低劑量攝入不同香型白酒對(duì)2型糖尿病小鼠的影響

張玉超，劉良禹，朱思潔，楊 旭，黃順琴，王 澳，劉旭東*

（1.茅臺(tái)學(xué)院 釀酒工程系，貴州 遵義 564507；2.中國(guó)海洋大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院，山東 青島 266100；3.茅臺(tái)學(xué)院 食品科學(xué)與工程系，貴州 遵義 564507；4.華中師范大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，湖北 武漢 430079）

白酒作為世界三大蒸餾酒之一，在我國(guó)有著廣泛的消費(fèi)，2019年在我國(guó)食品工業(yè)主營(yíng)收入中白酒產(chǎn)業(yè)占6.92%的份額[1]。作為我國(guó)的傳統(tǒng)酒類(lèi)，同時(shí)又是傳統(tǒng)文化的典型代表，多年來(lái)有關(guān)白酒的風(fēng)味研究從未停止[2]。然而隨著人民生活水平的不斷提高，健康飲食的觀念不斷深入人心，飲酒的健康效應(yīng)也逐漸受到研究人員的關(guān)注。

糖尿病作為一個(gè)世界性的公共衛(wèi)生問(wèn)題，目前已被認(rèn)為是僅次于惡性腫瘤和心腦血管疾病的第三大威脅人類(lèi)健康的疾病[3]。有研究顯示，一定量的啤酒、葡萄酒、烈性酒攝入對(duì)于2型糖尿?。╰ype 2 diabetes mellitus，T2DM）病癥有一定的緩解作用[4]。國(guó)內(nèi)外均有流行病學(xué)研究表明，飲酒量和T2DM患病風(fēng)險(xiǎn)之間呈U型關(guān)系[5-7]。已有研究顯示，在較低的酒精攝入劑量下（10 g/d），飲酒會(huì)降低T2DM患病風(fēng)險(xiǎn)，而當(dāng)酒精攝入量超過(guò)10 g/d后，T2DM患病風(fēng)險(xiǎn)會(huì)隨著攝入量的增大而升高，提示10 g/d的酒精攝入劑量可能是飲酒與T2DM之間U型關(guān)系的劑量拐點(diǎn)[8]。而本團(tuán)隊(duì)的前期研究發(fā)現(xiàn)，按人群10 g/d的酒精攝入劑量與小鼠給藥劑量進(jìn)行等效換算，對(duì)小鼠進(jìn)行低劑量的酒精攝入會(huì)加重T2DM雄性小鼠的病癥[9]。

本文的前期研究結(jié)果已經(jīng)說(shuō)明單純的酒精攝入可對(duì)T2DM產(chǎn)生影響，而單純的酒精攝入并不能完全等同于飲酒。酒類(lèi)中除了水和酒精以外還有很多其他成分，白酒中的微量成分超過(guò)2 000種，其中有200多種成分已被證明對(duì)健康有益[10-11]。由于原料及生產(chǎn)工藝條件的不同，使得不同香型白酒的風(fēng)味成分也存在著顯著差異。又鑒于飲酒與T2DM發(fā)生在流行病學(xué)研究中體現(xiàn)出的U型相關(guān)性，因此進(jìn)一步探究不同香型白酒攝入尤其是低劑量不同香型白酒攝入對(duì)于T2DM的影響，對(duì)于未來(lái)闡明飲酒于T2DM發(fā)生之間的關(guān)系則顯得尤為重要。

為更好的了解低劑量攝入不同香型白酒對(duì)T2DM的影響，本研究對(duì)T2DM小鼠進(jìn)行不同香型白酒（52度濃香型、52度清香型、53度醬香型）連續(xù)30 d灌胃，隨后對(duì)小鼠T2DM相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)小鼠肝臟、胰腺組織病理學(xué)損傷和胰腺氧化應(yīng)激、炎癥水平進(jìn)行分析，以期為未來(lái)闡明低劑量攝入不同香型白酒對(duì)T2DM的影響提供一定的參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 試驗(yàn)小鼠

無(wú)特定病原體（specific pathogen free，SPF）級(jí)雄性昆明小鼠（6～8周齡，體質(zhì)量（20±2）g）：湖北省疾病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心。小鼠飼養(yǎng)于標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房?jī)?nèi)，鼠籠內(nèi)通入無(wú)菌空氣，室溫20～25 ℃，相對(duì)濕度50%～70%，12 h/12 h明暗交替，自由進(jìn)食飲水。

