• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    丁香酚對褐菖鲉的麻醉效果

    2023-12-21 16:22:38陳欣怡王好學(xué)徐開達(dá)李鵬飛周永東
    關(guān)鍵詞:丁香酚麻醉劑魚體

    陳欣怡,王好學(xué),徐開達(dá),李鵬飛,周永東

    (1.浙江海洋大學(xué)海洋與漁業(yè)研究所/2.浙江省海洋水產(chǎn)研究所,農(nóng)村農(nóng)業(yè)部重點(diǎn)漁場漁業(yè)資源科學(xué)觀測實(shí)驗(yàn)站,浙江省海洋漁業(yè)資源可持續(xù)利用技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,浙江 舟山 316021;3.浙江海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院,浙江 舟山 316022)

    褐菖鲉(Sebastiscus marmoratus)隸屬硬骨魚綱(Osteichthyes)鲉科(Scorpaenidae)菖鲉屬(Sebastiscus),俗稱石頭鱸、石九公等[1],其營養(yǎng)價(jià)值豐富,是沿海重要的經(jīng)濟(jì)魚種[2-3]。近年來由于人類過度捕撈,褐菖鲉資源衰退嚴(yán)重,為補(bǔ)充其資源量,相關(guān)部門已連續(xù)多年開展增殖放流活動(dòng)[4],有研究表明增殖放流過程中標(biāo)志、運(yùn)輸?shù)拳h(huán)節(jié)可能引發(fā)魚體應(yīng)激造成損耗[5],且褐菖鲉受到外部刺激時(shí)背部硬鰭條會豎起展開,容易使操作人員受傷,不利于相關(guān)生產(chǎn)活動(dòng)和實(shí)驗(yàn)操作開展。楊州等[6-7]指出合理使用麻醉劑可以抑制麻醉對象中樞神經(jīng),使其在一定時(shí)間內(nèi)進(jìn)入低消耗休眠狀態(tài),從而在受外界刺激時(shí)減少應(yīng)激反應(yīng),降低損傷及致死危害,有利于提高魚苗放流的成活率。因此,研究麻醉劑對褐菖鲉的麻醉效果有重要實(shí)際意義。

    目前魚用麻醉劑有包括丁香酚、MS-222、苯唑卡因等十幾種[8-9],其中丁香酚不僅價(jià)廉易得,而且麻醉效率較高,其代謝物能夠快速從血液和組織中排出,不會對海洋生物和人體造成毒害影響[10],在牙科醫(yī)學(xué)鎮(zhèn)痛及水產(chǎn)動(dòng)物麻醉方面應(yīng)用廣泛[11-12]。丁香酚用于各類魚種的麻醉研究已見諸多報(bào)道,包括大黃魚(Larimichthys crocea)、半滑舌鰨(Cynoglossus semilaevis)、大口黑鱸(Micropterus salmoides)、刀鱭(Coilia nasus)、暗紋東方鲀(Takifugu obscurus)等30 多種[13-23],上述研究發(fā)現(xiàn)麻醉不同魚種適用的丁香酚質(zhì)量濃度存在較大差異,且丁香酚對褐菖鲉的麻醉效果未見報(bào)道,因此本研究開展褐菖鲉在不同濃度丁香酚作用下的麻醉復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)以及麻醉后不同空氣暴露時(shí)長的影響實(shí)驗(yàn),以期為進(jìn)一步優(yōu)化褐菖鲉標(biāo)志放流技術(shù)提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    使用樣品為浙江省舟山市西軒漁業(yè)科技島培育的褐菖鲉苗種,體長(88.12 ± 4.87)mm,體質(zhì)量(19.58 ± 3.30)g,實(shí)驗(yàn)用魚達(dá)到標(biāo)志放流標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格[24],魚體健康,體質(zhì)強(qiáng)健。實(shí)驗(yàn)前15 d分別暫養(yǎng)于15 個(gè)200 L 白色圓形養(yǎng)殖桶,每日上午8 點(diǎn)及下午5 點(diǎn)喂食,實(shí)驗(yàn)前2 d停止投喂。實(shí)驗(yàn)所用為自然海水,海水溫度為(15.7 ± 0.5)℃,經(jīng)過濾處理引入養(yǎng)殖桶。麻醉劑為常熟尚齒齒科材料有限公司生產(chǎn)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)96%丁香酚,淡黃色油狀液體,難溶于水,需無水乙醇助溶。

    1.2 實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1 麻醉劑配制 以丁香酚、無水乙醇按體積比1∶9 的配制母液,隨配隨用。實(shí)驗(yàn)時(shí)根據(jù)所需濃度在20 L的潔凈塑料盆中用海水稀釋母液。

