嗜硫小紅卵菌HNI-1 菌劑對(duì)水稻白葉枯病和細(xì)菌性條斑病的防效

高愛軍，魯 湘，劉 勇，譚新球，戴建平，張玉燭，李巳夫,

（1.湖南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所，湖南 長(zhǎng)沙 410125；2.隆平農(nóng)業(yè)科技黃埔研究院，廣東廣州 510715；3.湖南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，湖南 長(zhǎng)沙 410125）

水稻是世界上最重要的糧食作物之一，它容易受到多種病害的侵害，包括真菌性病害、細(xì)菌性病害和病毒病[1-2]。水稻白葉枯病和細(xì)菌性條斑病是水稻生產(chǎn)中最常見的兩種細(xì)菌性病害，分別由稻黃單胞菌(X.oryzae)的兩個(gè)致病變種引起，即水稻白葉枯病菌（X.oryzaepv.oryzae,Xoo）和條斑病菌(X.oryzaepv.oryzicola,Xoc)[3-4]。這兩種病害在我國(guó)水稻產(chǎn)區(qū)廣泛流行，特別是在華南稻區(qū)，由于華南稻區(qū)多臺(tái)風(fēng)天，水稻葉片摩擦產(chǎn)生微傷口導(dǎo)致細(xì)菌侵入水稻葉片發(fā)病造成水稻大面積減產(chǎn)，每年造成的產(chǎn)量損失高達(dá)10%～30%[5-6]。

長(zhǎng)期以來(lái)，水稻細(xì)菌性病害的防治基本依賴于化學(xué)殺菌劑，主要有噻森銅、噻菌銅、氯溴異氰尿酸、代森銨等[7]。長(zhǎng)期使用化學(xué)藥劑不僅導(dǎo)致微生物產(chǎn)生抗藥性，防效下降，而且嚴(yán)重污染環(huán)境，對(duì)非靶標(biāo)生物也存在安全性風(fēng)險(xiǎn)[8]。隨著人們對(duì)農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)和安全的要求提高，這些殺菌劑的使用將受到嚴(yán)格的限制。嗜硫小紅卵菌HNI-1 被認(rèn)為是一種潛在的生防微生物，其在水稻細(xì)菌性病害的田間防治上的應(yīng)用研究較少。華南稻區(qū)是細(xì)菌性病害多發(fā)地，試驗(yàn)旨在評(píng)價(jià)嗜硫小紅卵菌HNI-1 菌劑對(duì)水稻白葉枯病和細(xì)菌性條斑病的防效，為其應(yīng)用于水稻細(xì)菌性病害防治提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)在廣東省廣州市黃埔區(qū)新龍鎮(zhèn)洋田村進(jìn)行，試驗(yàn)地是典型的“水稻—蔬菜”輪作模式，試驗(yàn)地面積0.2 hm2，砂壤土，有機(jī)質(zhì)含量41.3 g/kg，pH值為5.43，前茬作物為菜薹。土壤肥力均勻，田面耕耙平整。所有試驗(yàn)小區(qū)栽培及水肥管理?xiàng)l件一致，且與本地農(nóng)業(yè)生產(chǎn)實(shí)踐一致。

1.2 試驗(yàn)材料

供試藥劑為2.0 億CFU/mL 嗜硫小紅卵菌 HNI-1 懸浮劑（長(zhǎng)沙艾格里生物科技有限公司），對(duì)照藥劑為20%噻菌銅懸浮劑（浙江龍灣化工有限公司），供試水稻品種為玉針香（湖南省水稻研究所）。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.3.1 田間試驗(yàn)處理與小區(qū)設(shè)置 水稻白葉枯病防治試驗(yàn)設(shè)置以下5 個(gè)處理：（1）2.0 億CFU/mL嗜 硫 小 紅 卵 菌HNI-1 懸 浮 劑100 mL/667m2；（2）2.0 億CFU/mL 嗜硫小紅卵菌HNI-1 懸浮劑200 mL/667m2；（3）2.0 億CFU/mL 嗜硫小紅卵菌HNI-1懸浮劑300 mL/667m2；（4）對(duì)照藥劑20%噻菌銅懸浮劑100 mL/667m2；（5）清水對(duì)照。每個(gè)處理3 次重復(fù)，共15 個(gè)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)長(zhǎng)6 m，寬5 m，小區(qū)面積30 m2，各處理小區(qū)采取隨機(jī)區(qū)組排列。試驗(yàn)田翻耕后按設(shè)定小區(qū)做區(qū)埂，區(qū)埂用塑料薄膜覆蓋，要求埂高15～20 cm 左右，埂寬15 cm 左右，小區(qū)間留有排水溝，寬50 cm，以保證小區(qū)之間確保獨(dú)立排灌，不串排灌。

