血清SCCA、HE4表達(dá)與宮頸癌MRI征象的相關(guān)性

王成雙 王華杰 李嬋嬋 郭成

(青島大學(xué)附屬青島市中心醫(yī)院 1婦瘤二科,山東 青島 266042;2婦科;3分子影像科)

宮頸癌是較為常見(jiàn)的女性生殖系統(tǒng)腫瘤,可發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,嚴(yán)重影響患者生存情況〔1〕。及早診斷、及時(shí)給予宮頸癌患者適當(dāng)治療,是提高患者生存率的關(guān)鍵。隨著影像學(xué)發(fā)展,磁共振成像(MRI)逐漸用于宮頸癌診斷,其可輔助評(píng)估患者預(yù)后,判定淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、宮旁浸潤(rùn)情況〔2〕。另外,鱗狀細(xì)胞癌抗原(SCCA)在宮頸癌患者血清中上調(diào),具有輔助診斷宮頸癌的潛在價(jià)值〔3〕;人附睪上皮分泌蛋白(HE)4在宮頸癌患者血清中呈高水平,有利于診斷宮頸癌、評(píng)估患者病情及預(yù)后〔4〕。但血清SCCA、HE4水平與宮頸癌患者M(jìn)RI征象的關(guān)系鮮有研究。本研究擬分析兩者與MRI征象的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選取2019年6月至2020年1月青島大學(xué)附屬青島市中心醫(yī)院宮頸癌患者55例為宮頸癌組,其中年齡62～74歲,平均(68.00±3.06)歲;另選取同期體檢健康女性55例為健康組,其中年齡60～73歲,平均(66.50±3.32)歲。兩組年齡差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。宮頸癌根據(jù)《宮頸癌及癌前病變規(guī)范化診療指南》相關(guān)宮頸癌判定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷〔5〕。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)患者均符合宮頸癌有關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn),經(jīng)病理檢查確診為宮頸癌;(2)患者病歷檢查資料均完整,均有清晰的MRI征象;(3)年齡60～74歲;(4)患者術(shù)前均未行放化療。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)其他免疫系統(tǒng)疾病、感染性疾病、惡性腫瘤者;(2)合并嚴(yán)重肝、腎功能障礙者;(3)失訪者。受試者及其家屬均簽署知情同意書(shū)。本研究已獲青島大學(xué)附屬青島市中心醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2主要試劑與儀器 人SCCA酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒(貨號(hào):DRE11971)購(gòu)于上海邦奕生物科技有限公司,人HE4 ELISA試劑盒(貨號(hào):JLC20037)購(gòu)于江西江藍(lán)純生物試劑有限公司。酶標(biāo)儀(型號(hào):CLARIOstar Plus)購(gòu)買(mǎi)于伯齊科技有限公司,超導(dǎo)磁共振檢查儀(型號(hào):Achieva 1.5T)購(gòu)買(mǎi)于飛利浦公司。

1.3樣本收集 利用采血管收集宮頸癌患者行MRI檢查前、健康女性體檢當(dāng)日清晨空腹外周血3～4 ml,室溫自然凝集35 min,4 000 r/min離心6 min,分離出血清,保存于-20 ℃冰箱中,用于檢測(cè)血清SCCA、HE4水平。

1.4ELISA檢測(cè)血清SCCA、HE4水平 從冰箱中取出人SCCA、HE4 ELISA試劑盒內(nèi)配帶的標(biāo)準(zhǔn)品,按相應(yīng)說(shuō)明書(shū)將其標(biāo)準(zhǔn)品配制成不同濃度溶液,檢測(cè)各標(biāo)準(zhǔn)品溶液吸光度值,制作SCCA、HE4的標(biāo)準(zhǔn)回歸曲線;將血清解凍,平衡至室溫,于酶標(biāo)板中加適量血清,置于37 ℃培養(yǎng)箱中,孵育25 min,加生物素工作液(含SCCA、HE4抗體),37 ℃孵育約45 min,棄反應(yīng)液,用磷酸緩沖液洗2次;加顯色液,37 ℃孵育約30 min,加終止液,于450 nm處測(cè)各樣本的吸光度,計(jì)算血清SCCA、HE4濃度。