    1.2.2 麻醉/復(fù)蘇階段及行為特征 褐菖鲉麻醉及復(fù)蘇過程參考彭寧東等[25]和劉長琳等[26-27]研究結(jié)果,將麻醉階段分為Ⅰ-Ⅵ期(表1),復(fù)蘇階段分為Ⅰ-Ⅳ期(表2)。在不同質(zhì)量濃度丁香酚溶液中分別浸浴2 尾實(shí)驗(yàn)魚,選擇麻醉行為分期較明顯的質(zhì)量濃度50 mg/L 進(jìn)行褐菖鲉行為特征觀察,實(shí)驗(yàn)魚每組6尾,設(shè)3組平行,一半觀察至Ⅵ期麻醉(魚體死亡),一半達(dá)到Ⅳ期麻醉后立即從丁香酚溶液轉(zhuǎn)移至自然海水復(fù)蘇,重復(fù)3 次,觀察并對褐菖鲉麻醉/復(fù)蘇各階段進(jìn)行行為特征描述(表1、表2),并以此作為后續(xù)實(shí)驗(yàn)判斷麻醉與復(fù)蘇階段的標(biāo)準(zhǔn)。

    表1 褐菖鲉麻醉過程分期及行為特征Table 1 Anesthesia stage and behavior characteristics of Sebastiscus marmoratus

    表2 褐菖鲉復(fù)蘇過程分期及行為特征Table 2 Stages and behavioral characteristics of recovery process of Sebastiscus marmoratus

    1.2.3 最終麻醉程度 根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,設(shè)計(jì)10、20、30、40、50、60、70、80、90、120、150和180 mg/L 共12 個(gè)質(zhì)量濃度梯度,各梯度實(shí)驗(yàn)用魚5 尾,設(shè)置3 組平行組,因低質(zhì)量濃度麻醉劑褐菖鲉入麻時(shí)間較長,由此設(shè)定最長浸浴時(shí)間為30 min,并在3、5、10、15、20 和30 min 時(shí)觀測記錄各質(zhì)量濃度下褐菖鲉的麻醉程度。結(jié)果表明丁香酚質(zhì)量濃度低于30 mg/L時(shí)褐菖鲉不能在3 min 內(nèi)入麻,質(zhì)量濃度在50~180 mg/L 時(shí),30 min 內(nèi)均出現(xiàn)不同程度的死亡情況。

    1.2.4 麻醉、復(fù)蘇時(shí)間測定 預(yù)實(shí)驗(yàn)得出各質(zhì)量濃度組褐菖鲉全部麻醉至多需要4.4 min,全部復(fù)蘇至少需要6.9 min,綜合考慮褐菖鲉復(fù)蘇時(shí)間較其他魚種更長的特點(diǎn),本實(shí)驗(yàn)設(shè)定3 min 內(nèi)麻醉,7 min 內(nèi)蘇醒,麻醉15 min 后存活率100%為有效麻醉濃度。結(jié)合實(shí)驗(yàn)1.2.3 的結(jié)果以及相關(guān)文獻(xiàn)[28],選取30、40、50、60、70、80 mg/L 共6 個(gè)質(zhì)量濃度的丁香酚溶液分別測定褐菖鲉入麻與復(fù)蘇所需的時(shí)間,各組實(shí)驗(yàn)用魚12尾,設(shè)置3個(gè)平行組。

    1.2.5 空氣暴露時(shí)長對褐菖鲉復(fù)蘇的影響 對比上述實(shí)驗(yàn)中褐菖鲉的麻醉/復(fù)蘇時(shí)間,選定麻醉劑質(zhì)量濃度為40 mg/L,以此設(shè)計(jì)空氣暴露實(shí)驗(yàn),預(yù)實(shí)驗(yàn)得出致死空氣暴露時(shí)間為(49.9 ± 8.1)min,因此設(shè)最長空氣暴露時(shí)間為60 min,實(shí)驗(yàn)魚在40 mg/L 丁香酚溶液中浸浴至Ⅳ期麻醉后撈出置于濕潤毛巾,再覆蓋一層濕毛巾僅使頭部暴露在空氣中。各實(shí)驗(yàn)組分別暴露3、5、10、15、20、30、45、60 min 后放入自然海水觀察復(fù)蘇情況并記錄完全復(fù)蘇所需時(shí)間,另設(shè)置一組實(shí)驗(yàn)魚在進(jìn)入Ⅳ期麻醉后空氣暴露至無生命體征,記錄致死時(shí)間。復(fù)蘇時(shí)間以褐菖鲉出現(xiàn)復(fù)蘇特征(平衡恢復(fù)期)的時(shí)間判斷蘇醒狀況,實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平均值± 標(biāo)準(zhǔn)差表示,復(fù)蘇率為完全復(fù)蘇個(gè)體占實(shí)驗(yàn)個(gè)體總數(shù)的比例。

    1.2.6 數(shù)據(jù)處理 本實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)使用Microsoft Excel 2016、Origin Pro 2021 和SPSS 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析及多重比較,描述性統(tǒng)計(jì)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差來表示,顯著性水平α為0.05(差異顯著)和0.01(差異極顯著)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 30 min內(nèi)不同質(zhì)量濃度丁香酚溶液下褐菖鲉的最終麻醉程度

    由圖1可知,浸浴時(shí)長為30 min時(shí),所有組別均能達(dá)到Ⅳ期(麻醉狀態(tài)),10~40 mg/L 最終麻醉程度為Ⅴ期深度麻醉,50 mg/L 及以上質(zhì)量濃度最終麻醉程度能達(dá)到Ⅵ期(魚體死亡)且均為部分實(shí)驗(yàn)魚為Ⅴ期,部分實(shí)驗(yàn)魚為Ⅵ期,其中10、20 mg/L 組部分實(shí)驗(yàn)魚為Ⅳ期,部分實(shí)驗(yàn)魚為Ⅴ期,30 和40 mg/L 組全部實(shí)驗(yàn)魚為Ⅴ期深度麻醉,麻醉程度高的實(shí)驗(yàn)魚占比基本隨麻醉劑濃度升高而增大。

