參麥地黃湯聯(lián)合纈沙坦對糖尿病腎病患者氧化應(yīng)激、血管內(nèi)皮功能及血清miR-133b、miR-135b的影響

趙立昌,袁超,殷娜,計忠寧,相春波,曾菁蓉,李萍

(江陰市中醫(yī)院腎病科,江蘇 江陰 214400)

糖尿病腎病是糖尿病常見的并發(fā)癥之一,其嚴(yán)重程度取決于糖尿病患者對血糖的控制情況[1]。糖尿病腎病患者往往伴隨著氧化應(yīng)激和內(nèi)皮功能損傷表現(xiàn),而氧化應(yīng)激和內(nèi)皮功能異常又可加重糖尿病腎病病情,兩者密切相關(guān),互相影響[2]。因此,尋找有效的治療方案,防止或改善氧化應(yīng)激和內(nèi)皮功能損傷,對于糖尿病腎病治療具有重要意義[3]。纈沙坦是目前糖尿病腎病的常用治療藥物,可以阻止腎素和血管緊張素Ⅱ的形成和作用,減輕高血壓和腎小球毛細(xì)血管的收縮,實現(xiàn)對糖尿病腎病患者血管內(nèi)皮功能的改善,并能減輕氧化應(yīng)激損傷[4]。中醫(yī)治病求本,單通過纈沙坦針對患者病癥實現(xiàn)改善,難以從根源實現(xiàn)對機體平衡的調(diào)整。參麥地黃湯由《小兒藥證直訣》中六味地黃丸加沙參、麥冬組成,具有養(yǎng)陰益氣功效,前期研究顯示,參麥地黃湯能夠改善腎臟微循環(huán),保護(hù)腎小球,改善糖代謝障礙,同時還能從根源調(diào)節(jié)免疫功能[5]。因此,本研究進(jìn)一步研究參麥地黃湯聯(lián)合纈沙坦對糖尿病腎病患者氧化應(yīng)激和內(nèi)皮功能的影響,同時評估其對血清miR-133b、miR-135b的改變,以期為臨床治療糖尿病腎病提供參考及依據(jù)。

1 臨床資料

1.1 一般資料

選取2017年1月至2020年10月于我院門診就診的90例糖尿病腎病患者為研究對象,依據(jù)隨機數(shù)字表法將其分為對照組、觀察組各45例。2組患者基線資料比較無顯著差異(P>0.05),見表1。本研究經(jīng)江陰市中醫(yī)院倫理委員會審批通過(倫理批號:SR201600701)。

表1 2組患者一般資料比較

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn) 參照《糖尿病腎病診斷標(biāo)準(zhǔn)(2010)》[6]中關(guān)于糖尿病腎病的診斷標(biāo)準(zhǔn):清晨空腹血糖(FPG)、餐后血糖水平均升高,FPG>7.1 mmol·L-1;出現(xiàn)腎功能損傷,表現(xiàn)為血清肌酐(SCr)、24 h尿蛋白量升高(<2 500 mg);6個月內(nèi)尿白蛋白排泄率至少連續(xù)2次>20 μg·min-1。

1.2.2 中醫(yī)辨證標(biāo)準(zhǔn) 參照《糖尿病中醫(yī)防治指南》[7]、《糖尿病腎臟病中西醫(yī)結(jié)合防治專家共識(2019 版)》[8]氣陰兩虛證辨證標(biāo)準(zhǔn),主癥:①水腫;②尿濁;③五心煩熱;④神疲乏力;⑤咽干口燥。次癥:①潮熱盜汗;②納差;③大便干燥;④形瘦多食。舌脈:舌質(zhì)紅,苔少或薄黃而干,脈細(xì)數(shù)。滿足全部主癥,及任意3項次癥即可辨證。

1.2.3 納入標(biāo)準(zhǔn) ①符合糖尿病腎病診斷標(biāo)準(zhǔn)及氣陰兩虛證辨證標(biāo)準(zhǔn);②年齡為18周歲以上;③屬于早期腎臟病變[尿微量白蛋白/肌酐比值(UACR)≥30 mg·g-1];④對研究所用藥物無過敏反應(yīng);⑤糖尿病病程≥10年;⑥可遵從醫(yī)囑用藥;⑦簽署知情同意書者。

