血清α-syn、Sirtuin-1 水平與急性腔隙性腦梗死患者病情進(jìn)展及腦白質(zhì)病變的關(guān)系

任占霞，宋愛霞，梁盼盼，賀宏梅，武婧月，陳曉凡，張帆，張志偉

河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河北張家口 075000

急性腔隙性腦梗死（ALCI）是腦梗死的一種亞型，因梗死部位直徑小，大部分患者的病情輕微，疾病轉(zhuǎn)歸良好，但有20%～30%的ALCI 患者可能在發(fā)病幾小時(shí)或幾天后出現(xiàn)病情進(jìn)展，甚者死亡［1］。腦白質(zhì)病變是ALCI患者的合并癥之一，是指白質(zhì)部位的神經(jīng)細(xì)胞發(fā)生髓鞘損害，可導(dǎo)致認(rèn)知功能障礙、運(yùn)動(dòng)功能障礙、情緒異常等，嚴(yán)重影響患者生存質(zhì)量［2］。因此，早期評(píng)估ALCI 患者的病情及腦白質(zhì)病變可指導(dǎo)臨床治療方案的選擇，有利于改善疾病轉(zhuǎn)歸。α-突觸核蛋白（α-syn）是路易體重要的組成部分，廣泛表達(dá)于神經(jīng)元，已有研究證實(shí)，血清α-syn水平異常與帕金森病發(fā)病有關(guān)［3］。沉默調(diào)節(jié)蛋白1（Sirtuin-1）是一種與煙酰胺腺苷二核苷酸相關(guān)的乙?；?，在機(jī)體能量代謝平衡、細(xì)胞損傷、炎癥應(yīng)激等過程中發(fā)揮重要作用［4］。敲除缺血性腦卒中小鼠模型的Sirtuin-1 基因，可春季氧化應(yīng)激，加重局灶性腦缺血/再灌注誘導(dǎo)的神經(jīng)功能缺損［5］。但國(guó)內(nèi)少有研究報(bào)道血清α-syn、Sirtuin-1與ALCI的關(guān)系。基于此，本研究探討ALCI 患者血清α-syn、Sirtuin-1 水平與病情進(jìn)展、腦白質(zhì)病變的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2021 年8 月—2023 年1 月本院收治的ALCI 患者130 例，男72 例、女58 例，年齡18～85（59.13 ± 8.24）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合ALCI的診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］，并完善影像學(xué)檢查；②年齡18～85歲；③均首次確診；④本人及監(jiān)護(hù)人知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并顱腦外傷、腦膜炎、腦腫瘤等其他腦部疾病者；②由非缺血性病因誘發(fā)的腦白質(zhì)病變者；③合并嚴(yán)重心、肺、肝等器官功能異常者；④存在精神或認(rèn)知障礙者，無(wú)法配合診療工作者。本研究已經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

1.2 病情評(píng)估 分別于患者入院時(shí)、入院7 d 后采用美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院卒中量表（NIHSS）［7］對(duì)ALCI患者的病情進(jìn)行評(píng)估，量表包括9 個(gè)項(xiàng)目，總分42分，評(píng)分越高病情越嚴(yán)重，其中入院7 d 后較入院時(shí)NIHSS評(píng)分增加≥2分即可判斷為病情進(jìn)展。根據(jù)病情是否進(jìn)展分為進(jìn)展組（n=32）和非進(jìn)展組（n=98）。

1.3 腦白質(zhì)病變程度評(píng)估 入院時(shí)采用Fazekas量表［8］對(duì)ALCI 患者腦白質(zhì)病變程度進(jìn)行評(píng)估，總分為各項(xiàng)評(píng)分之和。①腦室旁白質(zhì)：0 級(jí)無(wú)病變（計(jì)0分）；1 級(jí)側(cè)腦室前后角出現(xiàn)帽狀高信號(hào)，或側(cè)腦室周圍出現(xiàn)較薄的暈圈（計(jì)1分）；2級(jí)病變呈光滑的暈圈（計(jì)2分）；3級(jí)出現(xiàn)不規(guī)則的腦室旁高信號(hào)，并延伸到深部白質(zhì)（計(jì)3 分）。②深部白質(zhì)：0 級(jí)無(wú)病變（計(jì)0分）；1級(jí)出現(xiàn)點(diǎn)狀病變（計(jì)1分）；2級(jí)病變開始融合（計(jì)2分）；3級(jí)病變大面積融合（計(jì)3分）。根據(jù)是否發(fā)生腦白質(zhì)病變分為病變組（n=106）和非病變組（n=24），根據(jù)腦白質(zhì)病病變程度可分為輕度病變組（Fazekas評(píng)分1 分，n=49）、中度病變組（Fazekas 評(píng)分2～3 分，n=36）、重度病變組（Fazekas評(píng)分4～6分，n=21）。

