白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ對(duì)心腎綜合征大鼠心腎功能的影響及機(jī)制

吳英智,李志梁,賴 俊,傅 強(qiáng)

(1. 深圳大學(xué)附屬華南醫(yī)院,廣東 深圳 518116;2. 南方醫(yī)科大學(xué)珠江醫(yī)院,廣東 廣州 510280;3.廣東省第二人民醫(yī)院心血管病醫(yī)院,廣東 廣州 510317)

心臟和腎臟間具有密切聯(lián)系,其中一個(gè)臟器的功能紊亂會(huì)導(dǎo)致另外一個(gè)臟器功能繼發(fā)性紊亂或損傷,心臟和腎臟間這種交互作用被稱為心腎綜合征[1]。相關(guān)研究報(bào)道,入院急性失代償性心力衰竭患者約30%合并慢性腎臟疾病[2],高血壓、糖尿病、代謝紊亂、肥胖等慢性疾病過(guò)程中心臟和腎臟常伴有組織纖維化[3]。心臟組織纖維化可導(dǎo)致PR間期延長(zhǎng)、心臟傳導(dǎo)阻滯、心房顫動(dòng)、室性心律失常、左室收縮和舒張功能障礙、心力衰竭等。腎臟中腎小球纖維化會(huì)導(dǎo)致腎小球?yàn)V過(guò)功能下降,腎小管間質(zhì)纖維化可導(dǎo)致腎小管重吸收功能下降,加快發(fā)展為慢性腎臟疾病[4]。然而,目前臨床上缺乏針對(duì)心腎綜合征發(fā)病過(guò)程中心腎組織纖維化的治療方法和策略。白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ為白術(shù)的重要生物活性成分,其對(duì)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的動(dòng)物急性肺損傷具有較好的保護(hù)作用[5];可以通過(guò)減少腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和一氧化氮(NO)的產(chǎn)生抑制小鼠主動(dòng)脈環(huán)中慢性炎癥[6];還可能通過(guò)抑制p38-MAPK 和 NF-κB信號(hào)通路的激活而抑制低密度脂蛋白導(dǎo)致的血管內(nèi)膜平滑肌細(xì)胞的增生、分化及炎癥反應(yīng)[7]。Wang等[8]研究發(fā)現(xiàn)白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ可通過(guò)減少炎癥細(xì)胞因子和內(nèi)毒素來(lái)改善大鼠腎功能。炎癥反應(yīng)激活是組織纖維化發(fā)生的重要環(huán)節(jié),基于白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ的上述作用,推測(cè)其可能通過(guò)抑制炎癥反應(yīng)來(lái)抑制心腎綜合征發(fā)病過(guò)程中心臟和腎臟組織纖維化,為此本研究進(jìn)行了驗(yàn)證,希望給心腎綜合征的治療帶來(lái)一定啟發(fā)和思考。

1 實(shí)驗(yàn)材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 清潔級(jí)雄性SD大鼠50只,體重(200±20)g,6周齡,由南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,許可證號(hào):SCXK (粵)2011-0015。飼養(yǎng)大鼠1周適應(yīng)環(huán)境后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn),飼養(yǎng)條件為恒溫(20±2) ℃,濕度(50±5)%,24 h 自由攝水,人工照明各12 h。

1.2藥物及主要試劑和設(shè)備 白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ晶體(成都曼思特生物科技有限公司,純度>98%);水合氯醛、氨芐青霉素鈉(Sigma-Aldrich 公司,美國(guó));血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)試劑盒(南京建成生物工程研究所);尿蛋白定量測(cè)試盒(PanEra);大鼠腦鈉肽(BNP)ELISA試劑盒(Cloud-Clone)。動(dòng)物呼吸機(jī)(泰盟,型號(hào):HX-300S),心電監(jiān)護(hù)儀(邦健型號(hào):ECG-101A),酶標(biāo)儀(Thermo,型號(hào):Varioskan LUX),體式顯微鏡(Leica,型號(hào):S8APO),倒置顯微鏡(Leica,型號(hào):DMI1),熒光顯微鏡(Leica,型號(hào):DMI8),冷光源動(dòng)物手術(shù)燈(深圳市瑞沃德生命科技,型號(hào):76301),微量離心機(jī)(Thermo,型號(hào):LEGEND Micro21R),電熱恒溫水浴鍋(Blue Pard,型號(hào):HWS26),心臟超聲儀(Vevo 2100 Imaging System)。

