日常飲用水檢驗中的微生物檢驗方法對比研究

王丹 郝俊峰 王敏

【摘 要】研究日常飲用水檢驗中微生物的檢驗效果，本文研究分析了2018年1月—2018年12月不同時間逾地點的500份飲用水水樣，其中250份應(yīng)用多管發(fā)酵法檢測（A組），250份水樣采用濾膜法檢測（B組），回顧并分析了兩種方法檢測結(jié)果。結(jié)果顯示，A組檢驗合格率明顯高于B組，P<0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。由此得出，在生活飲水檢驗中，多管發(fā)酵法比濾膜法的水質(zhì)檢測合格率更高。

【關(guān)鍵詞】飲用水檢驗;微生物檢驗;飲用水微生物

【中圖分類號】R123 【文獻識別碼】B 【文章編號】1002-8714（2020）01-0107-01

1 資料與方法

1.1一般資料

研究時間在2018年1—12月，研究對象為不同時間不同地點獲取的500份飲用水水樣，其中250份應(yīng)用多管發(fā)酵法檢測（A組），250份水樣采用濾膜法檢測（B組），A組與B組水樣中均包括出廠水樣100份、管網(wǎng)末梢水樣100份、二次供水水樣50份。A組、B組在水樣數(shù)量、水樣來源等方面滿足可比性要求，P>0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

1.2方法

不同水樣均以微生物中的大腸桿菌檢驗為主，具體檢驗方法如下：

1.2.1A組

采取多管發(fā)酵法，不同水樣樣本量為10mL，然后將其加入雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中，在10mL單料乳糖蛋白胨中加入上述1mL樣本，量取1mL樣本，將其加入到9mL無菌生理鹽水中，再在10mL單料乳糖蛋白胨的培養(yǎng)液中加入1mL樣本，不同稀釋度均需設(shè)置5管;每日檢測處理后的自來水，接種雙料培養(yǎng)基，共5份，每份接種10mL，并將受污染水源確定為檢測水源。接種期間：培養(yǎng)箱溫度設(shè)置：35～37℃，培養(yǎng)時間：22～26h;培養(yǎng)完成后，陰性標準：乳糖蛋白胨培養(yǎng)管沒有產(chǎn)酸與產(chǎn)氣;陽性標準：培養(yǎng)管出現(xiàn)產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，此時需在伊紅美藍瓊脂板上接種發(fā)酵管中的菌落，培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。溫度：35～37℃，培養(yǎng)時間：18～24h，觀察培養(yǎng)基中的菌落變化，選取菌落，并進行革蘭氏染色，通過顯微鏡進行菌落觀察與分析。

1.2.2B組

采用濾膜法，使用0.45μm的微孔濾膜對水樣進行過濾，整個檢驗過程如下：采用一次性無菌濾膜（47mm×0.45μm×600）完成水質(zhì)監(jiān)測，有多種孔徑可滿足不同微生物檢測要求。本文選擇的濾膜孔徑為0.45μm，所有膜片均為無菌獨立包裝，表面有網(wǎng)格，便于菌落計數(shù)。使用前應(yīng)詳細閱讀使用說明書，并使用無菌鑷子夾取無菌濾膜，將其置于滅菌濾床上，放置位置合適后，固定過濾器，于過濾器中倒入100mL水樣，打開過濾器閘門，抽濾條件為-0.05Pa。水樣過濾后進行培養(yǎng)，取出的樣品需要抽氣，時間為5s，抽氣過程中需要關(guān)閉閘門，并取出過濾器，整個操作需要使用無菌鑷子完成，避免直接用水接觸，然后將濾膜放置到品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基中。放置過程中濾膜需要放在細菌面，便于其與培養(yǎng)基有效接觸，養(yǎng)殖期間避免殘留氣泡，放置完成后將濾膜倒入平皿并倒置，培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度為37℃，培養(yǎng)時間為22～26h。

1.3影響日常飲用水微生物檢測的因素

1.3.1人員因素

對于微生物檢測人員而言，要想保證相關(guān)檢測工作的順利開展，應(yīng)保證其具有扎實的技術(shù)能力以及專業(yè)素養(yǎng)，如果檢測人員的綜合素養(yǎng)不能滿足檢測工作開展的具體要求，也必然會對檢測工作的開展以及檢測結(jié)果的有效性產(chǎn)生一定的影響。

1.3.2環(huán)境因素

在實際的微生物檢測過程中，實驗室環(huán)境應(yīng)配備專門的微生物檢驗無菌操作室以及配套檢測設(shè)備，并在試驗開始之前對無菌操作間進行消毒處理，在進行消毒處理過程中，應(yīng)做好相應(yīng)的消毒方法選擇工作。

1.3.3設(shè)備因素

對于微生物檢測而言，其主要涉及到的設(shè)備主要包括干熱滅菌鍋、高壓滅菌鍋以及恒溫培養(yǎng)箱等等，上述幾類設(shè)備溫度一定出現(xiàn)較大偏差，就極易給檢測數(shù)據(jù)的準確性帶來較大的影響。因此，在日常工作過程中，相關(guān)檢測人員應(yīng)對設(shè)備溫度進行定期的校準。

1.4觀察指標

觀察不同方法對應(yīng)的水樣檢驗合格率。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法

借助統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS21.0處理檢驗結(jié)果，檢驗結(jié)果為計數(shù)資料，用（n，%）表示，進行x2檢驗，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，即P<0.05。

2 結(jié)果

見表1。

3 討論

通過對日常飲用水微生物檢驗方法的研究，便于明確不同檢驗特點，進而更好地控制飲用水質(zhì)量，保證飲水安全[1]。多管發(fā)酵法是常用的飲用水檢驗方法，該方法是在檢驗過程中依據(jù)稀釋培養(yǎng)測數(shù)法對待測樣品進行多重稀釋，直到稀釋液接種到無或者極少細菌生長繁殖的培養(yǎng)皿中。按照沒有生長的最低稀釋度、最高稀釋度，依據(jù)“最大或然數(shù)”理論，得到樣品單位體積中的細菌數(shù)。最初稀釋期間的檢測結(jié)果較大，但是隨著反復(fù)稀釋，最終結(jié)果趨近于真實值。實際應(yīng)用期間需要根據(jù)具體情況合理確定檢驗要求數(shù)目。

本研究通過采取多管發(fā)酵法，可使應(yīng)用水合格率達到98.00%。在飲用水檢測期間，濾膜法通過濾膜過濾器對水樣進行過濾，獲取一定的細菌微生物，通過將濾膜在培養(yǎng)基上培養(yǎng)，膜上可逐漸生長出大腸菌群，便于直接進行計數(shù)。濾膜法在應(yīng)用過程中具有操作簡單、檢測快速等優(yōu)點，該方法在雜質(zhì)較少的水樣檢測中應(yīng)用較多，整個操作過程對無菌要求較為嚴格，很容易因為外界環(huán)境因素影響檢測結(jié)果。綜上所述，根據(jù)研究結(jié)果，多管發(fā)酵法的檢驗合格率（98.00%）高于濾膜法（80.80%）。雖然上述兩種方法都能夠用于生活飲用水的微生物檢驗，但多管發(fā)酵法檢驗的合格率更高，因而在生活飲用水微生物檢驗方面更具有價值[2]。

參考文獻

[1] 薛秀萍.探究生活飲用水微生物檢驗方法及評價標準[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘，2018，18（51）：258.

[2] 李慧.生活飲用水微生物檢驗方法和評價標準探討[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘，2018，18（13）：130+151.