IDO在CD20+彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤中的表達(dá)及與RCHOP方案治療預(yù)后的關(guān)系

劉正彪 濮陽(yáng)油田總醫(yī)院血液內(nèi)科,河南省濮陽(yáng)市 457001

彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤(DLBCL)是非霍奇金淋巴瘤(NHL)常見(jiàn)亞型,約占全部NHL的30%～50%[1],臨床表現(xiàn)為無(wú)痛性淋巴結(jié)腫大,伴不同程度潮熱、盜汗表現(xiàn),部分可伴胃腸道、中樞系統(tǒng)受侵犯。目前多采用免疫化療干預(yù)DLBCL,研究發(fā)現(xiàn),DLBCL對(duì)放化療較為敏感,約有1/2的患者可在免疫化療獲益,甚至可達(dá)臨床治愈水平[2]。報(bào)道顯示,有超過(guò)95%的B淋巴細(xì)胞表達(dá)CD20抗原且其與抗體結(jié)合后不會(huì)從細(xì)胞膜表面脫落,故可將CD20抗原作為治療DLBCL患者的理想作用靶點(diǎn)[2]。近年來(lái),以利妥昔單抗+環(huán)磷酰胺+多柔比星+長(zhǎng)春新堿+潑尼松(RCHOP)為主的化療方案被廣泛應(yīng)用于臨床,其對(duì)腫瘤靶細(xì)胞有較好的殺傷效應(yīng)、安全性高、耐受性好。相關(guān)研究表明[3]免疫逃逸為DLBCL發(fā)生發(fā)展的重要機(jī)制,吲哚胺2,3雙加氧酶(IDO)則為與色氨酸分解代謝密切相關(guān)的因子,系色氨酸分解代謝的關(guān)鍵限速酶,在誘導(dǎo)T細(xì)胞免疫耐受及介導(dǎo)腫瘤免疫逃逸中具備重要作用,在正常生理狀態(tài)下,IDO表達(dá)可通過(guò)調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)抑制其過(guò)度活化,避免機(jī)體免疫損傷,而在腫瘤病理?xiàng)l件下,IDO異常表達(dá)則可導(dǎo)致效應(yīng)T細(xì)胞功能紊亂,造成樹(shù)突狀細(xì)胞免疫抑制?；诖?本研究將探討IDO在CD20陽(yáng)性(CD20+)DLBCL患者中的表達(dá)情況及其與RCHOP方案治療預(yù)后的關(guān)系,報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 回顧性分析2017年4月—2020年3月本院收治的接受RCHOP方案治療的82例CD20+DLBCL患者的臨床資料。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)經(jīng)病理及免疫組化確診為CD20+DLBCL;(2)有石蠟標(biāo)本存檔;(3)入院前未接受任何抗腫瘤治療;(4)完成IDO測(cè)定;(5)接受超過(guò)3個(gè)周期RCHOP方案治療;(6)臨床及隨訪資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)復(fù)發(fā)或難治性DLBCL者;(2)有器官移植史者;(3)合并其他惡性腫瘤及心、腎、肺等重要臟器官損傷無(wú)法完成RCHOP化療者;(4)患免疫系統(tǒng)疾病者;(5)放棄治療或失訪者。82例患者中男54例,女28例;年齡42～79歲,平均年齡(64.5±5.7)歲;Hans分型[4]:生發(fā)中心B細(xì)胞型(GCB)35例,非GCB型(non-GCB)47例;Ann Arbor分期[5]:Ⅰ～Ⅱ期34例,Ⅲ～Ⅳ期48例。

1.2 方法

1.2.1 IDO表達(dá)測(cè)定。采用免疫組化法測(cè)定組織IDO表達(dá),按照染色程度及陽(yáng)性細(xì)胞比例進(jìn)行評(píng)分。染色程度,0、1、2、3分依次對(duì)應(yīng)無(wú)著色、細(xì)胞漿或細(xì)胞核內(nèi)見(jiàn)均勻分布淡黃色顆粒、細(xì)胞漿或細(xì)胞核內(nèi)見(jiàn)均勻分布棕黃色顆粒、細(xì)胞漿或細(xì)胞核內(nèi)見(jiàn)均勻分布黃褐色顆粒;陽(yáng)性細(xì)胞所占比例,0、1、2、3、4分依次對(duì)應(yīng)的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)為<10%、10%～24%、25%～50%、51%～75%、>75%。評(píng)分結(jié)果為染色強(qiáng)度評(píng)分×陽(yáng)性細(xì)胞所占比例評(píng)分結(jié)果。陰性:0～1分;弱陽(yáng)性:2～3分;中等陽(yáng)性:4～6分;強(qiáng)陽(yáng)性:≥7分。

