2 株紫花苜蓿解鉀菌的篩選鑒定及其對產(chǎn)量和品質(zhì)的影響

王彥佳，胡伯昂，陳佳欣，許麗婷，姚琳，馮麗榮，郭長虹*

（1. 黑龍江省分子細胞遺傳與遺傳育種重點實驗室，哈爾濱師范大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，黑龍江 哈爾濱 150000；2. 黑龍江國宏節(jié)能環(huán)保有限公司，黑龍江 哈爾濱 150028）

鉀是植物生長和發(fā)育不可缺少的元素［1］。土壤全鉀量高于全氮、全磷量，但由鉀長石、云母等硅鋁酸鹽組成的難溶性鉀占95%，因而可被植物直接吸收利用的鉀非常少［2］。中國缺鉀的耕地約占70%，嚴重缺鉀的耕地約占45%［3］。隨著中國種植業(yè)結(jié)構(gòu)的調(diào)整，農(nóng)作物產(chǎn)量和種植面積不斷提高，對鉀肥的需求也隨之增高［4］。通常通過施加化肥來補充植物對鉀的需求，但長期大規(guī)模施用化肥可能對土壤產(chǎn)生不利影響，并對環(huán)境構(gòu)成威脅［5］。開發(fā)解鉀菌生物制劑替代化學(xué)鉀肥，是解決植物缺鉀的一條有利途徑。

解鉀菌（potassium-solubilizing bacteria， KSB）能夠?qū)⑼寥乐须y溶性的鉀轉(zhuǎn)化為可被植物直接吸收利用的有效鉀，從而促進植物生長［6］。Xiao 等［7］從油菜（Brassica campestris）根際篩選出3 株解鉀菌，接種后提高了黑麥草（Lolium perenne）的鉀含量和生物量。Bakhshandeh 等［8］研究表明，接種解鉀菌提高了水稻（Oryza sativa）的根長、葉面積和生物量，增強了水稻的光合作用，促進了水稻幼苗的生長。解鉀菌不僅對鉀的吸收有積極的作用，還能通過分泌吲哚-3-乙酸（indoleacetic-3-acid， IAA）、產(chǎn)生鐵載體，溶解磷酸鹽促進植物生長。楊華等［9］分離了6 株解鉀菌，促進了植物對鉀的吸收，還可通過產(chǎn)生IAA 和鐵載體來促進水稻的生長，提高了株高、葉面積、總根長、根冠比和組織鉀含量。史靜靜等［10］研究發(fā)現(xiàn)，分離的5 株解鉀菌，同時具有較高的溶磷能力，在棉花（Gossypium hirsutum）上施用解鉀菌，根系活力、株高、干重得到了顯著提高。這些研究表明，解鉀菌作為生物菌劑在改善植物生長方面表現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。

紫花苜蓿（Medicago sativa）是多年生豆科牧草，蛋白含量高，適口性好，被譽為“牧草之王”［11］。紫花苜蓿的種植面積在全球已超過3000 多萬hm2［12］。隨著中國畜牧業(yè)的發(fā)展和人們對畜產(chǎn)品需求的增加，紫花苜蓿種植面積不斷增加［13］。紫花苜蓿對鉀的需求較高，缺鉀會導(dǎo)致植株根系發(fā)育不良，葉片邊緣變黃，生長速度減慢，產(chǎn)量降低［14］。但是，目前對于紫花苜蓿解鉀菌的研究還非常有限。

本研究從紫花苜蓿根際土壤中篩選解鉀菌，評估其解鉀能力及潛在的植物促生特性，包括IAA 合成、鐵載體產(chǎn)生和磷酸鹽溶解能力，通過盆栽試驗分析解鉀菌株接種對紫花苜蓿的產(chǎn)量、品質(zhì)，土壤酶活性和土壤速效鉀含量的影響，可為開發(fā)解鉀微生物制劑，促進紫花苜蓿產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展提供菌株資源。

1 材料與方法

1.1 土壤樣品的采集

2019 年，供試紫花苜蓿根際土取自黑龍江省哈爾濱師范大學(xué)農(nóng)園（45°51′ N，126°32′ E）。將5 株紫花苜蓿連同根際土混勻裝入干凈保鮮袋中，帶回實驗室4 ℃保存。