    一定質(zhì)量濃度的丁香酚溶液中,浸浴時(shí)間越久麻醉程度越高,致死概率越大。麻醉5 min 內(nèi)僅有180 mg/L 組出現(xiàn)少部分死亡,麻醉30 min 時(shí)50~180 mg/L均出現(xiàn)不同程度死亡,其中120~180 mg/L丁香酚溶液中浸浴30 min 死亡率高達(dá)90%。由結(jié)果得出,若需在短時(shí)間內(nèi)麻醉褐菖鲉可選擇40~150 mg/L 的丁香酚溶液;若需褐菖鲉較長時(shí)間保持麻醉狀態(tài)可選擇10~40 mg/L 的丁香酚溶液,麻醉時(shí)間控制在30 min之內(nèi)較為合適。

    2.2 麻醉、復(fù)蘇時(shí)間及有效質(zhì)量濃度的確定

    由圖2 可知,褐菖鲉麻醉所需時(shí)間隨丁香酚質(zhì)量濃度上升基本呈減少趨勢,質(zhì)量濃度在40 mg/L時(shí)麻醉所需時(shí)間明顯減少,30 mg/L組麻醉所需時(shí)間與其余組差異極顯著(P<0.01),40 mg/L 組與60~80 mg/L 組差異顯著(P<0.05),50 mg/L 組與70~80 mg/L 組差異顯著(P<0.05);丁香酚質(zhì)量濃度在30~40 mg/L 時(shí),褐菖鲉復(fù)蘇所需時(shí)間隨丁香酚質(zhì)量濃度上升基本呈減少趨勢,質(zhì)量濃度40~70 mg/L 之間,復(fù)蘇時(shí)間基本呈增加趨勢,質(zhì)量濃度在40 mg/L 和80 mg/L 時(shí),復(fù)蘇時(shí)間明顯減少,分析得出:40 mg/L 組復(fù)蘇時(shí)間與60~80 mg/L 組差異顯著(P<0.05),50 mg/L 與80 mg/L 組差異顯著(P<0.05),70 mg/L 組復(fù)蘇時(shí)間與其余組差異極顯著(P<0.01)。

    30 mg/L 丁香酚溶液用于麻醉褐菖鲉濃度偏低,無法使其在1.2.4設(shè)定的有效麻醉濃度判定標(biāo)準(zhǔn)(3 min)內(nèi)全部進(jìn)入Ⅳ期麻醉,在30、60~80 mg/L丁香酚溶液中,褐菖鲉無法在7 min 內(nèi)全部復(fù)蘇,且由2.1 可知,只有當(dāng)丁香酚質(zhì)量濃度小于60 mg/L時(shí),褐菖鲉在麻醉劑中浸浴15 min 后沒有出現(xiàn)死亡,成活率達(dá)到100%,因此,丁香酚麻醉褐菖鲉的適宜濃度范圍為40~50 mg/L。

    2.3 空氣暴露時(shí)長對褐菖鲉復(fù)蘇的影響

    根據(jù)2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果選取40 mg/L 的麻醉濃度進(jìn)行實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示,褐菖鲉在該質(zhì)量濃度丁香酚溶液中浸?。?.90 ± 0.46)min 均能進(jìn)入Ⅳ期麻醉。由圖3 可知:褐菖鲉空氣暴露后復(fù)蘇率自20 min 起呈下降趨勢,空氣暴露30 min 時(shí),復(fù)蘇率為87.5%;空氣暴露45 min 存活率為83.3%;空氣暴露60 min,實(shí)驗(yàn)魚全部死亡??諝獗┞?~20 min 內(nèi),各組復(fù)蘇時(shí)間差異不顯著(P>0.05),空氣暴露30 min 與5~20 min 組復(fù)蘇時(shí)間差異顯著(P<0.05),空氣暴露45 min與其余組差異均顯著(P<0.05);空氣暴露時(shí)間在15 min以內(nèi),平均復(fù)蘇時(shí)間隨空氣暴露時(shí)間延長而縮短,最快入水3 s 即可正常游動(dòng);空氣暴露15~45 min 時(shí),平均復(fù)蘇時(shí)間隨空氣暴露時(shí)間延長逐步增加,且復(fù)蘇率逐步降低,觀測到最長復(fù)蘇時(shí)間為13.54 min。根據(jù)平均復(fù)蘇時(shí)間變化趨勢推測,空氣暴露15 min 時(shí)褐菖鲉可將麻醉劑基本代謝從而逐漸復(fù)蘇,因此今后若需進(jìn)行離水操作研究,建議將操作時(shí)間控制在15 min 以內(nèi),避免褐菖鲉應(yīng)激造成損害。

    圖3 空氣暴露時(shí)間對褐菖鲉復(fù)蘇時(shí)間及復(fù)蘇率的影響Fig.3 The effect of air exposure time on recovery time and recovery rate of Sebastiscus marmoratus

