肝癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)不同miR-148a mRNA相對(duì)表達(dá)量觀察

陳琰 張建華 陳堅(jiān) 楊揚(yáng)

原發(fā)性肝癌是臨床常見的惡性腫瘤之一,該病的發(fā)病和致死率在惡性腫瘤均位居前列,預(yù)后較差[1-2]。肝癌根治性切除術(shù)目前仍是該病的主要治療手段,可有效清除病灶,但由于多種因素,如病情進(jìn)展、術(shù)中搬動(dòng)和擠壓、腫瘤細(xì)胞微轉(zhuǎn)移等,術(shù)后仍存在一定復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)[3-4]。因此探究HCC術(shù)后復(fù)發(fā)的機(jī)制,尋找能夠預(yù)測HCC術(shù)后復(fù)發(fā)的標(biāo)志物對(duì)于臨床評(píng)估患者預(yù)后仍有指導(dǎo)價(jià)值.過去微小RNA-148a(miR-148a)已經(jīng)在多種惡性腫瘤如卵巢癌、乳腺癌、胃癌中有所報(bào)道,均顯示其miR-148a mRNA具有抑癌基因作用[5-7]。但miR-148a在原發(fā)性肝癌中的報(bào)道較少,其表達(dá)與肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)的關(guān)系尚不明確。本研究通過觀察肝癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)患者的miR-148a表達(dá)變化,旨在為臨床預(yù)測肝癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)提供參考指標(biāo)。

資料與方法

一、一般資料

納入2018年3月—2021年6月淮安市淮安醫(yī)院腫瘤內(nèi)科收治的115例原發(fā)性肝癌患者,其中男性73例、女性42例;年齡45～65歲,平均(54.29±6.71)歲;高血壓32例、高血脂27例、糖尿病23例;腫瘤部位:左半肝22例、右半肝93例;腫瘤數(shù)目:單發(fā)89例,多發(fā)26例;腫瘤直徑≥5 cm的患者56例,<5 cm的患者59例,平均(4.39±1.18)cm;肝功能child分級(jí)A級(jí)97例,B級(jí)18例;有血管侵犯53例,腫瘤包膜不完整55例。納入標(biāo)準(zhǔn):①原發(fā)性肝癌符合相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[8],接受肝癌根治術(shù)治療;②年齡45～65歲。排除標(biāo)準(zhǔn):①術(shù)前已接受化療、放療、射頻消融術(shù)及其他抗腫瘤治療;②臨床資料不全;③肝功能child分級(jí)C級(jí)。隨訪時(shí)間為12個(gè)月,依據(jù)預(yù)后將其分為復(fù)發(fā)組(24例)和未復(fù)發(fā)組(91例)。研究類型為回顧性研究,無知情同意書簽署。

二、方法

(一)一般資料 收集性別、年齡、合并癥(高血壓、高血脂、糖尿病)、腫瘤情況(部位、數(shù)量、直徑)、肝功能child分級(jí)、手術(shù)時(shí)間、術(shù)中出血量、有無血管侵犯、腫瘤包膜是否完整等資料。

(二)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo) 于術(shù)前24 h采集靜脈血4 mL于無菌EDTA試管中,離心處理后取上層清液,使用ELISA法檢測血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)水平。采用qRT-PCR法檢測肝癌組織miR-148a mRNA相對(duì)表達(dá)量。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

結(jié) 果

一、肝癌患者肝癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)的單因素分析

復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組多發(fā)腫瘤分別有10例(41.67%)、16例(17.58%),血管侵犯分別有17例(70.83%)、36例(39.56%),腫瘤包膜不完整分別有16例(66.67%)、39例(42.86%),兩組miR-148a mRNA相對(duì)表達(dá)量分別為0.23±0.05、0.52±0.11,腫瘤數(shù)目、血管侵犯、腫瘤包膜情況及miR-148a mRNA相對(duì)表達(dá)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);兩組其他資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

二、肝組織miR-148a mRNA相對(duì)表達(dá)量預(yù)測肝癌患者肝癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)的ROC分析

經(jīng)ROC分析,miR-148a mRNA預(yù)測肝癌患者肝癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)的最佳截?cái)嘀禐?.329,曲線下面積為0.821(95%CI:0.732～0.910),敏感度和特異度分別為0.742、0.707,P<0.05;肝組織miR-148a mRNA相對(duì)表達(dá)量預(yù)測肝癌患者肝癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)的ROC曲線見圖1。

三、肝癌患者肝癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)的多因素logistic回歸性分析

將腫瘤數(shù)目、血管侵犯、腫瘤包膜情況及miR-148a mRNA相對(duì)表達(dá)量等因素納入logistic多因素回歸模型,進(jìn)行量化賦值,因變量為肝癌患者肝癌根治術(shù)后是否復(fù)發(fā)(復(fù)發(fā)=1,未復(fù)發(fā)=0),自變量為腫瘤數(shù)目(多發(fā)=1,單發(fā)=0)、血管侵犯(有=1,無=0)、腫瘤包膜情況(不完整=1,完整=0)、miR-148a mRNA(≤0.329=1,>0.329=0),經(jīng)多因素logistic回歸性分析,腫瘤數(shù)目、血管侵犯、腫瘤包膜情況、miR-148a mRNA是肝癌患者肝癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表2。