水稻細(xì)菌性條斑病防治試驗(yàn)處理設(shè)計(jì)和小區(qū)設(shè)置同上。

1.3.2 播栽時(shí)期與田間管理 試驗(yàn)田塊水稻于2022年7 月16 日播種，8 月8 日移栽，密度為18 cm×23 cm，移栽時(shí)選擇長(zhǎng)勢(shì)一致的秧苗移栽，四周留有保護(hù)行。施肥用量為基肥（碳酸氫銨）30 kg/667m2，追肥尿素 10 kg/667m2、復(fù)合肥 20 kg/667m2。田間噴施常規(guī)除草劑和殺蟲劑，全程不用殺菌劑，田間管理按當(dāng)?shù)馗弋a(chǎn)栽培模式管理。

1.3.3 施藥時(shí)間和次數(shù) 供試藥劑2.0 億CFU/mL嗜硫小紅卵菌HNI-1 懸浮劑和對(duì)照藥劑20%噻菌銅懸浮劑分別于2022 年9 月5 日水稻分蘗末期進(jìn)行第1 次施藥，9 月12 日水稻孕穗初期進(jìn)行第2 次施藥，9 月19 日水稻孕穗中期進(jìn)行第3 次施藥，共施藥3次。用噴藥液40 kg/667m2對(duì)植株進(jìn)行全株莖葉均勻噴霧，空白對(duì)照噴等量清水。施藥機(jī)械為背負(fù)式手動(dòng)壓縮噴霧器（騰飛牌3WBS-16 型，浙江臺(tái)州市路橋奇勇塑料廠），工作壓力為0.2～0.4 MPa，單彎噴頭。

1.4 調(diào)查方法

1.4.1 水稻白葉枯病防效調(diào)查 由于施藥前所有小區(qū)均發(fā)生白葉枯典型病害癥狀，故未做藥前基數(shù)調(diào)查。施藥后觀察水稻的生長(zhǎng)情況，待病情基本穩(wěn)定時(shí)，即末次藥后14 d（即10 月3 日）調(diào)查病葉數(shù)與發(fā)病嚴(yán)重度，根據(jù)公式（1）（2）計(jì)算病情指數(shù)、防效。每小區(qū)五點(diǎn)法取樣，每點(diǎn)取50 株，每株調(diào)查旗葉及旗葉以下2 片葉。記錄病葉數(shù)和相應(yīng)病級(jí)，分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：0 級(jí)，無(wú)??；1 級(jí)，病斑面積為葉面積10%以下；3 級(jí)，病斑面積為葉面積11%～25%；5 級(jí)，病斑面積為葉面積26%～45%；7 級(jí)，病斑面積為葉面積46%～65%；9 級(jí)，病斑面積為葉面積65%以上。

1.4.2 水稻細(xì)菌性條斑病防效調(diào)查 于第1 次施藥前（2022 年9 月5 日）調(diào)查基數(shù)，第2 次施藥前（2022年9 月12 日），第3 次施藥前（2022 年9 月19 日），第3 次施藥后7 d（2022 年9 月26 日）、14 d（2022年10 月3 日）進(jìn)行防效調(diào)查，共調(diào)查5 次，調(diào)查病葉數(shù)與發(fā)病嚴(yán)重度，根據(jù)公式（1）（3）計(jì)算病情指數(shù)、防效。每小區(qū)采用五點(diǎn)對(duì)角線取樣方法，每點(diǎn)調(diào)查25 株，每株水稻選取3 片葉，選取旗葉及旗葉下第1 片和第2 片葉進(jìn)行調(diào)查；若旗葉未抽出，則調(diào)查從底部向上數(shù)第2 片葉及以上2 片葉。記錄病葉數(shù)和相應(yīng)病級(jí)，分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：0 級(jí)，葉片無(wú)病斑；1級(jí)，葉片僅有小點(diǎn)半透明水漬狀病斑，占葉面積的1%以下；3 級(jí)，葉片有零星短而窄條病斑，占葉面積的1%～5%；5 級(jí)，葉片病斑較多，占葉面積6%～25%；7 級(jí)，葉片上病斑較密，占葉面積26%～50%；9 級(jí)，葉片病斑密布，占葉面積51%以上，葉片變橙褐色、卷曲、枯死。

1.5 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)采用 Microsoft Excel 2010 處理，采用DPS 7.05 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)軟件中的Duncan 新復(fù)極差法進(jìn)行方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 嗜硫小紅卵菌HNI-1 菌劑對(duì)白葉枯病的防效

如表1 所示，末次藥后14 d 調(diào)查，2.0 億 CFU/mL 嗜硫小紅卵菌 HNI-1 懸浮劑100、200、300 mL/667m2劑量對(duì)白葉枯病的病情指數(shù)均顯著低于空白對(duì)照且與對(duì)照藥劑20%噻菌銅懸浮劑100 mL/667m2處理相比無(wú)顯著差異；2.0 億 CFU/mL嗜硫小紅卵菌 HNI-1 懸浮劑對(duì)白葉枯病的防效在56.76%～69.48%之間，其中高劑量300 mL/667m2處理的防效最好，為69.48%，高于對(duì)照藥劑處理，但差異不顯著。