    3 討論

    3.1 丁香酚對褐菖鲉的麻醉效果

    從實(shí)驗(yàn)結(jié)果(圖1和圖2)可以看出,丁香酚質(zhì)量濃度在50 mg/L 時(shí),褐菖鲉最終麻醉程度能達(dá)到Ⅵ期麻醉,且麻醉時(shí)間隨麻醉劑質(zhì)量濃度逐漸增加而逐漸縮短,復(fù)蘇時(shí)間基本隨麻醉劑質(zhì)量濃度逐漸增加而逐漸增加,這與其他魚類研究結(jié)果相一致[29-30]。但出現(xiàn)質(zhì)量濃度30 mg/L 組實(shí)驗(yàn)魚復(fù)蘇時(shí)間長于40 mg/L組,70 mg/L組實(shí)驗(yàn)魚復(fù)蘇時(shí)間長于80 mg/L組的情況。金元等[31]指出麻醉時(shí)間過長會導(dǎo)致魚體吸收麻醉劑含量超出可承受臨界值而出現(xiàn)毒性致死現(xiàn)象,而麻醉劑質(zhì)量濃度過低時(shí)需耗費(fèi)更長時(shí)間進(jìn)入麻醉狀態(tài)使得更多麻醉劑進(jìn)入魚體各組織,因此30 mg/L 質(zhì)量濃度實(shí)驗(yàn)魚需要耗費(fèi)比40 mg/L 組更長時(shí)間代謝麻醉劑,同理80 mg/L 組由于濃度高,實(shí)驗(yàn)魚進(jìn)入麻醉耗費(fèi)時(shí)間少,吸收的麻醉劑劑量少,因此恢復(fù)得更快。通常來說,麻醉時(shí)間越長麻醉濃度越大,魚體出現(xiàn)死亡可能性越大,但圖1中部分組別如10 min 時(shí)的80、90 mg/L 組,20 min 時(shí)的70、90、120 mg/L 組,30 min 時(shí)的60、90 mg/L 組出現(xiàn)死亡率低于相鄰濃度組,推測其原因?yàn)閷?shí)驗(yàn)魚個(gè)體差異,因此盡量選擇體格相似的同批魚苗以控制實(shí)驗(yàn)變量。

    3.2 關(guān)于丁香酚麻醉褐菖鲉的有效質(zhì)量濃度

    丁香酚主要是通過鰓絲或體表被魚體吸收進(jìn)入血液循環(huán),通過抑制腦皮質(zhì)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)致使其觸覺麻痹,再作用于基底神經(jīng)節(jié)和小腦,最后作用于脊髓,使魚體全身麻醉[32-33]。有研究表明硬骨魚類的最適麻醉質(zhì)量濃度基本在20~100 mg/L 之間[26],本實(shí)驗(yàn)得出丁香酚對于標(biāo)志規(guī)格褐菖鲉的有效麻醉質(zhì)量濃度范圍為40~50 mg/L,研究結(jié)論高于大黃魚5~10 mg/L[14]、錦鯉(Cyprinus carpio)15~20 mg/L[30]、斑馬魚(Danio rerio)20 mg/L[19]等,低于俄羅斯鱘(Acipenser gueldenstaedti)80~100 mg/L[34],推測由于不同魚種神經(jīng)生理特性存在差異[35],其機(jī)體內(nèi)部交互信息傳遞有一定區(qū)別導(dǎo)致麻醉劑作用于各部位存在時(shí)間差,使得不同魚種對同種麻醉劑的敏感程度有所區(qū)別[36]。對不同質(zhì)量濃度丁香酚作用下褐菖鲉的麻醉復(fù)蘇時(shí)間進(jìn)行線性回歸分析發(fā)現(xiàn),一定范圍內(nèi)的丁香酚質(zhì)量濃度會對麻醉所需時(shí)間產(chǎn)生極顯著負(fù)向影響關(guān)系(P<0.01),對復(fù)蘇時(shí)間有極顯著正向影響關(guān)系(P<0.01),因此需縮短麻醉時(shí)間時(shí)可適度增加丁香酚質(zhì)量濃度。

    此外,魚種、魚體規(guī)格、成熟度等都會影響適宜的麻醉質(zhì)量濃度,其中魚體規(guī)格及成熟度影響最為顯著。通常大型魚需要的麻醉濃度高于小型魚,魚齡越大,需要的麻醉劑濃度更高但復(fù)蘇率低[37]。本實(shí)驗(yàn)選取的實(shí)驗(yàn)魚為標(biāo)志放流規(guī)格的褐菖鲉幼魚,平均體長(88.22 ± 5.69)mm,日常增殖放流工作還包括更小規(guī)格的魚苗,因此可增加丁香酚對該魚種更多不同規(guī)格魚苗的麻醉實(shí)驗(yàn)。