1.1.2 試劑

高脂高糖飼料：上海集奇生物科技有限公司；鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ）、2',7'-二氯熒光黃雙乙酸鹽（2',7'-dichlordihydrofluorescein diacetate，DCFH-DA）、硫代巴比妥酸（2-thiobarbituric acid，TBA）（均為分析純）：美國(guó)Sigma-Aldrich公司。其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

小鼠總膽固醇（total cholesterol，TC）檢測(cè)試劑盒、甘油三酯（triglyceride，TG）檢測(cè)試劑盒、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）檢測(cè)試劑盒、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）檢測(cè)試劑盒、還原型谷胱甘肽（glutathione，GSH）檢測(cè)試劑盒、胰島素檢測(cè)試劑盒：南京建成生物工程研究所。

小鼠腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）檢測(cè)試劑盒、白介素1β（Interleukin-1β，IL-1β）檢測(cè)試劑盒：美國(guó)eBioscience公司；核因子NF-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）檢測(cè)試劑盒：上海藍(lán)基生物公司。

1.1.3 原料

52度某品牌濃香型白酒、52度某品牌清香型白酒、53度某品牌醬香型白酒均為市售成品白酒。

1.2 儀器與設(shè)備

590血糖儀及試紙：江蘇魚(yú)躍醫(yī)療設(shè)備有限公司；FLx800熒光酶標(biāo)儀：美國(guó)Bio-Tek公司；DNM-9602全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀：北京普朗新技術(shù)有限公司；5424R低溫冷凍離心機(jī)：德國(guó)Eppendorf公司；DP73顯微鏡：日本Olympus公司。

1.3 方法

1.3.1 T2DM模型的構(gòu)建

在動(dòng)物房?jī)?nèi)對(duì)小鼠進(jìn)行一周的基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)后，隨機(jī)選取10只小鼠繼續(xù)進(jìn)行基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)，剩余小鼠更換高脂高糖飼料喂養(yǎng)。參照文獻(xiàn)[9，12]的方法利用高脂高糖飼料喂養(yǎng)結(jié)合STZ腹腔注射方式進(jìn)行小鼠T2DM模型構(gòu)建，以小鼠的空腹血糖（fasting blood glucose，F(xiàn)BG）＞11.1 mol/L視為建模成功。隨機(jī)選擇建模成功的小鼠40只進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.3.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及飲酒暴露

將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按表1分為5組，參照文獻(xiàn)[9，13]的方法，以10 g/d的純酒精攝入量作為人群低劑量飲酒標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行人與小鼠等效給藥劑量換算后得出52度濃香型白酒、52度清香型白酒、53度醬香型白酒的小鼠日灌胃劑量分別為3.17 mL/kg、3.17 mL/kg、3.11 mL/kg，連續(xù)灌胃30 d。

1.3.3 小鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)量及飲食飲水量的測(cè)定

參照文獻(xiàn)[9，14]，在實(shí)驗(yàn)期間每天記錄小鼠的體質(zhì)量及飲食飲水量，計(jì)算小鼠30 d的體質(zhì)量增長(zhǎng)量和飲食飲水量。

1.3.4 小鼠空腹血糖及糖耐量的測(cè)定

參照文獻(xiàn)[15]的方法，在最后一次灌胃暴露后，對(duì)小鼠進(jìn)行禁食不禁水12 h，隨后對(duì)小鼠的空腹血糖、口服糖耐量和血糖曲線下面積（area under the curve of blood glucose，AUC）進(jìn)行測(cè)定。

1.3.5 小鼠血脂指標(biāo)及胰島素含量的測(cè)定

最后一次灌胃暴露24 h后，參照試劑盒說(shuō)明書(shū)對(duì)小鼠血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C及胰島素含量進(jìn)行測(cè)定。

1.3.6 小鼠肝臟和胰腺組織病理學(xué)觀察

最后一次酒精暴露結(jié)束24 h后，用頸椎脫臼法處死小鼠，取小鼠胰腺組織和肝組織。參照文獻(xiàn)[9]的方法對(duì)小鼠肝臟和胰腺組織進(jìn)行石蠟包埋和切片后，進(jìn)行蘇木素-伊紅（hematoxylin and eosin，H&E）染色，隨后在顯微鏡下進(jìn)行切片觀察。