1.2 解鉀菌的篩選

參照陳宇豐等［15］的方法從根際土壤中分離細菌。取1 g 紫花苜蓿根際土，加入盛有玻璃珠和99 mL 無菌水的錐形瓶中，在28 ℃搖床上劇烈振蕩30 min。采用平板稀釋法［16］分離細菌：將土壤樣品用無菌水稀釋至10-2～10-5濃度梯度，取100 μL 涂布在硅酸鹽細菌培養(yǎng)基（silicate bacteria medium）上，倒置于28 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)2 d，選取有水解圈的單菌落，進行平板劃線純化，反復(fù)進行，直至獲得純菌種，并挑取單菌落接種于LB（Luria-Bertani）固體培養(yǎng)基，待菌落長出后于冰箱中4 ℃保存，或制備成甘油菌-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

分別用接種環(huán)挑取純化后的菌株，接種于50 mL 種子液培養(yǎng)基中培養(yǎng)48 h 后在6000 r·min-1下離心10 min棄上清液。收集無培養(yǎng)基的菌體，并用去離子水將菌體懸浮，制成菌懸液（OD600=0.50±0.04）。將菌懸液按5%的接種量，接種于解鉀液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)7 d。以等量滅活菌懸液作為對照處理。取解鉀液體培養(yǎng)基的發(fā)酵液10 mL，加入2 mL 的H2O2并在沸水浴中消化1 h 后用去離子水補足10 mL，在13000 r·min-1下離心5 min，取上清液采用火焰分光光度計法測定鉀含量［17］，與空白對照對比分析，計算出菌株對鉀長石礦粉的分解率。

1.3 菌株鑒定

按照東秀珠等［18］的方法，對篩選出的菌株進行形態(tài)特征、吲哚測定、甲基紅、伏普、檸檬酸鹽、淀粉水解、硫化氫、明膠液化、脲酶、接觸酶試驗，以及葡萄糖利用和革蘭氏染色等生理指標的測定。

采用CTAB/NaCl 方法提取細菌DNA［19］，采用細菌16S 通用引物F8（5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'）和R1541（5'-AAGGAGGTGATCCAGCCGCA-3'）擴增16S rDNA 基因序列。擴增產(chǎn)物送至生工生物工程（上海）股份有限公司測序，測序結(jié)果在NCBI（https：//blast.ncbi.nlm. nih.gov/Blast.cgi）進行同源性比較分析，確定親緣關(guān)系，用MEGA 7.0 軟件進行系統(tǒng)發(fā)育分析，采用 Neighbor-joining 法和 Jukes-Cantor 模型構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。

1.4 菌株吲哚乙酸（IAA）合成能力測定

采用Salkowski 比色法測定菌株產(chǎn) IAA 能力［20］。供試菌株先在DF（Dworkin and Foster）培養(yǎng)液中培養(yǎng)48 h，再取1 mL 轉(zhuǎn)入添加不同濃度色氨酸（L-Trp）的DF 培養(yǎng)液（含0、100、200、500 μg·mL-1）中繼續(xù)培養(yǎng)48 h，每個菌株3 次重復(fù)，取樣測菌液OD600處吸光值。其余培養(yǎng)液室溫下10000 r·min-1離心，取500 μL 上清液，添加2 mL Salkowski 試劑，室溫培養(yǎng)20 min 后，在OD535處測吸光值。

1.5 菌株鐵載體合成能力測定

定性試驗參照Schwyn 等［21］的方法進行，將已分離保存的細菌接種于鉻奧醇CAS（Chrome Azurol Sulphonate）培養(yǎng)基上，28 ℃培養(yǎng)48 h，觀察菌落周圍的顏色變化，有橘黃色暈圈產(chǎn)生即可產(chǎn)生鐵載體。定量檢測參照王平等［22］的方法。將可產(chǎn)生橘黃色暈圈的菌株接種于MKB（Modified King’S B）培養(yǎng)基中，28 ℃搖床培養(yǎng)48 h（180 r·min-1）；菌液離心，取上清液，以1∶1 的體積比加入CAS 檢測液，充分混勻。靜置1 h 后，OD630處測吸光值A(chǔ)，以去離子水與CAS 檢測液等體積混合測得的Ar 為對照，A/Ar 代表樣品中鐵載體的相對含量。