    3.3 關(guān)于空氣暴露時(shí)間對褐菖鲉復(fù)蘇的影響

    在進(jìn)行標(biāo)志取血、測量取樣等研究操作過程中需要魚體短暫離水,未經(jīng)麻醉處理進(jìn)行急性離水操作易造成不同程度的鰓組織永久性損傷、肌肉組織結(jié)構(gòu)改變等[38],麻醉后進(jìn)行離水操作對其生理影響相對較小[39]。褐菖鲉經(jīng)40 mg/L 的丁香酚麻醉后,隨空氣暴露時(shí)間延長,平均復(fù)蘇時(shí)間呈現(xiàn)先縮短后延長的趨勢:空氣暴露時(shí)間在3~15 min 時(shí),實(shí)驗(yàn)魚復(fù)蘇所需時(shí)間隨暴露時(shí)間延長而逐漸縮短;空氣暴露時(shí)間在15~45 min 時(shí),實(shí)驗(yàn)魚復(fù)蘇所需時(shí)間隨暴露時(shí)間延長而逐漸延長;空氣暴露60 min 時(shí),實(shí)驗(yàn)魚無法復(fù)蘇。由于許多硬骨魚類除鰓呼吸外還可通過皮膚呼吸進(jìn)行部分代謝[40],推測魚體在空氣中由皮膚代謝了一定量丁香酚使得體內(nèi)麻醉濃度降低,從而逐漸復(fù)蘇,因此在15 min 以內(nèi),平均復(fù)蘇時(shí)間隨空氣暴露時(shí)間增加而縮短,15 min 之后由于魚體基本達(dá)到復(fù)蘇階段,但長時(shí)間離水導(dǎo)致缺氧或短暫休克,需要一定時(shí)間恢復(fù)正常生理活動(dòng),因此復(fù)蘇時(shí)間隨之延長。雖然麻醉后褐菖鲉在空氣中耐受時(shí)間較長,但考慮到缺氧會對魚體造成生理損害,且進(jìn)入復(fù)蘇階段魚體逐漸活躍不易于進(jìn)行各種操作,因此今后若進(jìn)行需魚體長時(shí)間離水的實(shí)驗(yàn)研究,建議麻醉后注意把握時(shí)間,盡量將離水過程控制在15 min以內(nèi)。