1.3.7 小鼠胰腺組織樣品制備及氧化應(yīng)激、炎癥指標(biāo)測(cè)定

參照文獻(xiàn)[16]的方法對(duì)小鼠胰腺組織樣品進(jìn)行組織勻漿制備，采用DCFH-DA法檢測(cè)活性氧（reactive oxygen species，ROS）相對(duì)表達(dá)量，使用相對(duì)熒光強(qiáng)度進(jìn)行衡量[17]。使用TBA法測(cè)定小鼠胰腺組織勻漿上清液中的丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量[17]。按試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定小鼠胰腺組織勻漿上清液中的GSH、NF-κB、TNF-α、IL-1β含量。

1.3.8 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 13.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析（analysis of variance，ANOVA）結(jié)合Duncan檢驗(yàn)分析差異性，差異顯著水平是P＜0.05，使用GraphPad Prism 8.0生成數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同香型白酒對(duì)T2DM小鼠體質(zhì)量、飲食量、飲水量的影響

各組小鼠灌胃30 d后的體質(zhì)量、飲食量、飲水量變化結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 各組小鼠體質(zhì)量、飲食量、飲水量Table 2 Bodyweight, food and water intake of mice in each group

由表2可知，灌胃30 d后只有T2DM組小鼠體質(zhì)量出現(xiàn)了下降，而低劑量攝入不同香型白酒的T2DM小鼠體質(zhì)量均出現(xiàn)了少量的增加，但增長(zhǎng)量依然顯著低于CK組小鼠（P＜0.05）。飲食量和飲水量的結(jié)果顯示，T2DM組小鼠的飲食量和飲水量均顯著高于CK組小鼠（P＜0.05），而低劑量攝入不同香型白酒的T2DM小鼠的飲食量和飲水量與T2DM組小鼠比出現(xiàn)了一定的下降，但依然顯著高于CK組小鼠（P＜0.05）。不同香型白酒對(duì)T2DM小鼠在體質(zhì)量增長(zhǎng)量、飲食量、飲水量的影響并未出現(xiàn)顯著性的差異（P＞0.05）。

“三多一少”為糖尿病的典型癥狀，以上結(jié)果顯示，建模后T2DM組小鼠出現(xiàn)了飲食多、飲水多，但體質(zhì)量減少的糖尿病典型癥狀，而低劑量攝入不同香型白酒后可以緩解T2DM小鼠體質(zhì)量下降、進(jìn)食和飲水量增加的癥狀，該結(jié)果與周振宇等[3]的研究結(jié)果一致，但與CK組小鼠相比飲酒組小鼠的高攝食量、高飲水量、低體質(zhì)量的糖尿病癥狀依然明顯，而不同香型白酒對(duì)于T2DM小鼠在以上指標(biāo)上并未體現(xiàn)出差異性的影響（P＞0.05）。說(shuō)明低劑量攝入白酒對(duì)于T2DM小鼠“三多一少”癥狀有所改善，但改善程度有限。

2.2 不同香型白酒對(duì)T2DM小鼠空腹血糖的影響

空腹血糖（FBG）是判斷糖尿病的主要依據(jù)，按糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)，F(xiàn)BG高于11.1 mmol/L則可被視為血糖超標(biāo)[18]。不同香型白酒對(duì)T2DM小鼠FBG的影響結(jié)果見(jiàn)圖1。由圖1可知，30 d后CK組小鼠FBG處于正常值范圍，而T2DM組小鼠FBG已遠(yuǎn)超建模標(biāo)準(zhǔn)，小鼠FBG的異常升高符合T2DM典型癥狀。與T2DM組小鼠相比，各低劑量白酒攝入組小鼠FBG雖然出現(xiàn)了小幅度的下降，但是依然顯著高于CK組（P＜0.05），同時(shí)也高于建模標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果顯示，低劑量攝入不同香型白酒可以降低T2DM小鼠的FBG，該結(jié)果與周振宇等[3，19]的研究結(jié)果類(lèi)似，可能與低劑量攝入白酒提高了小鼠胰島素分泌量或降低了小鼠胰島素抵抗有關(guān)。但是降低程度有限，各組小鼠FBG異常升高的癥狀依然明顯。而不同香型白酒對(duì)T2DM小鼠FBG降低的程度并無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。說(shuō)明低劑量攝入白酒可緩解T2DM小鼠FBG異常升高，但緩解程度有限。