表1 嗜硫小紅卵菌HNI-1 懸浮劑防治水稻白葉枯病的田間藥效

2.2 嗜硫小紅卵菌HNI-1 菌劑對(duì)細(xì)菌性條斑病的防效

由表2 可知，第1 次、第2 次施藥后7 d，試驗(yàn)藥劑2.0 億 CFU/mL 嗜硫小紅卵菌 HNI-1 懸浮劑100、200、300 mL/667m2處理對(duì)水稻細(xì)菌性條斑病的防效分別在54.60%～63.99%、65.39%～74.38%之間，試驗(yàn)藥劑3 處理防效與對(duì)照藥劑相比無(wú)顯著性差異；第3 次施藥后7 d，試驗(yàn)藥劑3 處理對(duì)水稻細(xì)菌性條斑病的防效在68.88%～77.60%之間，試驗(yàn)藥劑3 處理防效與對(duì)照藥劑相比無(wú)顯著性差異；第3 次施藥后14 d，試驗(yàn)藥劑3 處理對(duì)水稻細(xì)菌性條斑病的防效在62.49%～72.98%之間，與第3 次施藥后7 d 防效相比稍有下降，試驗(yàn)藥劑100、200 mL/667m2處理防效與對(duì)照藥劑相比無(wú)顯著性差異，試驗(yàn)藥劑300 mL/667m2處理防效顯著性高于對(duì)照藥劑處理。

表2 嗜硫小紅卵菌HNI-1 懸浮劑防治水稻細(xì)菌性條斑病的田間藥效

3 結(jié)論與討論

追求優(yōu)質(zhì)、新鮮、無(wú)毒、安全的農(nóng)產(chǎn)品已成為全球農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展趨勢(shì)。過度使用化學(xué)農(nóng)藥會(huì)嚴(yán)重破壞生態(tài)系統(tǒng)，污染空氣和水，從而對(duì)人類健康和環(huán)境造成危害。在綠色農(nóng)業(yè)中，各種微生物制劑已代替化學(xué)農(nóng)藥用于控制農(nóng)作物病蟲害，其中光合細(xì)菌（PSB）是一種能夠進(jìn)行光合作用[9]的原核生物。這些細(xì)菌可以在有氧或厭氧條件下生長(zhǎng)，并可使用有機(jī)或無(wú)機(jī)物質(zhì)作為電子供體來(lái)固定N2和CO2[10-11]，其作用機(jī)理主要是拮抗、誘導(dǎo)抗病、誘導(dǎo)系統(tǒng)抗性（ISR）等[12]。嗜硫小紅卵菌HNI-1 屬于光合細(xì)菌。羅路云等[13]研究表明2.0 億CFU/mL 嗜硫小紅卵菌HNI-1 懸浮劑用量在300～600 mL/hm2對(duì)水稻稻曲病和稻瘟病有較好的控制作用，王秀芝等[14]研究表明嗜硫小紅卵菌HNI-1 菌劑噴霧和噻蟲嗪灌根的方法相結(jié)合能有效控制病毒病介體昆蟲煙粉虱和增強(qiáng)植物抗病性從而提高番茄病毒病的防控效果。符偉等[15]研究表明2.0 億CFU/mL 嗜硫小紅卵菌HNI-1 懸浮劑400～600 mL/667m2灌根處理2～3 次對(duì)番茄根結(jié)線蟲病的防治效果為為60%～75%。

試驗(yàn)結(jié)果表明，2.0 億CFU/mL 嗜硫小紅卵菌HNI-1 懸浮劑對(duì)水稻白葉枯病和細(xì)菌性條斑病均有較好的防治效果。末次藥后14 d，300 mL/667m2處理對(duì)水稻白葉枯病的防效高于對(duì)照藥劑20%噻菌銅懸浮劑100 mL/667m2處理，但差異不顯著；300 mL/667m2處理對(duì)水稻細(xì)菌性條斑病的防效顯著高于對(duì)照藥劑處理。

試驗(yàn)期間未發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)藥劑對(duì)水稻產(chǎn)生黃化斑點(diǎn)、失綠白化、畸形扭曲、抑制生長(zhǎng)等影響，同時(shí)未發(fā)現(xiàn)藥劑對(duì)非靶標(biāo)和其他野生生物的影響，表明該菌劑使用非常安全。建議該菌劑用量200～300 mL/667m2進(jìn)行防治，間隔7～10 d 施藥一次，施藥3次。在水稻白葉枯病和細(xì)菌性條斑病發(fā)病初期施藥，施藥時(shí)注意所有藥劑噴霧時(shí)間應(yīng)在早晨和傍晚進(jìn)行，避免在高溫強(qiáng)光下施藥。由于生物制劑噴霧量是保證其防效的關(guān)鍵因素，如果采用植保無(wú)人機(jī)大面積噴霧，噴霧量不能低于20 L/667m2，并且相應(yīng)增加藥劑濃度和噴施次數(shù)。