1.3實(shí)驗(yàn)方法 參考文獻(xiàn)[9]的方法,采用永久性結(jié)扎冠脈前降支聯(lián)合3/4大部分腎切方法建立心腎綜合征模型:先對(duì)50 只大鼠行永久性冠脈前降支結(jié)扎術(shù),1周后行3/4大部分腎切術(shù),腎切術(shù)后1周對(duì)存活下來(lái)的42只大鼠行心臟超聲檢查,剔除左心室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)>60%的5只大鼠,將剩余37只大鼠采用隨機(jī)數(shù)表法隨機(jī)分為模型組(10只)、白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ低劑量組(9只)、白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ中劑量組(9只)、白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ高劑量組(9只)。白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ低、中、高劑量組分別給予0.3 mg/kg、1 mg/kg、3 mg/kg白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ(現(xiàn)配現(xiàn)用,每20 mg白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ晶體溶于0.2 mL DMSO中,再用生理鹽水將藥物母液稀釋至40 mL,得到濃度為0.5 mg/mL白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ藥物溶液)腹腔注射,模型組給予5 mL/kg生理鹽水腹腔注射,均1次/d,連續(xù)注射2周。

1.4標(biāo)本采集 注射2周后,將各組大鼠放入代謝籠,常規(guī)飼養(yǎng)24 h,記錄24 h總尿量和大鼠體重,將尿液常溫下1 500 r/min離心5 min后,取上清尿液-80 ℃保存。采用5%水合氯醛300 mg/kg腹腔注射麻醉大鼠后,將其仰臥固定,心尖取血,放入肝素化2.0 mL EP管充分混勻,4 ℃下8 000 r/min離心6 min,取上清液-80 ℃保存。心尖取血后取出腎臟和心臟,修剪去除腎臟包膜、脂肪組織和左、右心耳,生理鹽水泡洗后,無(wú)菌紗布吸干心臟及腎臟表面殘余水分,清除心臟和腎臟表面血跡,分別稱重后-80 ℃保存。

1.5檢測(cè)指標(biāo)及方法

1.5.1心臟超聲檢查 注射2周后再次行心臟超聲檢查,記錄LVEF、每搏量(SV)、心排血量(CO)、左心室短軸縮短率(LVFS)、左心室前壁收縮末期厚度(LVAWs)、左心室前壁舒張末期厚度(LVAWd)、左心室后壁收縮末期厚度(LVPWs)、左心室后壁舒張末期厚度(LVPWd)、左心室收縮末期內(nèi)徑(LVESD)、左心室舒張末期內(nèi)徑(LVEDD)、左心室收縮末期容積(LVESV)、左心室舒張末期容積(LVEDV),每只大鼠留取2個(gè)心動(dòng)周期圖像及參數(shù),最終值取2次心動(dòng)周期的平均值。

1.5.2血、尿生化指標(biāo) 采用尿蛋白定量測(cè)試盒(CBB法)檢測(cè)24 h尿蛋白水平,肌氨酸氧化酶法檢測(cè)SCr水平,脲酶法檢測(cè)BUN水平,競(jìng)爭(zhēng)抑制酶聯(lián)免疫分析法測(cè)定BNP水平,嚴(yán)格按照對(duì)應(yīng)試劑盒說(shuō)明書具體操作步驟和注意事項(xiàng)進(jìn)行。

1.5.3心、腎質(zhì)量指數(shù) 心臟質(zhì)量指數(shù)=心臟質(zhì)量/ 體重×100%,左心室質(zhì)量指數(shù)=左心室心超校正后質(zhì)量/體重×100%,左腎質(zhì)量指數(shù)=左腎質(zhì)量/體重×100%。

1.5.4心、腎組織病理形態(tài)和組織中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)、膠原蛋白Ⅰ、平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)表達(dá)情況 將心臟和腎臟組織置于4%甲醛溶液中固定24 h后進(jìn)行脫水、包埋、切片處理,按標(biāo)準(zhǔn)步驟進(jìn)行心臟和腎臟HE染色、馬松染色及免疫熒光染色。在200倍視野下隨機(jī)采集心臟和腎臟HE染色切片非梗死區(qū)圖像;在400倍光學(xué)顯微鏡下隨機(jī)選取馬松染色切片非梗死區(qū)10個(gè)非重復(fù)視野,用Image Pro Plus 6.0軟件分析膠原面積;在400倍光學(xué)顯微鏡下隨機(jī)選取組織免疫熒光切片非梗死區(qū)10個(gè)非重復(fù)視野,通過(guò) Image J 軟件處理后計(jì)算熒光強(qiáng)度。