圖1 各組小鼠空腹血糖測(cè)定結(jié)果Fig.1 Determination results of fasting blood glucose of mice in each group

2.3 不同香型白酒對(duì)T2DM小鼠口服糖耐量的影響

糖耐量是機(jī)體對(duì)血糖的調(diào)節(jié)能力，當(dāng)機(jī)體大量攝入葡萄糖后會(huì)快速分泌胰島素、合成肝糖原促使體內(nèi)血糖下降，如胰腺組織無(wú)法快速做出反應(yīng)，那么葡萄糖攝入2 h后都無(wú)法回正常值[20]。不同香型白酒對(duì)T2DM小鼠血糖濃度變化的影響見(jiàn)圖2。由圖2可知，CK組小鼠的血糖濃度在灌胃葡萄糖0.5 h后內(nèi)出現(xiàn)了升高，隨后開(kāi)始出現(xiàn)下降，2 h后已經(jīng)恢復(fù)到原水平。而T2DM組小鼠的血糖濃度則在1 h內(nèi)持續(xù)升高，2 h后雖出現(xiàn)下降，但與原水平相比依然有顯著升高（P＜0.05）。而低劑量攝入不同香型白酒的T2DM小鼠血糖濃度變化趨勢(shì)與CK組小鼠類(lèi)似，2 h后血糖濃度與原水平相比雖然有升高，但升高的程度小于T2DM組小鼠。說(shuō)明T2DM小鼠對(duì)于血糖的調(diào)節(jié)能力出現(xiàn)了改變，胰腺組織無(wú)法快速執(zhí)行降低血糖的功能糖耐量出現(xiàn)了異常。而低劑量攝入不同香型白酒后可能通過(guò)改善胰腺功能，提高胰島素表達(dá)加快降低血糖濃度的速率，對(duì)T2DM小鼠糖耐量異常的改善有一定的作用，但是改善作用有限，小鼠依然存在糖耐量異常。

圖2 各組小鼠血糖濃度測(cè)定結(jié)果Fig.2 Determination results of blood glucose concentration of mice in each group

糖耐量曲線下面積可以用來(lái)衡量物質(zhì)改善機(jī)體糖耐量異常的能力[21]，不同香型白酒對(duì)T2DM小鼠口服糖耐量曲線下面積的影響見(jiàn)圖3。

圖3 各組小鼠血糖曲線下面積測(cè)定結(jié)果Fig.3 Determination results of blood glucose curve area of mice in each group

由圖3可知，與CK組小鼠相比，T2DM組小鼠AUC顯著性的升高（P＜0.05）。低劑量攝入不同香型白酒后使T2DM小鼠的AUC出現(xiàn)了一定程度的下降，但依然顯著性高于CK組小鼠（P＜0.05），且不同香型白酒對(duì)T2DM小鼠AUC的影響并未呈現(xiàn)出差異性。說(shuō)明低劑量攝入不同香型白酒對(duì)T2DM小鼠AUC的異常有一定的改善作用，但程度有限，而不同香型白酒組AUC之間差異不顯著（P＞0.05），說(shuō)明不同香型白酒T2DM小鼠糖耐量的改善能力無(wú)差異。