1.5MRI檢查 利用8US TORSOPA線圈及3.0T超導(dǎo)磁共振檢查儀(型號(hào):Discovery MR 750 plus 3.0 T,美國(guó)GE公司)進(jìn)行MRI檢查。參數(shù):矢狀T2WI 序列:TE為98 ms,TR為4 235 ms,矩陣為320×256,DFOV為26×40 cm,層距1 mm,層厚4.5 mm;軸位T2WI序列:TE為985 ms,TR為6 280 ms,矩陣為320×320,DFOV為36×56 cm,層距1 mm,層厚5 mm;軸位T1WI序列:TE為1.96 ms,TR為4.33 ms,矩陣為320×256,DFOV為42×65 cm,層距1 mm,層厚5 mm;軸位DWI序列:TE為64.9 ms,TR為2 000 ms,矩陣為128×128,層距1 mm,層厚5 mm,b=1 000。

由兩名資深磁共振醫(yī)生利用雙盲法對(duì)MRI進(jìn)行分析。于各序列觀察宮頸癌患者M(jìn)RI學(xué)征象,評(píng)估腫瘤直徑、宮旁浸潤(rùn)、宮頸浸潤(rùn)、盆壁受侵、陰道受侵、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況。在國(guó)際婦產(chǎn)科學(xué)聯(lián)合會(huì)(FIGO)基礎(chǔ)上進(jìn)行MRI判斷,在T2WI上見(jiàn)宮頸腫瘤組織高信號(hào),測(cè)定腫瘤直徑,以4 cm為界限;宮頸病灶外緣模糊、不規(guī)則或有軟組織,則判斷為宮旁受侵;病灶局限于宮頸內(nèi),其周?chē)@示正常宮頸間質(zhì)低信號(hào)環(huán)完整,若低信號(hào)環(huán)不完整則判斷為宮頸間質(zhì)受侵(宮頸浸潤(rùn));宮腔T2WI顯示正常,而宮頸壁三層結(jié)構(gòu)顯示消失,則判斷為盆壁受侵(宮體受侵);腫瘤突破陰道,陰道T2WI顯示略低信號(hào),則判斷為陰道受侵;T2WI或壓脂序列中呈高信號(hào),DW1呈高信號(hào),且淋巴結(jié)直徑>10 cm,則判斷為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS25.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1兩組血清SCCA、HE4水平比較 與健康組相比,宮頸癌組血清SCCA、HE4水平明顯升高(P<0.001)。見(jiàn)表1。

表1 兩組血清SCCA、HE4水平比較

2.2宮頸癌患者不同參數(shù)間血清SCCA、HE4水平比較 宮頸癌患者血清SCCA、HE4水平與其臨床分期及腫瘤分化程度有關(guān)(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 宮頸癌患者不同參數(shù)間血清SCCA、HE4水平比較

2.3宮頸癌患者影像學(xué)表現(xiàn) 宮頸明顯增粗,T1WI稍低信號(hào),T2WI略高信號(hào),DWI序列為明顯高信號(hào)病灶大小清晰可見(jiàn),下端侵犯陰道,見(jiàn)圖1。

圖1 宮頸癌侵犯陰道

2.4血清SCCA水平與宮頸癌患者M(jìn)RI征象的關(guān)系 與腫瘤直徑<4 cm者、宮旁浸潤(rùn)陰性者、宮頸浸潤(rùn)陰性者、盆壁受侵陰性者、陰道受侵陰性者、遠(yuǎn)處未轉(zhuǎn)移者、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性者相比,宮頸癌患者腫瘤直徑≥4 cm、宮旁浸潤(rùn)陽(yáng)性者、宮頸浸潤(rùn)陽(yáng)性者、盆壁受侵陽(yáng)性者、陰道受侵陽(yáng)性者、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性者血清SCCA、HE4水平均明顯升高(P<0.001)。見(jiàn)表3。

表3 血清SCCA、HE水平與宮頸癌患者M(jìn)RI征象的關(guān)系

3 討 論

宮頸癌發(fā)生率較高,其晚期生存率較低,對(duì)女性健康構(gòu)成極度威脅〔6,7〕。目前,宮頸癌發(fā)病相關(guān)因素尚未闡述完全,但學(xué)者認(rèn)為其發(fā)病與人乳頭瘤病毒(HPV)感染、免疫功能異常、多孕多產(chǎn)、信號(hào)傳導(dǎo)異常、細(xì)胞異常增殖等密切相關(guān)〔8,9〕。此外,MRI可有效評(píng)估原發(fā)腫瘤、陰道浸潤(rùn)、宮旁侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及術(shù)后情況〔10〕。因此,尋找與宮頸癌發(fā)病及MRI征象相關(guān)的指標(biāo),對(duì)診治宮頸癌有一定積極意義。