1.4 血清α-syn、Sirtuin-1 檢測(cè) 于患者入院第2 天清晨采集其空腹靜脈血樣4 mL，以3 000 r/min 離心15 min，離心半徑10 cm，分離血清，置于冰箱內(nèi)保存，用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清α-syn、Sirtuin-1。α-syn 試劑盒購(gòu)于上海一研生物科技有限公司，Sirtuin-1 試劑盒購(gòu)于深圳中爍生物技術(shù)有限公司，檢測(cè)流程參考使用說明書。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS23.0 統(tǒng)計(jì)軟件。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以±s表示，兩組比較采用t檢驗(yàn)，多組比較采用方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)；用受試者工作特性（ROC）曲線評(píng)估血清α-syn、Sirtuin-1 對(duì)ALCI 病情進(jìn)展的預(yù)測(cè)價(jià)值，曲線下面積比較采用Z檢驗(yàn)；用Pearson 相關(guān)法分析血清α-syn、Sirtuin-1 與Fazekas 評(píng)分的關(guān)系。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清α-syn、Sirtuin-1 水平與ALCI 患者病情進(jìn)展的關(guān)系 非進(jìn)展組和進(jìn)展組血清α-syn、Sirtuin-1水平比較見表1。

表1 非進(jìn)展組和進(jìn)展組血清α-syn、Sirtuin-1水平比較（± s）

表1 非進(jìn)展組和進(jìn)展組血清α-syn、Sirtuin-1水平比較（± s）

組別非進(jìn)展組進(jìn)展組P n 98 32 α-syn（μg/L）19.27 ± 3.65 35.31 ± 4.45＜0.05 Sirtuin-1（ng/mL）14.24 ± 3.17 9.16 ± 2.04＜0.05

2.2 血清α-syn、Sirtuin-1 水平與ALCI 患者腦白質(zhì)病變的關(guān)系

2.2.1 非病變組和病變組血清α-syn、Sirtuin-1 水平比較 見表2。

表2 非病變組和病變組血清α-syn、Sirtuin-1水平比較（± s）

表2 非病變組和病變組血清α-syn、Sirtuin-1水平比較（± s）

組別非病變組病變組P n 24 106 α-syn（μg/L）18.16 ± 3.47 24.36 ± 4.15＜0.05 Sirtuin-1（ng/mL）16.52 ± 3.65 10.94 ± 2.13＜0.05

2.2.2 輕度、中度、重度病變組血清α-syn、Sirtuin-1水平比較 見表3。

表3 輕度、中度、重度病變組血清α-syn、Sirtuin-1水平比較（-x ± s）

2.3 血清α-syn、Sirtuin-1 水平與腦白質(zhì)病變ALCI患者Fazekas 評(píng)分的關(guān)系 Pearson 相關(guān)分析結(jié)果顯示，腦白質(zhì)病變ALCI 患者血清α-syn 水平與Fazekas評(píng)分呈正相關(guān)（r=0.534，P＜0.05），血清Sirtuin-1 水平與Fazekas評(píng)分呈負(fù)相關(guān)（r=-0.526，P＜0.05）。

3 討論

ALCI屬于神經(jīng)外科常見高發(fā)病，與其他類型腦梗死比較其致死和致殘風(fēng)險(xiǎn)低，但是易反復(fù)發(fā)作。ALCI發(fā)生后可引起腦小血管出現(xiàn)玻璃樣變性、纖維蛋白樣壞死，影響腦組織的血流灌注，進(jìn)而誘發(fā)腦白質(zhì)病變［9］。相關(guān)研究結(jié)果表明，腦白質(zhì)病變不僅會(huì)造成不同程度的認(rèn)知功能損害，增加老年癡呆的患病風(fēng)險(xiǎn)，而且與腦梗死合并出現(xiàn)時(shí)可加重患者病情，降低其生存質(zhì)量［10］?，F(xiàn)階段，如何早期判定ALCI患者的病情及腦白質(zhì)病變是臨床研究關(guān)注的熱點(diǎn)。

