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    2018—2022 年四川省達(dá)州市獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測能力比對分析

    2023-11-22 07:14:22李清竹徐倚天劉俐君趙小波黎丁箕
    中國畜禽種業(yè) 2023年10期
    關(guān)鍵詞:達(dá)州市禽流感獸醫(yī)

    李清竹,徐倚天,劉俐君,趙小波,楊 青,張 蕾,黎丁箕,李 成

    (達(dá)州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,四川達(dá)州 635000)

    為科學(xué)評估達(dá)州市獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測水平,達(dá)州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心(以下簡稱市疫控中心)于2018—2022 年期間組織轄區(qū)內(nèi)7個(gè)縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室開展獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測能力比對工作。本文通過對比對結(jié)果分析,提出針對性整改措施,以期進(jìn)一步提高全市獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測水平,增強(qiáng)達(dá)州市動(dòng)物疫病監(jiān)測預(yù)警能力。

    1 材料與方法

    1.1 比對范圍

    達(dá)州市內(nèi)轄區(qū)7 個(gè)縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室,其中5個(gè)實(shí)驗(yàn)室已通過省級考核或延展考核驗(yàn)收。

    1.2 比對項(xiàng)目、檢測方法、試劑來源和執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)

    2018—2022 年,每年比對3~5 個(gè)檢測項(xiàng)目,共比對項(xiàng)目17 個(gè)。比對項(xiàng)目包括禽流感、口蹄疫、布魯氏菌病、非洲豬瘟的病原學(xué)或血清學(xué)檢測(詳情見表1)。涉及5 種檢測方法:酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、血凝與血凝抑制試驗(yàn)(HA-HI)、熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(熒光PCR)、布魯氏菌試管凝集試驗(yàn)(SAT)、以及布魯氏菌虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBT)。

    表1 2018—2022 年檢測能力比對項(xiàng)目

    1.3 比對樣品和試劑

    比對樣品由市疫控中心自制或試劑廠家生產(chǎn),經(jīng)市疫控中心反復(fù)驗(yàn)證、編號(hào)、分裝,標(biāo)定樣品參考值后發(fā)放,各參考值的樣品數(shù)量不一致。每個(gè)比對項(xiàng)目設(shè)置4~6 個(gè)盲樣,各樣品外觀無差異,樣品量相同。除2022 年非洲豬瘟病毒核酸檢測、禽流感H5/H7 亞型核酸檢測2 個(gè)項(xiàng)目以外,其余比對項(xiàng)目試劑均由市疫控中心統(tǒng)一購置。

    1.4 比對樣品發(fā)放方式

    比對樣品由市疫控中心統(tǒng)一發(fā)放,縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室派專人在限定日期內(nèi)到市疫控中心實(shí)驗(yàn)室領(lǐng)取,放入裝有冰袋的保溫箱中保存,并在12h內(nèi)送達(dá)各自實(shí)驗(yàn)室后按具體要求存放。

    1.5 評判標(biāo)準(zhǔn)

    1.5.1 禽流感H5、H7 亞型抗體檢測

    陰、陽性對照成立,檢測結(jié)果與參考值相同或者±1 個(gè)滴度,判定為結(jié)果正確。

    1.5.2 O 型口蹄疫抗體檢測

    陰、陽性對照成立,陽性樣品、若弱陽性樣品檢測結(jié)果為“陽性”,陰性樣品的結(jié)果為“陰性”,判定為結(jié)果正確。

    1.5.3 非洲豬瘟病毒核酸、禽流感H5/H7 亞型核酸檢測

    陰、陽性對照成立,陽性樣品、若弱陽性樣品的檢測結(jié)果為“陽性”,陰性樣品的結(jié)果為“陰性”,判定為結(jié)果正確。

    1.5.4 布魯氏菌抗體檢測

    使用試管凝集試驗(yàn),虎紅平板試驗(yàn)進(jìn)行檢測:陰、陽性對照成立,若陽性樣品的檢測結(jié)果為“陽性”,陰性樣品的結(jié)果為“陰性”,判定為結(jié)果正確。

    1.6 比對結(jié)果報(bào)告

    縣級實(shí)驗(yàn)室每年在規(guī)定時(shí)間內(nèi)獨(dú)立完成各項(xiàng)目檢測,及時(shí)向市疫控中心上報(bào)檢測結(jié)果,同時(shí)報(bào)送檢測報(bào)告及原始記錄。

    2 結(jié)果分析

    2.1 總體比對結(jié)果

    2018—2022 年,7 個(gè)縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室共檢測602 份盲樣,檢測結(jié)果正確有573 份,總體正確率為95.18%。

    2.2 不同年度比對結(jié)果

    2018—2022 年,各年份檢測結(jié)果準(zhǔn)確率分別為99.05%、85.71%、93.33%、95.24%、100%,呈先下降后穩(wěn)步上升趨勢。