1.6 菌株溶磷能力測定

定性試驗參照喬策策等［23］的方法進行，將已分離保存的細菌接種于改良的PVK（Pikovskaya）培養(yǎng)基上，于28 ℃培養(yǎng)48 h，觀察菌落周圍的顏色變化，有透明暈圈產(chǎn)生即可溶解無機磷。定量采用鉬銻抗顯色法計算有效磷含量［24］。挑選菌株接種到LB 培養(yǎng)基，在10000 r·min-1離心10 min 富集菌體，將菌懸液濃度調(diào)至1×108cfu·mL-1，將細菌懸液按1%量接種在20 mL PVK 液體培養(yǎng)基中，以不接菌為對照，平行3 組，在28 ℃，180 r·min-1搖床上培養(yǎng)72 h 后，取發(fā)酵液在4 ℃ 10000 r·min-1下離心10 min，取上清液，加5 mL 鉬銻抗顯色液定容至50 mL，反應(yīng)30 min，利用722E 型可見光分光光度計（上海元析儀器有限公司）在OD600處測定光密度并計算有效磷含量，減去對照的值即為溶磷量。

1.7 紫花苜蓿盆栽試驗

1.7.1 盆栽試驗 盆栽試驗于2019 年在哈爾濱師范大學(xué)重點實驗室進行，紫花苜蓿種子表面消毒后，試驗設(shè)置：對照組CK：無鉀長石粉、無解鉀菌；處理組1：對照組CK+鉀長石粉（CK+K）；處理組2：只加解鉀菌XLT-4（XLT-4）；處理組3：解鉀菌XLT-4+鉀長石粉（XLT-4+K）；處理組4：只加解鉀菌XLT-7（XLT-7）；處理組5：解鉀菌XLT-7+鉀長石粉（XLT-7+K）。處理組用XLT-4 和XLT-7 菌懸液（1×108cfu·mL-1）浸種2 h，經(jīng)無菌水浸泡處理2 h 的為對照（CK）。將對照組和處理組的種子均勻播種于同一規(guī)格的花盆中。每盆10 粒種子，室溫培養(yǎng)，每天光照8 h，適當澆水保持土壤水分含量。每隔7 d 用50 mL 菌懸液均勻澆灌于幼苗根部周圍，對照組用等量無菌水。

1.7.2 樣品測定 種苗60 d 后測定紫花苜蓿的株高、根長、地上鮮重、地下鮮重、地上干重、地下干重。采用2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC）法對根活力進行測定［25］，采用火焰分光光度計法、釩鉬黃比色法、凱氏定氮法、中性洗滌纖維法、酸性洗滌纖維法測定植株鉀含量、磷含量、粗蛋白含量、中、酸性洗滌纖維含量［26-28］。根據(jù)《土壤酶及其研究方法》［29］和《土壤農(nóng)化分析》［30］測定土壤酶活性及土壤速效鉀含量。

1.8 數(shù)據(jù)處理

使用SPSS 23.0（IBM， 美國）對試驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析。采用T檢驗和單因素方差分析（ANOVA）進行不同處理組數(shù)據(jù)的比較分析。不同數(shù)據(jù)中的誤差柱代表標準偏差（standard deviation， SD），不同小寫字母代表統(tǒng)計學(xué)計算得到的差異顯著性（P＜0.05）。

2 結(jié)果與分析

2.1 解鉀菌的分離與篩選

將紫花苜蓿根際土壤接種到硅酸鹽細菌培養(yǎng)基上初步分離篩選出26 株可產(chǎn)生水解圈的解鉀菌，對26株菌進行搖瓶釋鉀試驗，孵化7 d 后測定菌株的解鉀率，從中挑選出解鉀率較高的2 株菌，標記為XLT-4、XLT-7，其解鉀率分別為10.53%和9.75%（圖1）。

圖1 從紫花苜蓿根際分離出的解鉀菌的解鉀能力Fig. 1 Potassium-solubilizing ability of potassiumsolubilizing bacteria isolated from alfalfa rhizosphere

