血清尿酸和總膽紅素與眼眶彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤的相關(guān)性研究△

張臨晨 許曉峰 胡濤 夏祖光

(1.復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院病理科 上海 200032；2.復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科 上海 200032；3.復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院淋巴瘤科 上海 200032；4.復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院腫瘤學(xué)系 上海 200032)

眼附件淋巴瘤(ocular adnexal lymphoma，OAL)可發(fā)生于結(jié)膜、眼瞼和眼眶，包括淚腺[1]。淋巴瘤是眼附件最常見的惡性腫瘤，OAL 占結(jié)外淋巴瘤的5%～10%[2]。眼眶淋巴瘤占OAL 的50%～60%[3]。絕大多數(shù)眼眶淋巴瘤為B 細(xì)胞起源(90%)，其中彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤是較為常見的亞型[4]。按照細(xì)胞起源分類，可將其分為生發(fā)中心型(GCB)和非生發(fā)中心型(non-GCB)兩類，其中GCB 型預(yù)后相對較好[5]。眼眶淋巴瘤多發(fā)于老年人，其性別分布因淋巴瘤亞型而異，而彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤性別分布均勻[6-7]。組織病理學(xué)亞型和疾病的臨床分期是眼眶淋巴瘤患者預(yù)后的最主要指標(biāo)，其中彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤預(yù)后較差，治療眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤，一般選擇免疫化療，伴或不伴放療[4]。

有研究[8]報(bào)道，炎癥細(xì)胞和細(xì)胞因子有可能促進(jìn)腫瘤生長、進(jìn)展和導(dǎo)致免疫抑制，并且癌癥易感性和嚴(yán)重程度可能與炎癥細(xì)胞因子基因的功能多態(tài)性有關(guān)。對于淋巴瘤或白血病等疾病，患者體內(nèi)尿酸(uric acid，UA)生成變多，血清UA 水平升高[9]。目前，大量流行病學(xué)和臨床研究[10]表明，血清UA水平可作為血液系統(tǒng)腫瘤的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。有研究[11]發(fā)現(xiàn)，彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤患者血清UA、乳酸脫氫酶和β2微球蛋白水平可顯著升高。有研究[12]表明，膽紅素可促進(jìn)促炎細(xì)胞因子的釋放，可引發(fā)炎癥反應(yīng)。然而，血清UA 和TBIL 與眼眶彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤的相關(guān)性尚未有過報(bào)道。

因此，本文回顧性分析了35 例經(jīng)病理證實(shí)為眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤的相關(guān)臨床資料，探討其血清中UA 和TBIL 水平的變化與發(fā)病的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 資料

收集 2015 年1 月—2022 年12 月復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院收治的35 例眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤、35 例原發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤和35例健康對照的臨床資料。眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤與原發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤和健康對照組之間的年齡、性別分布，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 納入排除標(biāo)準(zhǔn)

病例納入標(biāo)準(zhǔn)：①手術(shù)或活檢的眼部腫物組織，經(jīng)病理診斷為彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤；②完整的病史資料。病例排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤以外的其他腫瘤疾?。虎?排除全身免疫系統(tǒng)疾病。

疾病對照入選標(biāo)準(zhǔn)：①手術(shù)或活檢的中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫物組織，經(jīng)病理診斷為彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤(須結(jié)合臨床、影像檢查結(jié)果確認(rèn)為原發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤)；②完整的病史資料。病例排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有原發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤以外的其他腫瘤疾??；②排除全身免疫系統(tǒng)疾病。

健康對照入選標(biāo)準(zhǔn)：①健康體檢人群；②排除合并可導(dǎo)致視力下降的眼病及其他眼科炎癥疾??；③排除合并免疫功能不全、腫瘤等全身免疫性系統(tǒng)疾病。

本研究遵循《赫爾辛基宣言》的原則，經(jīng)復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，并獲取所有研究對象的《知情同意書》。

1.3 臨床資料的收集

確定研究對象后，對納入患者進(jìn)行臨床和病理資料、數(shù)據(jù)的收集，包括年齡、性別、血清UA、TBIL 水平及病理亞型等。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)計(jì)軟件(IBM SPSS，版本24.0；IBM,Inc,New York,USA)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。采用Kolmogorov-Smirnov 檢驗(yàn)數(shù)據(jù)正態(tài)性，計(jì)量資料符合正態(tài)分布則結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD)表示；偏態(tài)分布計(jì)量數(shù)據(jù)以中位數(shù)(四分位間距)表示。3組比較采用方差分析。通過多因素 Logistic 回歸分析和LASSO 回歸分析篩選眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤發(fā)生的危險(xiǎn)因素，并依此構(gòu)建風(fēng)險(xiǎn)模型。應(yīng)用受試者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲線評價(jià)模型的區(qū)分度。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 基本資料

3 組間平均年齡、性別分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.517，P=0.765)。眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤組UA 水平顯著高于健康對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤組TBIL水平高于健康對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。本研究中，眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤組GCB 型有11 例，原發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤組GCB 型有8 例，2 組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.420)，見表1。

表1 3組一般臨床參數(shù)及血清UA和TBIL分析

2.2 多因素 Logistic 回歸分析

納入全部因素，通過校正性別和年齡，對UA和TBIL 水平進(jìn)行多因素 Logistic 回歸分析，如圖1所示，血清UA 和TBIL 水平上升為眼眶彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤發(fā)病的危險(xiǎn)因素；血清UA 水平下降和TBIL 水平上升為原發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤發(fā)病的危險(xiǎn)因素。血清UA 和TBIL 升高者患眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤的可能性是未有以上危險(xiǎn)因素者的1.005 6 倍和1.097 9 倍，見表2。

