腦脊液Tau 蛋白、血脂在MCI 和AD 中的表達(dá)及其診斷價(jià)值

朱彤 閆世勇 白雪

輕度認(rèn)知障礙（Mild cognitive impairment，MCI）常見于老年群體，是一種認(rèn)知障礙癥候群，與同年齡健康老人相比，MCI 患者多表現(xiàn)為認(rèn)知功能衰退，但其日常生活未有顯著影響［1］。MCI 被認(rèn)為是阿爾茨海默?。ˋlzheimer's disease，AD）的前驅(qū)階段，可以說MCI 是介于正常衰老與AD 之間的一種臨床過渡狀態(tài)。相關(guān)數(shù)據(jù)顯示，每年約有15%的MCI 患者進(jìn)展為AD，53%的MCI 患者在患病3 年后可能進(jìn)展為AD［2-3］。因此，將MCI 作為AD 的早期防治突破口是臨床研究熱點(diǎn)之一。Tau 蛋白是目前已知含量最高的微管相關(guān)蛋白，能夠維持微管穩(wěn)定性，降低微管蛋白分子解離。已有大量研究證明，AD 患者腦中Tau 蛋白總量較健康群體明顯增多，其與AD 病理發(fā)生有緊密聯(lián)系［4］。有學(xué)者［5］認(rèn)為，外周血血脂代謝紊亂能夠致使腦內(nèi)β-淀粉樣蛋白異常沉積，從而導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)AD 病理樣改變，但該結(jié)論尚存在較大爭(zhēng)議。本研究以上述理論為基礎(chǔ)，從Tau 蛋白、外周血血脂水平單獨(dú)與聯(lián)合應(yīng)用角度出發(fā)，綜合性分析其與機(jī)體認(rèn)知水平的關(guān)系以及在MCI、AD 中的評(píng)估價(jià)值，以期為臨床MCI、AD 預(yù)防提供一定支撐，現(xiàn)將研究結(jié)果匯報(bào)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

從ADNI 數(shù)據(jù)庫中隨機(jī)選出42 例MCI 患者（MCI 組），選取2021 年1 月至2022 年6 月于周至縣人民醫(yī)院體檢的40 名健康者（對(duì)照組），根據(jù)MCI 患者年齡、性別匹配同時(shí)段于本院治療的AD 患者42例為AD 組。其中，對(duì)照組女性30 名，男性10 名；年齡平均（74.38±6.17）歲；受教育年限平均（10.43±2.15）年。MCI 組女性31 例，男性11 例；年齡平均（73.88±6.16）歲；受教育年限平均（10.29±2.19）年。AD 組女性30 例，男性12 例；年齡平均（74.93±5.60）歲；受教育年限平均（10.26±2.14）年。三組患者性別、年齡、受教育年限比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。本研究已通過院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

以《阿爾茨海默病源性輕度認(rèn)知障礙診療中國(guó)專家共識(shí)2021》［6］為導(dǎo)向擬定AD、MCI 入組標(biāo)準(zhǔn)。MCI 入組標(biāo)準(zhǔn)：①主癥為記憶障礙，且家屬或其他照護(hù)人可證實(shí)；②年齡在60 周歲以上；③病情超過6 個(gè)月；④癡呆評(píng)定量表（Clinical Dementia Rating，CDR）在0.5 分以內(nèi)（含0.5 分）；⑤日常生活正常，排除癡呆。AD 入組標(biāo)準(zhǔn)：①年齡在60 周歲以上；②簡(jiǎn)易精神狀態(tài)量表（Mini-Mental State Examination，MMSE）［7］得分小于26 分；③Hachin-ski缺血指數(shù)量表（Hachinsk ilnchemic Score，HIS）［8］得分在4 分以內(nèi)；④存在至少兩個(gè)認(rèn)知域損害：學(xué)習(xí)、記憶，言語、聽寫，推理、判斷，執(zhí)行、視空間，可伴隨人格或行為轉(zhuǎn)變；⑤日常生活、工作受到影響；⑥患者家屬對(duì)研究知情同意，知曉相關(guān)利弊，已簽署同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并家族性精神疾病史；②合并惡性腫瘤，腦梗死、腦出血等其他心腦血管疾病導(dǎo)致的認(rèn)知障礙；③合并甲狀腺素減少引發(fā)的癡呆，合并麻痹性癡呆等其他原因?qū)е碌陌V呆；④合并自身免疫系統(tǒng)異常引發(fā)的相關(guān)疾病，入組前未接受相關(guān)免疫抑制治療；⑤配合度差，無法完成相應(yīng)研究；⑥中途退出研究。

