食品中氯噻啉殘留檢測(cè)方法研究進(jìn)展

楊小鋒，許友良，廖林茂，劉躍群，璩向南，王建田

（1.南通江山農(nóng)藥化工股份有限公司，江蘇南通 226017；2.中化作物保護(hù)品有限公司，上海 200125；3.隆回縣七江鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心，湖南隆回 422205）

氯噻啉是南通江山農(nóng)藥化工股份有限公司具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的用于防治蚜蟲、粉虱、飛虱、薊馬和葉蟬等害蟲的新煙堿類殺蟲劑，具有很好的內(nèi)吸、滲透作用，同時(shí)具有低毒、高效、應(yīng)用范圍廣等特點(diǎn)[1]。氯噻啉使用量的增加帶來了食品中殘留問題，因此高效的殘留檢測(cè)技術(shù)對(duì)氯噻啉的規(guī)范使用和應(yīng)用發(fā)展具有重要的意義。本文對(duì)近年來氯噻啉殘留檢測(cè)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道進(jìn)行了歸納整理，對(duì)各檢測(cè)方法的特點(diǎn)進(jìn)行了總結(jié)分析，以期為食品中氯噻啉的殘留檢測(cè)提供參考。

1 液相色譜法

液相色譜法是以單一溶劑、混合溶劑、緩沖液等液體作為流動(dòng)相，利用不同物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相之間由于吸附性能、分配系數(shù)等不同而在固定相中的作用力不同，進(jìn)而將目標(biāo)物從復(fù)雜的混合物中分離出來后進(jìn)行檢測(cè)的一種分析技術(shù)，具有高效、分離時(shí)間短、選擇性高等優(yōu)點(diǎn)。李青等[2]采用高效液相色譜法對(duì)5 種茶葉中氯噻啉殘留進(jìn)行了分析，使用二極管陣列檢測(cè)器（波長(zhǎng)270 nm）對(duì)氯噻啉的光譜進(jìn)行分析，通過對(duì)比3 種流動(dòng)相組合的檢測(cè)結(jié)果，篩選出最佳條件為甲醇+乙腈+0.1%磷酸溶液（體積比10 ∶25 ∶65），在此檢測(cè)條件下測(cè)得的線性方程為y=50 803x-977.95（線性范圍為0.05 ～0.80 μg·mL-1），相對(duì)系數(shù)為R2=0.999 8，檢出限為0.1 mg·kg-1；往茶葉空白樣品中添加0.05 μg·mL-1、0.80 μg·mL-1和1.50 μg·mL-1共3 個(gè)添加水平的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按上述檢測(cè)方法處理后得到5 種茶葉中氯噻啉的回收率在80%～110%，RSD 小于10%，滿足茶葉中氯噻啉殘留量的日常檢測(cè)要求。賀敏等[3]使用高效液相色譜儀對(duì)水稻及其環(huán)境中的氯噻啉殘留量進(jìn)行檢測(cè)，使用二氯甲烷對(duì)糙米、谷殼、莖葉、土壤和水樣進(jìn)行提取，以弗羅里硅土和活性炭組成的吸附劑進(jìn)行凈化，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為270 nm，通過加標(biāo)回收試驗(yàn)得到回收率為89.27%～98.11%，變異系數(shù)為0.55%～3.64%，最小檢出量為0.2 ng，稻田水中氯噻啉的檢出限為0.000 4 mg·L-1，在土壤、植株、谷殼、稻米中的檢出限分別為0.005 mg·kg-1、0.010 mg·kg-1、0.020 mg·kg-1、0.005 mg·kg-1，該方法適合應(yīng)用于水稻及其環(huán)境中氯噻啉殘留量的檢測(cè)。高智席等[4]采用固相萃取-液相色譜法對(duì)水果中氯噻啉殘留量進(jìn)行了測(cè)定，前處理過程采用乙酸乙酯+環(huán)己烷（體積比1 ∶1）為提取劑對(duì)樣品進(jìn)行提取，以乙腈+水（體積比60 ∶40）為流動(dòng)相，流速為0.8 mL·min-1，進(jìn)樣量為20 μL，檢測(cè)波長(zhǎng)為230 nm，該方法操作簡(jiǎn)便、快速且費(fèi)用較低，適用于水果中氯噻啉殘留的檢測(cè)。