    猜你喜歡
    丁香酚麻醉劑魚體
    軸流泵內(nèi)魚體的運(yùn)動(dòng)行為與撞擊損傷分析
    淡水魚水平往復(fù)振動(dòng)頭尾定向輸送方法
    麻醉劑的使用
    淡水魚腹背定向裝置設(shè)計(jì)及試驗(yàn)
    陰差陽錯(cuò)的麻醉劑
    麻醉劑
    丁香酚吸嗅對MCAO模型鼠神經(jīng)行為學(xué)影響
    丁香酚、小檗堿及苦參堿對荔枝霜疫霉的抑制作用
    GC法測定蒙藥其順通拉嘎膠囊中丁香酚的含量
    氣相色譜法測定肉豆蔻-8散中的丁香酚的含量
    av在线观看视频网站免费| 视频在线观看一区二区三区| 人妻系列 视频| 亚洲四区av| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 在线免费观看不下载黄p国产| 纯流量卡能插随身wifi吗| 国产精品久久久av美女十八| 久久狼人影院| 久久久久久久大尺度免费视频| 日韩精品免费视频一区二区三区| 成人免费观看视频高清| 岛国毛片在线播放| 日本-黄色视频高清免费观看| 满18在线观看网站| 亚洲美女黄色视频免费看| 成人黄色视频免费在线看| 日日撸夜夜添| 精品国产一区二区久久| 少妇人妻久久综合中文| 国产一区亚洲一区在线观看| 丰满乱子伦码专区| 亚洲欧洲日产国产| 欧美精品av麻豆av| 一区二区三区四区激情视频| 亚洲av中文av极速乱| 1024香蕉在线观看| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 日本黄色日本黄色录像| 精品国产乱码久久久久久男人| 国产精品 国内视频| 国产精品成人在线| 国产成人91sexporn| 亚洲欧洲日产国产| 中文字幕av电影在线播放| 精品第一国产精品| 欧美少妇被猛烈插入视频| 久久青草综合色| 最近最新中文字幕免费大全7| 777米奇影视久久| av天堂久久9| 性色avwww在线观看| 2021少妇久久久久久久久久久| 久久精品久久久久久久性| 欧美av亚洲av综合av国产av | 成年人午夜在线观看视频| 亚洲精品在线美女| www.自偷自拍.com| 成年av动漫网址| 韩国精品一区二区三区| 国产xxxxx性猛交| 国产伦理片在线播放av一区| 99国产精品免费福利视频| 成人亚洲欧美一区二区av| 亚洲国产日韩一区二区| 色网站视频免费| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲av欧美aⅴ国产| av免费观看日本| 成人国产麻豆网| 多毛熟女@视频| www.精华液| 中文字幕av电影在线播放| 少妇 在线观看| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 美女中出高潮动态图| 在线天堂中文资源库| 叶爱在线成人免费视频播放| 亚洲av国产av综合av卡| 26uuu在线亚洲综合色| 高清av免费在线| 午夜免费鲁丝| 高清不卡的av网站| 国产精品嫩草影院av在线观看| 亚洲三区欧美一区| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 亚洲视频免费观看视频| 精品国产乱码久久久久久男人| 国产精品成人在线| 久久久精品94久久精品| av卡一久久| 美女国产高潮福利片在线看| 久久精品国产亚洲av天美| 免费在线观看完整版高清| 最新的欧美精品一区二区| 一级,二级,三级黄色视频| 欧美bdsm另类| av一本久久久久| 最近手机中文字幕大全| 成人二区视频| 欧美97在线视频| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 寂寞人妻少妇视频99o| 在线观看免费日韩欧美大片| 日韩大片免费观看网站| 两个人看的免费小视频| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 美国免费a级毛片| 一边摸一边做爽爽视频免费| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 亚洲,欧美,日韩| 国产成人精品久久久久久| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 国产片内射在线| 春色校园在线视频观看| 亚洲成人一二三区av| 热re99久久精品国产66热6| videos熟女内射| 国产精品二区激情视频| 在线看a的网站| 亚洲天堂av无毛| 日本午夜av视频| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 多毛熟女@视频| 五月天丁香电影| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 精品国产一区二区三区四区第35| 在线天堂中文资源库| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲国产欧美在线一区| 精品卡一卡二卡四卡免费| 婷婷成人精品国产| 赤兔流量卡办理| 亚洲国产日韩一区二区| 国产熟女午夜一区二区三区| 国产视频首页在线观看| 9191精品国产免费久久| 韩国精品一区二区三区| 亚洲经典国产精华液单| 1024视频免费在线观看| 国产男人的电影天堂91| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 国产精品久久久久久精品古装| 亚洲人成网站在线观看播放| 欧美97在线视频| 考比视频在线观看| 久久99一区二区三区| 一本色道久久久久久精品综合| 伦理电影免费视频| 九色亚洲精品在线播放| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 亚洲成色77777| 视频区图区小说| 男男h啪啪无遮挡| 一级黄片播放器| 午夜影院在线不卡| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 在线观看免费日韩欧美大片| 丰满乱子伦码专区| 2021少妇久久久久久久久久久| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 在线精品无人区一区二区三| av在线观看视频网站免费| 激情五月婷婷亚洲| 美国免费a级毛片| 亚洲精品一区蜜桃| 捣出白浆h1v1| 国产黄频视频在线观看| 国产片内射在线| a 毛片基地| 精品人妻一区二区三区麻豆| 国产一区二区激情短视频 | 一区在线观看完整版| 男女高潮啪啪啪动态图| 一二三四在线观看免费中文在| 精品一品国产午夜福利视频| 亚洲第一区二区三区不卡| 日韩大片免费观看网站| 一本久久精品| 男女午夜视频在线观看| 女性生殖器流出的白浆| 国产精品成人在线| 久久久久久久精品精品| 韩国av在线不卡| tube8黄色片| 永久网站在线| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 久久午夜综合久久蜜桃| 狂野欧美激情性bbbbbb| 男女无遮挡免费网站观看| 国产精品 国内视频| www.