海參多肽生物活性研究進(jìn)展

孫小飛，羅國瑞，劉念，李英美，賀迪，勵建榮*

（1 渤海大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院 海洋研究院 遼寧錦州121013 2 江蘇海洋大學(xué) 江蘇省海洋生物資源與環(huán)境重點實驗室 江蘇連云港222000 3 達(dá)蓮食品（錦州）有限公司 遼寧錦州 121200）

海參（Sea cucumber）為棘皮動物門（Echinodermata）海參綱（Holothuroidea）楯手目（Aspidochirota）動物[1]，是重要的海洋類食物和藥用資源，其高蛋白、低脂肪、低糖，富含人體必需的各種氨基酸、脂肪酸、維生素和微量元素等，具有很高的營養(yǎng)價值和藥用價值[2]。近年來，隨著對海參生物活性物質(zhì)分離、鑒定及醫(yī)學(xué)作用等研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)海參中含有很多重要的活性功能成分，如海參多肽、多糖、皂苷等，對這些組分的提取制備及活性功能研究成為海參深度開發(fā)利用的主要方向[3]。

海參多肽是一類具有多種生物活性的物質(zhì)，通常以海參為原料，經(jīng)蛋白酶酶解、分離純化來制備。與普通物理法制備的海參粉相比，酶解法制備的海參多肽具有良好的理化特性：黏度低、溶解度好、穩(wěn)定性高、易吸收，具有更高的應(yīng)用價值[4]。大量研究證實，海參多肽具有良好的抗氧化、降血壓、降血糖、抗疲勞、抗腫瘤、抗菌、提高免疫力和記憶力等多種生物活性，其活性與多肽分子質(zhì)量分布有關(guān)，由于海參來源和酶解方法的不同，因此導(dǎo)致得到的肽段有所差異，從而影響海參多肽的生物活性功能[5-7]。目前，研究人員在海參多肽的提取制備和活性方面做了大量的研究。本文以海參多肽的活性研究為導(dǎo)向，總結(jié)近年來國內(nèi)外在此方面的最新研究成果，旨在為其進(jìn)一步開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)和新的研究思路。

1 海參多肽的抗氧化作用

到目前為止，海參多肽的抗氧化活性一直是研究熱點?？寡趸瘎┲饕ㄟ^清除自由基、促進(jìn)過氧化物分解及螯合金屬離子等方式發(fā)揮作用[8]。人體在正常生理代謝過程中會有少量的氧自由基產(chǎn)生，如羥自由基（·OH）、超氧自由基（·O2-）和雙氧水（H2O2）等，自由基在體內(nèi)總是處于不斷產(chǎn)生與消除的動態(tài)平衡中。適量的氧自由基可以消除炎癥、增強免疫力、抑制腫瘤等，但數(shù)量過多便會破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，擾亂人體的正常生理代謝活動，引起各類疾病，加速人體衰老的進(jìn)程[9]。研究顯示，多肽是通過電子轉(zhuǎn)移來清除自由基的，即通過肽段的氨基酸傳遞電子或給出質(zhì)子氫到自由基上，使自由基生成相應(yīng)的陰離子或陽離子，從而達(dá)到清除自由基的目的[10]。海參多肽作為一種具有潛在抗氧化價值的新型活性肽，不僅可以降低人體的氧化應(yīng)激，而且安全可靠、無毒副作用，因此，其抗氧化活性引起了研究者的廣泛關(guān)注[11]。

