EB病毒抗體聯(lián)合淋巴細胞亞群分析診斷傳染性單核細胞增多癥患兒的臨床價值

張改玲

(華中科技大學(xué)協(xié)和深圳醫(yī)院兒科,廣東 深圳 518052)

傳染性單核細胞增多癥(IM)是一種急性感染性疾病,多由EB病毒(EBV)致病,主要表現(xiàn)為發(fā)熱、咽峽炎、淋巴結(jié)腫大及異型淋巴細胞增多等癥狀［1］。由于IM病例不典型,體征變化及癥狀多樣,臨床中發(fā)病率有明顯增多趨勢,增加了診治難度［2］?，F(xiàn)階段,我國IM主要發(fā)病在學(xué)齡前期,依據(jù)血清學(xué)調(diào)查,我國EB病毒VCA-IgG陽性率在3～5歲學(xué)齡前兒童中超過90%,已經(jīng)逐漸發(fā)展為該年齡段兒童常見的發(fā)熱病原體,且EB病毒直接關(guān)系到1%的腫瘤發(fā)?。?-4］。因此,需探究便捷、快速及具有特異性的檢查方法,依據(jù)機體感染EB病毒后會有抗早期抗原抗體和抗衣殼抗原抗體等不同類型抗原抗體產(chǎn)生,主要特征是于急性發(fā)病期增高［5］?；诖?本文以傳染性單核細胞增多癥患兒為研究對象,分析實行不同檢測方法的臨床價值。

1 資料與方法

1.1一般資料:回顧性分析華中科技大學(xué)協(xié)和深圳醫(yī)院2020年9月～2021年2月收治于兒科病房的82例傳染性單核細胞增多癥患兒,男51例,女31例,年齡1～10歲,平均(5.29±1.35)歲,其中<3歲、3歲～6歲、>6歲者各21、41、20例。研究組病例納入標準:①所有小兒均符合《諸福棠實用兒科學(xué)》(第8版)［6］IM診斷標準;②無其他特殊用藥史者;③未并發(fā)其他疾病者;④具備完整臨床資料者。排除標準:①并發(fā)惡性腫瘤者;②并發(fā)嚴重臟器功能不全及先天畸形者［7］。本次研究經(jīng)過本院醫(yī)學(xué)倫理委員會同意。

1.2方法:回顧性分析本院收治的IM住院患兒臨床資料,評估指標包括患兒年齡、性別、肝脾腫大、淋巴結(jié)腫大、咽峽炎、發(fā)熱、眼瞼浮腫、皮疹、鼻塞及睡眠打鼾等,在患兒入院第1天于清晨行靜脈血采集,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測EB病毒抗體,按照說明書實行具體操作;采用Sysmen XN-9000全自動血液分析儀進行血液采集,并進行實際分析,以手工鏡檢分類計數(shù)異型淋巴細胞,以西門子ADV2400全自動生化分析儀進行谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)檢測,按照說明書實行具體操作;采用BDFACSCanto 2型流式細胞儀分析T淋巴細胞亞群(CD3+T、CD4+T、CD8+T及CD4+/CD8+T細胞比值),按說明書實施操作。

1.3觀察指標:①分析IM患兒臨床特征,包括發(fā)熱、眼瞼水腫、淋巴結(jié)腫大、咽峽炎、肝腫大、脾腫大及皮疹、鼻塞、睡眠打鼾;②EBV抗體檢測結(jié)果:抗EBA-VCA-IgM和抗EBA-VCA-IgG抗體陽性,且抗EBA-VCA-IgG陰性;抗EBV-VCA-IgM抗體陰性,抗EBV-VCA-IgG抗體陽性,且為低親和力抗體;③觀察并記錄IM患兒EB病毒抗體檢測及淋巴細胞亞群檢測、聯(lián)合檢測的陽性例數(shù),計算陽性率。④分析IM患兒不同年齡組實驗室指標:分析<3歲、3～6歲、>6歲者ALT、CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD4+/CD8+T細胞比值。

2 結(jié)果

2.1IM患兒臨床癥狀分析:82例IM患兒中75例鼻塞,占比91.46%,70例夜間睡眠打鼾,占比85.37%,73例發(fā)熱,占比89.02%,58例咽痛,占比70.73%,79例淋巴結(jié)腫大,占比96.34%,扁桃體炎82例,占比100.00%,41例肝腫大,占比50.00%,61例眼瞼浮腫,占比74.39%,35例脾腫大,占比43.21%,8例皮疹,占比9.76%。

2.2IM患兒EBV抗體檢測結(jié)果:經(jīng)檢測82例IM患兒病毒抗體44例抗EBA-VCA-IgM和抗EBA-VCA-IgG抗體陽性,且抗EBA-VCA-IgG陰性;28例抗EBA-VCA-IgM抗體陰性,抗EBA-VCA-IgG抗體陽性;且10例為低親合力抗體。

2.3IM患兒陽性率:EB病毒抗體檢測陽性54例(65.85%),淋巴細胞亞群檢測陽性51例(62.20%);聯(lián)合檢測陽性79例(96.34%),聯(lián)合檢測比EB病毒抗體檢測及淋巴細胞亞群檢測陽性率均更高,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=30.578,P<0.05)。