2.2 菌株XLT-4 和XLT-7 的鑒定

XLT-4 菌落呈圓形，不透明，黏稠，邊緣整齊，表面光滑濕潤，長時間培養(yǎng)可產(chǎn)生黃色色素。XLT-7 菌落圓形，淡黃色或乳白色，微微凸起，邊緣光滑整齊。提取細菌XLT-4 和XLT-7 的DNA，進行16S rDNA序列的PCR 擴增，XLT-4 的GenBank 登錄號為OQ726246，XLT-7 的GenBank 登錄號為OQ726247。經(jīng)BLAST 比對分析發(fā)現(xiàn)，菌株XLT-4 與巨大芽孢桿菌（Priestia megaterium）、阿氏芽孢桿菌（Priestia aryabhattai）、彎曲芽孢桿菌（Priestia flexa）、副彎曲芽孢桿菌（Priestia paraflexa）同屬近緣種，序列同源性達99%；菌株XLT-7 與耐寒短桿菌（Peribacillus frigoritolerans）、食丁酸短桿菌（Peribacillus butanolivorans）、盧氏短桿菌（Peribacillus loiseleuriae）、棉籽殼短桿菌（Peribacillus gossypii）的同源性為99%（圖2）。基于16S rDNA 和系統(tǒng)進化樹分析結(jié)果表明，菌株XLT-4 屬于芽孢桿菌屬（Priestia），XLT-7 屬于短桿菌屬（Peribacillus）。進一步通過生理生化試驗表明，菌株XLT-4 的檸檬酸鹽、淀粉水解試驗呈陽性，明膠液化呈陰性，革蘭氏染色為陽性；菌株XLT-7 的明膠液化呈陽性，檸檬酸鹽、淀粉試驗呈陰性，革蘭氏染色為陽性（表 1）。根據(jù)菌落形態(tài)特征，16S rDNA 進化樹分析及生理生化鑒定，確定菌株XLT-4 和XLT-7 分別為巨大芽孢桿菌和耐寒短桿菌。

圖2 分離菌株的16S rDNA 的系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.2 Phylogenetic tree of 16S rDNA of bacterial isolates

2.3 菌株XLT-4 和XLT-7 促生特性分析

兩株菌在CAS 和PVK 檢測培養(yǎng)基上分別形成了橘黃色和透明的暈圈，即均具有產(chǎn)鐵載體和溶磷的能力（圖3）。

圖3 2 株解鉀菌在CAS 和PVK 培養(yǎng)基上進行斑點培養(yǎng)Fig.3 Two strains of potassium solubilizing bacteria were blotted on CAS and PVK medium

進一步對菌株進行了IAA 合成，產(chǎn)鐵載體和溶解磷能力的定量測定。隨著色氨酸濃度的增加，IAA 的合成水平也隨之增加，當色氨酸的濃度達到100、200 和500 μg·mL-1時，菌株XLT-4 和XLT-7 IAA 含量分別為12.37和23.52 μg·mL-1、12.22 和26.90 μg·mL-1、12.32 和28.90 μg·mL-1（圖4）。其鐵載體的相對含量（A/Ar 值）分別為0.73 和1.16；A/Ar 值越低則鐵載體含量越高；菌株XLT-4 和XLT-7 的溶磷量分別為97.45 和116.93 μg·mL-1。兩株菌均具有合成IAA、產(chǎn)生鐵載體和溶解無機磷的能力。

圖4 2 株解鉀菌產(chǎn)IAA、鐵載體、溶磷能力Fig.4 IAA production， siderophore and phosphorus solubilization capacity of two strains of potassium solubilizing bacteria

2.4 菌株XLT-4 和XLT-7 對紫花苜蓿生物量的影響

通過盆栽試驗評價了解鉀菌株對紫花苜蓿的促生效果。結(jié)果表明，接種XLT-4 和XLT-7 紫花苜蓿的株高、根長分別顯著提高了16.22%和13.43%、17.31%和13.15%，地上干鮮重分別顯著提高了25.35%和13.17%、28.87% 和19.45%、地下干鮮重分別顯著提高了 29.27% 和 20.34%、29.27% 和22.03%（P＜0.05）。XLT-4 和XLT-7 及鉀長石粉（K）共接種與鉀長石粉（K）接種相比紫花苜蓿植株的株高、根長分別顯著增加了19.19%和8.56%、19.90%和8.87%，地上干、鮮重分別顯著增加了30.26%和15.96%、36.84%和22.55%，地下干鮮重分別顯著增加了29.17%和20.97%、33.33%和21.77%（P＜0.05）（表 2）。