劉暢等[12]制備的海參多肽對·OH 和1，1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基（DPPH·）具有很好的清除能力，對Fe3+的還原力較高。Zheng等[13]研究發(fā)現(xiàn)，以刺參內(nèi)臟為原料，采用自溶法制備的刺參肽也有較好的DPPH·清除能力和Fe2+螯合能力，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)刺參肽對·OH 誘導(dǎo)的DNA 損傷具有保護(hù)作用。Senadheera等[14]以北大西洋海參的加工副產(chǎn)物海參花和內(nèi)部器官為原料，利用內(nèi)肽酶和外肽酶聯(lián)合作用，制備的海參蛋白水解物能夠增強自由基清除能力和金屬螯合活性，對不同海參組織使用不同的酶水解，得到的產(chǎn)物表現(xiàn)出不同的抗氧化能力。Zhang等[15]用堿性蛋白酶和胰蛋白酶分別對海參進(jìn)行水解，研究發(fā)現(xiàn)，前者的酶解產(chǎn)物對·O2-和DPPH·的清除能力以及螯合Fe2+能力均強于后者，表現(xiàn)出更好的抗氧化活性，且低分子量的酶解產(chǎn)物抗氧化活性更高。史亞萍等[16]采用復(fù)合蛋白酶酶解制備海參多肽，研究表明，分子質(zhì)量低于1 ku 的海參多肽對2，2-聯(lián)氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二銨鹽自由基（·ABTS+）和·O2-的清除能力最強，分子質(zhì)量大于3 ku 的海參多肽還原力以及對DPPH·的清除能力最強。于平等[17]研究發(fā)現(xiàn)，東海海參膠原蛋白酶解產(chǎn)物對·O2-、·OH 和DPPH·具有較好的清除作用，且清除能力與其濃度呈劑量依賴關(guān)系。Wang 和Li等[18-19]研究發(fā)現(xiàn)，從海參加工廢液中提取的多肽具有較強的體外抗氧化活性和還原能力，對活性氧和自由基有清除作用，且清除DPPH·的能力隨多肽濃度的增加而升高。Dong等[20]采用多肽固相合成技術(shù)（SPPS）合成了一種綠色、安全的海參-松子食品源動植物蛋白抗氧化肽，合成的多肽清除DPPH·的能力顯著高于海參多肽和松子肽。

此外，研究人員還從細(xì)胞水平和動物試驗對海參多肽的抗氧化活性進(jìn)行了深入研究。Lin等[21-22]研究發(fā)現(xiàn)，海參多肽通過上調(diào)抗衰老Klotho 基因的表達(dá)、激活超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、抑制脂質(zhì)過氧化和蛋白質(zhì)氧化以及下調(diào)乙酰膽堿酯酶（AChE）的活性，有效延緩正常和D-半乳糖誘導(dǎo)老化果蠅的衰老，并減輕D-半乳糖誘導(dǎo)小鼠的氧化損傷，表明海參多肽對衰老相關(guān)的神經(jīng)退行性疾病有預(yù)防和延緩作用。Chen等[23]通過美拉德反應(yīng)，用葡萄糖和低聚木糖對海參多肽進(jìn)行改性，發(fā)現(xiàn)美拉德反應(yīng)可以顯著提高海參多肽的抗氧化活性和整體風(fēng)味，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加糖基化海參多肽，可減輕衰老小鼠氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的肝毒性。楊坤[24]采用超高效液相色譜-四極桿飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（UPLC-QTOF-MS/MS）鑒定富肽提取物（CFE）中的多肽組成與結(jié)構(gòu)，并研究了其對果蠅延壽作用以及D-半乳糖誘導(dǎo)致衰小鼠氧化應(yīng)激的拮抗作用，首次在動物試驗中證實了富肽葉瓜參提取物對果蠅具有抗衰老作用。潘南等[25]研究了仿刺參多肽對H2O2誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞EA.hy926損傷的保護(hù)作用，試驗結(jié)果表明，仿刺參多肽具有提高SOD 活性、降低細(xì)胞內(nèi)丙二醛（MDA）含量、抑制細(xì)胞活性損傷和提高抗氧化能力的作用。趙芹等[26]采用氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）處理血管內(nèi)皮細(xì)胞ECV304 建立氧化應(yīng)激損傷模型，試驗發(fā)現(xiàn)，海參膠原蛋白多肽對血管內(nèi)皮細(xì)胞具有保護(hù)作用。楊環(huán)毓[27]采用DPPH·和·ABTS+清除試驗、總鐵離子還原試驗，比較了海參多肽和大豆肽、小麥肽的抗氧化能力，結(jié)果顯示，海參多肽的抗氧化能力最強；進(jìn)一步比較了3 種肽對L929 成纖維細(xì)胞氧化損傷保護(hù)和促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖能力、抑制B16 黑色素瘤細(xì)胞增殖能力，結(jié)果表明海參多肽的效果最好。