2 結(jié) 果

2.1各組大鼠心臟超聲指標(biāo)比較 白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ各組大鼠CO、SV、LVEF、LVFS、LVAWs、LVAWd均明顯高于模型組(P均<0.05),LVEDV、LVESV、LVPWs、LVPWd、LVESD、LVEDD與模型組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05);白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ各組間各指標(biāo)比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。見表1及圖1。

圖1 各組心腎綜合征大鼠左心室短軸心臟超聲圖像

表1 各組心腎綜合征大鼠心臟超聲指標(biāo)比較

2.2各組大鼠血、尿生化指標(biāo)比較 白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ各組大鼠24 h尿蛋白及血SCr、BUN水平均明顯低于模型組(P均<0.05),白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ各組間24 h尿蛋白及血SCr、BUN水平比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05);白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ中、高劑量組大鼠血BNP水平均明顯低于模型組和白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ低劑量組(P均<0.05),白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ中、高劑量組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 各組心腎綜合征大鼠24 h尿蛋白及血SCr、BUN、BNP水平比較

2.3各組大鼠心、腎質(zhì)量指數(shù)比較 白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ低、中、高劑量組大鼠心臟質(zhì)量指數(shù)、左心室質(zhì)量指數(shù)、左腎質(zhì)量指數(shù)均呈逐步降低趨勢(shì),其中白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ高劑量組大鼠心臟質(zhì)量指數(shù)、左心室質(zhì)量指數(shù)和白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ各組大鼠左腎質(zhì)量指數(shù)均明顯低于模型組(P均<0.05),白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ各組間各指標(biāo)比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。見表3。

表3 各組心腎綜合征大鼠心臟、腎臟及左心室質(zhì)量指數(shù)比較

2.4各組大鼠心臟、腎臟組織形態(tài)學(xué)比較

2.4.1HE染色 與模型組相比,白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ各組非梗死區(qū)心肌細(xì)胞排列較整齊,細(xì)胞間質(zhì)局灶性纖維化及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)減少;白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ各組腎臟非梗死區(qū)腎小管結(jié)構(gòu)較整齊,腎小管呈囊性擴(kuò)張,腎小球增大、結(jié)構(gòu)較清晰,炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)減少。見圖2。

圖2 各組心腎綜合征大鼠心臟和腎臟組織HE染色表現(xiàn)(×200)

2.4.2馬松染色 ①心肌細(xì)胞纖維呈紅色,肌纖維之間填充的膠原組織呈藍(lán)色。模型組肌纖維排列紊亂,細(xì)胞間質(zhì)被大量藍(lán)色膠原組織填充,膠原沉積明顯;白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ各組大鼠心肌肌纖維排列較整齊,細(xì)胞間質(zhì)膠原沉積面積均明顯低于模型組(P均<0.05),且白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ中、高劑量組均明顯低于白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ低劑量組(P均<0.05),白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ高劑量組明顯低于白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ中劑量組(P<0.05)。②腎小管上皮細(xì)胞和部分腎小球呈紅染,部分腎小球和腎間質(zhì)含有膠原組織呈藍(lán)色。模型組大鼠腎小管上皮細(xì)胞萎縮較明顯,腎小管間質(zhì)和大部分腎小球可見明顯膠原組織填充;白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ各組大鼠腎小管萎縮有所改善,膠原面積均明顯低于模型組(P均<0.05),且白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ高劑量組均明顯低于白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ低、中劑量組(P均<0.05),白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ低、中劑量組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見圖3及圖4。

圖3 各組心腎綜合征大鼠心臟和腎臟組織馬松染色表現(xiàn)(×400)