2.5 菌株XLT-4 和XLT-7 對紫花苜蓿根系活力和品質(zhì)的影響

與對照相比，接種菌株XLT-4 和XLT-7 根系活力分別顯著提高了29.70%和24.75%（圖5）、植株鉀含量分別顯著提高了15.64%和18.24%、磷含量分別顯著提高了40.48%和42.86%、粗蛋白含量分別顯著提高了67.64%和46.83%、中性洗滌纖維含量分別顯著降低了15.41%和13.24%、酸性洗滌纖維含量分別顯著降低了15.09%和12.88%（P＜0.05）。XLT-4 和XLT-7 及鉀長石粉（K）共接種與鉀長石粉（K）接種相比，根系活力分別顯著提高了49.55%和40.54%、植株鉀含量分別顯著提高了17.27%和20.91%、磷含量分別顯著提高了50.00%和52.08%、粗蛋白含量分別顯著提高了37.16%和37.16%，中性洗滌纖維含量分別顯著降低了17.50%和16.85%、酸性洗滌纖維含量分別顯著降低了16.54%和13.32%（P＜0.05）。

表1 XLT-4 和XLT-7 的生理生化特性Table 1 Physiological and biochemical characteristics of XLT-4 and XLT-7

圖5 接種2 株解鉀菌紫花苜蓿的根系活力、鉀、磷、粗蛋白、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維含量Fig. 5 The root activity， K， P， crude protein， neutral detergent fiber （NDF） and acid detergent fiber （ADF） contents of two strains of potassium solution-producing alfalfa were inoculated

表2 解鉀菌對紫花苜蓿生物量的影響Table 2 Effects of potassium solubilizing bacteria on biomass of alfalfa

2.6 菌株XLT-4 和XLT-7 對紫花苜蓿根際土壤酶活性及速效鉀含量的影響

與對照相比，接種XLT-4 和XLT-7 紫花苜蓿根際土壤脲酶活性分別顯著提高了20.17%和24.54%（圖6），過氧化氫酶活性分別顯著提高了20.69%和27.59%，蔗糖酶活性分別顯著提高了24.09%和22.03%，土壤速效鉀含量分別顯著提高了7.31%和8.19%（P＜0.05）。XLT-4 和XLT-7 及鉀長石粉（K）共接種與鉀長石粉（K）接種相比，土壤脲酶活性分別顯著提高了29.16% 和28.41%，過氧化氫酶活性分別顯著提高了35.48% 和38.71%，蔗糖酶活性分別顯著提高了25.57%和24.14%，土壤速效鉀含量分別顯著提高了10.29%和9.43%（P＜0.05）。

圖6 接種2 株解鉀菌紫花苜蓿根際土壤脲酶、過氧化氫酶、蔗糖酶活性及速效鉀含量Fig. 6 The activity of urease， catalase， sucrase and available potassium content in the rhizosphere soil of alfalfa inoculated with two strains of potassium-solutionizing bacteria

3 討論

鉀是植物生長發(fā)育所必需的營養(yǎng)元素，但土壤中大部分的鉀以不溶的形式存在，接種解鉀菌是提高土壤速效鉀含量的重要措施［31］。在過去的研究中，發(fā)現(xiàn)了許多具有解鉀能力的菌株，易浪波等［32］分離出11 株生長良好的解鉀菌，其解鉀率為10.03%～11.00%。Raji 等［33］從兩個不同石生棲息地植物根際土壤中篩選出15 株能力不同的解鉀菌，通過16S rDNA 序列分析，確定出4 株菌株分別與枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）、蠟樣芽孢桿菌（Bacillus cereus）和地衣芽孢桿菌（Bacillus licheniformis）相似。本研究從紫花苜蓿根際土壤中篩選出2 株高效解鉀菌XLT-4 和XLT-7，為巨大芽孢桿菌和耐寒短桿菌，具有較強的解鉀能力。

2 株解鉀菌XLT-4 和XLT-7，均具有產(chǎn)生IAA 和鐵載體的能力。IAA 可以刺激根組織的分裂和伸長，促進根系萌發(fā)和生長［34］。鐵載體可以溶解以氧化物形式存在的難溶性鐵，使植物能夠吸收，從而促進植物生長［35］。孫科等［36］從牛蒡（Arctium lappa）根際土壤中分離得到1 株具有較強解鉀和產(chǎn)IAA 能力的菌株，并通過盆栽試驗證明其能夠促進宿主植物生長。王歡等［37］從茶樹（Camellia sinensis）根際分離到1 株解鉀菌GD3，菌株具有產(chǎn)鐵載體的特性。本研究選用的2 株解鉀菌產(chǎn)生IAA 的同時還具有產(chǎn)鐵載體的能力，可能是促進紫花苜蓿生長的原因之一。