2.4 不同香型白酒對(duì)T2DM小鼠脂代謝相關(guān)指標(biāo)的影響

T2DM通常伴有不同程度的脂代謝紊亂，主要體現(xiàn)在TC、TG、LDL-C含量的升高以及HDL-C含量的下降，血脂含量的異常已經(jīng)被證明是引起胰島素分泌異常、胰島素受體抵抗的原因之一[22]。各組小鼠灌胃30 d后TC、TG、LDL-C、HDL-C的檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表3。由表3可知，T2DM組小鼠血清TC含量較CK組小鼠出現(xiàn)了顯著升高（P＜0.05），而低劑量攝入不同香型白酒使得T2DM小鼠血清TC含量出現(xiàn)了一定下降，但是依然顯著高于CK組小鼠（P＜0.05），且飲用不同香型白酒之間并未出現(xiàn)顯著差異（P＞0.05）。各組小鼠血清TG和LDL-C含量的變化情況與TC類(lèi)似。HDL-C含量檢測(cè)結(jié)果顯示，T2DM組小鼠血清HDL-C含量出現(xiàn)了顯著下降（P＜0.05），而低劑量攝入不同香型白酒使得T2DM小鼠血清HDL-C出現(xiàn)了一定升高，但依然顯著低于CK組小鼠（P＜0.05）。該研究結(jié)果與陳欣怡等[23]的研究結(jié)果類(lèi)似，可能是由于低劑量飲用白酒會(huì)改善了高脂高糖飲食導(dǎo)致的腸道菌群失衡，促進(jìn)了機(jī)體脂代謝穩(wěn)定。而不同香型白酒之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。說(shuō)明低劑量攝入不同香型白酒對(duì)T2DM脂代謝紊亂有一定的調(diào)節(jié)作用，但作用程度有限且無(wú)香型差異。

表3 各組小鼠總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇及高密度脂蛋白膽固醇含量Table 3 Contents of total cholesterol, triglyceride, low density lipoprotein cholesterol, high density lipoprotein cholesterol of mice in each group mmol/L

2.5 不同香型白酒對(duì)T2DM小鼠肝組織和胰腺組織的影響

胰島組織結(jié)構(gòu)功能異常是糖尿病發(fā)生的主要原因之一，而肝臟也在糖尿病的發(fā)生過(guò)程中起著重要的作用，如葡萄糖激酶的標(biāo)達(dá)、肝糖原的合成、脂代謝的調(diào)節(jié)等[24]。不同香型白酒對(duì)T2DM小鼠肝組織和胰腺組織的影響結(jié)果見(jiàn)圖4。

圖4 各組小鼠肝組織（A）和胰腺組織（B）細(xì)胞形態(tài)Fig.4 Cell morphology of mice lives tissue (A) and pancreas (B) in each group

由圖4A可知，CK組小鼠肝臟細(xì)胞形態(tài)正常，未見(jiàn)脂肪性病變和明顯的腫脹或萎縮。T2DM組小鼠肝臟胞體變大，細(xì)胞出現(xiàn)明顯的脂肪性病變，細(xì)胞大面積集中出現(xiàn)胞質(zhì)稀疏，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)大量空泡，結(jié)構(gòu)明顯異常。低劑量攝入不同香型白酒后各組小鼠肝臟細(xì)胞胞質(zhì)稀疏和空泡樣變化雖仍然顯著，但是和T2DM組相比，未見(jiàn)大面積集中性的細(xì)胞損傷。說(shuō)明低劑量攝入不同香型白酒可以緩解T2DM小鼠肝臟損傷，但是緩解程度有限，肝臟損傷依然顯著存在。

由圖4B可知，CK組小鼠胰腺組織中胰島和胰島外周細(xì)胞規(guī)則、完整，胰島呈清晰的圓形或橢圓形，胰島邊緣明顯，胰島大小正常，胰島內(nèi)細(xì)胞分布均勻。T2DM組小鼠胰島呈不規(guī)則形態(tài)，內(nèi)部細(xì)胞稀疏、不均勻，胰島邊緣不整。低劑量攝入不同香型白酒后各組小鼠胰島不規(guī)則和邊緣不整的情況有所緩解，可見(jiàn)圓形或橢圓形胰島，但胰島內(nèi)部細(xì)胞稀少，胰島形態(tài)明顯小于CK組，存在一定的萎縮。說(shuō)明低劑量攝入不同香型白酒后T2DM小鼠胰島病變有一定的緩解，但胰島內(nèi)細(xì)胞稀少和胰島萎縮依然明顯。

綜上，低劑量飲用白酒可以對(duì)于T2DM小鼠肝臟和胰腺的結(jié)構(gòu)異常有一定的改善作用，但是作用程度有限。

2.5 不同香型白酒對(duì)T2DM小鼠胰島素水平的影響

不同香型白酒對(duì)T2DM小鼠胰島素水平的影響結(jié)果見(jiàn)圖5。

圖5 各組小鼠胰島素水平測(cè)定結(jié)果Fig.5 Determination results of insulin levels of mice in each group