從上述研究可以發(fā)現(xiàn)，海參多肽的抗氧化活性不僅與海參品種、多肽來源有關(guān)，而且與海參多肽的相對分子質(zhì)量及其序列結(jié)構(gòu)有很大關(guān)系。海參多肽的分子質(zhì)量、氨基酸組成序列和結(jié)構(gòu)構(gòu)象對抗氧化活性有一定的影響，低分子質(zhì)量的肽段對抗氧化活性有促進(jìn)作用，在不同的多肽鏈中，氨基酸之間的相互作用可以影響多肽轉(zhuǎn)移電子的能力，從而影響多肽對活性氧自由基的清除能力。因此，不同結(jié)構(gòu)的海參多肽，其清除自由基的方式存在一定的差異，對不同種類的自由基也可能有著不同的抗氧化機制。

2 海參多肽的抗疲勞作用

疲勞是由運動引起機體一系列生化改變而導(dǎo)致的肌肉力量下降，運動耐力試驗和生化指標(biāo)檢測是其主要的評價方法，其中，反映抗疲勞能力加強最直接、最客觀的指標(biāo)便是運動耐力的提高[28]。生物活性肽可以通過維持機體能量平衡、調(diào)節(jié)糖異生、促進(jìn)脂肪分解代謝、抑制氧化應(yīng)激和增強骨骼肌線粒體功能等起到抗疲勞作用[29-32]。

申彩紅[33]研究發(fā)現(xiàn)，海參肽具有明顯的抗疲勞作用，活性與分子質(zhì)量分布有關(guān)，海參寡肽明顯優(yōu)于海參多肽，并且海參肽的抗氧化活性與抗疲勞作用存在一定的相關(guān)性。Ye等[34]建立負(fù)荷誘導(dǎo)的大鼠耐力游泳模型，研究發(fā)現(xiàn)，海參多肽能顯著提高大鼠的疲勞耐受能力，具有抗疲勞活性，并推測可能是通過調(diào)節(jié)能量代謝、減輕氧化損傷和炎癥反應(yīng)發(fā)揮抗疲勞作用。Yu等[35]以小鼠為研究對象，結(jié)合細(xì)胞學(xué)和生物信息學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)海參多肽通過運動時增加肌組織糖原含量、加速脂肪分解代謝、提高線粒體拷貝數(shù)及腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）生成能力、降低氧化應(yīng)激和炎癥因子水平起到抗疲勞作用。Suwanmala等[36]對中國和泰國5種海參的抗疲勞活性進(jìn)行比較，通過給高強度運動后的小鼠補充不同品種的海參，測定血液中乳酸（LA）、肌酸激酶（CK）、肝糖原和肌糖原含量、SOD 活性、MDA 含量，證明海參具有抗疲勞活性，其機制是通過降低小鼠血液中LA、CK 和MDA 水平，增加肝糖原、肌糖原和SOD 水平來實現(xiàn)的，其中，刺參和梅花參表現(xiàn)出很好的抗疲勞活性。

上述研究表明，海參多肽通過抑制氧化應(yīng)激和增強線粒體功能發(fā)揮抗疲勞作用，不同海參品種的抗疲勞效果不同，抗氧化能力強且分子質(zhì)量小的海參多肽具有更好的抗疲勞效果，有望成為一種新型抗疲勞的功能性營養(yǎng)添加劑。