熟女人妻精品国产| 国产免费一区二区三区四区乱码| 韩国精品一区二区三区| 精品国产露脸久久av麻豆| 日韩大片免费观看网站| 日韩免费高清中文字幕av| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 久久精品国产亚洲av涩爱| 亚洲av国产av综合av卡| 亚洲国产精品一区三区| 成人二区视频| 不卡视频在线观看欧美| 日本午夜av视频| 国产成人a∨麻豆精品| 三上悠亚av全集在线观看| 国产欧美亚洲国产| 一区在线观看完整版| 亚洲色图综合在线观看| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 久久99蜜桃精品久久| 午夜免费鲁丝| 少妇熟女欧美另类| 亚洲第一青青草原| av.在线天堂| 日韩三级伦理在线观看| 国产片特级美女逼逼视频| 午夜福利一区二区在线看| 老鸭窝网址在线观看| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 国产1区2区3区精品| 亚洲图色成人| 人体艺术视频欧美日本| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 五月天丁香电影| 久久毛片免费看一区二区三区| 这个男人来自地球电影免费观看 | 黄片无遮挡物在线观看| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 2018国产大陆天天弄谢| 丝袜脚勾引网站| 亚洲第一av免费看| 久久久久久久久久久久大奶| 久久久久人妻精品一区果冻| 性色av一级| 伦精品一区二区三区| 成人国产麻豆网| 最近手机中文字幕大全| 男人添女人高潮全过程视频| av有码第一页| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 不卡av一区二区三区| 亚洲图色成人| 欧美xxⅹ黑人| 男女边吃奶边做爰视频| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产xxxxx性猛交| 日韩av在线免费看完整版不卡| 色哟哟·www| 9热在线视频观看99| 精品视频人人做人人爽| 亚洲精品,欧美精品| 91精品国产国语对白视频| 国产乱人偷精品视频| 波野结衣二区三区在线| 午夜激情久久久久久久| 国产精品嫩草影院av在线观看| 少妇被粗大的猛进出69影院| 中文欧美无线码| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 国产乱人偷精品视频| 男女下面插进去视频免费观看| 国产亚洲最大av| 久久久久国产精品人妻一区二区| 18+在线观看网站| 亚洲一区二区三区欧美精品| 综合色丁香网| 伊人久久国产一区二区| 中文天堂在线官网| 9色porny在线观看| videos熟女内射| 中文天堂在线官网| 欧美精品一区二区免费开放| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 18禁动态无遮挡网站| 黑丝袜美女国产一区| 国产97色在线日韩免费| 下体分泌物呈黄色| 久久久a久久爽久久v久久| 黄频高清免费视频| 欧美国产精品一级二级三级| 中文字幕亚洲精品专区| 久久精品人人爽人人爽视色| 亚洲av.av天堂| 国产 精品1| 久久久久精品人妻al黑| 一级毛片 在线播放| 久久久久精品性色| 亚洲第一青青草原| 少妇人妻 视频| 日本欧美国产在线视频| 18+在线观看网站| 又大又黄又爽视频免费| 国产精品嫩草影院av在线观看| 18+在线观看网站| 又大又黄又爽视频免费| 2021少妇久久久久久久久久久| 亚洲欧美成人精品一区二区| 欧美bdsm另类| 国产精品嫩草影院av在线观看| 欧美人与善性xxx| av片东京热男人的天堂| 老司机亚洲免费影院| 国产一区有黄有色的免费视频| 电影成人av| 日本av手机在线免费观看| 婷婷色av中文字幕| 夫妻性生交免费视频一级片| 精品久久蜜臀av无| 性色av一级| 一级,二级,三级黄色视频| 91久久精品国产一区二区三区| 中文字幕制服av| 成年美女黄网站色视频大全免费| 欧美少妇被猛烈插入视频| 国产爽快片一区二区三区| 90打野战视频偷拍视频| 亚洲内射少妇av| 婷婷成人精品国产| 亚洲人成77777在线视频| 亚洲综合色网址| 三级国产精品片| 捣出白浆h1v1| 久久久久国产一级毛片高清牌| 国产 精品1| 看免费成人av毛片| 精品午夜福利在线看| 99热全是精品| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 男女国产视频网站| 久久人人97超碰香蕉20202| 99精国产麻豆久久婷婷| 久久久国产一区二区| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 国产有黄有色有爽视频| 国产精品亚洲av一区麻豆 | 日韩一区二区三区影片| 久久精品人人爽人人爽视色| 国产精品 欧美亚洲| 日日啪夜夜爽| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 咕卡用的链子| 欧美黄色片欧美黄色片| 99久久中文字幕三级久久日本| 婷婷色av中文字幕| 欧美精品一区二区大全| 日本爱情动作片www.在线观看| 亚洲三级黄色毛片| 国产一区二区三区av在线| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 久热这里只有精品99| 五月伊人婷婷丁香| 免费日韩欧美在线观看| 亚洲精品美女久久av网站| 爱豆传媒免费全集在线观看| 丝袜在线中文字幕| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 夫妻午夜视频| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 国产极品天堂在线| 日韩免费高清中文字幕av| 美女高潮到喷水免费观看| 最近最新中文字幕免费大全7| 亚洲国产最新在线播放| 热99久久久久精品小说推荐| 国产成人免费观看mmmm| 在线免费观看不下载黄p国产| 丝袜喷水一区| 下体分泌物呈黄色| 成年动漫av网址| 国产精品偷伦视频观看了| 美女福利国产在线| 国产成人精品一,二区| 1024视频免费在线观看| 国产1区2区3区精品| 精品人妻在线不人妻| 日韩精品有码人妻一区| 99久久精品国产国产毛片| 熟女av电影| 极品人妻少妇av视频| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 欧美黄色片欧美黄色片| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 91精品三级在线观看| 七月丁香在线播放| 老司机亚洲免费影院| 国产精品一区二区在线观看99| 精品第一国产精品| 人妻 亚洲 视频| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 国产一区二区三区综合在线观看| xxx大片免费视频| 亚洲成人手机| 亚洲av福利一区| 国产片特级美女逼逼视频| 欧美激情 高清一区二区三区| 成人国产av品久久久| 欧美日韩亚洲高清精品| 欧美xxⅹ黑人| 国产精品一区二区在线不卡| 一个人免费看片子| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 