1.2.2 研究方法。所有患者均接受RCHOP方案治療,化療前1d,給予利妥昔單抗(上海羅氏制藥有限公司,J20170034)375mg/m2,靜脈滴注;d1,環(huán)磷酰胺(浙江海正藥業(yè)股份有限公司,H20084627)750mg/m2,靜脈輸注,多柔比星(深圳萬(wàn)樂(lè)藥業(yè)有限公司,H44024359)60mg/m2,靜脈輸注,長(zhǎng)春新堿(深圳萬(wàn)樂(lè)藥業(yè)有限公司,H44021772)1.4mg/m2,靜推;d1～5,潑尼松(北京康蒂尼藥業(yè)有限公司,H20058375)100mg,口服,每3周重復(fù),持續(xù)化療3個(gè)周期以上。收集所有患者病例資料,包括性別、臨床分型、血乳酸脫氫酶(LDH)水平、體能狀態(tài)評(píng)分(ECOG)[6]、淋巴瘤國(guó)際預(yù)后指數(shù)(IPI)評(píng)分[7]、治療反應(yīng)(化療3個(gè)周期后評(píng)定,參照世界衛(wèi)生組織實(shí)體瘤療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)[8],分為完全緩解、部分緩解、穩(wěn)定及進(jìn)展)等。

1.2.3 隨訪。所有患者均完成2年隨訪調(diào)查,隨訪截止時(shí)間2022年3月30日,統(tǒng)計(jì)患者無(wú)進(jìn)展生存率(PFS,自治療至腫瘤出現(xiàn)進(jìn)展或患者死亡、隨訪截止日)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)采用SPSS20.0軟件進(jìn)行分析,計(jì)數(shù)資料采用構(gòu)成比(%)表示,進(jìn)行χ2檢驗(yàn),預(yù)后影響因素采用COX風(fēng)險(xiǎn)回歸分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 IDO在DLBCL患者組織中的表達(dá)情況 82例DLBCL患者組織IDO表達(dá)陽(yáng)性45例(54.88%),陰性37例(45.12%),患者組織細(xì)胞漿、細(xì)胞核見(jiàn)明顯棕黃色染色顆粒分布,陽(yáng)性細(xì)胞所占比例高。

2.2 IDO表達(dá)與不同病理特征DLBCL患者的關(guān)系 年齡≥60歲、Hans分型為non-GCB型、Ann Arbor分期為Ⅲ～Ⅳ期、有典型B癥狀、治療反應(yīng)為穩(wěn)定+進(jìn)展的DLBCL患者IDO陽(yáng)性率更高(P<0.05),見(jiàn)表1。

表1 IDO表達(dá)與不同病理特征DLBCL患者的關(guān)系[n(%)]

2.3 不同病理特征的DLBCL患者與隨訪2年P(guān)FS的關(guān)系 82例患者隨訪2年P(guān)FS為19.51%(16/82),IPI指數(shù)為0～2分、IDO表達(dá)為陰性DLBCL患者隨訪2年P(guān)FS更高(P<0.05),見(jiàn)表2。

表2 不同病理特征的DLBCL患者與隨訪2年P(guān)FS的關(guān)系[n(%)]