    2.3 不同實(shí)驗(yàn)室比對結(jié)果差異

    2.3.1 不同年份

    2018 年有6 個(gè)縣級實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果準(zhǔn)確率為100%;2019 年有2 個(gè)實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)確率為100%,但也有3 個(gè)實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)確率在85%以下;2020 年不同檢測準(zhǔn)確率范圍(100%,85%~99%,85%以下)的縣級實(shí)驗(yàn)室個(gè)數(shù)分別為:3、3、1;2021年100%準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)室為5 個(gè),但有1 個(gè)實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)確率在85%以下;2022 年7 個(gè)縣級實(shí)驗(yàn)室的檢測準(zhǔn)確率均為100%。

    2.3.2 不同縣

    2.3.2.1 總體情況

    G 縣獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測準(zhǔn)確率最高,為98.84%;E 縣實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)確率為90.70%,最低;7 個(gè)縣級實(shí)驗(yàn)室檢測準(zhǔn)確率均達(dá)到了90%以上。

    2.3.2.2 不同年份

    A 縣實(shí)驗(yàn)室2018 和2022 年的檢測結(jié)果準(zhǔn)確率均為100%,2019、2020 年分別為86.67%,2021 年為94.44%;

    B 縣實(shí)驗(yàn)室2019 年準(zhǔn)確率為80%,其余各年檢測結(jié)果正確率均達(dá)100%;

    C 縣實(shí)驗(yàn)室2019 年檢測結(jié)果準(zhǔn)確率為86.67%,其余各年的均為100%;

    D 縣實(shí)驗(yàn)室2021、2022 年檢測結(jié)果正確率均為100%,2018、2019、2020 年分別為93.33%、66.67%和93.33%;

    E 縣實(shí)驗(yàn)室2019、2021 年檢測準(zhǔn)確率分別為80.00%、72.22%,其余3 年均為100%;

    F 縣實(shí)驗(yàn)室除2020 年檢測結(jié)果準(zhǔn)確率為80.00%,其余4 年的均為100%;

    G 縣實(shí)驗(yàn)室除2020 年檢測結(jié)果準(zhǔn)確率為93.33%,其余4 年的均為100%。

    2.3.2.3 不同檢測方法

    A~G 縣實(shí)驗(yàn)室ELISA 檢測結(jié)果準(zhǔn)確率在92.31%~100%;HA-HI 方法檢測結(jié)果準(zhǔn)確率在61.90%~100%,其中E 縣的為61.90%,D 縣的為76.19%,其余縣的均在90%以上;除D 縣的SAT 方法檢測結(jié)果準(zhǔn)確率為92.86%,其余縣的均為100%;熒光PCR 方法A、D、F、G 縣檢測結(jié)果準(zhǔn)確率均為95.24%,B、C、E 縣的為100%;A~G 縣RBT 方法的準(zhǔn)確率均為100%(圖1)。

    圖1 不同縣級實(shí)驗(yàn)室不同檢測方法檢測準(zhǔn)確率

    2.4 不同檢測項(xiàng)目比對結(jié)果差異

    項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)室符合率在28.57%~100%,2019年禽流感H7 亞型抗體檢測項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)室符合率最低,僅為28.57%,2020 年非洲豬瘟病毒核酸檢測項(xiàng)目的為42.86%,其余各項(xiàng)目的實(shí)驗(yàn)室符合率均在85%以上。各項(xiàng)目檢測結(jié)果準(zhǔn)確率在62.86%~100%,除2019 年的禽流感H7 亞型抗體檢測項(xiàng)目的檢測結(jié)果準(zhǔn)確率為62.86%,其余各項(xiàng)目的均在85%以上。

    2.5 不同檢測方法比對結(jié)果差異

    在2018—2022 年,ELISA、HA-HI、熒 光PCR、SAT 和RBT 的總體檢測結(jié)果正確率分別為97.80%、86.39%、97.28%、98.98%、100%(表2)。從各年份的檢測結(jié)果來看,除2019 年HA-HI 檢測準(zhǔn)確率為62.86%,其余各年份各方法比對結(jié)果準(zhǔn)確率均在85%以上。

    表2 不同檢測方法檢測正確率統(tǒng)計(jì) 單位:%

    3 討論

    達(dá)州市獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測能力比對項(xiàng)目設(shè)置上,充分考慮了當(dāng)?shù)貙?shí)際情況,針對各階段的重點(diǎn)防控病種,結(jié)合縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)設(shè)施等條件,盡可能覆蓋實(shí)驗(yàn)室檢測工作常用的ELISA、HA-HI、熒光PCR 等多種檢測方法。

    3.1 總體水平

    2018—2022 年總體準(zhǔn)確率為95.18%,總體檢測水平高,能滿足非洲豬瘟、禽流感、口蹄疫等主要?jiǎng)游镆卟z測需要[1],說明縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室能夠?yàn)檫_(dá)州市動(dòng)物疫病監(jiān)測預(yù)警乃至疫病防控體系提供堅(jiān)實(shí)的技術(shù)支撐。除2019 年準(zhǔn)確率為85.71%,其余年份準(zhǔn)確率均在93.33%及以上,表明達(dá)州市獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室整體檢測能力水平高但略微不穩(wěn)定。

