臍帶血IL-36γ水平與早期嬰兒濕疹的關(guān)系分析

盧旭俊，王文革，楊云月，楊云彥

濕疹是一種慢性、復(fù)發(fā)性、炎癥性皮膚病。臨床上特應(yīng)性皮炎、接觸性皮炎、結(jié)節(jié)性皮炎等均有濕疹樣的表現(xiàn)［1-3］。一項(xiàng)研究顯示，42 d的嬰兒濕疹患病率高達(dá)57.3%～75.7%［4］。濕疹的確切發(fā)病機(jī)制目前尚不明確。研究表明濕疹的發(fā)病主要與Th1、Th2、Th17 細(xì)胞因子表達(dá)水平變化相關(guān)［5-6］。白細(xì)胞介素（IL）-36γ是IL-1細(xì)胞因子家族中的成員，廣泛存在于人體各種組織中。在多數(shù)情況下，IL-36γ 作為炎癥介質(zhì)，通過刺激IL-6和腫瘤壞死因子（TNF）-α等細(xì)胞因子表達(dá)，增強(qiáng)Th1細(xì)胞的免疫反應(yīng)，參與炎癥的發(fā)生［7-8］。此外，IL-36γ 與IL-13 存在正相關(guān)，可通過Th2 細(xì)胞加劇炎癥反應(yīng)［9］。已有研究發(fā)現(xiàn)IL-36γ參與濕疹的發(fā)病過程［10］。臍帶血是早期易于獲取的生物標(biāo)本，其所含細(xì)胞因子可作為嬰兒濕疹的潛在生物標(biāo)志物。臍帶血中Th2細(xì)胞因子（IL-4）水平上升，以及Th1 細(xì)胞因子（干擾素-γ）水平下降會增加濕疹的發(fā)生率［11］。然而，尚缺乏臍帶血IL-36γ與早期嬰兒濕疹的相關(guān)性研究。本研究通過檢測臍帶血IL-36γ水平，旨在揭示早期嬰兒濕疹與IL-36γ的相關(guān)性，以便早期識別高濕疹風(fēng)險(xiǎn)人群，實(shí)施相應(yīng)的預(yù)防措施，降低嬰兒濕疹的發(fā)病率或減輕濕疹的嚴(yán)重程度。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2020 年9 月—2021 年5 月空軍軍醫(yī)大學(xué)空軍特色醫(yī)學(xué)中心出生的新生兒。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）37～41+6周出生的足月新生兒。（2）出生體質(zhì)量2 500～4 000 g。（3）出生Apgar 評分≥8 分。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）先天畸形。（2）出生前有宮內(nèi)窘迫。（3）出生后有高膽紅素血癥、新生兒出血癥等新生兒疾病。（4）先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥、先天性甲狀腺功能低下癥、苯丙酮尿癥、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥等新生兒疾病篩查結(jié)果異常者。共納入59例，其中男28例，女31例，平均體質(zhì)量（3 316.95±312.06）g。本研究已獲得中國人民解放軍空軍特色學(xué)中心倫理委員會批準(zhǔn)［空特（科研）第2023-28-PJ01］，所有新生兒家長均已知曉并簽署知情同意書。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 早期嬰兒濕疹診斷標(biāo)準(zhǔn)：（1）出生2 周后發(fā)疹。（2）與皮疹相對應(yīng)的瘙癢和（或）易激惹/睡眠障礙。（3）符合以上2條者，加上以下2條中任意1條即可診斷濕疹：面頰部和（或）頭皮和（或）四肢伸側(cè)的濕疹樣皮損；身體其他任意部位的濕疹樣皮損，同時(shí)伴有干皮癥。需排除接觸性皮炎、銀屑病、疥瘡，或遺傳、代謝性疾病和淋巴瘤。

濕疹嚴(yán)重度標(biāo)準(zhǔn)：采用趙辨［12］改良的濕疹面積及嚴(yán)重度指數(shù)評分法（EASI）評價(jià)濕疹的嚴(yán)重程度。輕度濕疹：0.1～7分；中度濕疹：＞7～21 分；重度濕疹：＞21～50 分；極重度濕疹：＞50分。

1.3 資料收集 收集一般資料：性別、出生體質(zhì)量、分娩方式，胎齡，母親年齡、孕期是否體?。ㄓ袩o糖尿病、感染、甲亢等并發(fā)癥）、有無家族過敏史及母親孕期海鮮類食物攝入次數(shù)是否≥3次。

1.4 新生兒臍帶血IL-36γ 檢測 新生兒出生后，立刻采集臍帶血，以3 000 r/min 離心5 min，并將樣本存于EP 管中，冰箱保存。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測定臍帶血IL-36γ 水平。試劑盒購自美國賽默飛世爾科技公司，將所需試劑和待測標(biāo)本從冰箱取出并在常溫下按照說明書要求進(jìn)行操作。最后使用酶標(biāo)儀在450 nm 波長下測定樣本的光密度（OD）值，最后通過相應(yīng)軟件計(jì)算得到IL-36γ質(zhì)量濃度。