1.2.4 排除標(biāo)準(zhǔn) ①合并心腦血管疾病;②合并惡性腫瘤;③合并全身或局灶感染;④存在慢性腎小球腎炎、高血壓腎病等;⑤存在消化系統(tǒng)潰瘍;⑥妊娠期或哺乳期婦女;⑦存在嚴(yán)重精神疾病,合并認(rèn)知功能障礙;⑧有視聽功能障礙。

2 方法

2.1 治療方法

對照組予纈沙坦分散片(魯南貝特制藥有限公司,生產(chǎn)批號:20160907,規(guī)格: 每片40 mg)口服,每日1次,每次80 mg。

觀察組在治療組基礎(chǔ)上加予參麥地黃湯口服治療,藥物組成為北沙參15 g,熟地黃15 g,茯苓15 g,麥冬10 g,山萸肉10 g,山藥10 g,澤瀉10 g,牡丹皮6 g,由江陰市中醫(yī)院中藥房代煎,取汁300 mL,早晚各150 mL口服。

2組患者均治療3個月。

2.2 觀察指標(biāo)及方法

2.2.1 臨床療效評價 參照《臨床疾病診斷與療效判斷標(biāo)準(zhǔn)》[9]中的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)對其進(jìn)行判定,顯效:UACR和尿蛋白定量降至正常范圍;有效:UACR或尿蛋白定量減少≥30%;無效:未達(dá)到上述標(biāo)準(zhǔn)?？傆行?(顯效例數(shù)+有效例數(shù))/總例數(shù)×100%。

2.2.2 中醫(yī)證候積分比較 于治療前后評估患者主癥、次癥積分,主癥按重度(6分)、中度(4分)、輕度(2分)、無(0分)評分,次癥無、輕、中、重度分別記 0、1、2、3 分。 積分越高,癥狀越嚴(yán)重。

2.2.3 血糖及腎功能檢測 于治療前后抽取2組患者空腹靜脈血5 mL,3 000 r·min-1離心10 min后取血清,采用全自動生化分析儀(Beckman Coulter公司,型號:AU5800型)檢測FPG、SCr、尿素氮(BUN)水平及UACR,試劑盒購自Beckman Coulter公司,貨號C0008-50、C0101-41、C0006-14、C0009-10。

2.2.4 氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測 于治療前后抽取2組患者空腹靜脈血5 mL,3 000 r·min-1離心10 min后取血清,置于-80 ℃冰箱中儲存,采用ELISA法檢測超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平,試劑盒選購自南京建成生物工程研究所,貨號:55204、55641。

2.2.5 血管內(nèi)皮功能指標(biāo)檢測 于治療前、后空腹?fàn)顟B(tài)取靜脈血3 mL,3 000 r·min-1離心10 min后取血清,用ELISA法檢測可溶性細(xì)胞間黏附分子-1(sICAM-1)及內(nèi)皮素-1(ET-1)水平,試劑盒選購自南京建成生物工程研究所,貨號:56432、54432。

2.2.6 血清miR-133b、miR-135b水平檢測 于治療前后空腹?fàn)顟B(tài)取靜脈血4 mL,3 000 r·min-1離心15 min后取血清置于無菌EP管中,qPCR法檢測樣本血清miR-133b、miR-135b表達(dá)量。應(yīng)用SYBR qPCR Mix在Applied Biosystems公司的Prism 7000型熒光定量PCR系統(tǒng)上進(jìn)行PCR反應(yīng)。反應(yīng)條件為95 ℃下10 min,隨后進(jìn)入40個循環(huán):94 ℃下30 s,58 ℃下30 s,72 ℃下 1 min。miR-133b引物序列為:上游5′-CGCTCAGTGCATCACAGAA-3′,下游5′-CTCGCTTCCGCAGCACA-3′;miR-135b引物序列為:上游5′-GGCCTGAGCCTTCAGGGGCT-3′,下游5′-CGCGTAGGCGATTGGGGATCG-3′。

2.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計數(shù)資料用頻數(shù)(%)表示,進(jìn)行2檢驗;符合正態(tài)分布的計量資料用表示,采用t檢驗,以P<0.01為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 2組患者臨床療效比較

結(jié)果見表2。

表2 2組患者臨床療效比較(n=45)