表2 肝癌患者肝癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)的多因素logistic回歸性分析

討 論

過去由于診斷技術(shù)的限制,早期通常難以發(fā)現(xiàn)并確診原發(fā)性肝癌,患者預(yù)后通常較差,雖然近些年其診斷和治療方法不斷發(fā)展,但5年生存率依然不盡人意[9-10]。當(dāng)前有關(guān)原發(fā)性肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)與病理參數(shù)的關(guān)系尚未完全闡明,尤其分子生物學(xué)方面報(bào)道仍不多見,臨床仍缺乏預(yù)測肝癌根治術(shù)后早期復(fù)發(fā)的分子生物學(xué)標(biāo)志物[11]。本研究旨在研究肝癌患者肝癌根治術(shù)后早期復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素及miR-148a mRNA相對(duì)表達(dá)量預(yù)測術(shù)后早期復(fù)發(fā)的價(jià)值。

本研究結(jié)果顯示,與未復(fù)發(fā)組相比,復(fù)發(fā)組腫瘤數(shù)目為多發(fā)、有血管侵犯、腫瘤包膜不完整的患者比例較高,提示腫瘤數(shù)目、血管侵犯、腫瘤包膜情況可能是肝癌患者肝癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素。多發(fā)腫瘤提示其腫瘤病變程度高,病情相對(duì)較嚴(yán)重,患者接受手術(shù)切除治療導(dǎo)致其免疫功能削弱,而腫瘤細(xì)胞的黏附性、侵襲性等提高,因而術(shù)后復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)提高[12-13]。腫瘤包膜不完整的患者通常也存在血管侵犯情況,可引起肝癌根治術(shù)后隱匿性病灶在肝內(nèi)播散,從而增加術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)[14-15]。

本研究結(jié)果顯示,術(shù)后12個(gè)月復(fù)發(fā)組miR-148a mRNA相對(duì)表達(dá)量明顯低于未復(fù)發(fā)組,提示miR-148a mRNA表達(dá)降低可能與腫瘤進(jìn)展和肝癌術(shù)后早期腫瘤復(fù)發(fā)有關(guān)。既往有關(guān)miR-148a mRNA的報(bào)道指出,在多種惡性腫瘤組織中,miR-148a的表達(dá)均出現(xiàn)明顯下調(diào),并且其表達(dá)對(duì)于腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移等生理病理過程均有影響。非小細(xì)胞肺癌組織中,miR-148a表達(dá)明顯下降,miR-148a可能是通過抑制高遷移率族蛋白抑制腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲,另外有利于強(qiáng)化藥物的抗癌效果[16-17]。研究顯示,miR-148a mRNA在原發(fā)性肝癌中相對(duì)表達(dá)量明顯較低,miR-148a mRNA過表達(dá)則有利于阻滯細(xì)胞周期,對(duì)于原發(fā)性肝癌細(xì)胞增殖具有抑制作用[18-19]。本研究通過ROC分析miR-148a mRNA相對(duì)表達(dá)量預(yù)測肝癌患者肝癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)的最佳截?cái)嘀禐?.329,與周興芹等[20]研究中的0.31接近,另外ROC分析miR-148a mRNA相對(duì)表達(dá)量預(yù)測的曲線下面積為0.821(95%CI:0.732～0.910),預(yù)測價(jià)值較好,可作為肝癌根治術(shù)后早期復(fù)發(fā)的參考指標(biāo)。

本研究表明,腫瘤數(shù)目、血管侵犯、腫瘤包膜情況、miR-148a mRNA是肝癌患者肝癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素,臨床可據(jù)此對(duì)肝癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)較高的患者進(jìn)行篩查,對(duì)符合以上條件的患者密切監(jiān)測,制定個(gè)性化的治療策略,改善患者預(yù)后。

綜上,腫瘤數(shù)目、血管侵犯、腫瘤包膜情況、miR-148a mRNA是肝癌患者肝癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素,并且術(shù)后早期復(fù)發(fā)患者肝癌組織中miR-148a mRNA相對(duì)表達(dá)量較低,可作為預(yù)測術(shù)后早期肝癌復(fù)發(fā)的參考指標(biāo)。本研究尚存在部分不足,如隨訪時(shí)間為12個(gè)月,僅討論了miR-148a mRNA與術(shù)后早期復(fù)發(fā)的關(guān)系,對(duì)于患者中遠(yuǎn)期預(yù)后是否仍有較好的預(yù)測價(jià)值有待驗(yàn)證,需擴(kuò)大樣本、延長隨訪時(shí)間進(jìn)一步深入研究。

利益沖突聲明：所有作者均聲明不存在利益沖突。