1.5 隨訪及分組 在入組嬰兒42 d門診體檢時(shí)進(jìn)行隨訪觀察，了解濕疹發(fā)生情況（是否發(fā)生和嚴(yán)重程度）、嬰兒喂養(yǎng)方式。根據(jù)隨訪結(jié)果，將嬰兒分為濕疹組（40 例，67.80%）和無濕疹組（19 例，32.20%）；輕度濕疹患兒35 例（87.5%），中度5例（12.5%），無重度或極重度患兒。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 27.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。正態(tài)分布的計(jì)量資料采用±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，非正態(tài)分布的計(jì)量資料采用M（P25，P75）表示，組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以例（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。多因素Logistic 回歸分析早期嬰兒濕疹的影響因素，并繪制受試者工作特征（ROC）曲線評估診斷效能。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組新生兒一般資料比較 濕疹組母親孕期海鮮類食物攝入次數(shù)≥3 次比例高于無濕疹組（P＜0.05），2組其余指標(biāo)的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表1。

Tab.1 Comparison of general data between the two groups表1 2組一般資料比較

2.2 臍帶血IL-36γ 水平與早期嬰兒濕疹的關(guān)系 濕疹組臍帶血IL-36γ水平（ng/L）高于無濕疹組［433.32（157.95，1 205.40）vs. 90.76（40.55，540.24），Z=2.993，P＜0.01］。

2.3 不同嚴(yán)重度濕疹患兒IL-36γ 水平比較 輕度濕疹患者和中度濕疹患者中臍帶血IL-36γ 水平（ng/L）差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義［521.16（154.56，1 289.71）vs.247.20（120.25，684.27），Z=0.961，P＞0.05］。

2.4 早期嬰兒濕疹相關(guān)影響因素的Logistic 回歸分析 以母親孕期海鮮類食物攝入次數(shù)≥3 次（無=0，有=1）及IL-36γ 水平為自變量，以濕疹發(fā)生情況為因變量（無=0，有=1），進(jìn)行Logistics 回歸分析，結(jié)果顯示臍帶血IL-36γ 水平升高及母親孕期海鮮類食物攝入次數(shù)≥3 次是早期嬰兒濕疹發(fā)生的危險(xiǎn)因素（P＜0.05），見表2。

Tab.2 Multivariate Logistics regression analysis of infantile eczema表2 嬰兒濕疹發(fā)生的多因素Logistics回歸分析

2.5 臍帶血IL-36γ 水平對早期嬰兒濕疹的預(yù)測效能 ROC結(jié)果顯示，臍帶血IL-36γ預(yù)測早期嬰兒濕疹發(fā)生的AUC（95%CI）為0.743（0.611～0.874），P＜0.05，敏感度為87.6%，特異度為57.9%，截?cái)嘀禐?03.823 ng/L，見圖1。

Fig.1 ROC curve of cord blood IL-36γ level predicting early infant eczema圖1 臍帶血IL-36γ水平對早期嬰兒濕疹預(yù)測的ROC曲線圖

3 討論

濕疹作為一種過敏疾病，影響了全球15%～30%的兒童［13］，且該病患病率還在逐年上升［14］。雖然濕疹的確切發(fā)病機(jī)制尚未完全清楚，但目前推測可能與環(huán)境、遺傳以及皮膚屏障功能的改變等因素有關(guān)。濕疹是“濕疹-過敏性鼻炎-哮喘”過敏進(jìn)程的起始階段。研究表明，嬰兒期濕疹會增加其后續(xù)發(fā)生過敏性鼻炎、哮喘的風(fēng)險(xiǎn)［15-17］。因此，早期預(yù)防和治療可能有助于降低濕疹的發(fā)生率及病情的嚴(yán)重程度。此外，食物過敏與濕疹之間的關(guān)聯(lián)緊密。研究發(fā)現(xiàn)，母乳喂養(yǎng)期間母親攝入的不同食物可能會影響嬰兒濕疹的發(fā)病率［18］。本研究結(jié)果表明，孕期海鮮類食物攝入次數(shù)≥3次會增加?jì)雰涸缙诎l(fā)生濕疹的風(fēng)險(xiǎn)，與既往研究相吻合［19］，提示可以通過調(diào)整母親孕期飲食來降低濕疹的發(fā)病率。既往研究顯示，具有家族過敏史的嬰兒更容易發(fā)生濕疹［20］。但在本研究中，家族過敏史與濕疹之間并無明顯關(guān)聯(lián)，可能與本研究的樣本量不足有關(guān)。