2.4IM患兒不同年齡組實驗室指標:3～6歲組較<3歲組CD3+CD4+T、CD4+/CD8+T細胞比值更低,CD3+CD8+T值更高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);>6歲組較3～6歲組、<3歲組ALT、CD3+T、CD3+CD8+T水平更高,CD3+CD4+T、CD4+/CD8+T細胞比值更低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 不同年齡組實驗室指標比較

3 討論

IM是以EBV為病原體,EBV主要侵犯B淋巴細胞,伴有潛伏-活化的臨床特征,致使靶淋巴細胞無限增殖。目前,有研究結(jié)果顯示,IM的發(fā)病機制與病理損傷的聯(lián)系性較大,參與其中的EBV會直接造成細胞損傷［8-9］。近幾年,IM的發(fā)病率明顯升高,主要發(fā)病群體為小兒,會伴有不同程度的臨床表現(xiàn),導(dǎo)致就診難度增加［10］。本研究中病例主要表現(xiàn)為咽扁桃體炎、眼瞼水腫、淋巴結(jié)腫大及發(fā)熱癥狀,與很多研究結(jié)果相同。值得注意的是,本研究中鼻塞、夜間睡眠打鼾比例較高,且部分患兒為首發(fā)癥狀,在既往報道中并不多見,綜合分析后認為可能與小兒咽喉黏膜下腺體組織及淋巴組織豐富有關(guān)。

現(xiàn)階段,臨床上將外周血異型淋巴細胞比值超過10%作為診斷IM的一項標準［11］。目前,臨床應(yīng)盡早對未確定發(fā)熱原因的IM患兒實行WBC分類計數(shù)檢驗,若白細胞分類異常報警,需采用顯微鏡檢測血細胞形態(tài),尤其應(yīng)對異型淋巴細胞著重關(guān)注［12-14］。異型淋巴細胞常于發(fā)病后第3天出現(xiàn),以后逐漸增多,于2～3 w達峰值,比例可達50%,之后緩緩降低,一般持續(xù)至5～7 w。即使異型淋巴細胞首次檢測結(jié)果在10%以下,也不能排除IM,需動態(tài)觀察患兒臨床癥狀,綜合分析,適時復(fù)查。IM可累及多個器官,尤其是肝臟,并發(fā)癥中最常見的是肝功能受損。肝功能受損主要發(fā)生于病程1～2 w,部分嚴重病例于發(fā)病第2天即出現(xiàn)肝功能損傷［15-16］。IM患兒肝功能受損表現(xiàn)為酶學(xué)變化,其中常見LDH、AST及ALT升高,本研究肝功能異常者34例,占比41.46%。

T細胞的來源是淋巴樣前祖細胞,CD3抗原標志于T細胞表面,CD4標志于輔助性T細胞表面,CD8標志于細胞毒性T細胞表面,IM患兒的機體免疫力多由CD4+/CD8+T細胞比值標志,比值降低則代表機體的細胞免疫功能受損［17-18］。本研究結(jié)果顯示,患兒的細胞免疫功能處于紊亂狀態(tài),不同年齡組間差異明顯,究其原因在于患兒機體在受到EB病毒感染后,B淋巴細胞表面受體有效結(jié)合病原,將其攝入細胞內(nèi),受感染的B淋巴細胞表面抗原發(fā)生改變,引起T淋巴細胞的強烈免疫應(yīng)答,進而轉(zhuǎn)為CD8+T淋巴細胞,引發(fā)細胞毒效應(yīng),因而IM患兒體內(nèi)CD8+T淋巴細胞處于高度活化和增值狀態(tài),導(dǎo)致淋巴細胞亞群比例失衡,CD4+/CD8+T細胞比值下降甚至倒置［19］,細胞免疫功能下降。外周血T淋巴細胞亞群中的CD3+、CD4+、CD8+T細胞均為臨床檢測的重要指標,可有效檢測機體免疫功能［20］。IM是一種傳染性疾病,部分小兒的EBV載量偏高,嚴重損傷細胞免疫功能,且可能發(fā)展至嗜血細胞綜合征,具有較高的致死率［21］。因此,盡早診斷和有效治療可發(fā)揮關(guān)鍵作用。以定量PCR檢測EBV-DNA,可直接反映機體EBV-DNA水平,并將病毒復(fù)制和EBV感染情況顯出,有效實行IM診斷。有研究結(jié)果顯示,EBV-DNA濃度分別正關(guān)系與負關(guān)系CD3+CD8+T和CD3+CD4+T細胞頻數(shù)、CD4+/CD8+T細胞比值［22］。若實驗室指標的EBV-DNA水平檢測率較低,IM發(fā)病程度可借助淋巴細胞亞群分析進行準確檢測和有效判斷,以早期干預(yù),改善預(yù)后療效。

綜上,IM患兒實行EB病毒抗體聯(lián)合淋巴細胞亞群分析檢測,可快速檢測患兒臨床癥狀和實驗室檢測體征,有效提升疾病診斷水平,實踐價值較高。