亚洲四区av| 亚洲精品美女久久av网站| av天堂久久9| 最新中文字幕久久久久| 在线观看国产h片| 国产日韩欧美在线精品| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 另类精品久久| 日韩人妻精品一区2区三区| 91在线精品国自产拍蜜月| 男人舔女人的私密视频| 久久99一区二区三区| 日韩中文字幕视频在线看片| 国产熟女午夜一区二区三区| 国精品久久久久久国模美| 精品一区二区三卡| 国产一区二区三区av在线| 国产精品国产三级国产专区5o| 国产免费福利视频在线观看| 两个人看的免费小视频| 欧美在线黄色| 26uuu在线亚洲综合色| 久久精品夜色国产| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| av在线播放精品| 男女无遮挡免费网站观看| 99香蕉大伊视频| 在线 av 中文字幕| 国产精品av久久久久免费| 中文字幕av电影在线播放| 91精品三级在线观看| 成人影院久久| 欧美变态另类bdsm刘玥| 哪个播放器可以免费观看大片| 国产日韩欧美视频二区| 精品国产乱码久久久久久男人| 丝袜美足系列| 久久鲁丝午夜福利片| 国产高清国产精品国产三级| 国产av一区二区精品久久| xxx大片免费视频| 国产深夜福利视频在线观看| 在线观看免费日韩欧美大片| 女性被躁到高潮视频| 国产熟女欧美一区二区| 国产精品人妻久久久影院| 亚洲伊人久久精品综合| 一区二区三区激情视频| 黑丝袜美女国产一区| 国产av国产精品国产| 捣出白浆h1v1| 在线观看美女被高潮喷水网站| 精品一区二区三卡| 十分钟在线观看高清视频www| 国产爽快片一区二区三区| 国产熟女午夜一区二区三区| 精品少妇一区二区三区视频日本电影 | 欧美少妇被猛烈插入视频| 久久久久久久亚洲中文字幕| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 国产爽快片一区二区三区| 婷婷色综合大香蕉| 成人二区视频| 男女边摸边吃奶| 黄色视频在线播放观看不卡| 亚洲av欧美aⅴ国产| 国产精品99久久99久久久不卡 | 国产有黄有色有爽视频| 国产激情久久老熟女| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 永久免费av网站大全| 久久毛片免费看一区二区三区| 久久精品国产a三级三级三级| 熟女电影av网| 久久 成人 亚洲| 国产又爽黄色视频| 亚洲精品乱久久久久久| 97在线人人人人妻| 亚洲欧美精品自产自拍| 精品少妇内射三级| 大香蕉久久网| 免费观看a级毛片全部| xxx大片免费视频| videos熟女内射| 免费在线观看黄色视频的| 久久精品夜色国产| 国产精品av久久久久免费| 不卡av一区二区三区| 日本-黄色视频高清免费观看| 日韩欧美精品免费久久| 岛国毛片在线播放| 中文字幕av电影在线播放| 性高湖久久久久久久久免费观看| 一区二区三区四区激情视频| 尾随美女入室| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 国产亚洲欧美精品永久| 美女午夜性视频免费| 色婷婷av一区二区三区视频| av在线app专区| kizo精华| 高清av免费在线| 在线观看一区二区三区激情| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 亚洲精品一区蜜桃| 色婷婷av一区二区三区视频| 波多野结衣av一区二区av| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 亚洲图色成人| 日本vs欧美在线观看视频| 成人二区视频| 国产 一区精品| 又黄又粗又硬又大视频| 不卡视频在线观看欧美| 国产综合精华液| av不卡在线播放| 天堂俺去俺来也www色官网| 成人毛片a级毛片在线播放| 咕卡用的链子| 国产成人一区二区在线| 午夜免费鲁丝| 90打野战视频偷拍视频| videossex国产| 亚洲成色77777| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 捣出白浆h1v1| 久久韩国三级中文字幕| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| av电影中文网址| 叶爱在线成人免费视频播放| 9191精品国产免费久久| 黑丝袜美女国产一区| www.精华液| 国产乱来视频区| 免费高清在线观看日韩| av不卡在线播放| 电影成人av| 少妇 在线观看| 亚洲熟女精品中文字幕| 国产深夜福利视频在线观看| 桃花免费在线播放| 国产淫语在线视频| 黑人猛操日本美女一级片| 国产精品久久久av美女十八| 一区二区三区精品91| 韩国av在线不卡| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 人妻系列 视频| 一级,二级,三级黄色视频| 婷婷色av中文字幕| 91aial.com中文字幕在线观看| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产精品一国产av| 成年人午夜在线观看视频| 中文天堂在线官网| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 少妇熟女欧美另类| 成人手机av| 99热全是精品| 男的添女的下面高潮视频| 秋霞在线观看毛片| 亚洲欧美精品自产自拍| 欧美国产精品va在线观看不卡| 久久久国产精品麻豆| 男男h啪啪无遮挡| 国产一区二区激情短视频 | 亚洲精品aⅴ在线观看| 性少妇av在线| 亚洲第一av免费看| 制服人妻中文乱码| 高清视频免费观看一区二区| 国产精品久久久久久av不卡| 大陆偷拍与自拍| 日本欧美国产在线视频| av在线观看视频网站免费| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 在线天堂最新版资源| 亚洲国产av影院在线观看| 国产日韩欧美在线精品| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产人伦9x9x在线观看 | 国产麻豆69| 一个人免费看片子| 国产一区亚洲一区在线观看| 欧美97在线视频| 国产高清国产精品国产三级| 老汉色av国产亚洲站长工具| 人人澡人人妻人| 午夜福利,免费看| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 日日爽夜夜爽网站| 大陆偷拍与自拍| 久久综合国产亚洲精品| 国产成人精品一,二区| 大码成人一级视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 综合色丁香网| 亚洲经典国产精华液单| 国产精品久久久久成人av| 久久国产精品大桥未久av| 色婷婷久久久亚洲欧美| av.在线天堂| 日韩大片免费观看网站| 91在线精品国自产拍蜜月| 美女高潮到喷水免费观看| 日韩欧美精品免费久久| 国产精品 国内视频| 男人舔女人的私密视频| 亚洲av福利一区| 国产精品不卡视频一区二区| 久久热在线av| 老司机影院毛片| 久久精品夜色国产| 亚洲欧洲国产日韩| 日韩电影二区|