1.3 方法

采用MMSE、Addenbrooke 改良認(rèn)知評(píng)估量表（Addenbrooke cognitive examination，ACE-R）評(píng)估所有受試者認(rèn)知水平。于入組后24 h 內(nèi)對(duì)MCI 組、AD 組患者和對(duì)照組個(gè)體Tau 蛋白表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)檢測(cè)血脂指標(biāo)［總膽固醇（Total Cholesterol，TC）、甘油三脂（Triglyceride，TG）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein，HDL-C）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）］水平。所有入選者在入組后分別行腰椎穿刺術(shù)抽取腦脊液2 mL 分別裝置-70℃冰箱凍存待測(cè)。采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑盒tau 蛋白，試劑盒購(gòu)自比利時(shí)innogenetics NV 公司。抽取晨起安靜狀態(tài)下靜脈血3 mL，離心10 min，轉(zhuǎn)速為2 500 r/min（離心半徑為10 cm），分離血清標(biāo)本，放置于-20℃下保存待測(cè)。TG 采用氧化酶法測(cè)定，TC 采用CHOD-PAP 法測(cè)定，HDL 和LDL 采用一步酶法測(cè)定，試劑盒購(gòu)自上?？瓢┥锛夹g(shù)有限公司。

1.4 觀察指標(biāo)

①M(fèi)MSE 評(píng)分，量表包括定向、記憶力、注意力、計(jì)算以及回憶與語言5 個(gè)維度，共30 項(xiàng)，總分為0～30 分，分?jǐn)?shù)越高認(rèn)知水平越高［8］；②ACE-R 評(píng)分，量表包含5 方面認(rèn)知：定向力、記憶、表達(dá)、語言、視覺空間認(rèn)知，總分為100 分，分?jǐn)?shù)越高認(rèn)知功能越好。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 22.0 進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)數(shù)資料使用n（%）表示，行χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料采用（）表示，多組比較用單因素ANOVA 方差分析，兩兩比較用LSD-t 檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Pearson 相關(guān)分析。建立受試者工作曲線（ROC）評(píng)估診斷、鑒別價(jià)值。以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組Tau 蛋白表達(dá)水平比較

對(duì)照組Tau 蛋白表達(dá)水平為（146.16±100.45）pg/mL，MCI 組為（357.98±156.37）pg/mL，AD 組為（432.49±178.42）pg/mL，三組Tau 蛋白表達(dá)水平：AD 組＞MCI 組＞對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=40.262，P＜0.05）。見圖1。

圖1 三組Tau 蛋白表達(dá)水平比較Fig. 1 Comparison of Tau protein expression levels among the three groups

2.2 三組血脂水平比較

三組TG、LDL-C 水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；三組TC 水平：AD 組＞MCI 組＞對(duì)照組，三組HDL-C 水平：AD 組＜MCI 組＜對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 三組血脂水平比較（）Table 1 Comparison of blood lipid levels among the three groups（）

表1 三組血脂水平比較（）Table 1 Comparison of blood lipid levels among the three groups（）

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.05；與MCI 組比較，bP＜0.05。

2.3 三組認(rèn)知水平比較

三組MMSE、ACE-R 評(píng)分：AD 組＜MCI 組＜對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 三組認(rèn)知水平比較［（），分］Table 2 Comparison of cognitive levels among the three groups［（），scores］

表2 三組認(rèn)知水平比較［（），分］Table 2 Comparison of cognitive levels among the three groups［（），scores］

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.05；與MCI 組比較，bP＜0.05。

2.4 Tau 蛋白、血脂水平與認(rèn)知功能的相關(guān)性分析

MMSE、ACE-R 評(píng)分與TG、LDL-C 水平無顯著相關(guān)性，與Tau 蛋白、TC 呈負(fù)相關(guān)性，與HDL-C呈正相關(guān)性（P＜0.05）。見表3。

表3 Tau 蛋白、血脂水平與認(rèn)知功能的相關(guān)性分析Table 3 Correlation analysis of Tau protein，lipid levels and cognitive function

2.5 Tau 蛋白、血脂水平單獨(dú)、聯(lián)合診斷MCI 的ROC 曲線分析

Tau 蛋白、TC、HDL-C 水平聯(lián)合診斷高于單-診斷P＜0.05。見表4、圖2。

表4 Tau 蛋白、血脂水平單獨(dú)、聯(lián)合診斷MCITable 4 Separate and combined diagnosis of MCI by Tau protein and blood lipid levels