由圖5可知，與CK組小鼠相比，T2DM小鼠胰島素水平出現(xiàn)了顯著下降（P＜0.05），而攝入不同香型白酒使T2DM小鼠胰島素水平顯著上升（P＜0.05），但依然顯著低于CK組小鼠（P＜0.05），且攝入不同香型白酒之間并未出現(xiàn)顯著差異。說(shuō)明低劑量攝入不同香型白酒有促進(jìn)胰島素分泌的作用，進(jìn)而可以緩解T2DM小鼠胰島素水平下降，結(jié)果與前期相關(guān)研究報(bào)道結(jié)果相符，可能與低劑量白酒攝入增加了胰島組織血流量有關(guān)[25]。但調(diào)節(jié)程度有限，T2DM小鼠胰島素水平依然顯著低于CK組（P＜0.05）。

2.6 不同香型白酒對(duì)T2DM小鼠胰腺組織氧化應(yīng)激水平的影響

胰腺組織氧化應(yīng)激已被證明和T2DM的發(fā)生發(fā)展有著密切的聯(lián)系[26]，本團(tuán)隊(duì)前期研究也證明T2DM小鼠胰腺組織氧化應(yīng)激水平升高，且攝入純酒精后氧化應(yīng)激水平會(huì)進(jìn)一步提高[9]。但白酒與酒精不同，白酒中酚類(lèi)物質(zhì)、部分醛類(lèi)和多肽類(lèi)等物質(zhì)都具有一定的抗氧化作用[27-28]，由于不同香型白酒的組成存在差異，所以對(duì)自由基的清除能力也可能不同。各組小鼠胰腺組織氧化應(yīng)激水平的變化見(jiàn)表4。

表4 各組小鼠胰腺組織活性氧、丙二醛及還原型谷胱甘肽水平Table 4 Reactive oxygen species, malondialdehyde and glutathione levels of mice in each group

由表4可知，與CK組小鼠相比，T2DM小鼠胰腺組織ROS表達(dá)量和脂質(zhì)過(guò)氧化物MDA的含量均出現(xiàn)了顯著升高（P＜0.05）。低劑量攝入不同香型白酒使ROS表達(dá)量和MDA含量均出現(xiàn)了不同程度的下降，但下降程度有限，依然顯著高于CK組小鼠（P＜0.05）。而攝入不同香型白酒之間出現(xiàn)了差異性，攝入清香型和醬香型白酒后T2DM小鼠ROS表達(dá)量和MDA含量的下降程度要大于濃香型白酒。小鼠胰腺組織GSH含量檢測(cè)結(jié)果顯示，與CK組小鼠相比，T2DM小鼠胰腺組織GSH含量出現(xiàn)了顯著下降（P＜0.05），低劑量攝入不同香型白酒使GSH含量出現(xiàn)了一定的回升，但回升程度有限，依然顯著低于CK組小鼠（P＜0.05）。同時(shí)攝入不同香型白酒之間也出現(xiàn)了差異性，攝入清香型和醬香型白酒后T2DM小鼠GSH含量的上升程度要大于濃香型白酒。白酒中富含的抗氧化物質(zhì)以及不同香型白酒風(fēng)味物質(zhì)類(lèi)型的不同，可能是導(dǎo)致上述結(jié)果的原因。

以上結(jié)果說(shuō)明低劑量攝入不同香型白酒對(duì)T2DM小鼠胰腺組織氧化應(yīng)激有一定的調(diào)節(jié)作用，但調(diào)節(jié)程度有限，T2DM小鼠胰腺氧化應(yīng)激依然顯著。而在本研究中清香型和醬香型白酒抗T2DM小鼠胰腺氧化的作用要略大于濃香型白酒。已有研究表明，不同香型白酒均具有一定的自由基清除能力，且清除能力強(qiáng)弱依次為清香、醬香、芝麻香、老白干香、濃香[29]。而本研究的結(jié)果也提示清香型和醬香型白酒抗T2DM小鼠胰腺組織氧化應(yīng)激的能力略大于濃香型白酒。但不同香型白酒抗氧化性的差異并未體現(xiàn)在對(duì)T2DM糖脂代謝紊亂的調(diào)節(jié)作用中，可能是因?yàn)殡m然不同香型白酒均可下調(diào)T2DM小鼠胰腺組織氧化應(yīng)激水平，但是調(diào)節(jié)程度有限，調(diào)整后飲酒組小鼠胰腺氧化應(yīng)激仍處于很高的水平，依然導(dǎo)致了小鼠肝臟和胰腺功能的異常，所以不同香型白酒抗氧化性的差異并未體現(xiàn)在對(duì)T2DM糖脂代謝功能紊亂的調(diào)節(jié)上。