    3.2 不同實(shí)驗(yàn)室檢測水平差異

    各縣級實(shí)驗(yàn)室檢測能力不同,部分實(shí)驗(yàn)室的檢測準(zhǔn)確率較低。從檢測能力與穩(wěn)定性來看,A、B、C、G、F 縣檢測水平高且穩(wěn)定,D、E 縣檢測能力稍弱且波動(dòng)起伏大,可能與D、E 縣的實(shí)驗(yàn)室財(cái)政資金不足,個(gè)別檢測項(xiàng)目技術(shù)不熟練有關(guān)。總體而言,縣級實(shí)驗(yàn)室能較好掌握常用的5種檢測方法,但個(gè)別縣的個(gè)別檢測方法檢測能力不足,如E 縣對HA-HI 方法掌握程度較低。

    3.3 不同檢測項(xiàng)目差異

    2019 年禽流感H7 亞型抗體檢測項(xiàng)目(HAHI 方法)和2020 年非洲豬瘟病毒核酸檢測項(xiàng)目(熒光PCR 方法)實(shí)驗(yàn)室符合率或檢測準(zhǔn)確率偏低??赡苁荋A-HI 法受器材、稀釋液、抗原、待檢血清、紅細(xì)胞、人員操作等因素影響,試驗(yàn)結(jié)果易出現(xiàn)偏差[2];2020 年各縣級實(shí)驗(yàn)室初步具備熒光PCR 檢測能力,首次進(jìn)行該項(xiàng)目比對,實(shí)際操作經(jīng)驗(yàn)不足,技術(shù)不熟練。且熒光PCR 從樣品處理、核酸提取、擴(kuò)增到結(jié)果判定,步驟復(fù)雜,對操作人員技術(shù)要求較高,可能造成結(jié)果差別較大[3]。

    3.4 不同檢測方法差異

    HA-HI 法準(zhǔn)確率僅有86.39%,其余4 種檢測方法準(zhǔn)確率均在97.28%以上,說明縣級實(shí)驗(yàn)室能熟練掌握RBT、SAT、ELISA、熒光PCR 4 種方法,但HA-HI 方法是檢測薄弱點(diǎn),需強(qiáng)化培訓(xùn)指導(dǎo)與實(shí)際操作。出現(xiàn)上述結(jié)果可能與各檢測方法的特點(diǎn)有關(guān),RBT 是實(shí)驗(yàn)室日常監(jiān)測布魯氏菌病、基層大量初篩的最常見方法[4],其特點(diǎn)是操作簡便、省時(shí)省力;SAT 是布病抗體檢測的復(fù)核方法,準(zhǔn)確率高,特異性強(qiáng),但耗時(shí)長[5];ELISA是獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室最常用的血清學(xué)檢測方法,通常采用商品化試劑且結(jié)果判定使用儀器讀數(shù)[6],操作簡便,準(zhǔn)確率高。相對而言,HA-HI 法和熒光PCR法的操作相對復(fù)雜,對操作人員技術(shù)要求較高。

    3.5 檢測報(bào)告、原始記錄存在的問題

    各縣獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室遞交的檢測報(bào)告、原始記錄都存在一些問題,主要包括:①檢測原始記錄不完善,部分記錄出現(xiàn)原始記錄填寫不詳盡、不規(guī)范、不完整、不清晰等現(xiàn)象;②檢測報(bào)告不規(guī)范,存在蓋章不全、三級審核簽字不齊、檢測信息填寫不當(dāng)?shù)惹闆r[7]。這些問題的出現(xiàn)與工作人員的職業(yè)素養(yǎng)相關(guān),部分問題可能會(huì)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成一定的影響。

    4 小結(jié)

    在2018—2022 年達(dá)州市獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測能力比對中,各縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室均展現(xiàn)出了較高的檢測能力,但部分實(shí)驗(yàn)室存在著檢測水平不穩(wěn)定的問題、對個(gè)別檢測方法能力不足、也存在著檢測報(bào)告不規(guī)范、原始記錄不完善等問題??h級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)以比對試驗(yàn)為契機(jī),針對出現(xiàn)的問題進(jìn)行整改,提升自身檢測能力??梢酝ㄒ韵滦┕ぷ魈岣邫z測能力:認(rèn)真總結(jié)經(jīng)驗(yàn),深入查找不足,解決存在問題;積極爭取資金,升級檢測設(shè)施;深化實(shí)驗(yàn)室建設(shè),培養(yǎng)檢測人才;加強(qiáng)人員培訓(xùn)考核,重視檢測質(zhì)量。從而進(jìn)一步提高全市獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測水平,增強(qiáng)達(dá)州市動(dòng)物疫病監(jiān)測預(yù)警能力。

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