圖4 各組心腎綜合征大鼠心臟和腎臟膠原面積比較

2.5各組大鼠心臟纖維化相關(guān)蛋白表達(dá)情況比較免疫熒光染色顯示,模型組大鼠心肌組織中TGF-β1、膠原蛋白Ⅰ呈塊狀分布;α-SMA主要呈環(huán)狀分布于血管壁,在心肌細(xì)胞間質(zhì)呈斑點(diǎn)狀分布。白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ各組大鼠心肌組織中TGF-β1、膠原蛋白Ⅰ呈點(diǎn)狀分布,TGF-β1、膠原蛋白Ⅰ、α-SMA表達(dá)強(qiáng)度均明顯低于模型組(P均<0.05);白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ高劑量組TGF-β1、α-SMA表達(dá)強(qiáng)度均明顯低于白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ低劑量組(P均<0.05),膠原蛋白Ⅰ表達(dá)強(qiáng)度明顯低于白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ低、中劑量組(P均<0.05);白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ中劑量組α-SMA表達(dá)強(qiáng)度明顯低于白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ低劑量組(P<0.05)。見圖5及圖6。

圖5 各組心腎綜合征大鼠心臟組織中TGF-β1、膠原蛋白Ⅰ、α-SMA免疫熒光染色表現(xiàn)(×400)

圖6 各組心腎綜合征大鼠心臟組織中TGF-β1、膠原蛋白Ⅰ、α-SMA陽(yáng)性表達(dá)免疫熒光強(qiáng)度

2.6各組大鼠腎臟纖維化相關(guān)蛋白表達(dá)情況比較免疫熒光染色顯示,TGF-β1主要表達(dá)于腎小管間質(zhì)和腎小球基底膜;膠原蛋白Ⅰ主要表達(dá)于腎小管間質(zhì),呈點(diǎn)狀分布;α-SMA主要呈環(huán)狀分布于血管壁,在腎小管間質(zhì)及腎小球基底膜呈斑點(diǎn)狀分布。白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ各組大鼠腎臟組織中TGF-β1、膠原蛋白Ⅰ、α-SMA表達(dá)強(qiáng)度均明顯低于模型組(P均<0.05);白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ高劑量組TGF-β1表達(dá)強(qiáng)度明顯低于白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ低劑量組(P<0.05);白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ中、高劑量組膠原蛋白Ⅰ表達(dá)強(qiáng)度均明顯低于白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ低劑量組(P均<0.05),且白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ高劑量組明顯低于白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ中劑量組(P<0.05);白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ各組間α-SMA表達(dá)強(qiáng)度比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。見圖7及圖8。

圖7 各組心腎綜合征大鼠腎臟組織中TGF- 1、膠原蛋白Ⅰ、α-SMA免疫熒光染色表現(xiàn)(×400)

圖8 各組心腎綜合征大鼠腎臟組織中TGF-β1、膠原蛋白Ⅰ、α-SMA陽(yáng)性表達(dá)免疫熒光強(qiáng)度

3 討 論

心腎綜合征是一組多種病因、多種狀態(tài)的癥候群,臨床表現(xiàn)復(fù)雜、多樣,其病理生理學(xué)機(jī)制考慮與血流動(dòng)力學(xué)障礙、炎癥與氧化應(yīng)激、器官交互損傷有關(guān)[10]。臨床上心腎綜合征患者常表現(xiàn)為心臟收縮功能減退,射血分?jǐn)?shù)降低,心搏量減少,腎小球?yàn)V過(guò)率降低,腎小管重吸收功能減退,24 h尿量減少,尿蛋白明顯增加,治療手段主要為強(qiáng)心、利尿、擴(kuò)張血管、抑制RASS系統(tǒng)激活、心臟再同步化治療、超濾和透析等[11],但很難從根本上遏制或者延緩心腎綜合征病程進(jìn)展。有些心腎綜合征治療策略存在矛盾,比如呋塞米等利尿劑雖然可以明顯降低心臟前負(fù)荷,減少水鈉潴留,但可能會(huì)導(dǎo)致腎功能進(jìn)一步損害[12]。ACEI或ARB類藥物可以抑制RASS系統(tǒng)激活、擴(kuò)張血管,同時(shí)也存在損害腎功能和導(dǎo)致高鉀血癥的風(fēng)險(xiǎn)[13]。

近年研究發(fā)現(xiàn),在缺血/再灌注SD大鼠模型中,白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ預(yù)處理可以減少心梗面積,通過(guò)抑制Caspase-3信號(hào)通路的激活來(lái)抑制心肌細(xì)胞的凋亡,同時(shí)對(duì)心肌內(nèi)線粒體損傷有保護(hù)作用[14]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ各組大鼠SV、CO、LVEF、LVFS、LVAWs、LVAWd均明顯高于模型組,白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ中、高劑量組大鼠血BNP水平和白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ各組大鼠24 h尿蛋白及血SCr、BUN水平均明顯低于模型組,說(shuō)明白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ可以改善心腎綜合征大鼠心臟收縮功能和腎功能,抑制心室重構(gòu)。組織病理學(xué)觀察發(fā)現(xiàn),模型組大鼠心臟和腎臟大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),而白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ各組大鼠心臟、腎臟非梗死區(qū)組織炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)明顯減少,表明白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ具有抗炎作用。