SCCA是一種糖蛋白,可抑制腫瘤細(xì)胞程序性死亡,通過(guò)調(diào)節(jié)信號(hào)傳導(dǎo),進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖,可作為婦科腫瘤的血清指標(biāo)〔11〕。研究發(fā)現(xiàn),SCCA在宮頸癌患者血清中水平升高,其可能參與宮頸癌病變過(guò)程,有利于判定宮頸癌患者病理分級(jí)〔12〕;此外,SCCA在宮頸癌患者中表達(dá)失調(diào),其與腫瘤分化程度、病理類(lèi)型、預(yù)后復(fù)發(fā)關(guān)系密切,SCCA有望成為診斷、評(píng)估宮頸癌患者預(yù)后的標(biāo)志物〔13〕。以上研究表明,SCCA水平異?？赡芘c宮頸癌病理發(fā)展顯著相關(guān)。本研究中宮頸癌組血清SCCA水平明顯高于健康組,與王燕翔等〔12〕研究結(jié)果相符,提示SCCA可能在宮頸癌發(fā)病進(jìn)展中具有重要作用,推測(cè)高水平SCCA可能通過(guò)調(diào)節(jié)相關(guān)信號(hào)通路,進(jìn)而促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞增殖、遷移,抑制凋亡,從而在宮頸癌發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮促進(jìn)作用,但其具體作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究證實(shí)。另外,HE4在腫瘤細(xì)胞染色質(zhì)組裝、合成中起重要作用,其水平在宮頸癌患者血清中顯著升高,HE4可作為診斷宮頸癌的輔助指標(biāo),有助于臨床篩查宮頸癌患者〔14〕。本研究中宮頸癌患者血清HE4水平明顯高于體檢健康者,與鄧冰彬等〔4〕研究結(jié)果一致,提示HE4可能與宮頸癌發(fā)生發(fā)展有關(guān),究其原因,高水平HE4可能通過(guò)調(diào)節(jié)有關(guān)靶基因及信號(hào)傳導(dǎo),影響機(jī)體免疫應(yīng)答,促進(jìn)血管新生、宮頸癌細(xì)胞增殖,抑制宮頸癌細(xì)胞凋亡,從而在宮頸癌發(fā)病進(jìn)程中起作用,但仍需深入探究其作用機(jī)制。且宮頸癌患者血清SCCA、HE4水平與其臨床分期及腫瘤分化程度均有關(guān),宮頸癌患者臨床分期越晚、分化程度越高,其血清SCCA、HE4水平越高,提示SCCA、HE4與宮頸癌患者臨床進(jìn)展有關(guān),關(guān)于其具體機(jī)制還需進(jìn)一步探究。

MRI可多方位、多序列成像,具有較高組織分辨率,正常組織與腫瘤組織影像學(xué)信號(hào)存在明顯差異,其不僅可顯示病灶大小、位置、形態(tài),還可顯示腫瘤向周?chē)址盖闆r〔15,16〕。既往研究發(fā)現(xiàn),宮頸癌患者行MRI檢查,其宮頸區(qū)表現(xiàn)為不規(guī)則分葉狀或類(lèi)圓形的軟組織腫塊影,T2WI呈中高信號(hào),T1WI呈等信號(hào)/稍低信號(hào),DWI序列呈高信號(hào),壓脂序列呈略高信號(hào),有助于判斷腹股溝、盆腔區(qū)淋巴結(jié)影、盆壁及宮旁侵犯,對(duì)宮頸癌具有較高診斷價(jià)值〔17〕。另外,魏榮富等〔2〕研究表明宮頸癌患者血清SCCA水平與盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、宮旁浸潤(rùn)相關(guān),其有利于預(yù)測(cè)宮頸癌患者預(yù)后;鄧冰彬等〔4〕研究認(rèn)為宮頸癌患者血清HE4水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤浸潤(rùn)深度相關(guān),HE4參與并影響宮頸癌病變進(jìn)程。本研究結(jié)果顯示,MRI可清晰顯示病灶大小,且血清SCCA、HE4水平與腫瘤大小、宮旁浸潤(rùn)、宮頸浸潤(rùn)、盆壁受侵、陰道受侵、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān),進(jìn)一步提示SCCA、HE4可能在宮頸癌發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用,宮頸癌患者血清SCCA、HE4水平與MRI征象密切相關(guān)。但本研究未深入探究SCCA、HE4在宮頸癌中的作用機(jī)制,且未評(píng)估SCCA、HE4、MRI對(duì)宮頸癌的診斷價(jià)值,后期將擴(kuò)大樣本量進(jìn)行深入探討。

綜上,宮頸癌患者血清SCCA、HE4水平均顯著升高,兩者均可能參與并影響宮頸癌病理進(jìn)程,與MRI征象關(guān)系密切,檢測(cè)血清SCCA、HE4水平有利于臨床篩查宮頸癌患者。