解鉀菌能作為微生物菌肥促進植物的生長。陳臘等［38］通過田間試驗發(fā)現(xiàn)，接種解鉀菌，顯著提高了玉米（Zea mays）拔節(jié)期的株高和地上生物量。研究發(fā)現(xiàn)，用解鉀菌接種馬鈴薯（Solanum tuberosum），株高和枝條干重顯著增加［39］。Biswas 等［40］研究表明，接種解鉀菌，顯著提高了蘿卜（Raphanus sativus）的根長和鮮重。本研究接種菌株XLT-4 和XLT-7，紫花苜蓿株高、根長、地上干鮮重和地下干鮮重較對照組顯著增加。說明這2 株解鉀菌具有促進紫花苜蓿生長的能力。

植物根系活力和養(yǎng)分吸收能力直接影響地上部分的生物量以及作物的品質(zhì)［41］。Basak 等［42］研究表明，接種解鉀菌提高了獼猴桃（Actinidia chinensis）的根系活力和地上部分果實的產(chǎn)量和品質(zhì)。磷對植物生長有重要的作用，在植物體內(nèi)參與光合作用、呼吸作用，磷能促進早期根系的形成和生長，其次磷對蛋白質(zhì)的合成與分解也起著重要的作用［43］。接種解鉀菌G218 與未接種相比，顯著提高了薇甘菊（Mikania micrantha）植株的磷含量和鉀含量［44］。粗蛋白含量是評價植物營養(yǎng)品質(zhì)的重要指標［45］。Singh 等［46］報道，施用不同解鉀菌顯著提高了馬鈴薯植株磷含量、鉀含量和馬鈴薯塊莖中粗蛋白含量。本研究的兩株解鉀菌在具有解鉀能力的同時，均具有溶解磷的能力，可以顯著提高紫花苜蓿根系活力、磷、鉀和粗蛋白含量。表明接種解鉀菌可顯著促進植物對鉀、磷的吸收，進而提高作物的品質(zhì)。

土壤酶的類型及酶活性的大小，可以反映土壤中微生物的代謝活動。土壤脲酶活性能夠代表土壤的供氮能力，脲酶的增加伴隨著土壤氮素的增加，增加根際氮源，促進紫花苜蓿健康生長；土壤過氧化氫酶是一種促進土壤物質(zhì)能量循環(huán)的氧化還原酶，可以反映土壤的呼吸強度；土壤蔗糖酶在碳循環(huán)中起著重要作用，促進植物生長和植株養(yǎng)分的吸收［47］。在本研究中，XLT-4 和XLT-7 解鉀菌處理后可以顯著提高土壤脲酶、過氧化氫酶和蔗糖酶活性。Raghavendra 等［48］研究表明，施用解鉀菌CR 顯著提高了土壤酶活性，促進養(yǎng)分循環(huán)，并提高作物生產(chǎn)力。解鉀菌可以改善植物根際微環(huán)境，分解土壤礦物中的難溶性鉀，提高土壤速效養(yǎng)分含量［49］。本研究接種解鉀菌XLT-4 和XLT-7 后紫花苜蓿根際土壤速效鉀含量顯著提高。萬兵兵等［50］研究表明，接種解鉀菌后，煙草（Nicotiana tabacum）根際土壤速效鉀含量增加了4.72%，本研究結(jié)果與其一致。

4 結(jié)論

從紫花苜蓿根際土壤中分離出2 株具有很強解鉀能力的菌株，分別為巨大芽孢桿菌和耐寒短桿菌。2 株菌株均具有產(chǎn)IAA、鐵載體和溶磷的能力。接種2 株解鉀菌顯著提高了紫花苜蓿的生物量、根系活力和粗蛋白含量，降低了纖維含量，并且提高了根際土壤酶活性和速效鉀含量。菌株XLT-4 和XLT-7 可作為開發(fā)微生物制劑的優(yōu)質(zhì)菌株資源。