圖1 UA 和TBIL 水平變化與疾病發(fā)生的關(guān)系 GROUP 0：健康對照組；GROUP 1：原發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤；GROUP 2：眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤。

表2 UA和TBIL與眼眶彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤的多因素Logistic回歸分析

2.3 LASSO 回歸分析

LASSO 回歸是保證模型最優(yōu)的前提下將自變量的系數(shù)收縮為0，估計(jì)選擇變量的回歸系數(shù)[13]。如圖2 所示，本研究中用LASSO 回歸模型將性別、年齡、UA 和TBIL 作為協(xié)變量。這些納入LASSO 回歸模型的協(xié)變量作為混合因素進(jìn)行調(diào)整，得到計(jì)算得分公式：0.001 35×UA+0.018 51×TBIL。

圖2 LASSO回歸分析

2.4 ROC 曲線

ROC 曲線顯示，UA 水平鑒別眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤最大曲線下面積為0.641，敏感度為64.32%，特異度為67.08；TBIL 水平鑒別眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤最大曲線下面積為0.514，敏感度為47.16%，特異度為55.77%；UA 水平聯(lián)合TBIL水平預(yù)測發(fā)生眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤的最大曲線下面積(area under curve,AUC)為0.694，敏感度為72.02%，特異度為74.38%。見圖3。

圖3 ROC曲線

3 討論

眼眶淋巴瘤占OAL 的50%～60%，其中彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤占23%[2-4]。眼眶彌漫性大B 淋巴瘤屬于高級別淋巴瘤，老年人多見，進(jìn)展快，預(yù)后差，易誤診為炎性假瘤[14]。因此，眼眶彌漫性大B 淋巴瘤的早期準(zhǔn)確診斷極為重要。本研究發(fā)現(xiàn)，血清中UA 和TBIL 水平與眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤發(fā)病相關(guān)，高水平的UA 和TBIL 可能是眼眶彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤發(fā)生的危險(xiǎn)因素。

眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤病因較為復(fù)雜，可能與基因突變、自身免疫性疾病、免疫抑制性疾病以及慢性抗原刺激相關(guān)[4]。近期，有研究表明眼眶淋巴瘤患者血清泛炎癥miRNA 簇上調(diào)[15]，推測相關(guān)炎癥因子與眼眶淋巴瘤的發(fā)生可能相關(guān)。早在19 世紀(jì)，即有研究[7]描述腫瘤與炎癥的關(guān)系，炎癥反應(yīng)會(huì)促進(jìn)腫瘤的發(fā)生。Vona-Davis等[16-17]提出了UA 可作為炎癥介質(zhì)誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)，UA 在進(jìn)入細(xì)胞后可激活絲裂原活化蛋白激酶，激活NF-κB 炎性通路，誘導(dǎo)C 反應(yīng)蛋白等炎癥介質(zhì)表達(dá)。UA 還可以激活核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3，可激活單核巨噬細(xì)胞，其是腫瘤微環(huán)境中重要的組成部分[18]。腫瘤的高細(xì)胞周轉(zhuǎn)率和腫瘤溶解綜合征可能是導(dǎo)致血清中UA 水平升高的原因[19-20]。有研究證實(shí)，膽紅素會(huì)引起小膠質(zhì)細(xì)胞[21]和星形膠質(zhì)細(xì)胞[22]釋放促炎細(xì)胞因子，星形膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)膽紅素刺激后可在幾小時(shí)內(nèi)迅速釋放腫瘤壞死因子-α (TNF-α)和IL-1β，而其釋放IL-6 則先經(jīng)歷短時(shí)抑制，又在12 h 后出現(xiàn)大量釋放[22-23]。另有研究[12]報(bào)道，與非黃疸大鼠相比，黃疸大鼠體內(nèi)表達(dá)IL-18 和巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1 水平升高。這些研究表明膽紅素調(diào)節(jié)了神經(jīng)細(xì)胞中炎癥因子的表達(dá)。

本研究通過Logistic 回歸和LASSO 回歸分析發(fā)現(xiàn)，血清UA 和TBIL 水平升高是眼眶彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤發(fā)病的危險(xiǎn)因素。血清UA 和TBIL 升高者患眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤的可能性是未有以上危險(xiǎn)因素者的1.005 6倍和1.097 9倍。本研究提示，血清UA 和TBIL 可能參與了眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤的發(fā)病。預(yù)測模型的ROC 結(jié)果顯示，UA 結(jié)合TBIL 水平鑒別眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤的最大曲線下面積為0.694。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤患者血清UA和TBIL水平較健康對照顯著升高，進(jìn)一步研究分析發(fā)現(xiàn)UA 和TBIL 水平升高可能是眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤發(fā)病的危險(xiǎn)因素，而血清UA 和TBIL 水平升高與炎癥密切相關(guān)。因此，推測炎癥反應(yīng)可能參與了眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤的發(fā)病。本研究首次探討了血清UA 和TBIL 水平與眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤之間的相關(guān)性，但存在一定的缺陷，例如樣本例數(shù)較少、未進(jìn)行隨訪、未充分探討因果關(guān)系以及未深入研究炎癥反應(yīng)影響腫瘤的具體機(jī)制。因此，需要進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量來驗(yàn)證血清UA 和TBIL 水平與眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤之間的關(guān)系，并探明其影響眼眶彌漫性大B 細(xì)胞淋巴瘤病理生理的具體機(jī)制。