3 海參多肽的降血壓作用

目前，我國的高血壓發(fā)病率呈逐年上升趨勢，不僅嚴(yán)重威脅人們的生命安全，而且極大地影響我國社會經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。引發(fā)高血壓的因素很多，其中，血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（ACE）作為腎素-血管緊張素系統(tǒng)和激肽釋放酶-激肽系統(tǒng)的關(guān)鍵酶，參與體內(nèi)血壓調(diào)節(jié)，會造成血壓的升高，引起高血壓[37]。ACE 抑制劑就是通過抑制血漿和血管內(nèi)皮細(xì)胞ACE 的活性，達(dá)到降低血壓的目的。研究表明，生物蛋白來源的小分子肽具有ACE 活性抑制作用，具有調(diào)控高血壓的潛力，且抑制活性與多肽的分子質(zhì)量、氨基酸組成和序列結(jié)構(gòu)有關(guān)[38-40]。

Zhao等[41]研究發(fā)現(xiàn)，分子質(zhì)量<1 ku 的海參多肽組分能顯著降低腎血管性高壓大鼠的舒張壓和收縮壓，該組分經(jīng)分離純化，得到了具有更高活性的ACE 抑制肽，該肽由5 個主要的氨基酸組成，分子質(zhì)量為840 u，IC50值為0.0142 mg/mL。華鑫和Blanca Pérez-vega等[42-43]利用復(fù)合蛋白酶酶解刺參，并用單因素法優(yōu)化ACE 抑制肽的酶解工藝，通過超濾法制備了分子質(zhì)量<3 ku 的組分，分別測試了該組分和酶解液對ACE 的抑制活性，結(jié)果顯示，分子質(zhì)量<3 ku 的組分對ACE 的抑制活性高于酶解液；動物實驗結(jié)果表明，刺參ACE 抑制肽對高血壓大鼠具有良好的降壓效果。Liu 和Forghani等[44-45]用堿性蛋白酶酶解刺參，發(fā)現(xiàn)酶解液中多肽的分子質(zhì)量多集中于6.5 ku 以下，對ACE 的抑制率達(dá)到58.7%，并分離得到了多個ACE 抑制肽，試驗結(jié)果表明，堿性蛋白酶有利于酶解刺參產(chǎn)生抗ACE 活性高的多肽。此外，左愛華等[7]在海參低聚肽中鑒定到了88 個小分子肽段，利用在線數(shù)據(jù)庫篩選了9 個潛在的ACE 抑制活性肽，結(jié)合構(gòu)效關(guān)系，進(jìn)一步篩選了5 個核心肽段，有望開發(fā)成降血壓海參多肽，實現(xiàn)商業(yè)價值。

基于上述研究可以發(fā)現(xiàn)，降血壓多肽的活性與其分子質(zhì)量、氨基酸組成和序列有密切關(guān)系，其中，小分子多肽具有更好的ACE 抑制活性，且具有易被吸收、耐受體內(nèi)消化酶的作用等特點，因此，應(yīng)加強多肽的結(jié)構(gòu)與降血壓活性之間的構(gòu)效關(guān)系研究，進(jìn)而開發(fā)小分子降血壓海參多肽。

4 海參多肽的降血糖作用

糖尿病是一種異質(zhì)性代謝紊亂，由于胰島素分泌障礙、胰島素作用缺陷或兩者兼而有之而出現(xiàn)高血糖。糖尿病的慢性高血糖與影響眼睛、腎臟和神經(jīng)的相對特定的長期微血管并發(fā)癥有關(guān)，并有增加心血管疾病（CVD）的風(fēng)險[46]。隨著全球糖尿病患者人數(shù)的逐年增加，傳統(tǒng)的藥物治療方法面臨嚴(yán)峻挑戰(zhàn)，與傳統(tǒng)合成藥物相比，食物源性生物活性肽副作用小、活性高、毒性低且易在人體內(nèi)代謝[47]，受到越來越多的關(guān)注，因而，開發(fā)天然、安全、高效的功能活性成分替代傳統(tǒng)藥物具有十分重要的現(xiàn)實意義。