3.2 2組患者治療前后中醫(yī)證候積分比較

結(jié)果見表3。

表3 2組患者治療前后中醫(yī)證候積分比較

3.3 2組治療前后患者血糖及腎功能比較

結(jié)果見表4。

表4 2組患者治療前后血糖及腎功能比較

3.4 2組患者氧化應(yīng)激指標(biāo)比較

結(jié)果見表5。

表5 2組患者治療前后氧化應(yīng)激指標(biāo)比較

3.5 2組患者治療前后血管內(nèi)皮功能指標(biāo)比較

結(jié)果見表6。

表6 2組患者治療前后血管內(nèi)皮功能指標(biāo)比較

3.6 2組患者治療前后血清miR-133b、miR-135b水平比較

結(jié)果見表7。

表7 2組患者治療前后血清miR-133b、miR-135b水平比較

4 討論

糖尿病腎病是指由于長期血糖控制不良而導(dǎo)致的腎臟損傷和功能障礙,是糖尿病患者最常見的并發(fā)癥之一。通常表現(xiàn)為腎小球濾過率降低、蛋白尿、高血壓等癥狀,嚴(yán)重時可能導(dǎo)致腎功能衰竭。糖尿病腎病成因較為復(fù)雜,其中糖尿病引起的炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激會加速腎臟纖維化和損傷,使糖尿病腎病進(jìn)展加劇。糖尿病腎病會造成腎臟的結(jié)構(gòu)和功能異常,腎小球濾過率下降,無法及時清除體內(nèi)多余廢物和液體,導(dǎo)致水腫、嚴(yán)重的腎功能衰竭等問題[10]。臨床治療糖尿病腎病主要采取保守干預(yù)與藥物治療,如控制血糖、血壓、限制蛋白質(zhì)攝入,口服降糖藥、利尿劑、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑等。近年來,隨著中西醫(yī)結(jié)合治療理念的發(fā)展,中西醫(yī)結(jié)合用藥在糖尿病治療中應(yīng)用頻率上升[11]。

糖尿病腎病可歸屬于中醫(yī)“水腫”范疇,病因多歸于脾胃虛弱、氣血不足、陰陽失衡等,臨床以氣陰虧虛證居多。參麥地黃湯由六味地黃丸改良而來,方中北沙參養(yǎng)陰益氣、益胃生津,麥冬潤肺止咳、滋補肺陰,熟地黃益腎滋陰,共為君藥;山茱萸補腎澀精,山藥補益脾陰固腎,共為臣藥;澤瀉利濕泄?jié)?茯苓淡滲健脾除濕,助山藥之健運脾胃,與澤瀉共泄腎濁,而為使藥;牡丹皮清泄虛熱,為佐藥,諸藥合用共奏養(yǎng)陰益氣之效。本研究結(jié)果顯示,纈沙坦聯(lián)合參麥地黃湯治療后臨床總有效率達(dá)97.78%,顯著高于對照組的82.22%,且FPG、SCr、BUN、UACR水平更低,說明聯(lián)合治療方式療效更好,對患者血糖、腎功能改善程度更明顯。

糖尿病腎病患者中,氧化應(yīng)激反應(yīng)的增加可能導(dǎo)致機體自由基生成增多,內(nèi)皮細(xì)胞通透性增加,炎癥反應(yīng)加重,最終致使腎臟細(xì)胞受到嚴(yán)重?fù)p傷,因此,研究治療方案對氧化應(yīng)激的改善十分有意義。miR-133b、miR-135b被認(rèn)為是一種促炎型miRNA,可以刺激腎小球系膜細(xì)胞產(chǎn)生炎癥因子并導(dǎo)致纖維化[12]。本研究結(jié)果顯示,治療后2組患者SOD水平升高,MDA、sICAM-1、ET-1、miR-133b、miR-135b均明顯下降,且觀察組顯著優(yōu)于對照組,提示參麥地黃湯聯(lián)合纈沙坦可有效改善患者機體氧化應(yīng)激、血管內(nèi)皮功能及炎癥水平。

綜上所述,參麥地黃湯聯(lián)合纈沙坦可改善糖尿病腎病患者血糖、腎功能以及氧化應(yīng)激、血管內(nèi)皮功能,降低血清miR-133b、miR-135b水平。但本次研究納入樣本量偏少,且為單中心研究,未來還需開展大樣本、多中心研究以進(jìn)一步研究參麥地黃湯防治糖尿病腎病的內(nèi)在機制。