2 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法

液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法是將液相色譜和質(zhì)譜進(jìn)行串聯(lián)后對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行定性和定量分析的先進(jìn)技術(shù)，這種將二者結(jié)合起來的分析技術(shù)擴(kuò)展了可分析化合物的范圍，將目標(biāo)物從復(fù)雜化合物中高效分離，通過離子結(jié)構(gòu)解析實(shí)現(xiàn)定性定量分析，此技術(shù)具備高效的分離能力和準(zhǔn)確的分析能力，且具有高分辨率、高靈敏度和高檢測(cè)速度等優(yōu)點(diǎn)[5]。劉松南等[6]采用QuEChERS 前處理結(jié)合液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜建立了茶葉中氯噻啉殘留量檢測(cè)的方法，茶葉樣品采用乙腈進(jìn)行提取后使用PSA、C18和GCB 等材料進(jìn)行凈化，凈化后移取上清液加入等體積純水進(jìn)行稀釋后上機(jī)檢測(cè)，使用C18色譜柱對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行分離，流動(dòng)相為乙腈-0.1%甲酸水溶液，流速設(shè)為0.30 mL·min-1，質(zhì)譜端在ESI 正離子模式下選擇多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式，外標(biāo)法定量；結(jié)果表明氯噻啉線性關(guān)系良好（線性范圍為1 ～500 μg·L-1），相關(guān)系數(shù)為0.999 9，定量限為0.01 mg·kg-1，采用烏龍茶和綠茶樣品開展了加標(biāo)回收試驗(yàn)， 在0.01 mg·kg-1、0.30 mg·kg-1和3.00 mg·kg-1共3 個(gè)添加水平下的平均回收率為87.0%～101.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.1%～13.1%，該方法高效、準(zhǔn)確、特異性好、分析速度快，可滿足檢測(cè)需要。陸小磊等[7]建立了乙腈勻質(zhì)提取、固相萃取凈化結(jié)合超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)茶葉中氯噻啉的方法，該方法具有高速、高效、準(zhǔn)確的特點(diǎn)，且在實(shí)際樣品檢測(cè)中取得了良好效果，可以滿足國(guó)內(nèi)外對(duì)茶葉中氯噻啉快速檢測(cè)的要求。徐煒楓[8]使用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜對(duì)甘藍(lán)樣品中氯噻啉進(jìn)行定性及定量分析，在基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液為0.008 7 ～0.087 0 mg·L-1時(shí)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為0.997 9，方法檢出限為0.01 mg·kg-1，在0.01 mg·kg-1、0.10 mg·kg-1、1.00 mg·kg-1添加水平下，甘藍(lán)中氯噻啉回收率為89%～130%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差≤12%，該方法前處理速度快，結(jié)果準(zhǔn)確性好，可以滿足甘藍(lán)中氯噻啉殘留量的檢測(cè)需要。李曉貝等[9]利用QuEChERS 前處理方法結(jié)合超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)青菜中的氯噻啉殘留量進(jìn)行了檢測(cè)，在0.01 ～1.00 mg·kg-1的濃度范圍內(nèi)，得到的加標(biāo)回收率為77.2%～87.9%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.5%～3.0%，檢出限為0.000 2 mg·kg-1，定量限為0.01 mg·kg-1，可滿足青菜中氯噻啉殘留的檢測(cè)需求。侯建波等[10]采用QuEChERS 前處理結(jié)合高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)蜂王漿中氯噻啉進(jìn)行檢測(cè)，使用純水對(duì)樣品進(jìn)行稀釋后采用甲醇對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行提取，以PSA、C18和無水硫酸鎂作為分散劑進(jìn)行凈化后上機(jī)檢測(cè)分析，該方法快速準(zhǔn)確、靈敏高效，可作為蜂王漿中氯噻啉殘留量的測(cè)定方法。周大衛(wèi)[11]建立了QuEChERS 結(jié)合液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)肉品中氯噻啉殘留的方法，使用酸化乙腈對(duì)樣品進(jìn)行提取，采用PSA 和C18對(duì)提取液進(jìn)行凈化，液相端使用C18柱對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行分離，在流速0.30 mL·min-1條件下采用乙腈-0.1%甲酸水溶液作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，在ESI 正離子模式下采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)進(jìn)行分析；結(jié)果表明，氯噻啉在10 ～400 ng·mL-1濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，檢出限為5.0 μg·kg-1，回收率在91.41%～93.51%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.4%～3.2%，該方法高效、準(zhǔn)確、重復(fù)性好、操作簡(jiǎn)便，可為肉品中氯噻啉殘留的檢測(cè)提供參考。鐘莉萍[12]建立了液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定瓜類蔬菜及糧谷中農(nóng)藥殘留量的方法，樣品用乙腈∶甲酸（體積比99 ∶1）提取，經(jīng)QuEChERs處理后用C18色譜柱分離，流動(dòng)相采用乙腈-0.1%甲酸水溶液，在ESI 正離子模式下采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式進(jìn)行檢測(cè)，外標(biāo)法定量，該方法靈敏度可以滿足檢測(cè)要求，操作簡(jiǎn)便且準(zhǔn)確性、重復(fù)性均較好，適用于糧谷和瓜類蔬菜中氯噻啉殘留的檢測(cè)分析。