海參作為一種功能性食品，可以通過胃腸道消化釋放具有抗糖尿病功能的多肽，Gong等[48]模擬胃腸道消化系統(tǒng)，研究了日本刺參蛋白在被消化過程中釋放的多肽，分子對接結(jié)果表明，釋放的肽段與二肽基肽酶IV（DPP-IV）的抑制劑阿格列汀具有相似的結(jié)合模式，其中，<3 ku 的多肽在胃腸道消化中表現(xiàn)出最大的DPP-IV 抑制能力，具有潛在的抗糖尿病活性。Li等[49]采用尿液代謝組學(xué)方法，研究了海參多肽對db/db 小鼠的高血糖和腎臟保護(hù)作用，通過雙向電泳、電子鼻、頂空固相微萃取氣質(zhì)聯(lián)用儀（HS-SPME-GC-MS）和核磁共振（NMR）方法分析小鼠尿液中的蛋白質(zhì)和小分子物質(zhì)，與對照組相比，發(fā)現(xiàn)海參多肽能顯著降低小鼠尿液中的尿素和葡萄糖含量。王天星等[50]研究發(fā)現(xiàn)，海參多肽能夠有效改善db/db 小鼠的口服糖耐量和血糖調(diào)節(jié)能力，并可有效抑制體內(nèi)炎癥反應(yīng)，這為海參多肽用于II 型糖尿病及其并發(fā)炎癥防治提供了新的思路和理論基礎(chǔ)。劉志彤[51]采用高脂飼料結(jié)合鏈脲佐菌素建立II 型糖尿病大鼠模型，通過測定血清生化指標(biāo)、肝臟抗氧化水平及腎臟炎癥水平，結(jié)合蘇木精-伊紅染色（HE）切片結(jié)果，發(fā)現(xiàn)米刺參酶解物不僅具有調(diào)節(jié)II 型糖尿病患者血糖和血脂水平的能力，還能減輕糖尿病引起的肝腎損傷，可以作為預(yù)防和緩解糖尿病及其并發(fā)癥的潛在食源性活性成分。此外，Wang 等[52]研究發(fā)現(xiàn)，海參多肽對鏈脲佐菌素和高脂飲食誘導(dǎo)的糖尿病大鼠具有有效的降血糖、降血脂和胰島素增敏作用，海參多肽的抗糖尿病作用與低分子質(zhì)量多肽有關(guān)，這些多肽含有豐富的疏水性氨基酸、脂肪族氨基酸，以及一些具有胰島素增敏作用的特定氨基酸，有助于新的膳食補充劑或功能性成分在糖尿病治療中的應(yīng)用。

目前海參多肽在降血糖方面的研究主要集中于血糖調(diào)節(jié)作用及機制，對糖尿病引發(fā)的各種并發(fā)癥的研究比較少，可進(jìn)一步研究海參多肽對并發(fā)癥的抑制作用及調(diào)節(jié)機制，并結(jié)合代謝組學(xué)方法，探索發(fā)現(xiàn)更多的相互作用靶點，為海參多肽降血糖作用的研究提供新思路。

5 海參多肽的提高免疫力作用

免疫是機體免疫系統(tǒng)的一種生理功能，用于非特異性或特異性識別和清除所有異物或抗原物質(zhì)。免疫調(diào)節(jié)活性肽作為保護(hù)人體免受病原體入侵的有益因子發(fā)揮著重要作用，人們已經(jīng)從很多海洋生物體中，如藻類、甲殼類和無脊椎動物，提取到多種具有增強免疫力的活性物質(zhì)。目前，增強機體的免疫力備受關(guān)注，因此，深入研究具有提高機體免疫力的活性多肽，并將其應(yīng)用于保健食品和醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)領(lǐng)域具有重要的意義[53]。