圖2 Tau 蛋白、血脂水平單獨(dú)、聯(lián)合診斷MCI 的ROC 曲線Fig. 2 ROC Curve of Tau Protein，Lipid Levels for Single or Combined Diagnosis of MCI

2.6 Tau 蛋白、血脂水平單獨(dú)、聯(lián)合鑒別AD 的ROC 曲線分析

Tau 蛋白、TC、HDL-C 水平聯(lián)合診斷高于單-診斷（P＜0.05）。見表5、圖3。

表5 Tau 蛋白、血脂水平單獨(dú)、聯(lián)合鑒別ADTable 5 Tau protein and blood lipid levels alone and jointly identify AD

圖3 Tau 蛋白、血脂水平單獨(dú)、聯(lián)合鑒別AD 的ROC 曲線Fig. 3 ROC Curve of Tau Protein，Lipid Levels for Single，Combined identification AD

3 討論

AD 是一種好發(fā)于老年、老年前期群體以認(rèn)知功能障礙為典型表現(xiàn)的中樞性神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾?。?］。AD 患者早期可能僅存在記憶受損表現(xiàn)，隨著病情加重其學(xué)習(xí)、保存知識(shí)的能力衰退，甚至可能逐漸喪失言語能力，無法完成日常簡(jiǎn)單事項(xiàng)，嚴(yán)重影響生活質(zhì)量［10］。MCI 是AD 發(fā)病的臨床前階段，是一種處于健康與AD 患病之間的認(rèn)知損害狀態(tài)。作為AD 發(fā)病前的預(yù)警信號(hào)，MCI 一直是臨床研究的熱點(diǎn)。通過對(duì)正常群體、MCI 群體以及AD群體進(jìn)行鑒別與分析，能夠?yàn)锳D 高?；颊郀?zhēng)取到適當(dāng)干預(yù)時(shí)間。

Tau 蛋白屬于含磷酸基蛋白，MCI、AD 患者腦內(nèi)Tau 蛋白會(huì)出現(xiàn)異常過度磷酸化，導(dǎo)致其喪失正常生物功能，出現(xiàn)相應(yīng)神經(jīng)元退行性病變與認(rèn)知障礙［11］。本研究結(jié)果與許欣茹等人研究結(jié)果一致［12］。說明MCI、AD 患者Tau 蛋白水平較健康群體異常高表達(dá)。通過相關(guān)性分析可知，腦脊液Tau 蛋白表達(dá)水平與MMSE、ACE-R 評(píng)分呈負(fù)相關(guān)性，說明Tau 蛋白水平與機(jī)體認(rèn)知功能有相同變化趨勢(shì)，進(jìn)一步證實(shí)了Tau 蛋白參與了認(rèn)知功能障礙的發(fā)生與發(fā)展。

邱聰龍等［13］在對(duì)AD 患者血脂進(jìn)行研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，AD 患者認(rèn)知功能與其血脂表達(dá)水平有正相關(guān)性。黃小彥等［14］發(fā)現(xiàn)血脂升高是老年人出現(xiàn)輕度認(rèn)知障礙的危險(xiǎn)因素。同時(shí)，經(jīng)相關(guān)性分析可知，MMSE、ACE-R 評(píng)分與TC 呈負(fù)相關(guān)性，與HDL-C呈正相關(guān)性，說明血脂表達(dá)與機(jī)體認(rèn)知功能存在一定聯(lián)系。Gibbons 等［15］認(rèn)為，血脂表達(dá)與機(jī)體認(rèn)知功能的關(guān)系在于，神經(jīng)元細(xì)胞膜中存在大量脂肪，當(dāng)載脂蛋白異常時(shí)可引發(fā)血脂水平升高，致使Tau 蛋白磷酸化，誘發(fā)全腦沉積，產(chǎn)生認(rèn)知障礙，進(jìn)而發(fā)展為AD。

此外，本研究進(jìn)一步結(jié)果說明Tau蛋白與血脂水平在診斷、鑒別MCI、與AD方面有一定臨床價(jià)值。

綜上所述，MCI、AD 患者腦脊液TAU 蛋白及血脂水平存在異常表達(dá)，且其異常表達(dá)程度可隨認(rèn)知水平降低而加重，腦脊液TAU 蛋白與相關(guān)血脂指標(biāo)單獨(dú)、聯(lián)合對(duì)診斷、鑒別MCI 與AD 有一定臨床應(yīng)用價(jià)值。