2.4 DLBCL患者2年P(guān)FS影響因素分析 COX回歸分析顯示:IPI指數(shù)、IDO陽(yáng)性均為影響DLBCL患者2年P(guān)FS的危險(xiǎn)因素(P<0.05),見(jiàn)表3。

表3 DLBCL患者2年P(guān)FS影響因素分析

3 討論

多數(shù)DLBCL患者均表達(dá)CD20表面抗原,其為非糖基化疏水磷酸蛋白,位于前B細(xì)胞及成熟B細(xì)胞表面,少部分表達(dá)為T(mén)淋巴細(xì)胞表層,對(duì)B細(xì)胞增殖、分化有關(guān)鍵調(diào)節(jié)作用。利妥昔單抗則為針對(duì)B細(xì)胞細(xì)表面CD20分子的單克隆抗體,其可特異性與CD20結(jié)合,激活效應(yīng)細(xì)胞釋放細(xì)胞毒性作用的顆粒酶與穿孔素,促進(jìn)CD20+B細(xì)胞溶解,有效殺滅B淋巴細(xì)胞。近年來(lái),隨以利妥昔單抗為主的RCHOP免疫化療方案的應(yīng)用,DLBCL患者總緩解率得到明顯上升,但李書(shū)家等[9]的研究發(fā)現(xiàn),仍有1/3的患者在接受化療后出現(xiàn)疾病進(jìn)展,分析其原因可能為機(jī)體產(chǎn)生免疫耐受,無(wú)法識(shí)別及殺傷腫瘤細(xì)胞因而導(dǎo)致DLBCL患者免疫化療療效欠佳。隨著DLBCL發(fā)病機(jī)制研究的不斷深入,相關(guān)研究指出DCBCL患者生物學(xué)行為與腫瘤細(xì)胞、微環(huán)境相互作用密切相關(guān),而色氨酸代謝與免疫耐受的關(guān)系則成為近年來(lái)臨床研究者關(guān)注的熱點(diǎn)課題[10]。

IDO是色氨酸分解代謝中關(guān)鍵限速酶,一般認(rèn)為IDO主要通過(guò)降解色氨酸,耗竭局部色氨酸,抑制T細(xì)胞增殖。機(jī)體在正常條件下,IDO表達(dá)水平極低,而在病理?xiàng)l件下,脂多糖及干擾素-γ均可激活I(lǐng)DO表達(dá)。近年來(lái)發(fā)現(xiàn),IDO存在重要的免疫調(diào)節(jié)作用,與自身免疫性疾病的發(fā)生、移植排斥反應(yīng)及腫瘤免疫逃逸均有密切聯(lián)系。

本研究對(duì)IDO在DLBCL患者組織中的表達(dá)情況進(jìn)行探究,結(jié)果發(fā)現(xiàn),有54.88%的CD20+DLBCL患者腫瘤組織IDO均呈陽(yáng)性表達(dá),進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn),高齡、non-GCB亞型、臨床分期較晚、伴全身典型B癥狀、RCHOP免疫化療反應(yīng)較低的患者有較高的IDO表達(dá)陽(yáng)性率,證實(shí)IDO表達(dá)影響CD20+DCBCL患者對(duì) RCHOP化療的治療反應(yīng),分析其機(jī)制為:在DLBCL患者初始反應(yīng)階段,活化T細(xì)胞表達(dá)的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞抗原可誘導(dǎo)IDO高表達(dá),破壞機(jī)體免疫防御屏障,導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生免疫耐受,而在效應(yīng)階段,腫瘤細(xì)胞自身表達(dá)高水平IDO,降解局部色氨酸,抑制效應(yīng)性T細(xì)胞增殖,引起免疫逃逸,影響機(jī)體對(duì)RCHOP免疫化療的敏感度,產(chǎn)生耐藥。

本研究中預(yù)后COX分析發(fā)現(xiàn),IPI指數(shù)、IDO陽(yáng)性為影響DLBCL患者2年P(guān)FS的危險(xiǎn)因素,IPI指數(shù)是臨床公認(rèn)評(píng)定DLBCL預(yù)后的指數(shù),而Ann Arbor分期越靠后的患者病變浸潤(rùn)深度越高,侵犯范圍越廣。在DCBCL患者中IDO主要表達(dá)于癌細(xì)胞及宿主抗原呈遞細(xì)胞內(nèi),IDO高表達(dá)的宿主細(xì)胞聚集于腫瘤組織及引流淋巴結(jié)附近,可抑制T細(xì)胞功能,導(dǎo)致T細(xì)胞調(diào)節(jié)紊亂,并干擾其他免疫細(xì)胞對(duì)腫瘤抗原的呈遞及識(shí)別,引起局部免疫耐受,誘導(dǎo)全身免疫耐受,降低其識(shí)別及殺滅突變細(xì)胞能力,導(dǎo)致免疫監(jiān)測(cè)失活,引起腫瘤復(fù)發(fā),影響患者預(yù)后。但免疫耐受及免疫逃逸機(jī)制相對(duì)復(fù)雜,IDO并非引起DCBCL患者免疫逃逸的唯一機(jī)制,后續(xù)需進(jìn)一步展開(kāi)深入研究,明確DCBCL患者發(fā)生免疫逃逸的相關(guān)機(jī)制,為其治療提供指導(dǎo)。

綜上所述,CD20+DLBCL患者IDO陽(yáng)性率較高,且IPI指數(shù)、IDO陽(yáng)性為影響DLBCL患者2年P(guān)FS的危險(xiǎn)因素,臨床應(yīng)引起重視。