為了探究海參多肽的免疫調(diào)節(jié)活性，研究人員從免疫器官、免疫細(xì)胞以及有關(guān)細(xì)胞因子和基因表達(dá)等多個方面進(jìn)行了研究。徐先鋒等[54]采用經(jīng)口灌胃的方式，給予小鼠梯度劑量的高純度低分子質(zhì)量冰島刺參多肽，研究了冰島刺參多肽對小鼠免疫調(diào)節(jié)的影響，試驗結(jié)果表明，灌胃冰島刺參多肽的小鼠免疫器官指數(shù)、血清中免疫球蛋白含量、Ⅳ型超敏反應(yīng)（DTH）、腹腔巨噬細(xì)胞吞噬率均大于對照組，且存在一定的劑量與效應(yīng)關(guān)系，說明冰島刺參多肽可通過細(xì)胞、體液及非特異性免疫方式，調(diào)節(jié)小鼠免疫功能，提高免疫力。張健等[55]以仿刺參卵和體壁為原料制備海參多肽，通過小鼠灌胃試驗，發(fā)現(xiàn)2 種多肽EP1 和BWP1 對小鼠淋巴細(xì)胞增殖（SLP）能力有顯著促進(jìn)作用，EP1 可提高小鼠的細(xì)胞免疫和單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能，BWP1 可提高小鼠的體液免疫和單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能，這2 種多肽均具有增強免疫力的功能。羅文奇和Cai等[56-57]研究發(fā)現(xiàn)，海參多肽可增加小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞RAW264.7免疫活性，且無細(xì)胞毒性作用，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，海參多肽是通過激活絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）和核因子kappaB（NF-κB）信號通路、促進(jìn)腫瘤壞死因子-α（TNF-α），白細(xì)胞介素-6（IL-6）分泌而發(fā)揮促免疫活性。樂卿清等[58]利用小鼠淋巴細(xì)胞增殖試驗和地塞米松誘導(dǎo)小鼠免疫力低下的模型，進(jìn)行體內(nèi)和體外試驗，考察海參多肽調(diào)節(jié)免疫功能的作用，結(jié)果表明，海參多肽可以通過對T 淋巴細(xì)胞、B 淋巴細(xì)胞的增殖來提高免疫力低下小鼠的免疫功能，具有很好的增強免疫力作用。

目前的研究結(jié)果表明，海參多肽有望作為一種靶向免疫抑制的功能性食品補充劑，但是其作用機制復(fù)雜，因此，還需要深入研究其作用機制，發(fā)現(xiàn)更多新的免疫調(diào)節(jié)作用靶點及各種有效成分之間的相互作用，并可通過分子修飾等綜合作用，提高海參多肽的免疫調(diào)節(jié)活性。

6 海參多肽的抗腫瘤作用

癌癥是人類死亡的主要原因之一，在發(fā)展中國家和發(fā)達(dá)國家的發(fā)病率逐年上升，由于癌癥化療藥物的高毒性及副作用，對新型抗癌藥物的需求越來越大，因此需要開發(fā)更有效、毒性更小的天然抗癌藥物。天然產(chǎn)物已被用于治療各種疾病，使用天然化合物作為化療和放療的輔助手段，可以減少治療毒性，提高治療指數(shù)[59-60]。研究表明，食物源性多肽對各種癌細(xì)胞具有抗增殖作用，可促進(jìn)細(xì)胞凋亡、抑制細(xì)胞周期進(jìn)展和抑制腫瘤生長等[61-63]。關(guān)于海參活性物質(zhì)抗癌機制的研究主要集中在細(xì)胞毒性活性、誘導(dǎo)凋亡、細(xì)胞周期阻滯、抑制腫瘤生長、抗轉(zhuǎn)移和抗血管生成特性以及抑制耐藥性[64-66]，海參多肽能有效抑制腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞活力，對腫瘤的形成和轉(zhuǎn)移有明顯的抑制作用。