2.7 不同香型白酒對(duì)T2DM小鼠胰腺組織炎癥水平的影響

根據(jù)氧化應(yīng)激分級(jí)模型，細(xì)胞中持續(xù)高水平的氧化應(yīng)激會(huì)活化炎癥信號(hào)通路，相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子被激活，炎癥因子表達(dá)上調(diào)誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)[30]。白酒的抗炎作用研究發(fā)現(xiàn)，白酒有機(jī)萃取物具有抗炎作用[31]。各組小鼠胰腺組織炎癥水平的變化結(jié)果見(jiàn)表5。

表5 各組小鼠胰腺組織的NF-κB、TNF-α和IL-1β水平Table 5 NF-κB, TNF-α and IL-1β levels of pancreatic tissue of mice in each group

由表5可知，與CK組小鼠相比T2DM小鼠胰腺組織轉(zhuǎn)錄因子NF-κB及其調(diào)控轉(zhuǎn)錄的主要炎癥因子TNF-α和IL-1β[32-33]的含量均顯著升高（P＜0.05），而低劑量攝入不同香型白酒對(duì)NF-κB、TNF-α和IL-1β的升高有調(diào)節(jié)作用，但是調(diào)節(jié)程度有限，T2DM小鼠胰腺組織中NF-κB、TNF-α和IL-1β的表達(dá)量仍然顯著高于CK組小鼠（P＜0.05），且攝入不同香型白酒差異不顯著（P＞0.05）。說(shuō)明低劑量攝入白酒對(duì)緩解T2DM小鼠胰腺組織炎癥水平有一定的作用，但緩解程度有限，且不同香型白酒的作用無(wú)差異。

結(jié)合2.6的結(jié)果，不同香型的白酒可能是通過(guò)降低T2DM小鼠胰腺組織氧化應(yīng)激水平進(jìn)而達(dá)到緩解胰腺組織炎癥水平的作用。但在調(diào)節(jié)胰腺組織氧化應(yīng)激水平的作用上不同香型白酒體現(xiàn)出了一定的差異性，而在調(diào)節(jié)炎癥水平上并未顯示出差異，可能是由于低劑量攝入不同香型白酒后T2DM小鼠胰腺組織氧化應(yīng)激水平雖有不同水平下降，但是均仍然處于高水平的氧化應(yīng)激狀態(tài)，均可以促進(jìn)高水平炎癥反應(yīng)的發(fā)生。因此在本研究中，低劑量攝入不同香型白酒對(duì)T2DM小鼠胰腺組織炎癥水平的調(diào)節(jié)并未顯示出差異性。

3 結(jié)論

建模后T2DM小鼠糖脂代謝紊亂，胰島素水平下降，肝臟及胰腺組織出現(xiàn)明顯損傷，胰腺組織氧化應(yīng)激和炎癥水平上調(diào)。而低劑量攝入不同香型白酒，對(duì)T2DM小鼠出現(xiàn)的異常均體現(xiàn)出了一定的調(diào)節(jié)作用，但是調(diào)節(jié)程度有限，各組小鼠T2DM相關(guān)癥狀和損傷依然顯著存在。降低T2DM小鼠胰腺組織氧化應(yīng)激和炎癥水平可能是低劑量攝入不同香型白酒對(duì)T2DM小鼠產(chǎn)生調(diào)節(jié)作用的主要機(jī)制之一。低劑量攝入不同香型白酒對(duì)T2DM小鼠的調(diào)節(jié)作用只在調(diào)節(jié)小鼠胰腺組織氧化應(yīng)激水平上體現(xiàn)出了一定的差異，而這種差異對(duì)于T2DM小鼠胰腺組織炎癥水平及T2DM相關(guān)病癥并未產(chǎn)生影響。后續(xù)研究中，可考慮分析不同香型白酒主要差異成分對(duì)T2DM的作用，進(jìn)一步為闡明不同香型白酒對(duì)于T2DM的影響提供參考。