α-syn 是一種存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的可溶性蛋白，在突觸形成、多巴胺合成、突觸前膜囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)等過程中扮演重要的角色［11］。KIM 等［12］研究對(duì)缺血性腦卒中小鼠模型注射了miR-7 模擬物，發(fā)現(xiàn)血清α-Syn 水平明顯下調(diào)，病變體積顯著降低?？赏茰y(cè)α-Syn 水平升高可能與缺血性腦卒中發(fā)病有關(guān)。另一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，腦卒中后受α-Syn 誘導(dǎo)和積累可導(dǎo)致繼發(fā)性腦損傷［13］。本研究結(jié)果顯示，病情進(jìn)展ALCI患者血清α-syn水平較病情未進(jìn)展患者高。提示血清α-syn可能在ALCI患者的病情發(fā)展中發(fā)揮重要作用。原因是生理狀態(tài)下，血液中α-syn 含量較低，然而ALCI發(fā)生后α-syn異常聚集，并經(jīng)受損的血腦屏障進(jìn)入血液循環(huán)，故血清α-syn 水平升高。同時(shí)，α-syn 異常聚集可誘導(dǎo)線粒體發(fā)生去極化，產(chǎn)生大量的氧化應(yīng)激產(chǎn)物，而氧化應(yīng)激是ALCI發(fā)病的重要機(jī)制［14］。因此，可推測(cè)血清α-Syn水平上調(diào)與ALCI患者的病情發(fā)展有關(guān)。ROC 曲線結(jié)果顯示，血清α-syn 預(yù)測(cè)ALCI 患者病情的曲線下面積分別為0.831，特異度為66.05%。說明α-syn有望作為預(yù)測(cè)ALCI患者病情進(jìn)展的血清標(biāo)記物。血清α-syn水平在腦白質(zhì)病變ALCI 患者中升高，且與Fazekas 評(píng)分呈正相關(guān)，提示血清α-syn 水平變化可反映ALCI 患者腦白質(zhì)病變程度。這可能是因?yàn)棣?syn 可激活炎癥小體，促使大量促炎因子釋放入血，導(dǎo)致腦血管動(dòng)脈粥樣斑塊形成，血流灌注量降低，加重腦組織損害，促使神經(jīng)細(xì)胞凋亡，進(jìn)而損害腦白質(zhì)功能［15］。

Sirtuin-1 是一種在哺乳動(dòng)物腦組織中高度表達(dá)的沉默調(diào)節(jié)蛋白，其基因位于10q21.3，主要定位于細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，可通過激活內(nèi)皮型一氧化氮合酶的活性，減輕血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，進(jìn)而發(fā)揮保護(hù)血管功能的作用［16］。有研究表明，Sirtuin-1 在神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中呈高表達(dá)，可通過抑制IL-6、腫瘤壞死因子α 等炎性因子的脫乙?；偷蛲鐾緩?，減輕神經(jīng)炎癥，進(jìn)而抑制神經(jīng)元細(xì)胞凋亡［17］。ESMAYEL 等［18］研究結(jié)果顯示，急性卒中組血漿Sirtuin-1 水平低于健康組，可預(yù)測(cè)急性腦血管卒中發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。本研究結(jié)果顯示，進(jìn)展組Sirtuin-1 水平低于非進(jìn)展組。提示血清Sirtuin-1 與ALCI 患者病情發(fā)展密切相關(guān)。原因是Sirtuin-1 被認(rèn)為是血管內(nèi)皮穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，其表達(dá)下調(diào)后可導(dǎo)致血管內(nèi)炎癥介質(zhì)水平升高及活性氧增加，誘發(fā)血管炎癥反應(yīng)，進(jìn)而導(dǎo)致局部腦組織的缺血缺氧加重，病情進(jìn)一步惡化。ROC 曲線結(jié)果顯示，血清Sirtuin-1 對(duì)ALCI 患者病情進(jìn)展具有較高的預(yù)測(cè)價(jià)值，檢測(cè)其水平變化可以篩查病情進(jìn)展的高?；颊摺１狙芯拷Y(jié)果顯示，血清Sirtuin-1水平在腦白質(zhì)病變ALCI 患者中降低，且與Fazekas評(píng)分呈負(fù)相關(guān)。提示血清Sirtuin-1 可能參與了ALCI患者腦白質(zhì)病變過程，且與腦白質(zhì)病變程度有關(guān)。Sirtuin-1 對(duì)多種核轉(zhuǎn)錄因子具有調(diào)節(jié)作用，可通過影響緊密連接相關(guān)蛋白的活性，維持血腦屏障的穩(wěn)定性［19］。有研究表明，在腦內(nèi)皮細(xì)胞特異性Sirtuin-1 敲除小鼠實(shí)驗(yàn)中，血腦屏障的完整性受損，通透性增加［20］。因此可推測(cè)Sirtuin-1 在衰老的血腦屏障通透性中起著重要作用。而血腦屏障破壞及通透性異常是導(dǎo)致腦白質(zhì)病變的病理基礎(chǔ)，故認(rèn)為Sirtuin-1表達(dá)下調(diào)與腦白質(zhì)病變有關(guān)。

綜上所述，血清α-syn 水平升高、Sirtuin-1 水平降低與ALCI患者病情進(jìn)展及腦白質(zhì)病變加重有關(guān)，兩者有望作為預(yù)測(cè)ALCI 患者病情進(jìn)展的血清標(biāo)記物。