近年來，海參多肽的抗腫瘤活性不斷被報道。Yu等[67]研究了刺參重組多肽對BEL-7402 肝癌細(xì)胞的抗腫瘤作用，試驗發(fā)現(xiàn)，刺參重組多肽有效劑量低、毒性低，具有良好的抗腫瘤作用。Pérez-vega等[43]考察了墨西哥參的兩組酶解液和超濾后得到的多肽對直腸癌細(xì)胞HT-29 的細(xì)胞毒性，研究發(fā)現(xiàn)，低分子質(zhì)量的海參多肽對腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出了很好的抑制作用。此外，研究人員還對構(gòu)效關(guān)系和作用機制進(jìn)行了深入研究，Wei等[68]研究發(fā)現(xiàn)，海參腸多肽中富含支鏈氨基酸和疏水性氨基酸，可以通過抑制磷脂酰肌醇-3-激酶/絲氨酸/蘇氨酸激酶（PI3K/AKT）信號通路促進(jìn)人乳腺癌細(xì)胞MCF-7 的凋亡，隨后通過增加或上調(diào)抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax 的表達(dá)，誘導(dǎo)內(nèi)源性凋亡通路的顯著激活，從而發(fā)揮抗腫瘤活性。Mao等[69]研究發(fā)現(xiàn)，海參多肽可通過調(diào)節(jié)miR-378a-5p 靶向蛋白質(zhì)編碼基因TUSC2 抑制非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）惡性腫瘤，能有效抑制肺癌人類肺泡基底上皮細(xì)胞A549 的增殖、遷移和侵襲，并能抑制肺癌小鼠胸腔積液的形成和腫瘤生長，減輕肝腎損傷，提高白細(xì)胞介素-2（IL-2）和白細(xì)胞介素-12（IL-12）水平，降低IL-6 和TNF-α 水平，延長小鼠生存時間。

目前，對海參多肽的抗腫瘤活性機制尚不完全清楚，需要進(jìn)一步明確其構(gòu)效關(guān)系和作用機制，從而將海參多肽作為抗腫瘤營養(yǎng)補充劑應(yīng)用到臨床預(yù)防和治療中，為人類抗腫瘤工作做出積極的貢獻(xiàn)。

7 其它活性作用

海參多肽除了具有上述活性之外，還具有預(yù)防阿爾茨海默?。ˋD）、提高記憶力、降血脂、降尿酸、抗菌、促進(jìn)創(chuàng)面愈合、緩解骨質(zhì)疏松等多種生物活性。

Rathnayake等[70]研究發(fā)現(xiàn)，海參多肽可以通過降低c-Jun 氨基末端激酶、絲裂原活化蛋白激酶p38 的磷酸化水平和細(xì)胞β-淀粉樣蛋白（Aβ）、β-分泌酶1（BACE1）來保護(hù)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y 免受Aβ 誘導(dǎo)的神經(jīng)元細(xì)胞降解，是一種很有前途的治療AD 神經(jīng)退行性變的藥物。Lin等[71]模擬胃腸消化系統(tǒng)，分離出9 個新的海參多肽，研究發(fā)現(xiàn)，IGFH、LGFH、DWF 和FQF 4 個多肽能有效抑制Aβ 在細(xì)胞內(nèi)的聚集，可用于AD的預(yù)防或治療。于平等[17]通過測定人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SK-N-SH 的存活率并進(jìn)行形態(tài)觀察，發(fā)現(xiàn)東海海參膠原蛋白酶解物對由H2O2造成的神經(jīng)細(xì)胞損傷具有較好的保護(hù)作用。姜程耀和Xu等[72-73]通過水迷宮、穿梭箱等行為學(xué)試驗，結(jié)合生化指標(biāo)和受試小鼠生長情況，綜合對比發(fā)現(xiàn)，低劑量組海參多肽在不同受試期均可顯著提高乙酰膽堿（Ach）含量，通過提高海馬組織乙?；揭约昂ｑR錐體細(xì)胞增殖，達(dá)到輔助增強記憶和預(yù)防記憶損傷的效果。

胡曉倩等[74]將Wistar 大鼠連續(xù)飼喂冰島刺參膠原多肽28 d，發(fā)現(xiàn)可以有效抑制正常大鼠體重和脂肪含量的增加，能促進(jìn)脂質(zhì)代謝，具有一定的降血脂和減肥功效。Wan等[75]給飲食誘導(dǎo)的高尿酸血癥小鼠喂食海參多肽，發(fā)現(xiàn)海參多肽可以緩解小鼠的高尿酸血癥和腎臟炎癥。王明昌[76]提取了刺參消化道中分子質(zhì)量在6 ku 左右的多肽，發(fā)現(xiàn)其具有廣譜抗菌性，對革蘭氏陽性、陰性菌均表現(xiàn)出一定的抑制作用，特別是對蛭弧菌的抑制效果最明顯。Cusimano等[77]利用海參多肽合成了抑制單核細(xì)胞增生李斯特菌的多肽，發(fā)現(xiàn)該抗菌肽對傳統(tǒng)抗生素耐藥的食源性疾病有較好的治療效果。