3 免疫分析法

免疫分析技術(shù)是基于抗體與抗原或半抗原之間的特異性識(shí)別反應(yīng)建立的一種生物化學(xué)分析法，由于具有快捷、經(jīng)濟(jì)的特點(diǎn)而適合于農(nóng)藥殘留現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)，目前免疫分析正向多元化方向發(fā)展，方法的穩(wěn)定性、對(duì)檢測(cè)對(duì)象的通用性、超高的靈敏度是新型免疫方法的發(fā)展趨勢(shì)[13]。華修德等[14]建立了一種基于NaYF4:Yb,Er 上轉(zhuǎn)換熒光納米材料的上轉(zhuǎn)換熒光免疫層析（Upconversion Immunochromatographic Assay，UICA）方法，并將其用于農(nóng)產(chǎn)品中氯噻啉的定量檢測(cè)，該方法具有操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)時(shí)間短和抗樣品基質(zhì)干擾能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，經(jīng)條件優(yōu)化后，其半數(shù)抑制濃度（IC50）為97.37 ng·mL-1，檢出限（IC10）為26.30 ng·mL-1， 線 性 范 圍（IC10～I(xiàn)C90） 為26.30 ～363.08 ng·mL-1，UICA 對(duì)大米、 桃、 番茄、小麥、梨和黃瓜等樣品的平均加標(biāo)回收率為71.8%～97.2%，該方法可以為大米等農(nóng)產(chǎn)品中氯噻啉殘留的檢測(cè)工作提供參考。方松等[15]等建立了檢測(cè)氯噻啉殘留的間接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫分析方法（Indirect Competitive Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ic-ELISA），該方法特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確度高、快速簡(jiǎn)便、成本低廉，可同時(shí)測(cè)定多個(gè)樣品，可應(yīng)用于甘藍(lán)、水等樣品的檢測(cè)，為氯噻啉快速檢測(cè)和免疫試劑盒的研制提供了基礎(chǔ)。

4 結(jié)語

本文概述了食品中氯噻啉殘留量的主要檢測(cè)方法，為食品中氯噻啉殘留的檢測(cè)提供了參考。隨著生產(chǎn)過程中氯噻啉的推廣和用量的增加，以及檢測(cè)對(duì)象基質(zhì)種類的擴(kuò)大，需要根據(jù)具體食品特征對(duì)氯噻啉的檢測(cè)條件進(jìn)行優(yōu)化，并對(duì)建立的檢測(cè)參數(shù)進(jìn)行驗(yàn)證和優(yōu)化，確保檢測(cè)方法的準(zhǔn)確可靠，進(jìn)而促進(jìn)氯噻啉的安全規(guī)范使用和應(yīng)用發(fā)展。