導(dǎo)因子表達(dá)引發(fā)病變相關(guān)。早期自然流產(chǎn)的群體，外周血或者胎盤組織HMGB1激活免疫炎癥反應(yīng)，引起機(jī)體免疫失衡情況，因而通過合理方式阻斷HMGB1表達(dá)可較好地緩解炎癥及控制患者病情[15]。而當(dāng)外界干擾或者微生物感染時，HMGB1會在適當(dāng)條件下被激活，這樣也可進(jìn)一步釋放至細(xì)胞外，進(jìn)行相關(guān)受體的結(jié)合，誘導(dǎo)炎癥因子如TNF-α、IL-1及IL-6的產(chǎn)生，而這些炎癥因子反過來刺激使HMGB1釋放，放大炎癥反應(yīng)[16-17]。

綜上所述，早期自然流產(chǎn)者外周血中的TNF-α、IL-1、IL-6及HMGB1呈現(xiàn)出高表達(dá)的情況，并且炎癥因子與HMGB1也存在一定的關(guān)聯(lián)性，通過早期阻斷HMGB1及炎癥因子對于早期自然流產(chǎn)發(fā)生具有一定預(yù)防作用。

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