在促創(chuàng)面愈合方面，海參多肽也表現(xiàn)出很好的活性，程敏君等[78]研究發(fā)現(xiàn)，低分子質(zhì)量多肽促進(jìn)SD 大鼠創(chuàng)面愈合的效果最好，其作用機理與酶解液中的活性羥脯氨酸結(jié)合小肽被腸道完全吸收有關(guān)。李林和Li等[79-80]通過建立db/db 小鼠術(shù)后傷口模型，發(fā)現(xiàn)海參多肽能促進(jìn)糖尿病小鼠手術(shù)后傷口的一氧化氮（NO）生成和新生血管形成，減少炎癥反應(yīng)并且增強傷口抗張力強度，表明海參多肽有助于促進(jìn)糖尿病人的傷口愈合。Chen等[81]研究發(fā)現(xiàn)，海參多肽可直接作用于去卵巢大鼠的骨組織及相關(guān)通路，能改善骨密度、強度、微結(jié)構(gòu)和質(zhì)量，抑制破骨細(xì)胞的生成，中劑量的海參多肽對骨質(zhì)疏松癥的緩解效果最好。陳婭等[82]利用利福平和異煙肼灌胃建立大鼠肝損傷模型，發(fā)現(xiàn)喂食海參膠原低聚肽可以改善利福平和異煙肼聯(lián)用所致的藥物性肝損傷，為藥物性肝損傷治療中的潛在臨床應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù)。盡管研究人員已經(jīng)對海參多肽的各種功能活性進(jìn)行了大量的研究，但是有關(guān)海參多肽對人體保健作用的研究還比較少，并且海參多肽的作用機制和活性評價還有待于進(jìn)一步的深入研究。

8 展望

現(xiàn)有研究結(jié)果表明，低分子質(zhì)量范圍的海參多肽往往具有較好的生物活性，尤其是經(jīng)過純化得到的單一多肽活性通常會大大提高，因此，制備低分子質(zhì)量的純多肽將會是今后的主要研究方向。對多肽進(jìn)行化學(xué)修飾，如糖基化、聚乙二醇化等，是提高肽類藥物穩(wěn)定性的主要方法。目前對海參多肽的結(jié)構(gòu)修飾研究較少，下一步可積極探索海參多肽的化學(xué)修飾方法，進(jìn)行構(gòu)效關(guān)系研究，篩選出具有更高活性的海參多肽，同時對其作用機理進(jìn)行研究，結(jié)合基因組學(xué)和代謝組學(xué)，探索作用靶點以及信號通路。只有明確海參多肽的作用機制，才能更好地指導(dǎo)海參多肽活性研究工作的開展，將其活性更好地發(fā)揮出來。

海洋生物加工中產(chǎn)生的副產(chǎn)物是生產(chǎn)具有獨特生物活性多肽的重要來源[83]，目前，海參多肽活性的研究多集中于海參體壁，而對生殖腺、內(nèi)臟等部位的研究較少。已有研究表明，海參生殖腺和海參腸中所含的營養(yǎng)物質(zhì)不亞于海參體壁，且表現(xiàn)出多種活性，主要活性成分除了黏多糖外，還有含量很高的蛋白質(zhì)，是優(yōu)質(zhì)活性肽的來源[84]。因此，海參生殖腺和海參腸作為新型海洋多肽來源，具有很高的開發(fā)應(yīng)用價值。

綜上所述，水產(chǎn)多肽在食品、保健品、醫(yī)藥、飼料、日用化工等行業(yè)的需求量日益增長，而市場現(xiàn)有量難以滿足需求。我國作為海參養(yǎng)殖大國，深入研究開發(fā)海參活性多肽，將其應(yīng)用于功能性食品、醫(yī)藥、保健品、化妝品等行業(yè)，將具有廣闊的市場前景。