纖維化是組織過(guò)度修復(fù)過(guò)程,其顯著特征為肌纖維母細(xì)胞增生以及細(xì)胞外基質(zhì)過(guò)度沉積。研究表明,包括巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和肌成纖維細(xì)胞在內(nèi)的間質(zhì)細(xì)胞利用半乳糖凝集素-3和TGF-β1的共同信號(hào)通路,導(dǎo)致成纖維細(xì)胞和肌成纖維細(xì)胞增殖,其產(chǎn)生和分泌膠原蛋白前體,在細(xì)胞外間質(zhì)中交聯(lián)形成成熟的膠原蛋白,加重組織的纖維化[15]。TGF-β1參與許多病理生理過(guò)程,可調(diào)節(jié)各種組織分化和參與纖維化,其可直接誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞分化,同時(shí)在募集纖維細(xì)胞和促進(jìn)肌成纖維細(xì)胞分化中發(fā)揮重要作用[16],可促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的生成和沉積,抑制蛋白酶合成從而減少基質(zhì)降解[17]。心臟組織纖維化是心臟發(fā)生重構(gòu)過(guò)程中的重要病理改變,并最終導(dǎo)致心臟功能下降[18]。TGF-β1/Smads 在心肌纖維化的進(jìn)程中起著關(guān)鍵性的作用,是公認(rèn)的心肌纖維化信號(hào)通路[19-20]。腎臟纖維化主要表現(xiàn)為腎小球硬化、腎間質(zhì)纖維化及腎血管硬化[21],其中TGF-β1介導(dǎo)的成纖維細(xì)胞激活是腎臟纖維化的重要驅(qū)動(dòng)力,TGF-β1/Smads信號(hào)通路是腎臟纖維化的關(guān)鍵調(diào)節(jié)者[22]?？梢奣GF-β1在心臟和腎臟纖維化中具有重要推動(dòng)作用,通過(guò)抑制TGF-β1的表達(dá)可以減輕心腎纖維化程度。既往研究表明,白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ可通過(guò)抑制TGF-β1/Smads信號(hào)通路的激活,抑制腎臟上皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞的纖維化[23-24]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,模型組大鼠心臟和腎臟梗死區(qū)大量纖維結(jié)締組織填充,非梗死區(qū)膠原沉積明顯增多,白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ各組心臟和腎臟非梗死區(qū)膠原沉積較模型組明顯減少,證實(shí)白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ可以明顯抑制心腎綜合征大鼠心腎組織纖維化,且呈一定劑量依賴性。進(jìn)一步心腎組織免疫熒光染色發(fā)現(xiàn),白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ各組大鼠心臟和腎臟組織中TGF-β1、膠原蛋白Ⅰ、α-SMA熒光表達(dá)強(qiáng)度較模型組明顯降低,表明白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ抗心腎纖維化的作用可能與抑制TGF-β1信號(hào)通路,減少心臟和腎臟組織中α-SMA、膠原蛋白Ⅰ的合成有關(guān)。

綜上所述,白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ可以改善心腎綜合征大鼠心臟收縮功能、腎小球?yàn)V過(guò)功能和腎小管重吸收功能,抑制心臟肥大,其可能通過(guò)抑制TGF-β1的表達(dá)以及膠原蛋白Ⅰ、α-SMA生成發(fā)揮抗心臟、腎臟組織纖維化作用。但本研究由于設(shè)備因素限制,未能測(cè)量大鼠血壓,缺少衡量心腎功能的一個(gè)重要指標(biāo);另外由于時(shí)間和經(jīng)費(fèi)的原因,未定量分析TGF-β1、膠原蛋白I、α-SMA的表達(dá)情況。故本實(shí)驗(yàn)結(jié)論有待進(jìn)一步證實(shí),白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ抗心腎纖維化作用機(jī)制尚需系統(tǒng)研究。

利益沖突:所有作者均聲明不存在利益沖突。