IL-36γ 作為IL-36 家族的一員，通過引發(fā)Th1、Th2、Th17 細(xì)胞的失衡參與皮膚炎癥反應(yīng)的過程［21-22］。IL-36γ 可以通過增強(qiáng)髓樣分化因子、絲裂原活化蛋白激酶、核因子κB和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3的信號傳導(dǎo)，上調(diào)CD80、CD86等因子表達(dá)；同時(shí)，IL-36γ 可通過樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)產(chǎn)生IL-1β、IL-6、IL-23、TNF-α 等細(xì)胞因子，誘發(fā)Th1 和Th17 細(xì)胞的應(yīng)答［3，22］。此外，IL-36γ還可誘導(dǎo)CD4+T細(xì)胞和脾細(xì)胞產(chǎn)生TNF-γ、IL-4 等細(xì)胞因子，誘導(dǎo)了Th1 和Th2 細(xì)胞應(yīng)答［22-23］。Th1、Th2 和Th17 細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子也可以提升IL-36γ 的表達(dá)水平。因此，IL-36γ 和Th1、Th2、Th17 細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子形成一個(gè)正向調(diào)節(jié)機(jī)制［21-23］。而高水平的IL-36γ 以及Th1、Th2、Th17細(xì)胞會誘發(fā)皮膚出現(xiàn)炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致濕疹產(chǎn)生［24-25］。在臍帶血中Th2細(xì)胞因子水平升高或Th1、Th17細(xì)胞因子水平降低，均與嬰兒濕疹發(fā)病有關(guān)［11，26-27］。本研究濕疹組的臍帶血中IL-36γ水平升高，可能與Th2 細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子水平升高相關(guān)。然而，這一具體作用機(jī)制需要進(jìn)一步深入研究。

研究表明，濕疹患者皮損和血清中的IL-36γ水平升高，且IL-36γ 參與急性濕疹向慢性濕疹轉(zhuǎn)變［24，28］。Otobe等［10］研究發(fā)現(xiàn)，濕疹患者皮膚及血液中的IL-36γ 水平高于健康人群。Berekméri 等［29］也發(fā)現(xiàn)濕疹患者皮損區(qū)的IL-36γ mRNA 及蛋白水平升高。Suárez-Fari?as等［30］觀察到中、重度濕疹患者的皮損區(qū)IL-36γ 的表達(dá)水平升高。金黃色葡萄球菌是一種與濕疹相關(guān)的革蘭陽性菌，在大多數(shù)的濕疹患者皮膚表面都可檢測到，且與濕疹的病理機(jī)制有關(guān)［31］。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，金黃色葡萄球菌在小鼠皮膚上通過IL-36γ 介導(dǎo)的髓樣分化因子（MyD88）信號通路，誘導(dǎo)T 細(xì)胞產(chǎn)生IL-17，從而介導(dǎo)了皮膚炎癥的產(chǎn)生，進(jìn)一步加劇了皮膚的損害［25］。可見，IL-36γ 升高可能與濕疹患者的皮膚屏障功能損害密切相關(guān)。本研究Logistic 回歸分析結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)，臍帶血中IL-36γ水平升高是影響濕疹發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。ROC曲線分析顯示，臍帶血IL-36γ的水平對早期嬰兒濕疹有一定的診斷效能。臍帶血中的炎性因子水平能反映遺傳或環(huán)境等多種因素對胎兒免疫系統(tǒng)的影響［32］。高IL-36γ 水平可能表示胎兒在母體內(nèi)已對特定抗原產(chǎn)生過敏反應(yīng)。如果出生后再次接觸同類抗原，會破壞皮膚的屏障功能，從而增加患濕疹的風(fēng)險(xiǎn)。因此，檢測新生兒臍帶血IL-36γ水平，并在早期階段采取相應(yīng)措施，有助于重建皮膚屏障功能，降低濕疹的嚴(yán)重程度，防止?jié)裾钸M(jìn)一步發(fā)展為過敏性鼻炎或哮喘，提高患兒的生活質(zhì)量。此外，本研究中的嬰兒在早期階段，大多表現(xiàn)為輕度濕疹，而輕度與中度濕疹間的IL-36γ水平并無明顯差異，表明臍帶血IL-36γ水平并未與濕疹的嚴(yán)重程度直接相關(guān)。

綜上，臍帶血IL-36γ水平升高為早期嬰兒濕疹的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，早期檢測臍帶血IL-36γ水平對預(yù)測嬰兒濕疹的發(fā)生有一定的價(jià)值。然而，本研究樣本量有限，隨訪時(shí)間不足，研究對象僅局限于北京一家醫(yī)院出生的嬰兒，后續(xù)研究將擴(kuò)大樣本量，延長隨訪時(shí)間，并對患兒在3、6、12月的濕疹患病情況進(jìn)行追蹤。